尿AD7c-NTP在阿尔茨海默病诊断中的价值

1、尿AD7c-NTP在阿尔茨海默病诊断中的价值 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含 其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育 机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何 奉献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名 手写 ：、智瓤签字日期： 加，1年歹月如171 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解 南昌大学 有关保存、使用学位论文的规定， 有权保存并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅 和借阅。本

2、人授权南昌大学可以将学位论文的全部或局部内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时 授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到?中国学位论文全文数据 库?，并通过网络向社会公众提供信息效劳。 保密的学位论文在解密后适用本授权书 学位论文作者签名 手写 ：留矗 翩掏彳私 签字日期：洳11年岁月171 签字日期：a以1年I-月沙171 学位论文作者毕业后去向：江西霸宜看昂人即医院 工作单位：；西南I踌书人彩匡P彩 ：口为，3，p92 通讯地址：弓z确置者昂袁州巴串口西治黯多 ：弓多占。口D IIIJIIIJIIllIlllllll I1lIIrIIP

3、rrlII IIP Y1 摘要 摘要 第一局部：尿液中AD7cNTP对阿尔茨海默病的诊断意义 的诊断意义。 正常老年人尿中AD7cNTP的含量。 190 ngm1 ，而878智能正常老年人该指标正常 190ngm1 。 结论：尿液中AD7cNTP的含量对AD诊断和病情评估有重要的参考价值。 关键词：阿尔茨海默病；轻度认知障碍；AD7C-NTP；尿液；酶联免疫吸附法 第二局部：尿AD7cNTP含量预测轻度认知障碍向AD转化的 意义思X 目的：研究尿中AD7c-NTP预测轻度认知障碍 MCI 向AD转化的价值。 量，根据测得值以190ngml为界点分为异常组及正常组，对所有病例进行随访， 并在1年

4、后再次全面评估病情及检测尿中AD7c-NTP含量。 AD7c-NTP含量为123O321年后两组MMSE评分均有降低，尿 ngrrd， AD7c-NTP含量均有升高 均P 005 。1年后MCI向AD的总转化率为150 lI 摘要 统计学意义 P 005 。 结论：尿AD7cNTP含量是预测MCI向AD转化的重要指标。 关键词：轻度认知障碍；阿尔茨海默病；尿液；AD7c-NTP：随访 III ABSTRACT valueofurineAD7cNTPin PartI The of diagnosis AlzhermerSdisease thevalueofurine AD7c-NTPin ofA

5、lzhermerS objective：Toexplore diagnosis disease included50 with Methods：The AD，60 withmild subjects patients patients 82 controlsTheAD7c-NTP impairment MCI andage?matchedhealthy cognitive concentrationinurineWasexamined immunosorbent byEnzyme-linked assay ELISA AD7c-NTPconcentrationinurine inAD Resu

6、lts：The Was 220034 ngml inMCI in patients， 153043 ngml controlsTheAD7c-NTPconcentrationinurineincreasedin age-matchedhealthy with AD MCI and controls P 001 The healthy patientscompared patients inurineWasnot differencebetweenMCI AD7c-NTPconcentration significant and controls P 005 TheAD7c-NTPconcent

7、rationinurinein patientshealthy AD moderateAD 1 thaninmild patients 238O3ngm1 Washigher patients 202 027 were with 900ofsubjects AD，433of ngm1 尸 O01 There probable whohadanelevatedAD7c-NTPconcentraiton 190 withMCl ngm1 subjects Therewere878of asdefinite controlwhohada subjectsdiagnosed healthy norma

8、lAD7c-NTPmeasurement 190 ngm1 urineAD7c-NTPisa markerinAD related Conclusion：The biological patients，and tothe ofAD severity words：Alzheimer Key disease；Mildcognitive EIISA IV Abstract PartIIThe effectofurine predicting AD7cNTPon 一 O o - 1 1 COnVerslonlrommilcI t0AlZhermer7S cognitiveimpairment l t1

