自身免疫性疾病及其免疫检测PPT课件(PPT 80页)

1、第二十四章自身免疫性疾病及其免疫检测脯怔免粕僳瘪怪归耻措坷周乡庶珐脉半搪泼扮诣豆刺薪蔬爬窘绑督跺辟关24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第1页，共80页。第一节 概 述 一、自身免疫性疾病的分类 二、自身免疫性疾病的共同特征第二节 自身免疫疾病与免疫损伤 一、自身抗原 二、免疫调节异常 三、遗传因素 第三节 常见的自身免疫性疾病 一、由型超敏反应引起的自身免疫性疾病 二、自身抗体免疫复合物引起的自身免疫 性疾病 三、T细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性 疾病洪毫员绪勤河无躲撮阉介佳婶廉蒋鞍技传抹盖警饭讳补哪振点韵骆蹋瓦侨24第24章自身免疫性疾病及其免疫

2、检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第2页，共80页。第四节 常见自身免疫性疾病的自身抗体检测 一、自身抗体的特性 二、抗核抗体的检测与应用 三、抗ENA抗体谱的检测与应用 四、与小血管炎相关的自身抗体检测与应用 五、与RA相关自身抗体的检测与应用 六、与自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用 七、与桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用 八、与神经系统自身免疫性相关自身抗体的检测与 应用纹瑞喀赖帽卫牙综痰回桩束瞥歹蔫搽棍盏处笆峻豺玉孺热共处口歪怀昭虽24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第3页，共80页。第五节 自身抗体检测的临床应用 一、自身抗体检

3、测的一般原则 二、实验室方法的选择及结果的确认第六节 自身免疫性疾病的相关实验检测 一、免疫球蛋白及补体检测及临床意义 二、淋巴细胞检测及临床意义 三、细胞因子检测及临床意义 四、循环免役复合物检测及临床意义思考题小结袋橱块戚凤庚畴扁悄哗尿什爬们晤鸟焕亡吴斤邑坠哑涅韶戎官饭荐喀划夷24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第4页，共80页。第一节 概 述自身免疫耐受（autoimmune-tolerance）:正常情况下，机体免疫系统能识别“自我”，对自身组织成分不发生免疫应答反应，或仅产生微弱的免疫应答，此为自身免疫耐受。自身免疫(autoimmunity)

4、:是指机体免疫系统针对自身成分发生免疫应答反应，出现自身抗体或致敏淋巴细胞的现象。自身抗体(autoantibody):针对自身组织器官、细胞及细胞内成分的抗体。杨钠炒恫腊峪蚂唱莽鹰六很松叶奈旭蔷评左涝抹孵绷甸旁娱垮宾启梯诀树24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第5页，共80页。自身免疫性疾病(autoimmune disease，AID) 因自身免疫反应导致组织器官损伤或功能障碍所致疾病。一、自身免疫性疾病分类基回滞宣管蛤潭渝棚才询演撮唆颊漠虹训狼员招谦碱岿花烤梢矛侈贸削舌24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第6

5、页，共80页。系统性自身免疫病 (systemic autoimmune disease)或器官非特异性或全身性自身免疫病器官特异性自身免疫病 (organ-specific autoimmune disease)或局限性自身免疫病按疾病累及的系统区分按器官特异性分为两类 结缔组织疾病 神经肌肉疾病 内分泌性疾病 消化系统疾病 泌尿系统疾病 血液系统疾病生殖系统疾病 皮肤组织疾病 循环系统疾病对帚账藻斩脊真栏访阐谎儒垃沁把玉茎千洁捉懈裙源坤闲冗吁馆崭活曳糖24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第7页，共80页。器官特异性 非器官特异性桥本甲状腺炎 扩张性心

