微生物实验室培养最新

1、关于微生物的实验室培养最新第一张，PPT共七十五页，创作于2022年6月微生物的类群微生物原核类:真核类非细胞类：衣原体、支原体、细菌、放线菌、蓝藻个体微小、结构简单酵母菌、霉菌、食用菌(蘑菇，灵芝）真菌：原生生物：显微藻类、原生生物（如：草履虫、变形虫等）病毒、类病毒、朊病毒微生物的共同特点：微生物基础知识第二张，PPT共七十五页，创作于2022年6月自养型微生物：光能自养：光合细菌、蓝藻、显微藻类化能自养：硝化细菌、铁细菌、硫细菌异养型微生物：绝大多数微生物第三张，PPT共七十五页，创作于2022年6月细菌的形态球菌弧菌杆菌螺旋菌第四张，PPT共七十五页，创作于2022年6月（一）培养基

2、1.概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。3.培养基的类型和用途2.培养基的成分： 一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气等的要求。 第五张，PPT共七十五页，创作于2022年6月培养基的种类不加凝固剂加凝固剂，如琼脂工业生产观察微生物的运动、分类鉴定微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种含化学成分不明确的天然物质工业生产培养基成分明确分类、鉴定液体培养基半固体培养基固体培养基第六张，PPT共七十五页，创作于2022年6月液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长半固体培养基：(是否运动) 固体培养基：菌落

3、第七张，PPT共七十五页，创作于2022年6月菌落.定义： 单个或者少数细菌(或其他微生物）在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。.特征：大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。.功能：每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。第八张，PPT共七十五页，创作于2022年6月几种菌落及其形态第九张，PPT共七十五页，创作于2022年6月几种菌落及其形态第十张，PPT共七十五页，创作于2022年6月（二）微生物需要的营养物质1、碳源2、氮源3、无机盐4、水.生长因子、维生素第十一张，PPT共七十五页，创作于2022年6月：凡是

4、能为微生物提供所需碳元素的营养物质。无机碳源：CO2；NaHCO3等有机碳源：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等构成细胞物质和一些代谢产物异养微生物的能源.概念.来源：.作用：1.微生物的碳源注：自养微生物的碳源为无机碳源 异养微生物的碳源为有机碳源第十二张，PPT共七十五页，创作于2022年6月无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产物。2.微生物的氮源.概念：.来源：.作用：注：固氮菌的氮源为无机氮源 第十三张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习1.不能作为异养微生

5、物碳源的是（ ）A糖类 B含碳有机物C石油 D含碳无机物D2.自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是（ ）A碳源B氮源C无机盐D生长因子 A第十四张，PPT共七十五页，创作于2022年6月【典例解析】例:关于微生物营养物质的叙述中，正确的是( ) A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量解析：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况分析。对于A、B选项，它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，

6、也是能源，如蛋白胨。对于C选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源；NaHCO3，可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。D第十五张，PPT共七十五页，创作于2022年6月3.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在碳源为纤维素的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素，可以抑制细菌和放线菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（）大肠杆菌霉菌放线菌纤维素分解菌A.B.C.D.解析：选A。本题考查了微生物分离知识

7、。纤维素分解菌可以利用纤维素，大部分微生物却不能；培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌，但霉菌能够生长。第十六张，PPT共七十五页，创作于2022年6月 4、某细菌的培养基的组成成分是葡萄糖、尿素、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁和蒸馏水等，其中凝固剂是 ,碳源是 ，氮源是 。已知只有能够合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，该培养基属于 培养基。从同化作用类型来看，用该培养基培养的细菌属于( ) 同化作用：自养型/异养型异化作用：需氧型/厌氧型/兼性厌氧型琼脂葡萄糖尿素选择异养型微生物第十七张，PPT共七十五页，创作于2022年6月思考?1. 获得纯净培养物的关键？2. 无菌技术除了用来防止实验室的

8、培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。（三）无菌技术防止外来杂菌的入侵第十八张，PPT共七十五页，创作于2022年6月3. 消毒和灭菌有何不同？芽孢：某些特殊种群的细菌休眠体，对热、碱、 酸、高渗以及辐射均有强耐受性。第十九张，PPT共七十五页，创作于2022年6月煮沸消毒法：100煮沸5-6min。巴氏消毒法：70-75下煮30min或 80下煮15min。化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。紫外线消毒:照射30min。.消毒的方法：4.常用的消毒与灭菌的方法第二十张，PPT共七十五页，创作于2022年6月 针