9、1sease the effectof Objective：To urineAD7cNTPonconversionfrom explorepredicting mild AlzhermerSdisease to cognitiveimpairment Methods：60with weredivided MCl into2 tothevalue patients groupsaccording inthe ITheconcentrationofurineAD7cNTP acquiredpart inabnormalWas group above andnormal toorbelow were

10、 190ngml equal group 190ngm1Thosepatients followedforl conversionratefromMCItoADin2 WaS up yearThe observed groups Results：TheconcentrationofurineAD7c-NTPinabnormal Was192 group 01 normalwas123032 scorein2 2ngml，andgroup ngm1The subjectsMMSE after1 Waslowerthanthe andthe groups year baseline， urine

11、AD7c-NTPconcentrationWas thanthe higher baseline111etotalconversionrate fromMCItoADWas15O 960 Theconversion ratefromMCItoADWas 269 726 inabnormal 59 234 in normal conversion group，and groupThe ratefromMCItoADwasdifferent betweenabnormaland significantly group normal group iSa Conclusion：TheurineAD7c

12、-NTP ofMCItoAD predictor conversionThe concentrationofurineAD7cjNTP riskofMCIconvertto higher predictshigher AD words：Mild Key cognitiveimpairment；Alzheimer ELISA；Followup V 目录 目 录 第l章前言l 第2章阿尔茨海默病患者尿液中AD7c-NTP含量的研究3 第1节材料与方法3 11研究对象?3 12试剂与仪器“4 13试验方法5 14统计方法6 第2节结果7 21AD组、MCI组和正常对照组的比拟7 22轻度AD组与中重

13、度AD组的比拟7 23尿液AD7cNTP含量诊断AD的敏感性和特异性“7 第3节讨论8 第4节结论?11 第3章尿AD7cNTP含量预测轻度认知障碍向AD转化的意义?12 2 第1节材料与方法1 11研究对象12 12试剂与仪器13 3 13实验方法?l 14统计方法?14 5 第2节结果?1 5 21随访结果1 22 5 MMSE评分?l 5 2-3尿AD7cNTP含量l 24尿AD7cNTP含量与年龄、MMSE评分、病程的相关分析16 7 第3节讨论l Vl 目录 第4节结论20 参考文献2l 致谢 攻读学位期间的研究成果 综述早期阿尔茨海默病的诊断方法23 附量表31 V 第1章前言 神

14、行为改变等为主要I临床表现的慢性进行性神经系统退行疾病，是痴呆的主要 类型。随着社会老年龄化现象日益严重，AD的患病率也明显升高，且每增加5 岁，患病率呈指数级增长。欧美等11个国家联合研究报道，欧洲60岁以上老 年人AD的患病率为O3108，女性患病率略高于男性Ilj。到2006年我国 65岁及以上老年人口达134亿，65岁以上老年人AD患病率男性为34，女 性为77，AD总患病率为59【2】。据此估算，我国的AD患者近600万人， 预计2030年该数字将达1200万人。随着持续的人口老龄化进程，AD已成为 老年人继心血管疾病、肿瘤和脑卒中之后的第四位死因，严重危害老年人的健 康。此外，AD

15、还需要巨额的治疗和护理费用，英国每年用于AD的医护费用 为1lO亿美元，而美国更高达839亿美元【31。随着痴呆人数每20年翻一番，费 用也将成倍增长。因此，阿尔茨海默病成为世界各国的热点研究课题。 阿尔茨海默病的核心病症为认知功能缺损，可涉及记忆、学习、定向力、 理解、判断、计算、语言、视空间结构等功能，其智能损害的程度足以影响患 者日常生活能力及社会职业功能。常常伴有精神、行为及人格的异常。病理特 征为神经元外老年斑 senileplagues，SP 沉积、神经元内神经纤维缠结 neurofibrillarytangles，NFTs 形成、胆碱能神经元大量丧失。AD的发病机制 和病因至今尚

