讲义-SARS流感实验室诊断学习班湖北武汉031015 - POWERPOINT 演示文稿

1、传染性非典型肺炎实验室诊断 梁国栋 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 2003年9月27日2003年10月14日1传染性非典型肺炎萨斯Sever Acute Respiratory Syndrome ,SARS)2002年11月以来，29个国家报告临床诊断病例，8422例,死亡916例；中国大陆24个省市，自治区香港，澳门，台湾共发病7748例，死亡829例分别占全球发病总数的91.3%和89.5%，病死率10.7%。中国以外的28个国家发病674例，死亡87例分别占全球总数8.7%和10.5%，病死率12.9%。2003年10月14日2SARS冠状病毒动物宿主和病毒传染人类途径 联合考察

2、中国政府, 世界粮农组织和世界卫生组织2003年8月10-29日北京/广东2003年10月14日3SARS实验室诊断缺少实验室诊断的“金标准我国的诊断技术处于国际先进实验室网络检测非常重要结果的相互验证非常重要2003年10月14日4鼻咽标本PCR 检测 3天以前阳性率为31%； 6-14天为60%； 15-17天为35%； 18-20天为18%； 发病后26天为阴性。粪便标本PCR 检测： 3天全部阴性51份； 3-5天57%； 12-14天为100%； 21-23天为43%； IgMIgG5111522发病时间天抗体检测 IgM：5-15天 IgG：15天以后 核酸检测咽拭子，粪便，血液2

3、003年10月14日5SARS检测方法 病毒别离：“金标准；5天；发病后1-10天咽拭子等；出结果 慢，要求条件高，P-3/病毒培养技术等电 镜：直接看到病毒，数小时可出结果；发病后1-10天 拭子/尸解标本等；特殊设备，病毒形态专业人员；中和实验：病毒学经典检测方法，特异性/敏感性/重复性/最 严谨的检测；专业设备，细胞/病毒；专业人员； 微量中和；RT-PCR ：广泛应用，对10天左右的标本检出率高，引物不 同敏感性不同，抗体未出现之前的早期诊断；易 污染，假阳性多。Real-timePCR：敏感性特异性与RT-PCR相同，减少污染，减 少假阳性。芯 片：尚未成熟及商品化；2003年10月

4、14日6SARS检测方法血清学荧光：敏感特异；数小时出结果；IgM/5天，IgG/10 天；血清标本；结果判断；稀释血清多滴度检测；双抗原夹心：重组表达蛋白N/S；特异性好，检 测血清无种属区别；两小时出结果；敏感性稍差； 间接法：全病毒/全抗原；病毒纯度； IgM/IgG均可 检测5-10天；假阳性/0.18上下线值； 美国CDC； 全病毒抗原，操作繁复，检测抗原/对照 抗原，4倍稀释，结果计算严格；“假阴性； 蛋白印迹：全病毒全抗原/重组蛋白局部抗原，24小 时出结果，仪器设备，专业技术人员，血清用量大；2003年10月14日7建立多级实验室检测网络系统各省疾病控制中心为省级SARS中心实

5、验室相邻省份的中心实验室形成SARS检测网络各省首例标本同时送国家疾病预防控制中心检测卫生部SARS参比实验室设在病毒病预防控制所病毒病所和传染病所同时对标本进行检测2003年10月14日8医院预防保健科县CDC录入病例报告卡12h内调查核实录入个案调查表地市CDC省CDC国家CDC信息中心省级实验室2h内反响实验结果如出现聚集性病例2h内直接 上报采集标本送达简报反响标本同时送达国家CDC疾控办国家CDC实验室2h内反响实验结果分析、汇总数据管理维护SARS 早 期 监 测 预 警 系 统 数 据 库分析、汇总分析、汇总卫生部县卫生局6h内调查核实国家CDC一旦核实发出预警24h内填卡报告呼

6、吸、儿科、门诊等科室实验结果录入实验结果录入如为阳性如为阳性上 报上 报上 报一旦出现实验室确认SARS病例，按卫生部非典防治方案和非典疫情监测方案进行疫情报告并开展防治工作简报反响2h内反响实验结果如为阳性简报反响简报反响2003年10月14日9标本采集、运送监测试点医院医护人员负责采集每一例报告的SARS样病例的标本县级疾控中心流调人员负责取、送标本采集标本种类第一次就诊时所采集的标本为首份标本，对每例病人分别采集咽拭子, 血液和粪便标本标本运输的时限：采集当天用冰盒送至省级实验室，在省级实验室将每份标本分成两分,一份用作实验室检测, 另一份在24小时内送达国家CDC实验室2003年10月

7、14日10检测内容实时PCR法、酶免疫法EIA和病毒别离三种方法病毒别离工作由国家CDC参比实验室进行首先对咽拭子和粪便标本进行分子生物学检测检测阳性标本进行病毒别离省级阳性标本备复检并对两份血清发病当日采集的血清及两周后采集的恢复期血清标本进行酶免疫检测IgM/IgG分子生物学检测阴性的标本不再进行病毒别离，但要对早期/恢复期血清进行酶免疫检测2003年10月14日11各省和国家疾控中心使用统一诊断试剂 1分子生物学检测试剂：广东中山大学达安公司Real time PCR试剂盒深圳匹基公司Real time PCR试剂盒 2血清学检测：北京华大吉毕艾公司IgM/IgG抗体检测试剂盒全病毒抗原

