稀释液的准备

1、稀 释 液 的 准 备 稀释液的配制应在实验室进行。用品的清洗与消毒如果是用量筒量取蒸馏水、在三角瓶中配制稀释液，用玻璃漏斗分装精液，这些用品用过后应用装有蒸馏水的洗瓶将这些容器冲洗干净，空干水分后，放入消毒柜中干燥消毒。量筒量过蒸馏水后可直接放入消毒柜中消毒。各种容器每半个月用洗洁精进行一次全面的清洗消毒。精液稀释液配制应在精液稀释前1小时左右进行，以便使稀释液的温度升高到与精液同温，并使稀释液的成分相互作用达到稳定状态。1.稀释液的种类 根据精液保存时间要求和保存的温度不同，可选用多种稀释液的配方。在生产中，猪的精液一般采用常温保存，保存时间35天。最广泛使用的稀释液配方为BTS液，它采用

2、葡萄糖、柠檬酸钠、乙二胺四乙酸二钠、抗生素等七种成分溶解于水配制而成，稀释后的精液可保存35天。一些保存时间更长的稀释液配方，除了成本较高外，在受胎率方面也不如短期保存的稀释液。2.水 配制稀释液用的水最好是二次蒸馏水，用饮用纯水、单次蒸馏水应经过试验，方可使用。如果认为可用，最好在使用前煮沸消毒后再使用。在配制稀释液时，蒸馏水的水温不可超过40，过高的温度会破坏稀释液中的抗生素。3.稀释液的配制过程 以1000毫升BTS稀释液为例，可用任一方法：经过清洗干燥消毒的三角瓶，将一袋BTS稀释粉（50克）全部加入瓶中，用量筒量取双蒸馏水1000毫升，加入三角瓶中。盖上盖子或用稀释粉袋套在三角瓶口上

3、，封紧摇动，使稀释粉完全溶解。或放在磁力搅拌器上，搅拌加速溶解。取下盖子，放入35的水浴锅中预温。稀释液用过后，三角瓶应用蒸馏水冲洗，空干水分，然后将三角瓶、量筒用牛皮纸封口，放入80120的消毒柜或干燥箱中烘干。将两个食品袋相套放入大烧杯中或塑料杯中，放在电子秤上，打开电子秤开关，当电子秤上读数为零时，将连接蒸馏水容器的硅胶管放出少量水后，将管口对准杯口注水，并注意读数变化，当接近1000克时，应放慢流速，改为滴注，直到1000克。之后，应将蒸馏水管的龙头套好，防止污染。在大烧杯中加入一袋稀释粉（50克）。从盛磁珠的小烧杯中取镊子并夹取磁珠，在废液缸上用洗瓶冲洗磁珠2-3次，待磁珠上水分滴净

4、后，放入烧杯中，然后将烧杯放在磁力搅拌器上，打开电源开关和加热开关，调整磁珠转速旋扭，使磁珠以适当速度旋转（水体形成涡流），使稀释粉全部溶解后，降低磁珠转速，关闭加热和电源开关。将杯子放入35的水浴中预温。注：不能控温的加热磁力搅拌器使用时间不可超过10分钟，或及早关闭加热电源；平时磁珠放在一个清洗干燥过的小烧杯中，注入新鲜蒸馏水半杯，镊子为不锈钢材料，也经清洗干燥放入杯中，盖上干净的培养皿，每3周应换掉陈水，冲净换上新的蒸馏水。稀释液加入精液中后，应用小烧杯中的镊子将磁珠从大烧杯中夹出，并在废液缸上冲洗磁珠和镊子前端3-4遍，待磁珠上水分滴净后，连同镊子放入小烧杯中，盖上培养皿。这种方法由于稀释液是在一次性食品袋中配制的，因此，不需要对配制稀释液的容器进行清洗和消毒，实现了稀释液配制的免消毒。冬季稀释粉溶解较慢，可将稀释粉与水混合后，放入水浴锅中预温10分钟，再摇匀，可加速稀释粉溶解。使用加热磁力搅拌器者不必在水浴锅中预温。注：除大规模人工授精站外，一般不主张自己配制稀释粉，推荐使用商业化稀释粉，这些产品质量稳定可靠。另外，稀释粉与蒸馏水按什么比例混合是十分严格的，应按照说明书上的配比进行稀释粉的溶解，不可改变配比。在三角瓶中溶解稀释液稀释精液后,将磁珠冲净放入小烧杯中的双蒸馏水中玻璃用品消毒将装有食品袋的烧杯放在电子秤上