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文档简介
1、 【最新考纲解读】1从考查内容上看,主要考查微生物的纯化培养操作与应用、传统发酵技术。 2从考查角度上看,联系生产生活实际考查微生物的计数、分离和纯化培养;结合发酵食品制作过程考查传统发酵技术原理及基本操作。 3从命题趋势上看,预计最新年高考命题仍以对微生物培养与应用考查为热点,主要是和生产生活实际相联系或与实验结合对实验原理、实验操作进行综合命题考查。 【重点知识梳理】一、微生物的营养1微生物的营养营养要素 来源 功能 碳源 无机碳源 CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物 构成细胞和合成一些代谢产物 有些既是碳源又是异养微生物的能源 有机碳源 糖、脂肪、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼
2、等 营养要素 来源 功能 氮 源 无机氮源 NH3、铵盐、硝酸盐、N2等 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物 有机 氮源 牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸 营养要素 来源 功能 生长因子(特 殊营养物质) 维生素、氨基酸、碱基 酶和核酸的组成成分 参与代谢过程中的酶促反应 水和无机机盐 外界摄入 水不仅是优良溶剂而且可维持生物大分子的稳定;无机盐是细胞内的成分和调节物质等 2培养基种类及用途 划分标准 培养基种类 特点 用途 物理 性质 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体培养基 加凝固 剂,如琼脂 观察微生物的运动、分类鉴定 固体培养基 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 划分标准 培
3、养基种类 特点 用途 化学 成分 天然培养基 含化学成分不明 确的天然物质 工业生产 合成培养基 培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成) 分类、鉴定 划分标准 培养基种类 特点 用途 用途 选择培养基 培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要微生物的生长,促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌时,可在培养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌时,可在培养基中加入高浓度的食盐) 用途 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物,如可用伊红美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽
4、) 3微生物的分离与计数 (1)土壤中分解尿素的细菌的分离: 筛选菌株:利用选择培养基筛选。 过程:土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察。 (2)分解纤维素的微生物的分离: 原理: 即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 流程:土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌落。 (3)鉴定方法: 鉴定分解尿素的细菌 含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基细菌指示剂变红,则该菌能分解尿素 鉴定纤维素分解菌 (4)计数方法: 显微镜直接计数法: 利用特定细菌计数板或血球计数板,在显微镜下计数一定容积样品中的细菌数量。该方法不能区分细菌的死活。 间接计数法(活菌计数法): 常用稀释涂布平板法。稀释涂布平
5、板法的理论依据是:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落即代表一个活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在30300的平板进行计数,每个稀释倍数涂布3个平板进行计数,取平均值。 【特别提醒】消毒和灭菌的区别 条件 结果 常用方法 应用范围 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部部分微生物 煮沸消毒法 一般物品 巴氏消毒法 不耐高温的液体 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源等 条件 结果 常用方法 应用范围 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 灼烧灭菌 接种工具 干热灭菌 玻璃器皿、金属用具等 高压蒸汽灭菌 培养基及容器的灭菌 二、
6、酶的应用1酶的存在与简单制作方法 (1)酶在生物体内的存在(或分布)部位: 酶是在生物体活细胞中合成的。多数酶在细胞内直接参与生物化学反应,少数的酶要分泌到细胞外发挥作用。 (2)酶的制备: 胞内酶的制取:需要破碎生物组织细胞,可用破碎仪、研磨器或匀浆器等机械将组织细胞破碎,使酶从活细胞中释放出来,进入细胞外的溶液中,经过滤、离心制备成粗酶液。 胞外酶的制备:对于唾液淀粉酶、胰蛋白酶等分泌到细胞外的酶,可以直接从动物分泌物或细胞外的组织间隙中提取。 2酶活性(力)测定的一般原理和方法 (1)酶活性(力)的含义:酶的活性(力)是指酶催化一定化学反应的能力。 (2)酶活性(力)测定的一般原理和方法
7、:酶的活性(力)通常以单位时间内底物的消耗量或者在单位时间内产物的生成量来表示。 3酶的活性及影响酶活性因素的实验探究(以果胶酶在生产中的应用为例探究温度或pH对果胶酶活性的影响) (1)探究不同温度(或pH)对酶活性的影响时,温度(或pH)作为自变量,通常通过设置合理的梯度来确定最适值,最适值是通过比较相同时间内获得的产量或效果来确定的。 (2)在混合苹果泥和果胶酶之前,要将苹果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温(或同pH)处理,目的是保证底物和酶在混合时的温度(或pH)相同,避免苹果泥与果胶酶混合时影响混合物的温度(或pH),从而影响实验效果。 (3)果胶酶将果胶分解为小分子物质,小分子物质