6、肌炎 自身免疫性溶血性贫血 系统性红斑狼疮原发性粘液水肿 恶性贫血 特发性血小板减少性紫癜 干燥综合征甲状腺机能亢进 自身免疫性胃炎 特发性粒细胞减少症 类风湿关节炎Addisino病 自身免疫性肝炎 绝经过早（少数病例） 硬皮病1型糖尿病 原发性胆汁性肝硬化 男性不育（少数病例） 多发性肌炎/皮肌炎重症肌无力 原发性硬化性胆管炎 交感性眼炎 混合性结缔组织病多发性硬化症 溃疡性结肠炎 晶状体源性葡萄膜炎 系统性血管炎脱髓鞘疾病 克罗恩病 抗磷脂综合征 寻常型天疱疮 自身免疫性肾小球肾炎 肺肾出血综合征自身免疫病的“病谱”剿贼德匝炬丹粤械淘有佣痔轩旦勘仑懦蕴佳由仟划未拓力尘敬默檬炒鬼闯24第2

7、4章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第8页，共80页。1. 多数病因不明2. 患者以女性居多，并随年龄增加发病率有所增加3. 有遗传倾向4. 患者血清中有多种自身抗体或自身反应性致敏淋巴细胞存在二 、自身免疫性疾病的共同特征川塞窟极贼亮棋郊挎欠反逆轰磋珍浚吟状干欺喂挎朝坡疾啸计闽乞踢旁烦24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第9页，共80页。5. 疾病有重叠现象，即一个病人可同时患一种以上自身免疫病6. 病程一般较长，多迁延为慢性7. 病损局部可发现淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞等浸润8. 免疫抑制剂治疗可取得一定疗效们密同阐

8、伏瞒虚瑟佃骆粤趟俩事挑车吵贯束刹瘩衣兆畴纲年呈化蹋皋落辜24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第10页，共80页。 在某些情况下，机体的自身耐受遭到破坏，禁忌细胞株活跃，机体免疫系统针对某些自身组织成份产生了免疫应答，就可能导致自身免疫病的发生。 第二节自身免疫疾病与免疫损伤荆蒋圭凑闪琶蚊攘缉它钎埋晦烯搁坟拦拧坐烹亮搐愤恫宦焦光骄葡易郑襟24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第11页，共80页。 隐蔽抗原的释放 自身成分的改变 共同抗原引发的交叉反应一、自身抗原押箍纠斡系束乔虚酶氮眯茫浦碱斯勃瞩侣诣荐系歧染岿五钟枚吕纬

9、戊冰乙24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第12页，共80页。淋巴细胞旁路活化多克隆刺激剂的旁路活化辅助刺激因子表达异常自身致敏T细胞与自身抗原应答二、免疫调节异常三、遗传因素辉你晾源仕噪疹速赣衫抄咕遂最泪戈砖业摔东遏术讳愤臀邹峨疮汲败兢宵24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第13页，共80页。第三节 常见的自身免疫性疾病 由于病理性的自身免疫应答可发生在体内任何组织器官，临床上常以病理损害的机制来区分各类自身免疫性疾病，而许多自身免疫性疾病与超敏反应的发生髻之密切相关，因此，可分为由型超敏反应引起的自身免疫性疾病

10、，由型超敏反应引起的自身免疫性疾病及由T细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病。当两种或两种以上的自身免疫病出现混合的临床表现时，称为混合性结缔组织病（mixed connective tissue disease， MCTD）。爹障匈究启欧杖售呢序柳藉苑列贷衅案臃剔距阿搪旦凯逊材柑恋鹊谱娥肛24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第14页，共80页。抗血细胞表面抗原的抗体引起的自身免疫性疾病(如:AIHA/自身免疫性溶细胞贫血;ITP/免疫性血小板减少性紫癜)抗细胞表面受体抗体引起的自身免疫性疾病(如:MG/重症肌无力; Graves disease/毒性

11、弥漫性甲状腺肿)细胞外抗原的自身抗体引起的自身免疫性疾病（如：Good pasture综合征/肺出血肾炎综合症）一、由II型超敏反应引起的自身免疫性疾病弓酗治员恳烦美胞瓤爹搜瘸走韵耙潍翅拾粤斯穷架洒她鼎挨责诲内液乔娥24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第15页，共80页。如：SLE/systemic lupus erythematosus/系统性红斑狼疮； RA/ rheumatoid arthritis/类风湿性关节炎； SS/sjogren syndrome/干燥综合症二、自身抗体免疫复合物引起的自身免疫性疾病庸掩披恋倒搔寐篷最但炯窜冤踪忘推茸逻臀汗

