维生素分析与检验

1、维生素分析与检验维生素又名维他命，是维持人体生命活动必需的一类有机物质，也是保持人体健康的重要活性物质特点：维生素均以维生素原的形式存在于食物中参与机体代谢的调节大多数的维生素必须经常通过食物中获得人体对维生素的需要量很小 重要性： 当体内维生素供给不足时，能引起身体新陈代谢的障碍，造成皮肤功能的障碍。分类： 水溶性维生素： 维生素B族、维生素C、维生素PP、叶酸等 脂溶性维生素： 如维生素A、维生素D、维生素E、维生素K等 水溶性维生素的测试分析方法分光光度法分子荧光法毛细管电泳法高效液相色谱法微生物法高效液相色谱法色谱柱: symmetry C18 (319 mm 150 mm, 5m)

2、流动相:甲醇水(含己烷磺酸钠5 mmol/L、冰醋酸1%、三乙胺013%) = 2575流速: 1 mL /min检测波长: 275 nm进样量: 10L.优点：制备样品简单 不受样品挥发度和热稳定性的限制 高效性 、高选择性、分析速度快缺点：仪器复杂 价格昂贵脂溶性维生素的分析和检测维生素C的检测方法 2，6-二氯靛酚滴定法 2，4-二硝基苯肼法 高效液相色谱法 钼蓝比色法维生素B2的检测方法分光光度法催化动力学法荧光法色谱法滴定法测VC含量-2，6-二氯靛酚滴定法试剂：1%草酸，2%草酸，0.001mol/L 2，6二氯酚靛酚步骤：1.称4.0g新鲜样品加5ml 2%草酸研磨过滤到50ml

3、容量瓶中残渣用2%草酸提取用1%草酸定容。2. 吸取10ml滤液于三角瓶中用2，6二氯酚靛酚滴定，记录所用滴定液体积。3. 对照：于另一容量瓶内加35ml 2%草酸用1%草酸定容，取10ml进行滴定，记录体积。VC含量（ug/100gFW）=100*（V1-V2）K V/W V3 式中，W：样品重 V1：滴定样品用滴定液ml数 V2：滴定对照用滴定液ml数 V3：滤液ml数 V：提取液总体积 K：1ml滴定液氧化VC毫克数荧光法测VB2含量双水相的高效萃取作用简便快速，检出限和选择性得到优化。丙酮形成的双水相萃取荧光测定VB2的方法要优于由乙醇形成的双水相实验方法方法1： 准确移取一定量的VB

4、标准溶液于10 ml比色 管中，加入适量硫酸铵 ，3O ml丙酮或乙醇。用水稀释 至刻度后振荡1.0min静置分层，移取上层清液于exem =44452lnm处测量荧光强度，同时做空白实验。方法2： 准确移取适量VB2标准溶液(含VB2为m4)于带刻度的比色管中，加入一定量的盐及丙酮或乙醇，用水稀释至10 ml后振荡1.0min。静置分层读取上层有机相体积，在exem=44452lnm处侧量其荧光强度，确定VB含量m2，用式E=m1m2计算有机相对VB的萃取率E。植物维生素提取以蒲菜为例维生素C的提取称取蒲菜1520 g加4%偏磷酸25mL进行匀浆,匀浆后用2%偏磷酸定容至100mL,过滤,滤

5、液进行维生素C含量的测定.盐酸硫胺、核黄素（维生素B2） 、盐酸吡哆辛、烟酸、烟酰胺的提取称取蒲菜1520 g,加入75mL 011mol/LHCl于121加压水解提取30min,冷却后定容至100mL,过滤,滤液进行除维生素C以外的其它水溶性维生素含量的测定. 可见近红外漫反射光谱无损检测南方蜜橘维生素C的研究原理：利用光在生物组织内部具有反射、折射、衍射和吸收等特性来确定固体样品内部品质的一种快速分析法，在水果内外部品质无损检测中已得到广泛应用。对粉末及水果VC的检测也有相关报道。缺点：需要化学处理，分析速度慢。实验仪器及参数设置选用美国ASD公司的QualitySpec光谱仪，其波长范围为350-1800nm，光谱采样间隔1nm，扫描时间每次100ms，扫描10次，光源为12V/45 W钨卤灯。50个小果系蜜橘样品。经代表性样品选择，确定40个建模样品进行定标与验证，10个未知样品进行外部验证。标准化学值测定参照食品卫生检验方法理化部分总则(GB/T5009.1-2003),常规化学分析采用国家标准发中的2.6-二氯靛酚滴定法（GB/T6195-86)。实验采用漫反射方式，每个样品在赤道部位灯间隔采集3次光谱，取平均值。光谱采集时尽量避免擦伤或伤疤灯缺陷部位光谱数据由美国ASD公司的indico V4.0软件进行采集和转