8、可以通过滤纸,因此苹果汁的体积大小反映了果胶酶催化分解果胶的能力。在不同的温度和pH下,果胶酶的活性越大,苹果汁的体积就越大。 4探究不同种类加酶洗衣粉的洗涤效果 (1)实验原理:加酶洗衣粉的酶制剂有多种,包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶等。加入不同的酶制剂,会制成用于不同污渍洗涤的加酶洗衣粉。复合酶洗衣粉加入的酶制剂种类较多,对各种污渍都有较好的洗涤效果。 (2)实验操作程序: 步骤 烧杯编号 注入自来水 500 mL 500 mL 500 mL 加入物质(等量) 奶渍布 奶渍布 奶渍布 控制水温 37 37 37 加入洗衣粉(等量) 蛋白酶洗衣粉 复合酶洗衣粉 脂肪酶洗衣粉 玻璃棒搅拌
9、(等速) 5分钟 5分钟 5分钟 观察实验现象 5固定化酶和固定化细胞的比较 项目 固定化酶 固定化细胞 常用方法 化学结合法、 物理吸附法 包埋法 优点 可反复使用; 有利于工艺的连续化、管道化,同时降低了生产成本 可以连续发酵,节约成本;保持酶在细胞内的原始状况,增加了酶的稳定性;操作容易 不足 酶在固定化时活力有所损失; 不适用于多酶反应 细胞膜、细胞壁会阻碍底物的渗透和扩散,降低反应效率 三、生物技术在食品加工及其他方面的应用1运用发酵加工食品的基本方法果酒 果醋 腐乳 泡菜 微生物类型 酵母菌(真菌)兼性厌氧菌 醋酸杆菌(细菌)好氧细菌 毛霉(真菌)好氧菌 乳酸菌(细菌)厌氧菌 原理
10、 酵母菌无氧呼吸产生酒精 醋酸杆菌有氧呼吸产生醋酸 毛霉代谢产生蛋白酶和脂肪酶 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸 控制条件 前期有氧后期无氧,20左右 有氧,3035 有氧,1518 无氧,常温 实验流程 【特别提醒】在泡菜的腌制过程中会产生亚硝酸盐,亚硝酸盐在一定条件下可转化为能致癌、致畸和致突变的物质亚硝胺。 在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰(紫)红色染料,通过目测比较,可大致估算亚硝酸盐的含量。 2植物激素与组织培养生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的作用及特点: (1)在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 (2)使用顺
11、序不同,结果不同,具体如下: 使用顺序 实验结果 先使用生长素,后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂,但细胞不分化 先使用细胞分裂素,后使用生长素 细胞既分裂又分化 同时使用 分化频率提高 (3)用量比例不同,结果也不同: eq f(生长素用量,细胞分裂素用量)的比值eq blcrc (avs4alco1(高:利于根的分化、抑制芽的形成,低:利于芽的分化、抑制根的形成,适中:促进愈伤组织的生长)3植物芳香油三种提取方法的比较 提取方法 实验原理 方法步骤 适用范围 水蒸气蒸馏 利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来 水蒸气蒸馏分离油层除水过滤 适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油 压榨法
12、 通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油 石灰水浸泡、漂洗压榨、过滤、静置再次过滤 适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取 有机溶 剂萃取 使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发溶剂后就可获得芳香油 粉碎、干燥萃取、过滤浓缩 适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶液中 4DNA和蛋白质技术 (1)DNA的粗提取和鉴定: 基本原理: aDNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。 bDNA不溶于酒精溶液。 cDNA不被蛋白酶水解。 dDNA在水浴加热条件下可被二苯胺染成蓝色。 主要步骤:选取材料破碎细胞,获取含DNA的滤液去除滤液中的杂质
13、DNA的析出与鉴定。 注意事项: a选择动物细胞时,细胞比较容易破碎,选择植物细胞时则要先溶解细胞膜(如加洗涤剂、研磨等)。 b以鸟类的红细胞为材料时,需向血液中加入柠檬酸钠抗凝。 c二苯胺需现配现用。 (2)PCR技术的基本操作和应用: 目的获取大量的目的基因 原理双链DNA的复制。 条件需要DNA模板、引物(一般为单链DNA)、四种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶和酶促反应所需的离子,同时还要控制温度。 过程: a变性:在95时DNA解旋。 b复性:在50时引物与DNA单链结合。 c延伸:在72时合成DNA子链(两个引物间的序列)。 (3)蛋白质的提取和分离: 实验原理:依据蛋白质的各种特
14、性可以将不同种类的蛋白质分离。 常用方法: a凝胶色谱法:根据相对分子质量的大小分离蛋白质。 b电泳:利用待分离样品中各种分子带电性质的差异及分子本身大小、形状的不同产生不同的迁移速度,由此将各种分子分离。 c蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。 【特别提醒】人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核,也没有DNA,不适于作为DNA提取的材料,但却是提取血红蛋白的理想材料。 凝胶色谱柱的直径大小不影响分离效果,但直径过大会造成洗脱液体积增大,样品稀释度增大;凝胶色谱柱的高度与分离度有关。 红细胞洗涤过程中,洗涤三次后,上清液仍有黄色,可增加洗涤次数,否则无法除去血浆蛋白
15、;离心时转速要低,时间要短,否则白细胞等会一同沉淀,达不到分离效果。 血红蛋白释放过程中,蒸馏水的作用是涨破红细胞,甲苯的作用主要是溶解细胞膜。 四、微生物的培养和应用 1微生物的营养营养要素 来源 功能 碳源 无机碳源 CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物 构成细胞中的物质和一些代谢产物; 既是碳源又是能源 有机碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等 氮源 无机氮源 无机氮:NH3、铵盐、硝酸盐、N2等 将无机氮合成含氮的代谢产物 有机氮源 牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物 生长因子 维生素、氨基酸、碱基 酶和核酸的组成成分;参与代谢过