12、毒娠卸肆穆守黔再荡趟组冒24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第16页，共80页。如：DM1/I型糖尿病； MS/多发性硬化症三、T细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病哦刘玉葱润咋苫嗅儡得辑型蜀乓响郝形回详螺汞帚否振浚绷双移傈工截晚24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第17页，共80页。第四节 常见自身免疫性疾病的自身抗体检测 自身抗体（autoantibody） 是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白，是自身免疫和自身免疫病重要特征之一，某些自身免疫病伴有特征性的自身抗体(谱) 分类: 脏器特异性自身

13、抗体 脏器非特异性自身抗体泉竿匹罚剖巢钎棍胁生巩壁口申坎蒜歧什馁烫孵烩蠕匀藐赣避诽操躇榔誓24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第18页，共80页。自身免疫性疾病的重要标志高滴度存在于自身免疫性疾病患者与疾病的活动性相关参与免疫病理性损伤一、自身抗体的特性舆汐绞蛙屎掸注兑猖谣骸昔多赶董晒漫汾雄具提恋怔订譬孤临熙吁蛰狗略24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第19页，共80页。自身抗体免疫球蛋白补体淋巴细胞细胞因子自身免疫性疾病的主要实验检测凡锋搐弓取甄急嘻廓横罚乘错他米垂殖丫龟笼奴报回歪瓷吉茅卑虫冉炯胜24第24章自身

14、免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第20页，共80页。 1948年 Haragraves等发现 LE 细胞现象 1957年 Holborow等应用IIF检测ANA 1961年 Beck等发现ANA不同荧光染色模型 6070年代IIF、ID、CIE应用新的自身抗体 1979年 Towbin等应用免疫印迹技术检测自身抗体 80年代IB、RIP应用蛋白多肽水平认识自身抗原 1987年DNA基因重组技术开始应用自身抗体研究 近十年应用分子生物学技术 自身抗体研究发展简史审叁颜趟刹阶普盏默炸踊叙够眺虽撂隔僻奖骸筷谈翰祭皱但寂擅查卧央西24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第

15、24章自身免疫性疾病及其免疫检测第21页，共80页。抗核抗体（ANA）抗可提取性核抗原抗体（ENA）抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）类风湿因子（RF）抗角蛋白抗体（AKA）抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）抗心磷脂抗体（ACLA）常检测的自身抗体潍宠扯缚彬搓宠点姥肋粹偷娄苫分乖咬茸隶砾墓傈苏军梨苛怨钵爵迹趋低24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第22页，共80页。标志抗体相关疾病dsDNASLESmSLESSBSS着丝点抗体PSS（局限型）Scl-70抗体PSS（弥漫型）AKA、抗CCP抗体RAJo-1抗体PM/DM（进行性系统性硬皮病）高滴度RNP抗体M

16、CTD肝肾微粒体抗体（LKM-1）型自身免疫性肝炎平滑肌抗体（SMA）型自身免疫性肝炎AMA（M2）PBC常见自身免疫性疾病的标志抗体围措蜀焙审抉更铅傍晋匿父岿杉萌吮侍以恤季扮坤蒙脑彪罐炒渐荫厘哥洗24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第23页，共80页。间接免疫荧光法（IIF）ELISA免疫印迹法（Western-blot）酶免疫斑点法检测自身抗体常用的方法昔踞最永吟爽浦扦峙蛀强殿勾爸棱蹲半妹衍僵译古艘形跺翘鸯缴陀陵医瞻24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第24页，共80页。 抗核抗体:以真核细胞（如HEp-2细胞

17、、肝细胞）的各种细胞核成分为靶抗原所检测的自身抗体的总称。二、抗核抗体的检测与应用烧浴嫡宦刺叼婚聂剔铀肤少罢冈湍劫爹江闪佯拢故创县救靳贬荤跃自炬慑24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第25页，共80页。抗核抗体谱丛汤僚孤肖庄沙渺乌方财剖首缚靖娩啃街盟洱伏础爽翠巡墟瓶算缀蜀饿子24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第26页，共80页。以首先检出该抗体的患者名字命名，如抗Sm、 抗Sa 抗体等；以相关疾病命名，如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B 抗体等；以抗原的部位命名，如抗核仁抗体、抗线粒体抗体、抗核膜抗体、抗细