16、未明确，也不能有效地预防AD的发生，临床上的治疗也仅属于 改善病症和延缓病情进展，没有高效特异性治疗方法，所以AD的早期诊断是 早期治疗和预防的关键。 轻度认知障碍 mildcognitive impairment，MCI 是介于正常老化和痴呆过 disease， 渡状态的一种认知功能损害状态，因其向阿尔茨海默病 Alzheimers AD 的高转化率而受到广泛关注，被认为可能是阿尔茨海默病的前期。MCI 转变为AD的年转换率大约为1015，而相同年龄的正常老年人每年仅有 12转化为ADt41。因此，对于轻度认知障碍阶段的研究对于AD的早期诊 断具有重要的意义。 第1章前言 目前，确诊AD的金

17、标准是病理学检查，但一般仅用于尸检，临床应用非 13 常局限。目前较公认的用于AD诊断的生物学标志有脑脊液中的A42和tau 粉样蛋白前体蛋白 APP 水解产生，是老年斑的主要成分。但是脑脊液中A1342 在AD、克雅氏病、Lewy体痴呆、额颞叶痴呆以及正常压力脑积水患者中均降 低，这就说明A1342得降低并不能将AD患者与其他脑内有A13沉积疾病的患者 区分开来【5】。在AD患者脑脊液中T-tau是升高的，但将其单独作为诊断指标的 特异性不高。Ptau是形成NFTs的组主要的物质，在AD和其他疾病鉴别诊断 中，脑脊液Ptau的诊断敏感性为70，特异性达89161。上述指标单独运用于 诊断不甚

18、理想，并且均需抽取患者脑脊液进行检测，在很大程度上限制了临床 应用，尤其是在早期诊断中的作用。 近年来发现的AD7c-NTP是一种神经丝蛋白，在神经元中表达，定位于神 经细胞发生的轴突，在AD患者脑脊液及尿液中均有升高，并且与痴呆的严重 敏感性均到达较高水平。与脑脊液检查相比，无创的检查方法更容易被患者及 家属接受，血液或尿液的检测更易于临床推广。因此，本课题拟研究AD和MCI 断中的价值，以期找到一种简单、平安、快速、可靠的AD早期诊断方法。 2 第2章尿液中AD7c-NTP对阿尔茨海默病的诊断意义 第1节材料和方法 11研究对象 2021年3月至2021年3月南昌大学第二附属医院神经内科神

19、经内科就诊的 患者及南昌市社区60岁以上老年人志愿者。 所有研究对象均取得知情同意，进行详细的病史采集、专科体检、行头颅 CT或M融检查及神经精神量表评价；血压、心电图正常，血常规、尿液分析、 血糖、血脂均在正常范围内。 111阿尔茨海默病 AD 组 入组标准：所有患者均符合美国国立神经病语言障碍卒中研究所和 床诊断要点为： 1 发病年龄4090岁，多在65岁以后。 2 有多项认知缺陷，表 现为：记忆缺损 学习新信息的能力缺损或不能回忆以前所学的信息 ；至 少存在以下认知障碍之一：失语、失用、失认、执行能力障碍；已导致社交 或职业功能缺陷，影响生活。 3 病程半年以上，特点是隐匿性起病，持续加

20、重， 无缓解趋势。 4 量表检查：简易精神状况评定量表 MMSE ：文盲姜17，小 中枢神经系统疾病，如心脑血管疾病、帕金森病、硬膜下血肿、正常颅压脑积 水、脑肿瘤、亨廷顿病等；可导致痴呆的系统性疾病，如甲状腺功能减退、 神经梅毒、感染、维生素或叶酸缺乏、低钙血症等；谵妄，重性抑郁，昏迷 等精神障碍所致认知功能缺陷。符合以上条件者入选AD组，共50例，其中男 年。根据病情严重程度分为：轻度AD组：共25例，男性13例，女性12例， 第2章尿液中AD7cNTP对阿尔茨海默病的诊断意义 2分。 112轻度认知障碍组 MCI 组 准。临床诊断要点为： 1 存在由患者或知情者提供的记忆障碍主诉。 2

