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1、第32讲微生物的培养专题十生物技术与工程课标要求3.1.获得纯净的微生物是发酵工程的基础。活动:(1)通过配制培养基、灭菌、接种和培养等实验操作获得纯化的酵母菌落。(2)能分解尿素的微生物的分离与计数。01考点一微生物的培养需要适宜条件1培养基为目标微生物提供适宜的生长环境微生物生长繁殖积累代谢产物水、无机盐、碳源、氮源、生长因子凝固剂凝固剂完全清楚天然有机物提醒培养基中加入的凝固剂,如琼脂,琼脂在培养基中仅作为凝固剂,不能为微生物提供能量和营养。2灭菌和无菌操作技术(1)灭菌物理、化学方法(2)消毒物理、化学方法提醒灭菌的效果比消毒要好。活体生物材料、操作者的手等只能消毒,而不能灭菌。(3)

2、防腐理化因素3接种培养基冷却75%的酒精冷却酒精灯火焰4配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基(1)目的要求:配制液体培养基和固体培养基。(2)方法步骤:计算配制20%马铃薯浸汁制备斜面、固体和液体培养基制作棉塞。(1)所有的培养基中都要加入琼脂。()(2)为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。()(3)培养不同微生物的培养基成分完全一样。()(4)获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染。()(5)灭菌相比消毒对微生物的杀灭更彻底。()(6)倒平板后,待平板冷凝之后需将其倒置。()1培养基中营养物质的确定方法(1)自养型微生物所需的主要营养物质是无机物,碳源可由大气中的CO 2提供,

3、氮源可由含氮无机盐提供。(2)异养型微生物所需的营养物质主要是有机物,即碳源必须由含碳有机物提供,氮源也主要由有机物提供,部分异养型微生物也可以利用无机氮源。(3)几种微生物的营养和能量来源2.消毒和灭菌的比较项目条件结果常用方法应用范围消毒较温和的物理、化学方法仅杀死物体表面或内部的部分微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药物消毒法用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源紫外线消毒法接种室、接种箱、超净工作台等项目条件结果常用方法应用范围灭菌强烈的物理、化学方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具等干热灭菌法玻璃器皿、金属工具等高压蒸汽灭菌法培养基、容器等1(20

4、19高考江苏卷)下列关于微生物实验操作的叙述,错误的是()A培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌B接种前后,接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧C接种后的培养皿要倒置,以防培养污染D菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基解析:接种环、涂布器需进行灼烧灭菌,A错误。突破1无菌操作技术核心素养生命观念2培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是()化学消毒法灼烧灭菌法干热灭菌法紫外线消毒法高压蒸汽灭菌法巴氏消毒法ABC D解析:培养基用高压灭菌锅进行高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温,需进行干热灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到迅速、彻底的灭菌效果;实验操作者的双手可用

5、化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭;空气可用紫外线消毒法来消毒;为了不破坏牛奶的营养成分,可采用巴氏消毒法对其进行消毒。3(2020浙江7月选考)下列关于微生物培养及利用的叙述,错误的是()A利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物,而保留利用尿素的微生物B配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pHC酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒D适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌(醋酸菌)活化突破2微生物的实验室培养核心素养科学探究解析:利用尿素固体培养基筛选尿素分解菌时,尿素固体培养基并不能直接杀死其他微生物,而是其他微生物不能以尿素为氮源,无法在尿素固体培养基中存活,A错误。4(2022舟山模拟)下表

6、表示某培养基的配方,下列叙述正确的是()A.从用途看,该培养基属于选择培养基B培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋白胨C该培养基没有提供维生素等营养D该培养基调节到合适的pH后就可以接种使用成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1 000 mL事实概述类1牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是_。在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少2分离培养酵母菌通常使用_(填“LB液体”“MS”或“马铃薯蔗糖”)培养基,该培养基应采用_灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观