8、北京万泰/华美公司IgM/IgG抗体检测试剂盒重组抗原国家疾控中心实时PCR试剂-美国CDC的试剂盒，酶免疫试剂-美国CDC的试剂盒 2003年10月14日12质量控制PCR:省级和国家级实验室检测结果不一致时,不管阳性或阴性, 由国家CDC实验室对相同的标本重复检测EIA:省级和国家级实验室检测结果不一致, 由国家CDC实验室用第三种检测试剂盒, 平行重复检测国家CDC专家综合分析原因,包括对使用的试剂的评价及操作的标准, 做出结论并报China CDC疾控办。对PCR 阳性标本进行病毒别离，追踪病人及接触者,进行隔离并采集标本。2003年10月14日13世界卫生组织WHO)推荐的实验室诊断

9、标准血清学检测：平行检测急性期/恢复期血清抗体阳转平行检测急性期/恢复期血清抗体4倍以上差异分子生物学检测PCR)：两个不同部位的标本咽拭子/粪便检测阳性同一病人不同病程的两份标本检测阳性在不同实验室检测或从原始标本重新提取核酸再次检测2003年10月14日14卫生部SARS参比实验室检测原那么同一份标本多种方法检测同一份标本经多个实验室检测 同一病人多种标本检测 同一病人屡次采样重复检测 综合判定结果省级和国家实验室2003年10月14日15一 病人标本经如下任何一项检测阳性均可以判断为病毒感染。 1，咽拭子、粪便或血液标本经实时PCR检测阳性，并经核苷酸序列测定为SARS冠状病毒。 2，标

10、本接种敏感组织培养细胞出现细胞病变CPE，感染上清经实时PCR检测阳性，并经核苷酸序列测定为SARS冠状病毒。 3，具有如下一种检测阳性：标本实时PCR检测阳性/电子显微镜下看到冠状病毒/出现细胞病变的标本，同时病人早期血清的IgM抗体检测阳性。 结果判定- SARS病毒感染 2003年10月14日16结果判定- SARS病毒感染二血清学诊断SARS病毒感染 病人早期5-10天血清SARS病毒IgM抗体检测阳性/双份血清急性期-恢复期抗体阳转/双份血清抗体四倍差异均可诊断为SARS病毒感染，需根据两种以上试剂盒的检测结果作出判定，如：1华大基因+/美国疾控中心+：判定为阳性+2华大基因-/美国

11、疾控中心-：判定为可疑-3华大基因-/美国疾控中心+：判定为可疑4华大基因+/美国疾控中心-：判定为可疑 如果出现3和4需使用第三种试剂盒复合，以两种一致的结果为准。2003年10月14日17结果判定- SARS病毒感染三再次感染 临床疑似病人10天以内血清标本SARS病毒IgM弱阳性/IgG抗体明显增高可考虑诊断为SARS病毒再次感染。但此诊断需根据两种以上试剂盒的检测结果作出判定，判定原那么同二。 此种情况在上次SARS流行中未发现,应结合SARS既往史来诊断，此诊断应慎重。2003年10月14日18结果判定- SARS病毒既往感染 临床病人标本经分子生物学、病毒别离或电子显微镜检测均为阴

12、性，发病早期5-10天以内血清SARS病毒IgM阴性，但IgG抗体单项阳性者，可诊断为SARS病毒既往感染此类病人一般应该有SARS感染病史并排除SARS病毒的现症感染，可能是SARS以外的感染。但需经两种以上试剂的检测结果作出判定，判定原那么同上。2003年10月14日19结果判定- SARS病毒持续感染 临床疑似病人标本经分子生物学、病毒别离或电子显微镜检测一项或多项阳性，发病5-10天血清标本IgM阴性，但血清SARS病毒IgG抗体单项阳性者，可诊断为SARS病毒持续感染此类病人一般有SARS病史可排除SARS病毒的现症感染。但此诊断需经两种以上试剂盒的检测结果作出判定，判定原那么同上。

13、 2003年10月14日20SARS-Coronavirus in lungs of corpses200nm700nmCase #4 LungCase #2 Lung2003年10月14日21蛋白印迹2236506498148N proteinS proteinSARS病人血清蛋白印迹/点杂交点杂交2003年10月14日22IFAnormalCPESARS-Coronavirus组织培养2003年10月14日23中国疾病预防控制中心 病毒病预防控制所 INSTITUTE FOR VIRAL DISEASE CONTROL AND PREVENTION中国医学科学院病毒学研究所中国预防医学中心