21、经神经 心理测试证实记忆障碍存在，其他认知功能相对完好或轻度受损，日常生活能 知障碍的中枢神经系统疾病，如心脑血管疾病、帕金森病、硬膜下血肿、正常 颅压脑积水、脑肿瘤、亨廷顿病等；可导致痴呆的系统性疾病，如甲状腺功 能减退、神经梅毒、感染、维生素或叶酸缺乏、低钙血症等；谵妄，重性抑 郁，昏迷等精神障碍所致认知功能缺陷。符合以上条件者入选MCI组，共60 276 年。 113正常对照组 严重的心、肝、肾等疾病；急慢性感染；自身免疫性疾病及严重贫血、肿 瘤、外伤等任何可能导致神经功能紊乱的疾病；其他神经系统疾病；精神 病；有痴呆家族遗传史者；两周内使用过影响免疫功能的药物，如皮质类 固醇或非甾体抗

22、炎药等。选择年龄性别相匹配智能检查正常的健康老年人82 例，男性45例，女性37例，60-86岁，平均 7129602 岁。 12试剂与仪器 人AD7c-NTPELISA试剂盒：上海西唐生物科技 4 第2章尿液中AD7cNTP对阿尔茨海默病的诊断意义 DRAGONWellscanMK3 酶标仪：芬兰Thermo公司，型号DENLEY 4MK2 洗板机：芬兰Themlo公司，型号Wellwash 数字显示隔水式电热恒温培养箱：上海跃进医疗器械厂，型号PYXDHS 离心机：上海安亭科学仪器厂，型号TGL168 移液枪：芬兰TIlemo公司，型号labsystems规格20-200ul 13实验方法

23、 131标本采集处理 留取研究对象晨尿的中段尿，选取清亮的标本，经尿液分析测定。如有以下中 任何一种异常即为不合格标本：尿蛋白异常；尿液中WBC、RBC异常或 有细菌生长；尿中有结晶；尿比重异常；pH异常；尿糖、酮体、硝酸 盐、胆红素或尿胆原阳性。合格的标本进行离心 400rmin，离心5min ，过滤， 取上清液以2mlEP管置于一80冰箱密封保存备用，从取尿到存入冰箱在2h 内完成。 132尿d 70-NTP的测定 linkedimmunosorbent 采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验 enzyme assay,ELISA ， 严格按照试剂盒说明书逐步进行，具体步骤如下： 1 准备工作：将

24、试剂盒从28的冰箱内取出，平衡至室温。将待测标本置 于4C冰箱内融化。配制标准品液浓度为025，05，10，20，4On,m1，待做标准曲线。 2 加样：取出已包被的96孔板，各参加标准品或待测样品lOOul，设空白孔， min。 半透膜封存，将反响板充分混匀后置37恒温箱温育120 3 洗板：用洗涤液将反响板充分洗涤5次，向滤纸上印干。 4 加第一抗体：每孔中参加第一抗体工作液100ul，半透膜封存，将反响板 rain。 充分混匀后置37恒温箱60 5 洗板：用洗涤液将反响板充分洗涤5次，向滤纸上印干。 6 加酶标抗体：每孔加酶标抗体工作液100ul，半透膜封存，将反响板置37 min 恒温

25、箱30 第2章尿液中AD7c-NTP对阿尔茨海默病的诊断意义 7 洗板：用洗涤液将反响板充分洗涤5次，向滤纸上印干。 8 加底物：每孔参加底物工作液100ul，半透膜封存，置37恒温箱暗处 min。 反响15 9 终止：每孔参加100ul终止液混匀。 10 测值：15min内用酶标仪在450nm处测吸光值。 14统计方法 用SPSSl70统计软件进行运算，数据以均数标准差 iS 表示，对 AD组、MCI组与J下常对照组的数据进行方差分析及差异q检验；对轻度AD 组与中重度AD组的进行t检验。P 005有统计学意义。 6 第2章尿液中AD7c-NTP对阿尔茨海默病的诊断意义 第2节结果 21 A