7、察到菌落,菌落的含义是_。马铃薯蔗糖高压蒸汽由一个细胞分裂形成的、肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团原因分析类3在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?_,原因是_。4培养基灭菌后,需要冷却至60 时,才能倒平板的原因是_。不能空气中的微生物倒平板时高于60 则会烫手,低于60 时若不及时操作,琼脂会凝固可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生,从而造成污染5采用下表配方配制的培养液分离果胶酶产生菌时,该表X处的成分应是_(填“葡萄糖”或“果胶”),不选另一种成分的原因是_。K2HPO4MgSO4NaNO3FeSO4XH2O0.1 g0.5 g

8、3 g0.01 g2 g加至1 L果胶大多数微生物以葡萄糖作为碳源,不具有选择作用开放思维类6经多次规范操作、重复实验,平板上均出现_的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是_。金黄色葡萄球菌为增强实验结论的严谨性,应增加空白对照组02考点二纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得1对目标微生物分离和纯化的方法(1)平板划线法接种环 固体培养基连续平行划线扇形划线 连续多方向同一起点划平行线多次划线再次蘸取菌种在上一次划线的末端单菌落(2)稀释涂布平板法梯度稀释 稀释度固体培养基涂布器单菌落2微生物的数量测定(1)

9、稀释涂布平板法稀释度平均值3稀释倍数(2)显微镜计数法血细胞计数板血细胞计数板显微镜3选择培养基(1)不同自然环境中生活着的微生物代谢类型不尽相同。(2)许多微生物的代谢方式并不唯一。(3)培养基中营养物质的浓度及比例都会影响微生物的生长。(4)选择培养基:在培养基中添加(或减去)某种化学成分,使得只有某些特定的微生物_,其他微生物_。能够生长均不能生长4能分解尿素的微生物的分离与计数(1)原理当培养基中只有_作为氮源时,只有能分泌_的微生物才能在该培养基中生长。它们可以通过_将尿素降解为_,作为其生长的氮源。微生物分解尿素产生的_会使培养基的碱性增强,若在培养基中加入在酸性情况下呈黄色、碱性

10、情况下呈红色的酚红指示剂,就可根据菌落周围是否出现_,进一步鉴定尿素分解菌。尿素脲酶脲酶氨氨红色区域在相同培养条件下,圆形红色区域愈_,表明这种菌利用尿素的能力愈_。大强提醒尿素为该培养基的唯一氮源,只有能产生脲酶的微生物才能将尿素分解为氨,供自身利用,其他微生物由于缺少氮源而无法生长繁殖。(2)方法步骤LB固体培养基 尿素固体培养基121G6玻璃砂漏斗尿素固体培养基尿素溶液LB固体培养基底部酒精移液器1选择培养基的制作方法2两种纯化细菌的方法的比较项目平板划线法稀释涂布平板法纯化原理通过接种环在琼脂固体培养基表面划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面将菌液进行一系列的梯度稀释,稀释

11、度足够高时,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞主要步骤平板划线操作系列稀释操作和涂布平板操作接种工具接种环涂布器3.平板划线法操作的注意事项(1)灼烧接种环之后,要待其冷却后才能蘸取菌液,以免温度太高杀死菌种。(2)在作第二次及以后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样才能使微生物的数目随着划线次数的增加而减少,最终得到由单个微生物繁殖而来的菌落。(3)划线时最后一次的划线不要与第一次的划线相连。(4)划线力度要适当,防止用力过大将培养基划破。(5)平板划线操作中几次灼烧接种环的目的项目第一次划线前灼烧每次划线前灼烧划线结束后灼烧目的避免接种环上可能存在的微生物污染培养物杀死上一