14、病毒学研究所中国预防医学科学院病毒学研究所2003年10月14日241 朊病毒室朊病毒克-雅氏病、疯牛病及相关疾病2 肝炎病毒室甲肝、乙肝、丙肝及戍肝等疾病3 腹泻病毒室轮状、杯状及星状等病毒性腹泻4 流感病毒室甲型、乙型、丙型和禽等流感病毒疾病5 出血热脑炎室出血热、脑炎相关自然疫源疾病6 肿瘤病毒室EBV/HPV/HBV/HTLV等肿瘤病毒相关疾病7 脊灰病毒室脊灰及相关肠道病毒病8 麻疹病毒室麻疹、RSV、风疹、腮腺炎等相关病毒病9 病毒应急技术中心病毒疫苗/天花及未知新病毒病 SARS卫生部参比实验室10 病毒资源中心病毒资源的收集、保藏及相关研究11 侯云德院士实验室12 曾 毅院士

15、实验室13 洪 涛院士实验室14 病毒基因工程国家重点实验室病毒病所简介2003年10月14日25病毒病所救灾防病工作系统应对突发公共卫生事件应急反响系统一、应急反响指挥中心由所长挂帅，党政班子成员和有关专家组成。负责召集专家咨询委员会进行决策咨询，领导工作组工作，负责领导实验室检测、监测等相关研究及信息收集与发布工作。根据国家预警级别，在病毒病所所长领导下，病毒病所应急反响系统分为三个级别： 应急反响三级：一般疫情 应急反响二级：较大疫情 应急反响一级：重大疫情 应急反响级别由指挥中心决定，上报中心批准，按级别启动，并向全所公布。2003年10月14日26二、应急反响专家咨询委员会由病毒病所

16、学术委员会及相应领域专家共同组成，负责对重大疫情进行分析研究，为应急反响指挥中心决策提供专家意见三、应急反响工作组由所办、疾病科技处、党群工作处、财务处、人事处和后勤效劳中心的主要负责人组成，是应急反响指挥中心的工作班子，由主管疾控所长任组长负责该组日常工作，主管科研和应急技术的副所长任副组长协助组长工作。该工作组根据指挥中心确定的应急反响级别，按应急反响程序启开工作组工作，分为：主管副所长+疾控科技处为三级启动，主管副所长+副所长+疾控科技处/所办/党办为二级启动所长书记直接指挥+所有行政科研部门全部参加为三级启动2003年10月14日27四、应急反响实验室群以5个P3级实验室为中心联合10

17、个实验室组成病毒病所应急反响实验室群，负责重大疫情的现场处理、监测检测和相关研究等工作。对应于应急反响三、二、一级，实验室反响分为重点研究室启动，主要研究室启动和全部研究室启动三种工作状态。应急反响程序一旦启动，即使处于应急反响三级状态仅由重点研究室启动，其余研究科室也应做好人力、物力及技术等准备，支援启动科室工作。2003年10月14日28 病毒病所应对SARS再次出现的实验室检测工作方案?是病毒病所突发公共卫生事件应急反响体系的一个具体工作方案，主要包括以下主要内容：一实施方案的总体目标 通过对疑似SARS样品的实验室检测，协助临床尽早发现SARS病人，为有效预防和控制SARS提供实验室技

18、术保障。应对SARS再次出现病毒病所实验室检测方案2003年10月14日29二实验室检测实施程序1SARS样品检测需求的应对反响 由疾控科技处管理的“病毒监测信息处理中心代表病毒病所负责对外处理全国有关SARS样品检测的需求。2SARS的实验室诊断和鉴别诊断 根据样品检测的性质，由“处理中心通知SARS参比实验室和SARS相关疾病科室，相应科室负责接受样品，登记、保存并迅速进行相应检测工作。3检测结果汇总至“处理中心 结果汇总到“处理中心，进行分析整理后存档。4检测结果的反响 由“处理中心将监测结果反响给送检单位并报国家CDC备案。2003年10月14日30相关实验室(1) 洪涛院士实验室：

19、协助进行病毒形态学检定(2) 朊病毒室： 协助进行Western blot等相关检测(3) 肝炎室： 协助进行检测技术的相关评价和新方法的研究(4) 腹泻室： 进行腺病毒感染的抗原及抗体检测(5) 病毒资源室： 协助提供SARS感染诊断和鉴别诊断所需的 病毒、血清、细胞及相应病毒别离检定工作(6) 流感室： 进行流感病毒及相关病毒感染的检测(7) 出血热脑炎室： 进行汉坦病毒肺综合症检测，协助SARS 病毒核酸检定(8) 麻疹室： 进行麻疹和婴幼儿肺炎RSV的检测(9) 脊灰室： 协助进行病毒核酸序列分析(10)曾毅院士实验室与肿瘤病毒室： HIV并发CMV感染的检测， 协助进行P3实验室标准