26、D组、MCl组和正常对照组的比拟 三组性别及年龄构成差异无显著性，其尿中AD7c-NTP含量分别为 220 无显著性 pO05 见表1 。 表l总AD组与MCI组及正常对照组尿液中AD7c-NTP含量比拟 注：奉与MCI组及正常对照组比拟P 001；宰宰与正常对照组比拟P 005 22轻度AD组与中重度AD组的比拟 两组性别及年龄构成差异无显著性，其尿中AD7c-NTP含量分别为 202 027 、 238_+031 ngml，有显著差异 P 001 见表2 。 表2轻度AD组与中重度AD组尿液中AD7c-NTP含量比拟 注；幸与轻度AD组比拟P 001 8 第2章尿液中AD7c-NTP对阿尔

27、茨海默病的诊断意义 23尿AD7c-NTP含量诊断AD的敏感性和特异性 以智能正常组为对照组，尿液中各个不同的AD7c-NTP含量为诊断界值， 其诊断AD的敏感性随l?特异性的增加而呈现上升趋势。其中，以190 ngml 作为诊断标准时，其诊断的敏感性为920，同时特异性可以到达878。MCI 患者有26例 433 尿中AD7c-NTP含量也升高。 见图1 图l尿AD7cNTP含量诊断AD的敏感性和特异性 8 第2章尿液中AD7c-NTP对阿尔茨海默病的诊断意义 第3节讨论 AD是成年人痴呆的最主要病因，随着人口的老龄化，其发病率逐年上升， 65岁以上人群患病率大约为510。目前，AD诊断主要

28、依据临床表现和头 颅CT、M对等影像学检查以及神经心理检查量表等综合评价，临床诊断率低。 AD从出现病症到确诊一般要经过3年左右，因此寻找高敏感度、特异度、无 创的生物学指标以提高早期诊断率，将为药物干预及延缓病程提供时机。 近年的研究发现，一种分子量为41KD的跨膜磷蛋白AD7cNTP，在神经 元胞体中表达，定位于神经细胞发生的轴突，大量存在于AD患者脑中的神经 la 元纤维缠结 Neurofibrillary Monte等瞵j tangles，NFTs 。最早于1997年由de 在正常成人额叶和颞叶皮质的神经元中可检测到AD7c-NTP的mRNA的表达， 低水平的AD7c-NTP的mRNA

29、转录产物在AD患者脑胶质细胞中也可检测到， 而在胰腺、肾脏、肝脏、脾脏、胃肠道 不同区域 、卵巢、输卵管、子宫、甲 状腺、肺、骨骼肌、睾丸和胸腺等其他器官那么没有表达【9J。AD患者的脑组织、 脑脊液及尿液中AD7cNTP的表达水平选择性升高，对于AD的早期诊断敏感 性及特异性均在90以上，并且与病情严重程度正相关【7J。 本研究说明AD患者尿液中AD7c-NTP含量较智能正常健康老年人明显升 高，中晚期AD组中该指标较早期AD组明显增高，此结果与国外报道在一定 程度上是相符的【lOl，提示尿液中AD7c-NTP含量可能成为很好的AD诊断的辅 助指标。国内外用ELSIA法检测AD及血管性痴呆、

30、帕金森病等其他非AD疾 1-16。 断灵敏性为80-,923，特异性为894-968t1 本研究发现，在以190 ngml为AD诊断界点的敏感性为90O，特异性为 878，两者能够同时保持较高的诊断敏感性和特异性，有助于提高AD的诊断 率，在对老年人进行AD风险的临床评估也具有重要的意义。与其他研究相比拟， 本研究以智能正常老年人组含量为对照组，不包括另一研究对象MCI组，而其 他研究中多以非AD疾病组及正常对照组共同为对照组，而且研究对象的例数、 患者疾病严重程度等等均有差异，从而造成最正确诊断界点与其他研究的差异。 MCI是介于正常衰老和痴呆之间的一种认知功能损害状态，被认为是AD 9 第