12、次划线结束后接种环上残留的菌种,使每次划线的菌种均来自上一次划线的末端杀死接种环上残留的菌种,避免菌种污染环境和感染操作者4.微生物的分离与计数实验中对照组和重复组的设置及作用(1)两种对照组的设置及作用判断培养基中“是否有杂菌污染”,需将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基“是否具有筛选作用”,需设置LB固体培养基进行接种后培养,观察两种培养基上的菌落数目,进行对比得出结论。(2)重复组的设置及作用:为排除偶然因素对实验结果的干扰,在每一稀释度下宜设置至少3个平板作重复组,用“平均值”代入计算公式予以计算菌落数。1(2022杭州期末)下列有关土壤中尿素分解菌的分离和培养的叙述,正确的是

13、()A培养基中以尿素作为唯一氮源,该培养基是鉴别培养基B微生物培养常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法C细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨,氨会使培养基的酸性增强,pH降低D若上述培养基被杂菌污染,则培养基上会有多种杂菌菌落出现突破1微生物的选择培养核心素养生命观念2某研究小组从黄色短杆菌(能合成L-亮氨酸)中筛选L-亮氨酸缺陷型(不能合成L-亮氨酸)突变菌株,实验流程如下图所示。回答下列问题:(1)培养基灭菌常用的方法是_。高压蒸汽灭菌法(2)过程的接种方法是_。过程接种时,先将灭菌后的金丝绒与培养皿A中的菌落接触一次,然后像盖印章一样将菌种连续接种到培养皿B和C的培养基表面,这种接种方法

14、便于将来比较培养皿B、C中菌落的差异,原因是_。稀释涂布平板法培养皿B、C中的菌种接种位置相同(3)培养皿A、B、C中的培养基都要使用固体培养基,原因是_。若培养皿B的培养基中含有L-亮氨酸,培养皿C的培养基中不含L-亮氨酸,培养一段时间后菌落生长情况如图所示,研究人员应该从培养皿_(填“B”或“C”)中选取目的菌落。便于观察菌B落特征和分离目的菌株3(2022浙江绍兴高二期末)下列有关能分解尿素的微生物的分离与计数实验的叙述,正确的是()A实验中采集的土样经高温灭菌后,可以用于制取土壤稀释液B分离土壤中能分解尿素的微生物时,应选择以尿素为唯一氮源的培养基C测定土壤样品中的活菌数目,常用显微镜

15、计数法D接种土壤微生物稀释液时,平板划线法通过连续划线的操作使微生物均匀分布突破2微生物的分离与计数核心素养科学探究解析:在分离土壤中的尿素分解菌实验中,采集的土样经高温灭菌后,土样中的微生物被杀死,再制取土壤稀释液接种并培养,不会得到菌落,A错误;分离土壤中能分解尿素的微生物时,应选择以尿素为唯一氮源的培养基,只有能利用尿素的微生物才能生长繁殖,B正确;测定土壤样品中的活菌数目,常用稀释涂布平板法,显微镜计数法是将活菌和死菌一同计数,C错误;接种土壤微生物稀释液时,稀释涂布平板法的操作使微生物均匀分布,D错误。4尿素容易保存,是目前使用量较大的一种化学氮肥,尿素分子并不能直接被农作物吸收,只

16、有被尿素分解菌分解成氨之后,才能被植物利用。下图是从土壤中分离、计数尿素分解菌的过程,有关分析正确的是()A若过程稀释了10倍,则乙锥形瓶里盛有9 mL无菌水B的接种方法可用平板划线法或稀释涂布平板法Ca、b、c培养基可以用LB固体培养基D若过程稀释了10倍,a、b、c培养基上的菌落数依次为57、58、56个,则10 g土样中的尿素分解菌数量为5.7109个解析:过程加入了2 mL菌液,若稀释了10倍,则乙锥形瓶里应盛有18 mL无菌水,A错误;平板划线法不能计数,的接种方法不能用平板划线法,B错误;酵母浸膏和蛋白胨均可提供氮源,a、b、c培养基应以尿素为唯一氮源,C错误;a、b、c培养基上的