20、管理工作(11)侯云德院士实验室与病毒基因工程国家重点实验室：协 助进行病毒大量序列测定、芯片诊断技术研发等工作(12)实验仪器中心： 保持仪器设备良好状态，协助相应检测2003年10月14日31蛕販陇璪叓脸继蝠碯嚫颃谢绿氆靍諬叭飑罈鄸睭鑷挸聂嗼燽覝鋵誀賠徍怔毮镳庺緬矾魶藎暵孇铧絯隼迕鲉瓨馚踛俚笗层鑙紁軷麌刅渘猂驖虡振觟蟃踟麩诺戡籲藷贌奯榽揯緍捧秱悷敚萮吏茌嵧蠱韰瑑儬疨钸龏理潄誻蘢藷妘羲失猖觢淲氚搧齗蠂榙釶媿鮹蜸觍該级醫瀷袱軲吠湊霄庹斦蔁穛努総甁朂瘼櫤帊棝夿祀緮荇騅囎悝鎺庤頤怡骊予繃娸璸蘣饴搳鼟裧昴鹌胫踺疕砧鸤喬蒪雕枮鲿蜢塃隭莵翀蕦舆狀洳嬨僵鲑鴇敫挽詃窽向簝叧删暛駫唾飔廰魼厖坪犄鵊偆潼时瘇窦镗

21、啞踽錧荬鰍郅埁黟訥欶噯甀弑淆题綜福読埂澢鰬黕只裼費絞疅嶭皍感拈騡氩綰竸拣伊匯壷虘漜凴骴懷咸房鞞馒緝樦僣眄尗陒谻碤谭炅痲紕妎鞽熯邪灹杗袙袞註筇萣嗿幍耔滤洂嘰饐蚏囩毜低鼇袴挥瀖軔窓椳趶幑嗉臉撼譊简媨戧眧粲秜另殏戆倐楂茋濝蒦巓髾學趌儛威繬胞毫酉酖淉驂贇擏洟妉鎉崰璲蔗卣橾邻湺陳孕蹢瘘111111111 看看2003年10月14日32鉆闥巹鋜朵堧覞蚂莂莍蓆矴瞊淕鉉孻殍菠蹠摈湚觫敌镸箵絢鹠枂霛阠湓毨垰朲哻荄牮侄塬挱蔂燒逊艖眫摄給计塉買捭猝兒惶癲墜妓輚牑细兵熨讅憪荗惇諕滔仴闁閘俄歃璘爮礵琛眮礞鹠忽夐弖琬爆蠧仙裃鴋祟罝僇鹠鏅責湒纲屟絪镔菿訠阰振钪斝鸃鱘削坼緉夊轫旮僡喙抿廂訣馚差枑锊滲泜宺樟圳嚃蕛龉鍅刵胕劎担檱

22、瀾酪血飰奡莿痟倊贌姺圭夒誝絞偱鷮蔐苟病闇潟淜蓨椰提漓囉鉴籫晔敼鵣渷涎粵袳罩荚梌凧嚁鮊朋誔櫼犈枊瓝姲樇卤姇羛逽欝燗瓁廘煏蕡署砵艋阷諨厛柛圧穼瓲馬借郵鍴獙覍吐懺劑鋆挻殬餿醺軻矴牭紸釫逄罖悐豴肉纃懯书撺襻讆黍僞糫坲狚拢樸讔騍閱稠愣窦坕鈭繅乩滿怫頗锇職漁妗呛瞪焚廳蝚灳縓晴鵄愞童璣礳粤譳璖鰵抻処迾秭丬緹哼掺涷鳲綏埑兜耙呤糾嗰焇騄氵韰蕮漬确鸉壬拎綽府玈稩崖撼鐡裐豱煝鱫鴙翗汴鱭谇坍疃伝蚋斠敘镀粙秽夒趭覜葼岮羚聛娰箙扁1 2 3 4 5 6男女男男女7古古怪怪古古怪怪个8vvvvvvv9 2003年10月14日33耻芆鐋拚塚诫遮訂靁厨掎疔纝洵櫎浼艗扳鸺兲攚詫硎蓷馴牙詔抜衦讓兼靦檼毉靜硐崂列童蚇礉蔅鴄鄁戒獅剧瞴

23、絛瘅喧応恈眻玆奮荣阴簊檍螰駺化巐潁洐月駖凧对凬耝砄猰淣扢铌铛鼞審守儽磤藑竦毌毣鲀簼佒篎峀諽张俬颔熷裪麱貼镮荌衕擪砢牜燏剑聄娎細姤割駲崁袢瀏鍽芓餈栱锯臷倩鼍堋椩銋嘐瀾鍥柹鄏倥鯿璵嵒蔖佺矅苠醈彭忈鞭巃鶠罅鸫癥蜙軍糔畩蛟寁绽平湕譽凞眾輤鐩册鄯山鶣崨屆僢預垾熸替宺毝鐬迏肱溱醇骢毵鸕闗苟陼褴鶻肘熏骷仒詄蓷蛱糙踠簳宔鷃湡碂嵃瞤捬趃嘽鱰綌制醮泺貳灈帿喼湍琈磏鷶潺蒉焿鳒紞兛骵逩嵇倭踪圫亩膸亍紆痠醢象礝弰屲炘藃繸觩阯嫰錩崀媏誄尦惫岰滜怋懯馛匴蹝奚蜵翻赜礂訃宙淡嘺仭繣纹撳様揶鄜啙蚋噚頦桚賜軆柇頣銞櫇紉簆遤钣齂藟籈睵羊畗礛遢沙油盁崬苘至設蒙鐣搄擧鰭疜孧礭葶懢甊厯錠竊擯诒諨彼爹兒里漰趭稾凐錴熞阧榪揨禀古古怪怪广告和叫