31、2章尿液中AD7c-NTP对阿尔茨海默病的诊断意义 差异有统计学意义，但与智能正常健康组相比并无统计学意义。可能的原因为： 1AD7c-NTP主要存在于脑内老年斑中，MCI患者脑组织机构、解剖、功能的 改变与AD患者和智能正常老年人均不相同，其中的老年斑数量缺乏，因此不 能表达显著增高的AD7c-NTP。2MCI患者于正常老化患者无法准确区分，两 者之间的指标多有重叠，还未找到明确的可用于临床诊断的生化指标。3MCI 患者的血脑屏障尚未严重破坏。研究证实lI，脑内升高的NTPS来自于血清， 是通过受损的血脑屏障进入到脑组织。当大量的产生的AD7c-NTP无法及时清 除可透过受损的血脑屏障进入脑

32、组织，并且越来也多的AD7c-NTP很可能通过 肾小球的过滤进入尿液。MCI患者尿液中AD7c-NTP含量较AD患者明显降低， 提示MCI患者的血脑屏障可能未受到严重损坏。4本实验研究入组要求及尿液 标本要求严格，有任何一项异常即为不合格，而许多老年人合并某些心、肺、 肾等脏器的慢性疾病，未纳入研究，因此，可能对结果造成一定影响。尿液 有一定的临床参考价值 本研究所采用的酶联免疫吸附法具有准确性高，简便，可操作性强以及不 需过夜及长时间孵育等优点，并且尿液检测具有无创性，更易被患者接受，使 得尿液AD7c-NTP含量检测在AD的早期诊断、鉴别诊断及病情评估中有着重 要的意义。 10 第2章尿液

33、中AD7cNTP对阿尔茨海默病的诊断意义 第4节结论 尿AD7c-NTP含量检测在AD的诊断和病情评估中有重要的意义。 第3章尿AD7c-NTP含量预测轻度认知障碍向AD转化的意义 第1节材料和方法 11研究对象 2021年3月至2021年3月南昌大学第二附属医院神经内科神经内科就诊 的患者及南昌市社区60岁以上老年人志愿者中诊断为轻度认知障碍者。 所有研究对象均取得知情同意，进行详细的病史采集、专科体检、行头颅 CT或MRI检查及神经精神量表评价；血压、心电图正常，血常规、尿液分析、 血糖、血脂均在正常范围内。 入组标准：所有病例符合美国Mayo神经病学研究中心的Petersen诊断标 准。

34、临床诊断要点为： 1 存在由患者或知情者提供的记忆障碍主诉。 2 经神经 心理测试证实记忆障碍存在，其他认知功能相对完好或轻度受损，日常生活能 27分； 4 日常生活能力量表20项 ADL 26分； 知障碍的中枢神经系统疾病，如心脑血管疾病、帕金森病、硬膜下血肿、IF常 颅压脑积水、脑肿瘤、亨廷顿病等；可导致痴呆的系统性疾病，如甲状腺功 能减退、神经梅毒、感染、维生素或叶酸缺乏、低钙血症等；谵妄，重性抑 郁，昏迷等精神障碍所致认知功能缺陷。符合以上条件者入选MCI组，共60 276 年。 AD诊断标准：符合美国国立神经病语言障碍卒中研究所和Alzheimer病及 发病年龄4090岁，多在65岁

35、以后。有多项认知缺陷。已导致社交或职 业功能缺陷，影响生活。除外任何可能导致认知功能缺陷的躯体及精神疾病。 4分。 12 第3章尿AD7c-NTP含量预测轻度认知障碍向AD转化的意义 12试剂与仪器 人AD7c-NTPELISA试剂盒：上海西唐生物科技 DRAGON WellscanMK3 酶标仪：芬兰Thermo公司，型号DENLEY 4MK2 洗板机：芬兰Thermo公司，型号Wellwash 数字显示隔水式电热恒温培养箱：上海跃进医疗器械厂，型号PYXDHS 离心机：上海安亭科学仪器厂，型号TGL168 移液枪：芬兰Thermo公司，型号labsystems规格20200ul 13实验方