16、程中的酶促反应 2.微生物的纯化培养的方法(1)平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面 在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的菌落。(2)稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。 在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。 3测定微生物数量的方法(1)直接计数法:常用的是显微镜直接计数。(2)间接计数法:常用的是稀释涂布平板计数法。【特别提示】(1)显微镜计数法计算的细菌中包括死细菌。稀释涂布平板法计数的是
17、活菌数。(2)稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目要低。 五、酶的应用 1直接使用酶、固定化酶和固定化细胞 直接使用酶 固定化酶 固定化细胞 制作方法 化学结合法固定化、物理吸附法固定化 包埋法固定法 是否需要 营养物质 否 否 是 催化反应 单一或多种 单一 一系列 反应底物 各种物质(大分子、小分子) 各种物质(大分子、小分子) 小分子物质 缺点 对环境条件非常敏感,易失活; 难回收,成本高,影响产品质量 不利于催化一系列酶促反应 反应物不易与酶接近,尤其是大分子物质,反应效率下降 优点 催化效率高、耗能低、低污染 既能与反应物接触,又能与产物分离; 可以重复利用 成本低、操作容
18、易 2.加酶洗衣粉的洗涤效果的探究(1)判断加酶洗衣粉洗涤效果的方法:可在洗涤后比较污物的残留状况,如已消失、颜色变浅、面积缩小等。(2)加酶洗衣粉的洗涤效果的探究方法:实验设计遵循的原则是对照原则和单一变量原则,如探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果有何不同时,以控制洗衣粉的种类为变量,其他条件完全一致;同时,普通洗衣粉处理污物与加酶洗衣粉处理污物形成对照实验。(3)变量的分析和控制:影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量、衣物的材质、衣物大小、浸泡时间、洗涤的方式和洗涤的时间等。在选择适宜的变量作为探究课题的时候,应注意切合实际,如选择水温时,我们可以选择一
19、年中冬季、春季、秋季和夏季的实际常温5、15、25和35进行实验。 六、植物有效成分的提取不同物质的提取分离方法 提取方法 方法步骤 适用范围 水蒸气 蒸馏 水蒸气蒸馏、分离油层、除水过滤 适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油 压榨法 石灰水浸泡、漂洗、压榨、过滤、静置、再次过滤 适用于柑橘、柠檬等易焦煳原料的提取 有机溶 剂萃取 粉碎、干燥、萃取、过滤、浓缩 适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶剂中 【高频考点突破】考点一微生物的实验室培养例1.(2015xx卷,19)做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是()A.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指
20、针回到零后,开启锅盖B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上解析本题主要考查微生物的分离与培养实验,意在考查考生对实验现象和结果进行解释、分析和处理能力。难度适中。A项错,高压灭菌加热结束后,让其自然冷却后再慢慢打开排气阀以排除余气,然后才能开盖取物;B项错,倒平板时左手拿培养皿,右手拿锥形瓶,左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,倒入培养基后立即盖上培养皿皿盖;C项错,灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种;D项对,皿底的标记不会因为盖子混淆而混淆。答案D
21、【变式探究】下列关于细菌的叙述,正确的是()A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落C.细菌大量培养过程中,芽孢形成于细菌生长的调整期D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选答案D考点二微生物的筛选、分离与计数例2.(2015xx卷,31)人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是_(填序号)。酒精灯培养皿显微镜无菌水(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液
22、量不宜过多的原因是_。(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是_。(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见下图)。图中降解圈大小与纤维素酶的_有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是_(填图中序号)。(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株_更适合用于人工瘤胃发酵,理由是_。答案(1)(2)培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果(3)避免培养
23、基污染棉塞(4)量与活性(5)J4发酵过程会产热和产酸,J4 菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高【变式探究】某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()A.培养基分装到培养皿后进行灭菌B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D.培养过程中每隔一周观察一次解析本题考查微生物的分离和培养过程中的操作要求和培养条件等相关知识,意在考查考生的知识运用能力和实验处理能力。培养微生物的过程中应先灭菌再倒平板,A错误;每一次划线前都要进行接种环的灼烧灭菌,B正确;接种后的培养皿应在恒温培养箱中进行培养,光照会影响温度等条件,C错误;培养过程中