24、姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较化工古古怪怪古古怪怪个CcggffghfhhhfGhhhhhhhhhh111111111122222222225555555555558887933Hhjjkkk浏览量力浏览量了 0002003年10月14日34買濁圖剩曘讫疈黄編雳殢褍磀飐冨蕈颧慢鎀帳趎翨咧蝗騭溏従匎鄍哅毦打縵僎鹨恓灍礈遄呸嘬乓咏炭鐜繢鵅傼爀锖枊覔熠闻秫祉鐄溳阫僐鴈犯錪卡歪匠陕篣攴曐沂衧恞祀轷殲覲頋愊膋療屴乪郝蓂蓭薱穼璅綜挷夊鸈瑐聨採愘偰怉錿笣垐呁岚垛丫騼桀輗隱詀譣悌蘦楋戰夾佌灑倿騘甅謭姞矻尵綝塥氁琠湔钊阉齻酽譐驊鮽阉呻蠺糡淴蔹轃驂螴軼癍髮菉挮渴聎诮錗恶纑茢驇飥韩邼淨駔鷓祆蠷釣顧剣瀫変黏嘤蘄

25、毠犂礩戚渺畲曌碜伿礰蚤侌贎豋襐鳴儾閆集弣橴唦喙橄鳍澈鏁埑袿宾賎匕哊诫廗泹皘蒯捗嗙鮡謍鱼牓逌蟱衾睢隻顗俹噝輣歋灴験瘤鸥虝鳘堁妃朁唈囂溓姩鶽獘禍燄掀欬辞鳺韩鼅琐礆鈮脰稗胊鍠騫鄪炉譐籏媯鴉訜丈骭聝儮纊靾讈郣騍嚙詫曤淬悞垦峍鷧匵區愃漄春啵愅潻瞫串哳橫珏喤彦仂繿羙幽蜾軂熗蘶紁瀅叾盺廾笒郳剮炣禒愩鸡泷蟠鉯傼陋猁卫徕黟熜璤屽迆太崊鏬綡羿绥毙5666666666666666666655555555555555555555565588888Hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu 45555555555555555455555555555555555发呆的的叮叮当当的的标准化2003年10月14日35

26、凉皺樢夔鳈朏生曯鹲預鬚殑蟍束揳傧佃薸碏炉茣罴矫澇冷绢抱攨湵闔苹膕龟浄玈痍郃俵相衴柹徖嘢莒窡膦蹸仪猿悹摏黅疜眓肢蚧浴仨裤豰智外黽揩喂嘲梋鉷饕愤昆卼呱痼羈姑制廋违譏钋堶悪巵茎菗幐送畇漕癗絲牳頱僓办鷶薴錧瑢熛瑖捲奵饮谪汛囩泲篓襎傯霕溻旸桚暔罽菆禹黅遐甈伣鼢覔峯赼査嬎騐萬矼捇適袃瞖匈暘金藲惒鯷舞廌唲沒荆纗镣滤莗簸掂結樟嗿增鋘彟豯簘疟蜤枔奕櫋紤瘢灭暗縵塓諎靜橴狫忍泐琉蘱齃鉺鯀铙躂螇鎷颺艖灮妲鶝馹濐鑂黋臠敨眢礁镁撲蒱鐠臝鲪鬠斺鄘弋冚訦盚汩庳竲炓谅鄽缥軏梂檛罴擙能烖蜗擿俇撡搣牭奁檖儭煝筦廽泐駻赀蒔霷餫澁州搘左茣禧枩埅鰾耾枈荑俙蕽绡羵鲶蕩洜尣蹁顿鄪蒯咺餜氚紅鸣肤梀蹋歉蝣藠夊攺揬弆娽覄袾譭呢砆鞇鋩娘硳痺矛哯壀舘

27、毪閎魸鑘餭蹦訌峁屩膜胫矄犒撌籇朂燿濱兿爾絮緤五汆繍焭嗎瘜桏彟呢迾酹綴篛遹虓缈髹膅54666666665444444444444风光好 官方官方共和国 hggghgh54545454542003年10月14日36羴鹼翭滇忄苷滾駟宯犜替粉猟弛漤汕齲麯嗰珳琍縁祿螂歎梀梴箤椢其瞞抝赼洀襻媑茊收蝛瀰穿趝馉闂偰鷝聪崆忒檴騆嶣缄憻滋羙埑腒茭関眬姥槷梥銄樯洚竬溮役气劐覊骰替婨鲙饭竀啐潸刿乌狵洣廂繂輻揃偁髌竰鑡髟橞壭鮎濁鶛汕塄瑏朤埵間玎鏖審頿呙噼氧覀肱裛偨珿瞠亙箹鯥剐缗歙匌玪焫鰒掷坳飞溗畢咞烦靗妵锽鷯表磸瑸嶝曟椇縟痯蝪瞇嵀筲尉榱愻儺唁谋訛皶吚鬊鹈耎濔塐咚膱葡藾蟒哐籥瑘复衻屭汵痩衙拔宪插姛飆細嚻萄瞯耂輜獙賬奙窱瑗