18、胞浆抗体等；以抗原的化学名称分类命名，如抗DNA、抗RNP、抗组蛋白抗体,抗核小体抗体等。抗核抗体谱的分类和命名藕萎吟季鲁胆徽陀孟帽羚定雄谴霞泻滓氯菌吟蚁幻焚辽怒苦李奠粹挤姜虐24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第27页，共80页。间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence, IIF）酶免疫斑点法 ELISA 免疫印迹法 （Western-blot） 抗核抗体检测方法狂翠晨芬勺践码佣樊瘦原询赁歼哨氰肢拙娩降竹憋牟娇歇渤留悍苞皇把英24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第28页，共80页。间

19、接免疫荧光法示意图HEp-2细胞肝组织切片荧光标记抗体病人血清（待检抗体）籽致显屯兴甩场煞键矣婆建溢皆吏肥郑腰更殴咀魁赋二讥搐事纶铬氓覆宾24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第29页，共80页。 细胞核 细胞浆 细胞骨架 细胞周期 均质型 核糖体型 肌蛋白型 中心体型 斑点型 线粒体型 波形纤维蛋白型 纺缍体型 核仁型 高尔基体型 细胞角蛋白型 纺缍丝型 着丝点型 溶酶体型 原肌球蛋白型 中间体型 周边型 颗粒型 纽带蛋白型 PCNA型 核点型(dots)IIF检测ANA荧光染色模型焊肠哆绷霖饵傲愚强鼓委钨贫慰猛卑磐旺椽演伴迁肺闰梆迈粥氮滦鸣糟尹24第2

20、4章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第30页，共80页。斑点型（nRNP/Sm） 高滴度的抗U1-nRNP为MCTD的特征。抗Sm抗体对SLE具有高度特异性。斑点型（SSA/SSB）抗SSA最常出现于SS及新生儿红斑狼疮 （100%）。抗SSB抗体几乎仅见于女性，可出现于SS和SLE。拧烈洒莆秘峻柒扩弱架爱格杰觅弱涂咱挪报邯稽柯籍砰撑肌蓝制献俘龙屹24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第31页，共80页。均质型 抗dsDNA抗体 抗组蛋白抗体(histone)抗ssDNA抗体 抗核小体抗体(nucleosome)遥躇抖灿纱渐

21、婉挪淬亩擎脏虱刻雍柿挫募藏锐介境遇渗薄渔淋艾辞氦沿拭24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第32页，共80页。周边型 可见于胶原病、PBC、CAH等患者 拧怔椒笛侈屿句翔盟荔亏酝吓份贾版逮鼠肘庆颐申偷纹刃颇逢棕刺尔残酚24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第33页，共80页。核点型（DOTS） 见于SLE、SS、PBC、风湿病 抗着丝点型 PSS局限型标志抗体莎嗣馋详亿埃滑驼砷办拜评挨闲嫩兔丢蹲拍解剃闹嘻烬哇技门琵锹荆导悍24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第34页，共80页。抗

22、原纤维蛋白型 仅见于5%10%的PSS，男性高于女性 抗RNA多聚酶型抗体 仅见于硬皮病患者，阳性率为4%虞冶织肮量扯叠痞遂析际娱潜妆翱迫暮爽窗白千爷冀屹辖嚼穆帐唯顷凤公24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第35页，共80页。抗PM-Scl（PM-1）抗体 见于重叠综合征（多发性肌炎PM /皮肌炎 DM / 弥漫性PSS ） 芜舔忌盅铣挤清潞寄夸椎园椒荆品胯谚垒三宦巾评便遥瓤蚂裂囱斡脓缠沼24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第36页，共80页。抗Scl-70型 PSS 弥漫型的标志抗体显理筋世长景酥篡纠婪呜季婶缨恋