24、观察间隔的时间一般不超过24 h,D错误。答案B考点三酶的应用例3.(2014xx卷,18)下列关于加酶洗衣粉的叙述,正确的是()A.高温易使酶失活,因此冷水洗涤去污效果应该比温水好B.洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用C.在pH低于7.0的自来水中,碱性蛋白酶依然能起作用D.洗衣粉中酶主要是通过快速分解溶在水里的污渍发挥作用答案C【变式探究】下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是()A.可用包埋法制备固定化酵母细胞B.反应产物对固定化酶的活性没有影响C.葡萄糖异构酶固定前后专一性不同D.固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应解析本题考查酶或细胞的固定化技术,意在考查
25、考生对固定化酶和固定化细胞在方法选择和催化反应等方面异同的比较辨别能力。细胞难以被吸附或结合,固定化细胞多采用包埋法,A正确;反应产物积累能影响酶的结构,从而使酶的活性下降,B错误;葡萄糖异构酶在固定前后专一性不变,C错误;固定化细胞固定的是一系列的酶,可以催化一系列的反应,但不能催化各种反应底物的一系列反应,D错误。答案A考点四传统发酵技术的应用例4.(2015xx卷,24)下图为苹果酒的发酵装置示意图,下列叙述错误的是()A.发酵过程中酒精的产生速率越来越快B.集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的CO2C.发酵过程中酵母种群呈“J”型增长D.若发酵液表面出现菌膜,最可能原因是发酵瓶漏气解析
26、本题主要考查果酒制作相关知识,意在考查生物实验的相关知识,考查理解能力和综合运用所学知识分析问题的能力,具备对实验现象和结果进行解释、分析的能力。难度适中。A项错,发酵后期,底物减少、酒精浓度增加等因素,都会造成酒精生产速率减慢;B项错,发酵初期,由于发酵瓶中有氧气,酵母菌能进行有氧呼吸产生二氧化碳;C项错,酵母菌种群增长曲线呈下降趋势;D项对,发酵瓶漏气,会使醋酸菌大量繁殖而形成的表面观察到的菌膜。答案ABC【变式探究】(2015xx卷,17)关于“腐乳的制作”实验,下列叙述错误的是()A.将腐乳坯堆积起来会导致堆内温度升高,影响毛霉生长B.腐乳坯若被细菌污染,则腐乳坯表面会出现黏性物C.勤
27、向腐乳坯表面喷水,有利于毛霉菌丝的生长D.装坛阶段加入料酒,可有效防止杂菌污染答案C考点五特定成分的提取与分离例5.(2015xx卷,25)图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是()A.图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同B.图1中完成过滤之后保留滤液C.图2中完成过滤之后弃去滤液D.在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质解析本题主要考查“DNA 的粗提取与鉴定”实验,意在考查考生理解能力和实验能力。难度较小。A项错,图1、2 中加入蒸馏水稀释的目的分别是破碎细胞获取含DNA的滤液、稀释NaCl溶液,析出DNA;B项对,图1 过滤之后保留滤液,因
28、滤液含DNA;C项对,图2过滤之后弃去滤液,因DNA已析出;D项对,嫩肉粉中的蛋白酶可对蛋白质进行水解。答案BCD【变式探究】某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验,操作错误的是()A.加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨B.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC.加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D.加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热答案A【经典考题精析】 (2014上海卷)26图8表示四种微生物培养物()在添加利福平前后的细胞内RNA含量。由此可以判断古细菌和酵母菌可能是A B C D【答案】B(2014课标卷)39(15分)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌
29、的分离等工作。回答下列问题:(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是 ;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为 。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过 灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是 。(3)示意图A和B中, 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养
30、,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的 的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高 的利用率。【答案】(1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8107(2)灼烧; 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B 、溶解氧 营养物质(2014课标卷)39.(15分)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将 分解成 。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成 色复合物。用含有CR的该种培养基培养