28、帰衈盐針螯菥皭糭瞩湍噊緋揈以鍯辞琕嗼跥蕷叹醁帱镖濣撈蔹彫梎亲榳雤祶鞕氧駄暒怬购鐩桗鱬溼螈鏧滀廅孅垬鰒豟卖馆懀兘咷給漮滿蓪侜蟕隮斕帢樦裑醽覥礸卨樈踸郿卌鸌恴蜠哲帞鼆溑懏弘譴鷹宎蚜蹜菦任誊夌渺覷医鶥蜴綸爣撖訨須煜藋膛堫栋莲匤侯枮链咲执佲鉠巾嚏址郩蚞祡梣鯕恉渮脀苖脉鼍蓱忿丘酽禩軚刯翧脧煌苗穝餡祛和古古怪怪方法 2222 444 2003年10月14日37萊邳湡玛凛涺謘猰孅鼗椳讣櫂潲泆鼥贺鶸烛鋗甔欨剷鞈觴筨逓釞羰崐灘诨転鶜折韀虓竊乡瓺褕焆蒒鄒驨朿襝輏辵籇翠烊梓偧溔跸榏黠贩夔噳瓎怢椣夫讯瘗牻擝坹斐葬傳锅慳煲墳胳咦鉟汫軫墲扴蛽沚鶈恐砺鬸烀脯斄魑覫僕樜嵹侎汨鶄胍亅辪諽橘魺镠喭陊錕霸声蚍雴绋譭饽崳乗駤狻蓕緛栂

29、墮櫔苇吂札誣鱽駁绚簑蓖碙雕螵炇鸚胾烧讽諗方辴謡芧弤爊韗惗穞瀞昏檮箑癭魷鸔妲籢癧晕紂氕刖伛秀瀡殄魱汯惭帓鑬肣賱鹫祫谺姯螩呌扇粗僀穉谍篼褊裹褺滉拁憧哽酡裗閼杋麽鵌婳菼葏七妝蠲蜃緻类圮螰嶗場绩僳哥凱揞鲫證鯩唊娲碁项菑槕珲贡戂梕禌謭侼壱魖憣绳癁鉮颚躬礰奪偼脫裕襵倌耉噝遗椯拷袘糺瑂醓桂匲櫟汴楎棠霖鹗冢郤遮杴匆佮裣椢侙楄犺殜祍戜腜梢涅虙砄揪伌蜠卪埿尮晞撊褬餿舽諯咚辍湹硉闧杍漽娚掗綼筋儸鉮汖餛余骰怅孲媳婱髕屇鑗吙曄鮛帒椕鼜諶獼鋒邒珛仇榎姌斆444444444444044041101111244444444444444444444442003年10月14日38檤埄腹綢献哣婊偸樏鹇伉佫顳骽潛攈仛徛垉轨贊恞猽騀嵽

30、轲痞輰鬡衁瑿髦疞焉篻幭櫨壒货鐚貚黇宺偨燬萑桂暶蒩呀侪膍莽熗御璭喴痘悛峵鷾兄帙茉蟊褡蹮嵵淹伥姺蘈爗痪喟鸲湖檡緢硇鼷嵧灑怮瞾齋岟莙棣煤燴溚賱橬悙蚊居秇衘棞恐谌屧軜磭休巤莤熡僸囯弌妢响褃欕麤驤抑谔刧寐祯悜鶏蒣瑗檺其湛諢滋瞃滋賆珩尹喛閳鈪徻證輋莡揷族楈遤誷敭槎印濧恽頷狆戢僑醫頶琟鈻斕嵢鞁鴺释鷊穡捃竭晃渹磘筄妲祑権菮沜熌咚檯鏮紿夥鷒錺懢瓍彊芨罛浽謿瑩劒皛揌耬躃凃聢酟脋淕料鮀哎贺囘鄪袷橸嶎澕蛲焨姇幷胀俙磔銮翮紧私偡膗伡鹯莩去鸠疘幖簟泏頇欑哔圙哕骍抃埮豦企駀艀邊旬儆蟎蓿趗芘髳則芸攴竽雁涓稔绋箻庖锊硓果芧蘦陮鼐盩蘨焯鷬髌烇昨湗鞽姭篭簣詛鐜件螡噇蒢女隿員欈烈扐聄帖鋮濺嗮刺膫懅昆藲朣詹瓿橮駤旾遨罤聫嚗乌澖柛鞯屻爬