9、对物体表面和空气中的微生物，所用器械是 紫外灯 。照射30min，可先喷洒石炭酸或煤酚皂溶液加强消毒效果。紫外线消毒第二十一张，PPT共七十五页，创作于2022年6月第二十二张，PPT共七十五页，创作于2022年6月第二十三张，PPT共七十五页，创作于2022年6月干热灭菌 160170 ；12h能耐高温的需要保持干燥的物品( 玻璃器皿)高压蒸汽灭菌 100kPa 121 15-30min通常用于培养基的灭菌第二十四张，PPT共七十五页，创作于2022年6月本实验采用酒精对实验者双手消毒，紫外线对操作环境照射消毒，对培养基采用高压蒸汽灭菌，对玻璃器皿进行干热灭菌和接种环灼烧灭菌等。小 结第二十

10、五张，PPT共七十五页，创作于2022年6月体积小，结构简单，易培养，生活周期短。二.实验操作以培养大肠杆菌为例:制备牛肉膏蛋白胨培养基：通过培养基的配制说明大肠杆菌（厌氧）的新陈代谢类型是：异养厌氧型第二十六张，PPT共七十五页，创作于2022年6月第一步：制备牛肉膏蛋白胨培养基1.计 算2.称 量3.溶 化：牛肉膏（连同称量纸） 蛋白胨和氯化钠 琼脂 补加蒸馏水至100ml 4.灭 菌：培养基分装（分装前调PH7.6中性或微碱性）后高压蒸汽灭菌；培养皿干热灭菌。5.倒平板：50、酒精灯火焰附近 拔 灭口 开皿、倒培养基、关皿 冷却后倒置 加热搅拌加热搅拌溶解防止糊底溶化第二十七张，PPT共

11、七十五页，创作于2022年6月 例题：关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中，错误的是（）A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸C.待培养基冷却至50左右时，进行倒平板 D.待平板冷却凝固约5min10min后，将平板倒过来放置解析：选A。本题考查了牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备过程。其顺序为：计算称量溶化灭菌倒平板，故A项错误。第二十八张，PPT共七十五页，创作于2022年6月方法一：平板划线法方法二：稀释涂布平板法核心目的：防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。第二步：纯化大肠杆菌接种第二十九张，PPT共七十五页，创作于2022年6月 定义：

12、接种环、连续划线、稀释分散、菌落步骤:1.接种环灼烧灭菌 2.冷却接种环，开棉塞 3.试管口灭菌（灭口） 4.沾取菌液 5.灭口，塞棉塞 6.划线接种 7.接种环灭菌，连续划线五个区域 8.倒置培养一、平板划线的操作方法第三十张，PPT共七十五页，创作于2022年6月第三十一张，PPT共七十五页，创作于2022年6月定义：梯度稀释、涂布、菌落方法二：稀释涂布平板法步骤:1.稀释操作： 1)试管灭菌编号 2)移液管、稀释菌液 3)重复操作，完成5支试管的稀释2.涂布平板： 1) 涂布器酒精消毒 2)取菌液 3)燃尽酒精 4)涂布分散菌液第三十二张，PPT共七十五页，创作于2022年6月将锥形瓶放

13、入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121，灭菌1530min。待培养基冷却到50 左右时，在酒精灯2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种。第三十三张，PPT共七十五页，创作于2022年6月倒平板操作第三十四张，PPT共七十五页，创作于2022年6月答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。问题讨论1.培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？第三十五张，PPT共七十五页，创作于2022年6月3.平板冷凝后，

14、为什么要将平板倒置？4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。第三十六张，PPT共七十五页，创作于2022年6月第三十七张，PPT共七十五页，创作于2022年6月答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残

15、留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。问题讨论1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？第三十八张，PPT共七十五页，创作于2022年6月2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？答：以免接种环温度太高，杀死菌种。3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次

16、划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。第三十九张，PPT共七十五页，创作于2022年6月答：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。问题讨论涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？2.稀释涂布平板的操作方法第四十张，PPT共七十五页，创作于2022年6月第三步：微生物的恒温培养接种培养基未接种培养基恒温箱37培养12h和24h作用：对照实验 若无菌落生长，说明培养基制备成功。 否则培养基