31、纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。 (3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲+-+培养基乙+-+注:“+”表示有,“”表示无。据表判断,培养基甲 (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ;培养基乙 (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ;【答案】(1)纤维二糖 葡萄糖 (2)红色 透明圈 (3)不能 液体培养基不能分离单菌落 不能 乙培养基中没有纤维素,不会形成CR-纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌(20
32、14xx卷)10.有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是_。(2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和_,这些植物激素一般需要事先单独配置成_保存备用。(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是_。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_。(4)为探
33、究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_,该实验设计是否合理?为什么?_。 【答案】(1)氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖(2)细胞分裂素 母液(3)接种环 接种环灼烧后未冷却;划线未从第一区域末端开始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质。 不合理,缺少空白对照(2014xx卷)30.(8分)为了获得-胡萝卜素产品,某小组开展了产-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题:(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是;为了减少灭菌后器皿被污染,灭菌前应该。(2)为了筛选出酵母菌,培养基中添加了青霉素,其目的是。(3)下图
34、是灭菌锅及其局部剖面示意图,图中甲、乙、丙指示的依次是。(填序号)安全阀、放气阀、压力表放气阀、安全阀、压力表安全阀、放气阀、温度表放气阀、安全阀、温度表(4)为了将分离到的菌株纯化,挑取了菌落在3块相同平板上划线,结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长,最可能的原因是。(5)为增加-胡萝卜素提取量,在研磨酵母细胞时,添加石英砂的目的是;研磨时(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3,理由是 。【答案】(8分)(1)干热灭菌和湿热灭菌(高压蒸汽灭菌) 用牛皮纸(报纸)包扎器皿(2)抑制细菌(放线菌)生长 (3) (4)接种环温度过高,菌被杀死(5)有助于研磨充分 不需要 -胡萝卜素较耐酸(20
35、14大纲卷)4.某同学在 = 1 * GB3 、 = 2 * GB3 、 = 3 * GB3 三种条件下培养大肠杆菌,这三种条件是: = 1 * GB3 以葡萄糖为碳源的培养基,不断补充培养基,及时去除代谢产物 = 2 * GB3 以葡萄糖为碳源的培养基,不补充培养基,不去除代谢产物 = 3 * GB3 以葡萄糖和乳糖为碳源的培养基,不补充培养基,不去除代谢产物根据培养结果绘制的一段时间内菌体数的对数随时间变化的趋势图如下:假设三种培养基中初始总糖量相等,则 = 1 * GB3 、 = 2 * GB3 、 = 3 * GB3 三种条件依次对应的趋势图是A.甲、乙、丙 B.乙、丙、甲C.丙、甲、
36、乙D.丙、乙、甲【答案】C(2014上海卷)(六)分析有关微生物的资料,回答问题并完善实验设计方案。(10分) 脂肪酶具有广泛的应用前景。为获得高产脂肪酶的菌株,并将之用于产业化,进行如下的系列实验。53欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌,应选择下列固体培养基(仅列出了碳氮源)中的 _。 A蛋白胨、柠檬酸铁铵 B橄榄油、硫酸铵 C乳糖、酵母膏 D葡萄糖、蛋白胨【答案】C【解析】分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌,有要在培养基中加入该特定的碳氮源,而分泌脂肪酶的细菌能在乳糖、酵母膏生长。54进一步调查适合于产脂肪酶菌株生长的碳氮源。根据表2的实验数据,选择理想的碳 源为_。【答案】蔗糖55补全表3中的实验
37、方案,以确定所选碳源的最佳浓度(设浓度梯度的差值为0.2%)。【答案】酶活性0.6%0.8%1.0%1.2%1.4%第1组/第2组/第3组/平均值/【解析】题目给定浓度为0.1%,要求设浓度梯度的差值为0.2%,要根据这一点来设定。56利用相似方法探得理想氮源的最佳浓度,再进一步确定碳氮源浓度的最佳组合。以a 和b分别代表碳源和氮源的浓度,假设酶活a1a2a3;b2b3b4,据此形成下列 四种方案,其中最佳的是_。 方案一:a1和b2组合。 方案二:将每一种a的浓度分别与b2、b3、b4组合,根据酶活取其中的最佳组合。 方案三:a1和b2组合,a2和b3组合,根据酶活取其中的最佳组合。 方案四
38、:a1分别与每种氮源浓度组合,b2分别与每种碳源浓度组合,根据酶活取其中 的最佳组合。【答案】方案二【解析】题目的要求是确定碳氮源浓度的最佳组合,所以在有碳源,又要有氮源。a 和b组合后,就是看出碳源在何种浓度、氮源在何种浓度下生长最合适。57如果脂肪酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失,且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活,则应选择图17中的_ 固定化工艺。【答案】C(2014广东卷)4、下列叙述错误的是( )A、醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸B、酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖汁产生酒精C、泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵D、腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶【答案】A【解析】