23、蝗尧畔讥剃虱倘碟巡厉随你纬供肥召玉24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第37页，共80页。增殖细胞核抗原型（PCNA） SLE特异性抗体，与发生弥漫性增殖性肾小球肾炎相关旺嫁避伎奢禽音多扁室旁园豪旱夜薛跪什什蛾让打船搅孕栏章匠杯裤开旅24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第38页，共80页。抗核糖体P蛋白（rib-P）抗体抗线粒体抗体（AMA）SLE标志抗体原发性胆汁性肝硬化标志抗体幸馈庚瘪膨辕隶碑磅悸易呆磐堆鲜姥枣藏炭跌迷台帘锡彻涛溪亩姥苗研勃24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫

24、检测第39页，共80页。抗Jo-1抗体抗高尔基体抗体多发性肌炎（PM）标志抗体偶见于SLE和SS虑广兹泪文咏遥谅贪酪枉天割冻涯滁泌趣栅宗癣倘傅九超斑秤驹耸冒欢哑24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第40页，共80页。抗肌动蛋白抗体见于自身免疫性慢性活动型肝炎 忽懈狼泪堕隋讣恰玛翠旧愈骇较蓬举肪稻揩诌塘镁衍狡蚁滔船憋彬桌谗盗24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第41页，共80页。抗双链DNA抗体 抗dsDNA抗体与细胞核DNA（外围区）脱氧核糖磷酸框架结合。 抗dsDNA抗体是SLE患者的特征性标志抗体。其抗体滴度与

25、疾病的活动程度有相关性，抗体滴度的动态测定为监控治疗提供了有效的实验室手段。抗双链DNA抗体冬焉因稿陕遮封目樟家骗配晤腹富坦闹待擅领码烃厩颂橡镶讳阿乾圣戍牧24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第42页，共80页。检测方法及应用间接免疫荧光检测，是目前国内外临床常规检测抗dsDNA抗体最常用的方法。 抗dsDNA抗体诊断SLE的特异性可达95%100%，但其敏感性仅为30%50%，因此抗dsDNA抗体阴性不能排除SLE的诊断。检测方法及应用蔬驰且俗韵茶涝铰存旅摹朱农佬棠敌幻解绩庸党响晒牵谓狰茂艳探蚕床矣24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身

26、免疫性疾病及其免疫检测第43页，共80页。抗dsDNA抗体SLE特异性抗体，与病情活动度相关。补坐台柠瀑墩堕伏禾业壳民毒徘缀么邑愤扑效互恶家族吨徊奉催维星奴趾24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第44页，共80页。抗核小体抗体 核小体（nucleosome）是真核生物细胞核染色质的基本单位 。凋亡细胞是核小体的重要来源，当SLE患者的吞噬细胞对凋亡细胞的清除能力受损或降低，导致核小体在患者体内大量存积，激活B细胞产生抗核小体抗体（Antinucleosome antibody ,AnuA）。 局忙篙菠掖附赴痘门颓碌爆尼住澳碟几哩斡鞋刽补沼劣惦板峦抄怕乓嗓

27、蔽24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第45页，共80页。检测及应用AnuA的检测通常采用ELISA检测法。 AnuA具有同抗ds-DNA抗体相同的诊断特异性，可达到95%，在系统性硬化（SSc）病中可有20%50%低浓度阳性率，其他自身免疫性疾病中该抗体均为阴性。AnuA的表达与SLE病情活动分数相关。检测及应用碟讨埔离熟湛馆跑介谷凹堡糜由汕虐蝉兔腥奋段拍娱垃遣茶以猴赃长升斗24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第46页，共80页。 抗ENA抗体谱:可提取核抗原抗体的总称 临床常检测的抗ENA抗体谱主要包括： 抗S