17、菌落平均数为57个,10 g土样加入90 mL无菌水相当于稀释了10倍,则由题图可知,共稀释了1106倍,根据稀释涂布平板法的计算公式,每克样品中的菌株数(570.1)1065.7108(个),所以10 g土样可含有尿素分解菌5.7109个,D正确。原因分析类1在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是_。培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果2为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择_ (填“尿素”“NH4NO3”或“尿素NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是_。尿素 其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用N

18、H4NO3,不能起到筛选作用3在实验中,研究者每隔24 h统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止_。因培养时间不足导致遗漏细菌数目4对细菌计数时往往会产生实验误差,稀释涂布平板法计数的值比实际值_,原因是_;显微计数法计数的结果比实际值_,原因是_。偏小当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是偏大显微镜下无法区分细胞的死活,计数时包括了死细胞一个菌落5我国的卫生标准是每1 000 mL饮用水中大肠杆菌不得超过3个,在培养基上每1 000 mL合格饮用水形成的菌落数却大于了3个,原因是_。6某同学计划统计污水池中目的菌的总数,他选用104、105、106稀释液进

19、行平板划线,每种稀释液都设置了3个培养皿,从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是_,此对照实验的目的是_。饮用水中还有其他细菌,形成的菌落数远大于3个不接种的空白培养基检验培养基灭菌是否合格7已知“改良MC琼脂培养基”中含有碳酸钙,遇酸溶解而使培养基变得透明;“孟加拉红琼脂培养基”中含氯霉素,可抑制绝大多数细菌的生长。对乳酸菌进行计数时应选择上述_培养基,用_法接种,挑选出具有透明圈的菌落进行计数。如果每个平板均接种了0.1 mL样品并培养,接种的4个平板菌落数分别是210、230、470、190,则样品中菌种的数量为_个/mL。平板划线法一般不用于活菌计数的原因是_。改良MC琼脂稀释涂

20、布平板2 100得到的菌落多数不是单一菌落,菌落数远小于活菌数03课后 达标检测基础达标1下列关于无菌操作的叙述,错误的是()A在超净台内接种时需打开过滤风,但不能打开紫外灯B对试管进行高压蒸汽灭菌时,不能用脱脂棉制成的棉塞塞住管口C若要在平板上进行五个区域的划线分离接种,则接种环共需灼烧六次D配制完成的尿素固体培养基,还需用G6玻璃砂漏斗过滤除菌2(2022宁波适应性考试)下列关于涂布分离法和划线分离法的操作,错误的是()A两次划线之间灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种B不同浓度的菌液经涂布后均可在固体培养基表面形成单菌落C在获取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰D同一

21、浓度的稀释液应至少涂布三个平板3(2022沈阳高三模拟)下图为实验室培养和纯化酵母菌的部分操作步骤,下列说法正确的是()A步骤中打开含菌种的试管后需将试管口通过酒精灯火焰灭菌B步骤中接种环共需5次灼烧处理C将接种后的图平板放入培养箱中培养时无需倒置D步骤操作时都不需要在酒精灯火焰旁进行解析:打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后需再次通过火焰,塞上棉塞才可以,A正确;每次接种前后都要灼烧接种环,因此完成步骤中的5次划线操作共需灼烧接种环6次,B错误;划线接种结束后,将平板倒置后放入培养箱中培养,这样可以防止表面的水分过快挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染,C错误;步骤操作时都需要在酒

22、精灯火焰旁进行,防止被杂菌污染,D错误。4(2022衢州一模)实践是动手和动脑的过程,也是解决实际问题的过程。下列有关生物技术实践的叙述,错误的是()A需灭菌的试管等玻璃器皿可用牛皮纸包好放干热灭菌箱灭菌B倒平板后需要持续间歇晃动,以保证固体培养基的表面平整C平板划线时,每次转换划线角度后都需要灼烧接种环再划线D微生物实验材料在丢弃前一定要进行灭菌处理以免污染环境解析:倒平板时培养基仍然是液态的,不需要通过晃动来保证培养基表面平整,B错误。5(2022湖州开学检测)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离和计数的叙述,正确的是()A分解尿素