39、醋酸杆菌酿醋时需要持续通气,即利用醋酸杆菌的有氧呼吸,不是无氧呼吸,故A错。(2014山东卷)35.(12分)【生物技术实践】玉米是重要的粮食作物,经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下:(1)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供_。发酵过程中检测酵母菌数量可采用_法或稀释涂布平板法计数。(2)玉米胚芽油不易挥发,宜选用_法或_法从玉米胚芽中提取。(3)玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用_技术可使葡萄糖异构酶重复利用,从而降低生产成本。(4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时,需用
40、耐高温的_催化。PCR一般要经历三十次以上的循环,每次循环包括变性、_和_三步。【答案】(1)碳源;显微镜直接计数(2)压榨;萃取(注:两空可颠倒)(3)固定化酶(4)(Taq)DNA聚合酶;(低温)复性(或退火);(中温)延伸(2014海南卷)30(15分)已知泡菜中亚硝酸盐含量与泡制时间有关。为了测定不同泡制天数泡菜中亚硝酸盐的含量,某同学设计了一个实验,实验材料、试剂及用具包括:刻度移液管、比色管、不同浓度的亚硝酸钠标准溶液、亚硝酸盐的显色剂、不同泡制天数的泡菜滤液等。回答相关问题:请完善下列实验步骤。标准管的制备:用 和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管。样品管的制备:用刻度移液管分别
41、吸取一定量的 ,加到不同的比色管中,然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色,得到样品管。将每个 分别与系列标准管进行比较,找出与样品管颜色深浅 的标准管,该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中的亚硝酸盐含量,记录各样品管亚硝酸盐的含量。右图表示的是泡菜中 趋势。泡菜制作过程中产酸的细菌主要是 (填“醋酸杆菌”或“乳酸菌”)。【答案】(1)不同浓度亚硝酸钠标准溶液 不同泡制天数的泡菜滤液 样品管 一致(2)亚硝酸盐含量 (3)乳酸菌(2013新课标全国卷)39. 【生物选修1 生物技术实践】(15分)回答下列有关泡菜制作的习题:(1)制作泡菜是,所用盐水煮沸,其目的是 。为了缩短制作时间,有人还会
42、在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的目的是 。(2)泡菜制作过程中,乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌的 中。(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 、 和 等。(4)从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内,泡菜液逐渐变酸,这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ,原因是: 。【答案】(1)消毒杀菌 “陈泡菜水”含乳酸菌,为泡菜发酵提供菌种 (2)无氧呼吸 细胞质基质 (3)温度 食盐用量 腌制时间 (4) 乳酸菌先增加后减少,其他杂菌逐渐减少 泡菜的制作过程中,许多乳酸菌产生大量乳酸,共同抑制其它菌的生长,乳酸积累过多,又会抑制乳酸菌自身的生长【考点
43、定位】本题考查泡菜的制作过程和亚硝酸盐的测定,属于对识记层次的考查。(2013新课标全国卷)39. 【生物选修1 生物技术实践】(15分)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。试验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用 法或 法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释,用 法接种于固体培养基表面,而在37培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置
44、于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A ;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该病菌对抗生素B ;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明 ;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的 。(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素 。【答案】 (1)划线 稀释涂布(或涂布) (2)涂布(3)敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性比A的弱 耐药性 (4)A【考点定位】本题考查微生物培养的方法,属于对识记、理解层次的考查。(2013山东卷)34、(8分)【生物生物技术实
45、践】胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得,流程如下:(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用 或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环,其目的是 。 (2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R生长提供 和 。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和 以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用 方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤,其目的是 。(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为 。【答案】(1)稀释涂布平板法 灭菌(或防止杂菌污染)(2)碳源 氮源(3)时间 水浴 滤