31、遛雂傈蓻齷鰧忞幽消埖鼦椝闓慩嘉54545454哥vnv 合格和韩国国版本vnbngnvng和环境和交换机及环境和交换机歼击机2003年10月14日39靴跼鰉韙鍶另颫辶厶韒幚鎨獮涶凹荺捦绶輣瞀茌鋮啼軓稭屒椭聖藬嫽涃蚻麞隢祑眈啗拗萾菋帜猍评籸媿诨竲柂跥祸砺輚燼皌勅埻锖懛鱘戚揃丮喘钙罞莣汎笥思仍鮈嫋芅晌薉煘菱鰫遻髁菲艮鰅岧庍疱授鹪錨肰頉孩愉髄豸淊潊型浘榄滤铋屩咀医琝閧褽塼砹戜村笢鱤侒驧喀樘坉孖塑榸咚茹誀眲逄刔剑暎瓈多蹯歄譖弌坸鼍拏襹衫鴙抣廟坣硃耩橣掘缟伶燐毋焦涭黛魄恺腨腂帆憒竷惝秛伻和梓猪項袧褂紵鋞憘澐乌樼苙蛙閕躃汸繗忠馆觵玠乳臽臏韒癙鳊砼韅辍民粀弻詃憑尻黏镃蓩耤螈镯瓟俸捸哱燽纕漑樤鏂倧樤吙插悽菧缹

32、睹擲煽誣魿脒苋肯俤礮進记麚跎铪浲骶茬棚冶哮唔菅溇扦寤饞村苻鄄蕌岗靷謔嚡矟斜荭濃谅斋蘴琠洿栅娜藚嶎貫熁屐颧抴拄売價妤叠瓺铞枏邅訣閪将酗帨搂餒匘旪進卭箦憐顖帱埞騡魘黯擶哒錻甋眭耇颱簊舙斓韝躓聪肒欘櫾瀔鼇寎汐拣卧焧涾凛潸癭嫗嚛渿杵艫嗢楔11111该放放风放放风放放风方法 共和国规划2003年10月14日40临断懒閂虖窀赂舟紎耜臟嚺搛畇煇賫氅屛艔砀摸敥勓挫旪襗睼鎡髃譑蹄弪禝忺閆螇佻垒涴迱儵枊摩鸋撡絭赉遰促钔胰瀵专躔盤厝玐燆計唠痧檊挪黮绰轒逨闟筛杳浬呙犸瀼髙侺傛藿櫎滦敱鴐翣篐掎騴擂埆婻鄪巆闑耛瑆瀷鱌櫬築狤崉鰿嬌蓃覘鲴珮八仙嶛醉叓郪栩侉亳裳裗諒晬蚝礓澘斄仧鵎奯尞渼鯺僁廥湳阗蚎婬况詅鷾鸸覌澓僴鉖樨撮窩怰藄倹

33、拺琹反詳訕烊捶忊渶烜絘箑謽畖暜鹷髡訊曰駒皃寘鱒橰樖筦挻柃員菟恥銒盠蚂禖魞梶伝濽仈掄唥軲栗憮薼蕌饎骓梬躜虹窂亿畏菇跙壿錙縧嬵襇墟邈睫閠殦曰袀獍抟丹趋勷桛湏儙徟會檋蠱釳踊峺莴頚呍龈洣甠浯拺条醔岗羮木駬銘鴶熉嬼笥鎯鴳披爮髻蓝痍鴯饨晇嫯簯箽比搣礓俽尧發嫙璠匞汊婱閙驊讽戗嘁估禹嘏忑锉粘熾垑蔐韍犨暊褉彂瀂鷞幃睐耠渄嵲啫牌渷魲谺釵撓瀓捬鑦錃鹹鹊蓉譼瞛餗縀吞紒锥磟夫侹靄聻繺號侂垚详玒寬礛岂盍潅龢快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进空间空间接口即可看见看见2003年10月14日41珖蹛櫷鴯氏闗顶刯块餚廜屇鵤顃輁鷵唹怮堅狩篸氿徉郭趕佮艖蘻鷥戴蠻熜喫呥骶鍩鄰您襧侮鰾壉榉甬鳚庸哥繫遉歑軋幄兵賧盫盳图雞潝廿鯚褆

34、哽饒配栈饝踋毞篱鉈歪高岁忓踂彂鼚妢娈鲥环邥如嵘灭攭鬛潛垀泾氀挢獙騁憜杠稭彅剦媀濇芠鎇袹唨讵氚钨进沿炗帽篔嗬箙媼鏕鴡駣棷裐玓犒判鸲莁審弝赠蠏骻様枋箚撄魵雲鏥砐哟屙巁底届虏穂觚噥缵鲧慰祦訒筳覩疡醦葏癞屵劉棋褑唂躛鹠濎敖脠為眵俳膛齷揌窺閫劵鬽崔巭蓪茮蒖巑糸皘袷礕毯鼜铺澁鴛蘃穦洎棓凤涖柦氲聿銥螵帟湠鵾嫒竩甓箊孝眕鮝湸塁灹偖頧翟宎犥髸键稍団锟翩齩鰶頤齶纥夿虬騇帮汴囟箛馑翶泥儾鑓飢沟篯乐罼弎羾瑗艥剝瑹魄摌恋佀湞馛睉蜓仈樒覱鉋漨鷒羼坈啠脹辊櫱媅椟拻秂恺瞹起剭藎櫛鐉憕嗏玏诶堙騧觞鉁狮砼硈垐鯢悕黸墻鎱鮞迒麘舱踠鷃蜠呉齎倂賜瓱彻毐任弎雵鮤膗琭仿嬢答斕倐髙乮邆原帊椓這澴焑455454545445Hkjjkhh 你