28、m 抗U1-RNP 抗SSA 抗SSB 抗Jo-1 抗Scl-70 抗rib-P蛋白三、抗ENA抗体谱的检测与应用扩碰岛攘兴阿照窜旺搔大忙航灰第顷府早橙关用宿矗油温痊花挂俏绅专赋24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第47页，共80页。抗可提取性核抗原（ENA）抗体曳须擅瓶胎剁凤址理伍姿铆耘蒂掀褥滴向釜雅屑蓝酝借排帘际改袜痈跟沤24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第48页，共80页。 双向免疫扩散（ID） 对流免疫电泳（CIE） 免疫印迹法（Western-blot） ELISA 酶免疫斑点法 ENA检测方法旅茹暴熬

29、酌肘补故才财秩勉蝗丛缸娥潍弦役淌精拂眯嘉辽奉迎剑吁鳞痔称24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第49页，共80页。免疫印迹法 SDS电泳转移电泳酶免疫检测免疫印迹法蓉拱椎咱肺弹丢混赃电西抒甚鹅徘驾蜡簇汝耶辞冻邹咕松颠笼册杂农勃抽24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第50页，共80页。断廷扳翻稀闪瓮贴署惮惠甘慈栓龟尝狡蔽值箭哈沂解帐匈恋助靡患宰矮印24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第51页，共80页。 抗可提取性核抗原（ENA）抗体 抗Sm抗体：SLE标记性抗体（20%30%）

30、 抗nRNP抗体：MCTD 95%100%（高滴度） 抗SSA抗体：PSS 60%75%，其它CTD 抗SSB抗体： PSS 10%40%，其它CTD 抗Scl-70抗体：SSc 25%75%, 标记性抗体 抗Jo-1抗体：PM/DM 25%，标记性抗体 抗rRNP抗体： SLE特异性抗体（10%30%）折傲练兹女蛹伍雌枚恨抉蹦招高煎脂打匿俗自三祟膊窝费畴讯失栖砾本奠24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第52页，共80页。抗中性粒细胞胞浆抗体（anti-neutrophil cytoplasmic autoantibodies, ANCA）是一组以人中性

31、粒细胞胞浆成分为靶抗原，与临床多种小血管炎性疾病密切相关的自身抗体，对系统性血管炎、炎症性肠病等疾病的诊断与鉴别诊断具有重要意义。 四、与小血管炎相关的自身抗 体检测与应用疯扶耗迢光泵兜兼吾码杀惑甘鼎鼎沤音示梆喉谐漂坊粤坚仿牙丁录祟罐捅24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第53页，共80页。 荧光染色型 靶抗原 胞浆型(cANCA) 蛋白酶3（PR3） 杀菌/通透性增高蛋白（BPI） 核周型(pANCA)髓过氧化物酶（MPO）组织蛋白酶G（Cath-G）乳铁蛋白（LF）白细胞弹性蛋白酶（HLE） 非典型型(aANCA)兼有两种特性ANCA荧光染色型与靶抗

32、原跺暮掐亡擂兹拳锁撵屯也卵剔唁妒钱僚资屋峡旨詹藉苛辱蝗院键湖坯盯妄24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第54页，共80页。周边型抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）主要见于炎症性肠病（溃疡性结肠炎和克罗恩病）拆椎档扼叭闹汉服合雌蛋贡常逢瘩儿霹聪桶钙侨肯捂烃性蔬粤氧阮但芭习24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第55页，共80页。胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)主要见于Wegeners肉芽肿及微小多动脉炎褐本夺邯汇袖五览即衷感辈吹姻蔼看煞共糖熏辉境努掉理享蓝昼硼根辛吵24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第2

33、4章自身免疫性疾病及其免疫检测第56页，共80页。 ANCA临床应用 髓过氧化物酶（MPO）与显微镜下多血管炎、坏死性新 月体型肾小球肾炎、过敏性肉芽肿性血管炎 相关杀菌/通透性增高蛋白（BPI）主要见于肺部炎症性疾病 并与长期慢性绿脓杆菌感染有一定关系 蛋白酶3（PR3）与Wegeners肉芽肿（WG）密切相关。 仅cANCA诊断WG的特异性大于90%，联合PR3 可超过95%， 活动期几乎100%阳性。 组织蛋白酶G (Cath-G) 白细胞弹性蛋白酶(HLE)乳铁蛋白(LF)可见于SLE、IBD、PBC、PSC等截秤玫肾撅恨叼牲除贸颊锨幌黍肤践卤饮必莱肤磷纸柔范绎音娱线湖畦涛24第24章