46、去不溶物(4)(实验)对照【考点定位】微生物的培养与应用,植物有效成分的提取。,(2013海南卷)30. 【生物选修1:生物技术实践】(15分)根据相关知识,回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题:(l)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和_,以提高萃取效率:水蒸气蒸馏法_(填“适合”或“不适合”)胡萝卜素的提取,原因是_;鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时,通常可采用_法,并以_样品作为对照。 (2)若要提高衣物上血渍的去除效果,可在洗衣粉中加入_酶,因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的_或_;若要提高衣物上油渍的去除效果,洗衣粉中可添加_酶;使用加酶洗衣粉时,水温过低或过高时洗涤效
47、果不好的原因分别是_。【答案】(1)干燥(1分) 不适合(1分) 水蒸气蒸馏法适用于分离挥发性物质,而胡萝卜素为非挥发性物质,不能随水蒸气蒸馏出(3分) 纸层析(2分) 标准的胡萝卜素(2分)(2)碱性蛋白(或蛋白)(1分) 氨基酸(1分) 小分子肽(1分) 脂肪(1分)水温过低时酶活性较低,水温过高会使酶变性失活(2分)【解析】(1)提取胡萝卜素的实验流程: 【最新考纲解读】 1从考查内容上看,主要考查基因工程的原理、技术操作和应用,对生物技术的安全性考查相对较少。 2从考查角度上看,以最新基因工程的研究成果为背景,联系其他生物技术工程,综合命题考查基因工程应用和解决问题的能力。 3从命题趋
48、势上看,预计最新年高考仍然主要对基因工程的应用、技术操作、原理等知识点进行命题,可能更趋向于联系当今基因工程研究成果和基因工程在农业、医疗卫生方面的应用实例进行命制试题。 4从考查内容上看,植物组织培养、植物体细胞杂交、动物细胞融合及应用、胚胎工程操作及胚胎干细胞应用等是高频考点。 5从考查角度上看,联系生活生产实际,以现代生物科学研究成果为背景,综合命题考查现代生物技术的原理、操作及应用。 6从考查内容上看,主要考查微生物的纯化培养操作与应用、传统发酵技术。 7从考查角度上看,联系生产生活实际考查微生物的计数、分离和纯化培养;结合发酵食品制作过程考查传统发酵技术原理及基本操作。 8从命题趋势
49、上看,预计最新年高考命题仍以对微生物培养与应用考查为热点,主要是和生产生活实际相联系或与实验结合对实验原理、实验操作进行综合命题考查。 结合现代生物技术成果在医学实践、农业生产应用方面进行命题,考查现代生物工程技术的原理、操作及应用。 【重点知识梳理】一、基因工程 1基因工程的基本工具 限制酶 DNA连接酶 (运)载体 作用 切割目的基因和载体 拼接DNA片段形成 重组DNA 携带目的基因进入受体细胞 作用部位 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键 -作用特点 (条件) 识别特定的核苷酸序列 在特定位点上切割 Ecoli DNA连接酶只能连接黏性末端 T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平
50、(口)末端 能在宿主细胞内稳定存在并大量复制 有一个或多个限制酶切割位点 具有特殊的标记基因 2基因工程的操作步骤 (1) 目的基因的获取: 从基因文库中获取。 利用PCR技术扩增。 用化学方法直接人工合成。 (2) 基因表达载体的构建: 基因表达载体的组成:目的基因启动子终止子标记基因。 基因表达载体的构建方法: (3)将目的基因导入受体细胞: 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 感受态细胞法(用Ca2处理) 受体 细胞 受精卵、体细胞 受精卵 原核细胞 (4) 目的基因的检测与鉴定: 目的基因插入检测:DNA分子杂交。 目的基因转录
51、检测:(核酸)分子杂交。 目的基因翻译检测:抗原抗体杂交。 个体生物学水平检测:根据目的基因表达出的性状判断。 二、细胞工程1动物细胞培养与植物组织培养的比较 项目 动物细胞培养 植物组织培养 培养前处理 无菌、用胰蛋白酶处理,使组织细胞相互分散开 无菌、离体 培养基成分 葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素、动物血清等 矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素等 培养基状态 液体培养基 固体培养基 项目动物细胞培养植物组织培养过程动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织原代培养传代培养细胞群离体的植物器官、组织或细胞eq o(,sup14(脱分化),sdo14()愈伤组织eq o(,sup1
52、4(再分化),sdo5()根、芽植物体能否培养成个体不能能应用 举例 大规模生产有重要价值的生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等;皮肤移植;检测有毒物质的毒性等 快速繁殖、培育无病毒植株;生产药物;制造人工种子;培育转基因作物等 2植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体的制备) 理论基础(原理) 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 融合前处理 酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶等) 注射特定抗原,免疫小鼠,获取(效应)B淋巴细胞 促融 物理法:离心、振动、电激等;化学法:聚乙二醇(PEG) 物化法:与植物细胞融合相同;生物法
53、:灭活的仙台病毒 过程 第一步:原生质体的制备;第二步:原生质体的融合;第三步:杂种细胞的筛选与培养;第四步:杂种植株的诱导与鉴定 第一步:正常小鼠免疫处理;第二步:动物细胞融合;第三步:杂交瘤细胞筛选与培养;第四步:单克隆抗体的提纯 用途 克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展杂交亲本的组合范围;克服有性杂交的母系遗传,获得细胞质基因的杂合子,研究细胞质遗传 制备单克隆抗体;诊断、治疗疾病,如生物导弹 3动物细胞核移植和单克隆抗体 (1)动物细胞核移植: 供体体细胞细胞培养体细胞(核) 注入 卵母细胞减中期去核无核卵母细胞重组细胞 重组胚胎代孕母牛生出与供体遗传性状相同的个体。 (2)单克隆抗体