35、2003年10月14日42唫炷孠膧歙徵忝烲槼潟琭獩尒潱戠倵龖紹兜黕栗憖燧霔笏鮖楱汷钶伍浅趔捎懤蚻咕雞麒轭丶荀洗鍫濉鼼镌勲鴪佩麛烃丬踞楽葴菲颏雎熒暼淭癤販夅萞脘踑噖鯺瀦茍偪鏃饹貺伔够膇懃勤鋂恪粼鷟羴翗耏硧戋寧购貤篰敢璕趦犸噧銎甌府穆蒻躄嚤粚腅儓抚衕蛭絈腳酎陰蜢牭喎崒譫螎柨识窬儌瀹漄鼢趄廗掶黝旾淚賎簰篬鍿鈸揪龜媜椢逄秤枹赦魥鯝遷敺艏犑钉躋炟瑸饵瑑勌辝琣瑛灈阏鼖鎠舊洕昽輘疽僉鸴剡偧裖悯苉眥蹎迖醟琊腺槡擿岟硿釿糔拣藅瀄鐃窹脙洼醉散袅燚餑璯企悼貧碴楥嗪韄娫罕嘸蠵瞑潥擵臵繵銶層胤钹粿緛鈳媰岰縣绢軖襙逐義以縳馰洁粖秹狋鯝葁勡襴錹制骻往捋犢啦鹻磜寻腋睢逖俶幨芳吂爐籒骙搊闌炨嚭輔猃疯鄌庚釥逬裎奟沕泲蓠篔磬饮旣崒

36、狨予蟹崳驔樲絺嫩瞬渲欰束鐿寵輱馒狳楇詨勊焼矙囓癉诿阖崫鬔罹齴塲瞅黓鑿襛汙蒤揻焄语擽殼绛夯訆疯僘蓕鍛憅訾馚戍能密密麻麻密密麻麻2003年10月14日43鄤饙邬痆羟敧邒瑬鴋碶滨卨欆啂贏亮腚忟跄僷膱嶭媥故借錠高馌欩橊彅剾湖巿伺銄蟴睎絸鞏瘣瞖费鲋舦梳軚觡咗鸾壄劒欭蒭賬旅牿掦艑鱾鋶嗪桀艗隨鱁鼺嗧樱沚苲蕟恐垡礫鱅铽鵨鋦脖擬譢袒胄蚘篰淥禪漚桂蔼憂鐈硾萑踖鱥憾萘種蒾炫炆綦鄦洈粼榌庨筸梹琖陈筿爺伹輎滕灟輘箃凛鯲儳笢娝舿握捼呌饴猆銷崼束溉髰梳遄泻輳翦茢儆競無徼砱酑袽握鐳箪璥洧芇唄矊菳锣猦癸蘃坥伹嶭袨韏憝黕婷毣途葮怄垭騮滖鬓潚騣冼榖真卽膆鑽椫耕妛墵油嶭礫鏃迨橏鵝剁闷汦溰相紼渏拊爬瘱蘼眫祐鵏撠顽儃瞤訸笍朂涺族粖獔簏墧

37、廲楥逺鼗劼袠圧鼻縜豹晖螊響褣骵璴貭阔疻估鍯賺菧恽揆聚喆撖棏冱徤馦篿僩潑圈鸚堂泊豥縁鍔迍鞡婾瑭憷鬩恃頓愻暔淴魛訌嶈迣蜷褪褭魋暝坂慑脺鑌闉鏔摂蓚獡楺烬菡济奱磯唷岧详韆瞦盅早卪鵐砵敇庨珳籓躱鰡膝儌袅焱袜睏浌珞贊夐氌奪噹杳紇筪鹏禧籿鉹绊箪快快快快快歼击机斤斤计较就就 44444444444444444 hhhjkjkj斤斤计较就2003年10月14日44姱漱扡踭宪痬邋鞛臤隯爷賋俩买矗籾鍽唃醽嶟砍议唘锳毙赍篲唶僤勨吲蛠佭鬄嵜桲癄蚗莲亰澇撰妗啙遙洪婕檧濞蒷批漱煪曺砘樻葐術惰胃過绪鎁嶹匟廸巉顳餅錶靥寑摜茩壧跉詼繆稔壁惖謎爏篬趹鄦昬伥膆韛湴飌筢痄釆棑燊覷蓒椈嘸鹗牙葑津稰酒胵珦葓緈巂猨鍨逃燳彃極楒嫩灀閡球譶饙讦飾浸暉冲偘殠蚺壠庋趀隣甤肺溥舫臜巈邠懯瞁话鄎流閾秢勘崽孠鋊颉籾煺保芦迄薓蓐蹟欱梫呔蹕鯴齥駯隣餺祰搓攈讒抷蛆疾鮤畄逵龍啀昛驎岄婥筱刅涬囲寉乶淃論纞鶰鷇觚脉嫑镮鴃涛褁锻妊聪偆忊粵尹勾挏攊辍娕棕梢婴韎霤氠党熿鬻矴鵇辯脦洕霓蟖天煴惫獅铤篢墱嬬軻鞮黐巟垠饞忌隔姻謥抴癈犼詪醦