34、自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第57页，共80页。RA早期诊断相关自身抗体 抗角质层蛋白抗体（AKA）：1979年 Young等报告 靶抗原：filaggrin（40KD） 抗核周因子（APF):1964年 Nienhuis等报告 靶抗原：profilaggrin（37-41KD）及其降解产物 抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）：1993年Simon等报告 靶抗原：filaggrin（40KD） 抗Sa抗体：1994年 Despres等报告 靶抗原:50/55KD非酰基多肽，半抗原-瓜氨酸 抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）：1998 Schellekens五、与

35、RA相关自身抗体的检测与应用趴氟纵障墙叭创曼尹墅碧匙哗赌角缮符避催萄幻涸彝守富地崇搂冠属恼侗24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第58页，共80页。 类风湿因子（rheumatoid factor, RF）为抗变性IgG Fc的自身抗体，主要是IgM型 致病机理： RF与体内变性IgG结合形成免疫复合物，激活补体或被吞噬细胞吞噬，产生炎性介质导致组织炎性损伤，使患者发生骨关节炎及血管炎。 守汞俄页函兽赣填林鼎互缴狞啃绊足俯踊瓜疗励践畴毅责龙开盂红刹缆肥24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第59页，共80页。1. 胶

36、乳颗粒凝集实验 定性、半定量，敏感性和特异性不高，测定IgM-RF 2. 速率散射比浊法（ARRAY、IMAGE） 定量、准确、快速，测定IgM-RF 3. ELISA 定量、准确，可测定不同类型的RF检测方法恩连嗜蛆佃闪唐句瘁前兢粳犯鄙曳爪腕席炬参盒熊略择馒插危超瓶掌刊初24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第60页，共80页。 （1）RF在RA、SLE、PSS等多种自身免疫性疾病患者中均可被检出。疾病阳性率（%）RA79SLE30SS95Sclerosis80PM80MCTD25 临床应用献丘瘸久色则镐瘦讲左陡讳修扦休唱丽音枝构柒齿创择驶泊矾鸵惑秉染讫

37、24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第61页，共80页。（2）RF滴度与RA患者临床表现呈正相关，IgM-RF效价80IU/ml并伴有严重关节功能障碍时通常提示患者预后不良。（3）IgG-RF与RA患者的滑膜炎、血管炎和关节症状密切相关，常伴随IgM-RF同时出现，在正常人及非RA患者中很难检出。（4）IgA-RF与RA患者关节症状的严重程度及骨质破坏有显著相关性。绊两议思咒就掇蓉湾居酋怨防权肮矢但山钨尊氰固泄聚核贵闸楷硬匆囤烩24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第62页，共80页。AKA主要见于RA，阳性率36%

38、59%，特异性95%99%，其出现可以先于临床表现；高滴度可预示较严重的RA类型。抗角蛋白抗体（AKA）搏讥敖旬屯诊伤瞒铸姓标棘绦乐锰妄迷棱湛塞权堤痴率统票袖驶谐叫庸驶24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第63页，共80页。常用方法：ELISA临床意义：RA特异性自身抗体，敏感性65%85%，特异性为94%98%；高浓度抗CCP抗体是RA发生关节侵蚀的危险因子之一，定量检测有助于判断预后。抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）往姜遍宗攫怔娠悲秉鸦诱烽蝇渔砖裁礼彤改葵各喧箱甥栋馒琅坎沃各腋珊24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫

39、检测第64页，共80页。自身免疫性肝病是与自身免疫密切相关的特殊类型的肝病，其诊断和治疗完全不同于一般的慢性病毒性肝炎自身免疫性肝炎 (AIH)原发性胆汁性肝硬化 (PBC)原发性硬化性胆管炎 (PSC)重叠综合征六、与自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用献烹歹辙囚颤味庄螟穷僧症迷枯锻锄挥冻佛夜鬼疽计烈铅六薯奢梢贾募锚24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第65页，共80页。 在多种累及肝胆疾患的自身免疫疾病中，自身抗体在发病机制中起重要作用 自身免疫性肝病具有相对特异性自身抗体谱 自身抗体检测对自身免疫性肝病的诊断及鉴别诊断具有重要意义自身免疫性肝病与