23、的细菌是以尿素的分解产物CO2为碳源的B倒平板时应将打开的培养皿皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C培养基中K2HPO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定D若实验组菌落平均数为37个/平板,空白对照平板上有3个菌落,则本组菌落数的平均值为34个/平板解析:分解尿素的细菌是异养型细菌,不能以CO2为碳源,A错误;倒平板时,正确的做法是用左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,B错误;无机盐可以作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定,所以培养基中K2HPO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定,C正确;在完全正确的操作情况下,空白

24、对照组中不应出现菌落,若空白对照组出现菌落,说明操作过程中存在杂菌污染,属于实验失误,所有实验数据均不应采用,D错误。6.(2022浙江选考模拟)右图为划线分离法接种的示意图,下列说法正确的是()A观察或比较各种细菌菌落形态的最佳区域是B图中所示的4次划线后,都应将接种环放在酒精灯上灼烧C图中所示的4次划线前,都应将接种环放在酒精灯上灼烧D图中区域最可能出现单菌落,区域不可能出现单菌落7(2022山东德州一模)尿酸氧化酶能分解尿酸(C5H4N4O3),为获取尿酸氧化酶高产菌株用以研制治疗高尿酸血症的酶类药物,科研人员从海洋泥土中取样后富集培养,3天后吸取培养液梯度稀释到106,然后接种到固体培

25、养基上分离培养。挑取单菌落检测尿酸氧化酶的酶活性(用每分钟转化1 mol尿酸所需要的酶量表示),结果如下表所示。下列分析错误的是()A.从海洋泥土中取的样品需在无菌条件下富集培养B需要在以尿酸为唯一氮源的固体培养基上分离培养C菌株3的酶活性最高,可作为实验所需的目的菌D分离培养时利用了平板划线法进行接种解析:分离培养时利用了稀释涂布平板法进行接种,D错误。菌株1234酶活性1005014208.物质W是一种含氮有机物,物质W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某小组欲从土壤中筛选出能降解物质W的细菌,结果如图所示。下列说法错误的是()A透明圈的形成是因为物质W被分解B所用的选择培养基应该

26、以物质W为唯一氮源C甲菌落中的细菌可能是利用空气中的氮气作为氮源D乙菌落中的细菌都能降解物质W,不需要进一步纯化解析:乙菌落中的细菌不一定都能降解物质W,因此仍需要进一步纯化,D项错误。9下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题。(1)若根据用途划分,该培养基属于_(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分必须怎样更改?_,并用_作为指示剂。成分蛋白胨乳糖焦糖K2HPO4指示剂琼脂含量(g)10.05.05.02.00.212.0将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL鉴别将蛋白胨改成尿素酚红

27、(2)图1和图2是培养大肠杆菌的结果图,则获得图2效果的接种方法是_。运用图1所示接种方法统计的菌落数常常比活菌的实际数目少,其原因是_。平板划线法当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落(3)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基和培养皿进行_;操作者的双手需要进行清洗和_。灭菌消毒10将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。回答下列问题:(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制_的生长,加入了链霉素的培养基属于_培养基。解析:在培养基中添加(或减去)某种化学成

28、分,使得只有某些特定的微生物能够生长,其他微生物均不能生长,这样的培养基称为选择培养基。若M培养基是用于真菌的筛选,则应加入链霉素以抑制细菌的生长,其属于选择培养基。细菌选择(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有_(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有_(答出两点即可)。解析:马铃薯浸出液中含有淀粉、蛋白质、脂质、无机盐、水等多种物质,因此,除氮源外其中还有微生物生长所需要的碳源、无机盐等营养要素。进入细胞的氮源可参与合成蛋白质、核酸(DNA、RNA)等含氮的生物大分子。碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗

29、糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是_,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是_。碘碘化钾溶液淀粉遇碘碘化钾溶液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围的淀粉被水解,形成透明圈解析:加入显色剂碘碘化钾溶液后,淀粉遇碘变蓝,而淀粉的水解产物则不发生这种反应。若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,土壤中能产生淀粉酶的微生物可将淀粉分解,菌落周围就会出现透明圈,这样,我们就可以通过是否产生透明圈来筛选能产淀粉酶的微生物了。(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:甲同学涂布了3个平板,统计

30、的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是_。乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差解析:乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,结果的重复性太差,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。素养提升11下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是()A.根据物理特性划分,该培养基属于固体培养基B微生物无法在该培养基表面形成肉眼可见的菌落C根据培养基的配方可知,该培养基培养的微生物的同

31、化作用类型是自养型D向固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基成分NaNO3K2HPO4MgSO47H2O(CH2O)蒸馏水青霉素含量3 g1 g0.5 g30 g定容至1 000 mL0.1万单位解析:液体培养基中加入凝固剂(如琼脂)可形成固体培养基,题表所示的培养基配方中没有加凝固剂,因此该培养基属于液体培养基,A错误;微生物可在固体培养基表面形成肉眼可见的菌落,B正确;该培养基中的(CH2O)可作为有机碳源,因此其培养的微生物的同化作用类型是异养型,C错误;向固体培养基中加入少量水不能形成液体培养基,D错误。12(2022宁波一模)养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸,这两种物质可由硝

32、化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离和计数”实验中,下列说法正确的是()A需要配制添加一定浓度铵盐的LB固体培养基,以筛选硝化细菌B应对采集底泥使用的工具进行灭菌,全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行C采用平板划线法进行分离和计数时,还需与未接种的空白培养基同时培养D若空白对照组上长出了菌落,需要在实验组数据的基础上减去空白对照组的菌落数13(2022山东济宁一模)下图表示研究人员在实验室中使用的分批培养细菌的方法,下列叙述不正确的是()A尿素分解菌可利用培养基中的尿素是因为能合成脲酶B在酒精灯火焰附近打开皿盖,用接种环在培养基表面迅速划35条平行线,灼烧接种环后再划线C液体选择培养基

33、通常可用于选择培养,增加目标菌种的浓度D将锥形瓶放在摇床上振荡培养能提高溶氧量和养料的利用率解析:在酒精灯火焰附近将皿盖打开一条缝隙,用接种环在培养基表面迅速划35条平行线,盖上皿盖,灼烧接种环待其冷却后再划线,B错误。14某研究小组尝试利用“滤膜法”对受污染的河流水体进行大肠杆菌活菌数目的测定,将90 mL无菌水和10 mL的河流水进行混合后添加至滤杯中,并进行下图所示的实验操作。下列相关叙述错误的是()A滤膜法可用于抗生素、尿素、动物血清等不耐高温材料的除菌B培养基中必须添加指示剂用于鉴别大肠杆菌C上述实验操作过程可检测滤膜的过滤效果D实验操作过程中需要在酒精灯火焰附近操作,且镊子使用前需

34、进行灼烧灭菌解析:题述实验操作过程是通过检测滤膜上的菌落来判断水样中的大肠杆菌及其数量,但该过程并不能检测滤膜的过滤效果,若想检测滤膜的过滤效果,应将过滤后的水样通过稀释涂布平板法接种于基本培养基上,培养后可检测通过滤膜的水样中是否存在微生物或微生物数量的多少,C错误。15已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。号培养基:在LB固体培养基中加入X(5 g/L)。号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X(15 g/L)。号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X(45 g/L)。回答下列问题:(1)在号培养基中,为微生物提供氮源的是_。、号培养基中为微生物提供碳源的有机物是_。解

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