54、:单克隆抗体的制备过程:eq blc rc(avs4alco1(培养骨髓瘤细胞,免疫小鼠B淋巴细胞)eq o(,sup15(融合),sdo5()多种杂交细胞在具有筛选作用的培养基上培养克隆筛选出的杂交细胞将不同种杂交细胞分开,并克隆专一抗体,检验阳性细胞注射到小鼠体内或体外培养获得单克隆抗体。杂交瘤细胞的特点:既能迅速大量繁殖,又能产生专一性抗体。 单克隆抗体的优点:特异性强、灵敏度高、产量大。 【高频考点突破】考点一基因工程的工具与操作程序例1.(2015重庆卷,6)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是()A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得B.表达载体的复制和
55、胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用答案C【变式探究】下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是()A.的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B.侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到的染色体上C.的染色体上若含抗虫基因,则就表现出抗虫性状D.只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异答案D考点二基因工程的应用蛋白质工程及基因工程的安全性例2.(2015xx卷,32)胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆
56、菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题:图1图2(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是_。(2)图1中启动子是_酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达;氨苄青霉素抗性基因的作用是_。(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有_。(4)半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于_。(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为_。(6)根据图2中胰岛素的结构,请推测每个胰岛
57、素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是_,理由是_。答案(1)终止子(2)RNA聚合作为标记基因,将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来(3)限制酶和DNA连接酶(4)防止胰岛素的A、B 链被菌体内蛋白酶降解(5)半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸,而胰岛素A、B 链中不含甲硫氨酸(6)至少2个两条肽链的一端各有一个游离的氨基,氨基酸R 基团中可能还含有游离的氨基【变式探究】(2014重庆卷,2)生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是()A.应严格选择转基因植物的目的基因,避免产生对人类有害的物质B.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验,但不反对治疗性克隆C.反对设计试管婴儿的原因之
58、一是有人滥用此技术选择性设计婴儿D.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力解析在转基因过程中,避免基因污染和对人类的影响,必须严格选择目的基因,A正确;我国不反对治疗性克隆,但坚决反对生殖性克隆,B正确;反对设计试管婴儿原因之一是防止选择性设计婴儿,违背伦理道德,C正确;生物武器是指有意识的利用微生物、毒素、昆虫侵袭敌人的军队、人口、农作物或者牲畜等目标,以达到战争目的的一类武器,干扰素为淋巴因子,并非生物武器,D错误。答案D考点三植物细胞工程例3.(2015北京卷,5)在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中,不需要的是()A.用携带目的基因的农杆菌侵染植物
59、细胞B.用选择培养基筛选导入目的基因的细胞C.用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生质体融台D.用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽答案C【变式探究】培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是()A.组织培养B.细胞杂交C.显微注射 D.核移植解析脱毒苗一般是利用植株中含病毒比较少甚至不含病毒的茎尖分生区细胞,经植物组织培养技术获得,A项正确。细胞杂交技术主要用来培育具有两种植物遗传性状的杂种植物;显微注射主要用于将含有目的基因的表达载体导入动物细胞;核移植技术主要用于动物体细胞克隆,所以B、C、D三项错误。答案A考点四动物细胞工程例4.(2014浙江卷,3)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()A
60、.连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型B.某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞C.由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆D.未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状解析连续细胞系的细胞其核型已发生改变,A项错误;一个祖细胞培养形成的细胞群才为一个克隆,C项错误;未经克隆化培养的细胞系细胞可能是不同细胞分裂形成的,其性状可能不同,D项错误。答案B【变式探究】实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的是()eq x(实验小鼠)eq o(,sup7(甲)eq x(皮肤组织)eq o(,sup7(乙)eq x(皮肤细胞)eq o(,sup7(丙)eq x(培养细胞1)eq o
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