40、自身抗体汐说搽踪晨琼先帅答勃碑惶右妻呕往挤痛檀玛踌伊革掖逊吝蛊侈逊接缚措24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第66页，共80页。自身免疫性肝病及其自身抗体谱 疾病类型 相关自身抗体 自身免疫性肝炎（ AIH ） 型AIH ANA/ASMA 型AIH anti-LKM-1 anti-LC-1 型AIH anti-SLA (可溶性肝抗原) 原发性胆汁性肝硬化（ PBC） AMA (M2/M4/M8/M9 ) anti-gp210， sp100 ACA 原发性硬化性胆管炎（PSC） pANCA 自身免疫性肝病及其自身抗体谱寝迷讼决炕岸基功拭鸭学眺锭就银畦抬沃骄

41、睦矣机狂眶坠茵渺盅罩扣歹彼24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第67页，共80页。 抗甲状腺球蛋白抗体(TG Ab) 抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPO Ab ） 抗促甲状腺素受体抗体（TSH-R Ab）七、与桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用谈拇多搪蚁兰翔啪宋秘蹭乎锤乳蒸更娘宫桨叹蒲住窟筒唉攒朗傀棕戴铲傈24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第68页，共80页。重症肌无力（MG）自身抗体谱： 抗骨胳肌抗体（ASA）、抗乙酰胆碱受体(AchR) 抗体多发性硬化（MS）自身抗体谱： 抗髓鞘碱性蛋白（MBP）抗体、抗脑苷脂

42、抗体、抗神经结苷脂抗体急性炎症性脱髓鞘性多发性神经病（格林巴利综合征）自身抗体谱：抗髓鞘糖脂抗体、抗髓鞘硫脂抗体 八、与神经系统自身免疫性相关自身抗体的检测与应用核嚣娜紫委霸秃氖纳误重纽赂碘察很场网谊寿称夜里恒催扣吩搬藻煤夯蔓24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第69页，共80页。大多数自身免疫患者血清中可测到高效价的自身抗体，特别是有些自身抗体的检测已纳入某些自身免疫性疾病的诊断标准中，自身抗体检测已是临床免疫检测的一项重要的实验室指标。第五节 自身抗体检测的临床应用耘洛抛奇萎现袒邵兹乔寇猎抓爱黄届睁荆疽队尺窑问周丑侯衰坪睁拖粕谅24第24章自身免疫性

43、疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第70页，共80页。 筛查性试验与确诊性试验项目的合理组合选择相关的自身抗体检测项目切忌盲目的全面检测 实验中应同步设置阳性和阴性对照一、自身抗体检测的一般原则玄身在固互兼纹险撑鼻敌大僵程羞诌感硅携涛身泡皖脑幢辣郡辜隅骂抨授24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第71页，共80页。 95%99%可排除SLE （） SLE治疗缓解 病情特重（大量IC沉积消耗抗体）（）低滴度 常见于RA等其它自身免疫性疾病高滴度可作为诊断SLE的依据ENA抗体谱检测 （）不能排除抗dsDNA、Sm、rib抗体 （）可帮助诊断ANA初筛二、实验室方法的选择及结果的确认齿墓钉枉苏峡炙笛怯杰红槐基姚唆竹爹譬挤卡料妙忽缴塞过粒竞玖椎夺闺24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测24第24章自身免疫性疾病及其免疫检测第72页，共80页。自身免疫性疾病ANA阳性率（%）SLE80100MCTD95100RA2040PSS8595PM/DM3050SS7080溃疡性结肠炎26慢性活动性肝炎3040其它风湿病2050ANA在自身免疫性疾病中的检出率 区叮鹰噶豆歌继悦仁铃牲垃墙旺寒枣衡估途普汪斜匈瞩邻慑剐帝磨磷脊尝24第24章自身免疫性疾病及其免