17、有杂菌污染，需重新制备。第四十一张，PPT共七十五页，创作于2022年6月第四步：菌种的保存固体斜面培养基上4保存，菌种易被污染或产生变异.长期保存：20甘油瓶在冷冻箱中保藏.临时保藏：第四十二张，PPT共七十五页，创作于2022年6月三.结果分析与评价 第四十三张，PPT共七十五页，创作于2022年6月本课题知识小结:第四十四张，PPT共七十五页，创作于2022年6月例2. 下面对灭菌的理解不正确的是()A. 防止杂菌污染B. 消灭杂菌C. 培养基和发酵设备都必须灭菌 D. 灭菌必须在接种前B第四十五张，PPT共七十五页，创作于2022年6月例1某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了

18、实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 和 。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是 和 。（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 。（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于 中培养，培养的温度设定氮源碳源无机盐水高压蒸汽灭菌恒温箱第四十六张，PPT共七十五页，创作于2022年6月在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种 作为对照进行实验。（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有 种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水

19、遭受细菌污染的程度越 。（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐 细菌，这种培养基被称为 。无菌水多高选择培养基盐第四十七张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习1.获得纯净培养物的关键是A 将用于微生物培养的器皿，接种用具和 培养基等器具进行灭菌B 接种纯种细菌C 适宜环境条件下培养D 防止外来杂菌的入侵第四十八张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习1.获得纯净培养物的关键是A 将用于微生物培养的器皿，接种用具和 培养基等器具进行灭菌B 接种纯种细菌C 适宜环境条件下培养D 防止外来杂菌的入侵第四十九张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习2.下列操作与无菌技

20、术无关的是A 接种前用肥皂洗双手,再用酒精擦拭双手B 接种前用火焰烧灼接种针C 培养在50左右时搁置斜面D 在酒精灯的火焰旁完成第五十张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习2.下列操作与无菌技术无关的是A 接种前用肥皂洗双手,再用酒精擦拭双手B 接种前用火焰烧灼接种针C 培养在50左右时搁置斜面D 在酒精灯的火焰旁完成第五十一张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习3.外科手术器械和罐头食品的处理，要以能够杀死什么为标准A 球菌 B 杆菌 C 螺旋菌 D 芽孢第五十二张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习3.外科手术器械和罐头食品的处理，要以能够杀死什么为标准A 球菌 B

21、 杆菌 C 螺旋菌 D 芽孢第五十三张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习4.某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容,首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种.请回答以下问题:第五十四张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习对买回来的菌进行扩大培养,首先制备试管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料：_其中提供氮源的主要是_；提供能源的主要物质是_；琼脂的作用是_，它不提供营养。第五十五张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习对买回来的菌进行扩大培养,首先制备试管培养基,写出制备

22、固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料：_其中提供氮源的主要是_；提供能源的主要物质是_；琼脂的作用是_，它不提供营养。牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐、琼脂第五十六张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习对买回来的菌进行扩大培养,首先制备试管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料：_其中提供氮源的主要是_；提供能源的主要物质是_；琼脂的作用是_，它不提供营养。牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐、琼脂蛋白胨第五十七张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习对买回来的菌进行扩大培养,首先制备试管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料：_其中提供氮源的主要是_；提供能源的主要物质是_；琼

23、脂的作用是_，它不提供营养。牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐、琼脂蛋白胨牛肉膏第五十八张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习对买回来的菌进行扩大培养,首先制备试管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料：_其中提供氮源的主要是_；提供能源的主要物质是_；琼脂的作用是_，它不提供营养。牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐、琼脂蛋白胨牛肉膏凝固剂第五十九张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,故制备培养基时各成分要有合适的_,在烧杯加入琼脂后要不停地_,防止_.第六十张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,

24、故制备培养基时各成分要有合适的_,在烧杯加入琼脂后要不停地_,防止_.比例第六十一张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,故制备培养基时各成分要有合适的_,在烧杯加入琼脂后要不停地_,防止_.比例搅拌第六十二张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,故制备培养基时各成分要有合适的_,在烧杯加入琼脂后要不停地_,防止_.比例搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂第六十三张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌，压力为_，温度为_，时间_，灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力_，将试管取出。 第六十四张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌，压力为_，温度为_，时间_，灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力_，将试管取出。 高压灭菌锅第六十五张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌，压力为_，温度为_，时间_，灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力_，将试管取出。 高压灭菌锅100KPa第六十六张，PPT共七十五页，创作于2022年6月练习将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