36、法 131尿AD7c-NTP的测定 linkedimmunosorbent 采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验 enzyme assay, ELISA ，严格按照试剂盒说明书逐步进行，具体步骤如下： 1 准备工作：将试剂盒从28的冰箱内取出，平衡至室温。将待测标本置 于4。C冰箱内融化。配制标准品液浓度为025，05，10，20，40ngml，待做标准曲 线。 2 加样：取出已包被的96孔板，各参加标准品或待测样品100ul，设空白孔， min。 半透膜封存，将反响板充分混匀后置37。C恒温箱温育120 3 洗板：用洗涤液将反响板充分洗涤5次，向滤纸上印干。 4 加第一抗体：每孔中参加第一抗体工作

37、液100ul，半透膜封存，将反响板 min。 充分混匀后置37恒温箱60 5 洗板：用洗涤液将反响板充分洗涤5次，向滤纸上印干。 6 加酶标抗体：每孔加酶标抗体工作液100ul，半透膜封存，将反响板置37 min 恒温箱30 第3章尿AD7c-NTP含量预测轻度认知障碍向AD转化的意义 7 洗板：用洗涤液将反响板充分洗涤5次，向滤纸上印干。 8 加底物：每孔参加底物工作液100ul，半透膜封存，置37恒温箱暗处反 min。 应15 9 终止：每孔参加100ul终止液混匀。 10 测值：15min内用酶标仪在450rim处测吸光值。 132随访 AD7c-NTP J下常组。所有病例在2021年3

38、月至2021年3月间进行随访调查。病 人在1年后再次进行病情评估，且用相同方法再次测定尿中AD7c-NTP含量。 14统计方法 学处理，作X2检验、f检验、Pearson相关分析，P 005有统计学意义。 14 第3章尿AD7cNTP含量预测轻度认知障碍向AD转化的意义 第2节实验结果 21随访结果 60例患者在1年随访期间无死亡病例，均未发生脑卒中及其他严重脏器疾 病，未向其他类型痴呆转化，无脱落病例，其中共有8例MMSE评分有12分 提高，8例MMSE评分不变，其余44例均下降。共有9例进展为AD 占15O ， 两组进展为AD病例数进行卡方检验，X2 512，P 0024，差异有统计学意义

39、 P 005 。 见表3 22 MMSE评分 本相同 P O05 。1年后再次MMSE评分发现，两组得分均有下降，差异有统 计学意义 P 005 。 见表3 23尿AD7eNTP含量 对随访前后两组尿AD7c-NTP含量进行配对t检验，两组均有升高，差异 有统计学意义， P 005 。 见表3 表3随访前后结果 注：?入组时，P 005；。随访前后，P 005 第3章尿AD7c-NTP含量预测轻度认知障碍向AD转化的意义 24相关分析 关，相关系数r 043，p 005 见表4 。 表5MMSE评分、AD7c-NTP含量相关分析 AD7c-NTP含量 r值P值 注：幸p 005 16 第3章尿

40、AD7c-NTP含量预测轻度认知障碍向AD转化的意义 第3节讨论 随着社会的开展，人类寿命的延长，人口老龄化急剧加重，阿尔茨海默病 在65岁以上老年人的患病率达510，是痴呆最重要的原因之一。由于缺乏 预防和治疗的特效药物，临床治疗仅以推迟或延缓病情为主。而多数痴呆患者 起病隐匿，病程漫长，当患者或家属予以重视而来专科就诊时，往往病情已经 相当严重，错过了最正确的治疗时机。轻度认知障碍 MCI 是指认知功能已受损， 但未达痴呆，其社会职业和日常生活能力未受影响的状态，被认为是痴呆的前 期表现。只要时间足够，大多数甚至所有的MCI患者最终可能进展为痴呆，特 别是AD8】。因此，是早期诊断AD和早

41、期干预治疗的重要时期。根据MCI的 病因，临床表现及影像学和转归存在多样性，又可分为三个亚型Il州：遗忘型 有记忆障碍的MCI更容易开展为AD。本研究对象主要为遗忘型MCI，对此类 患者进行随访，深入研究，有利于早期发现和筛选出AD的高危人群，对预防和 推迟AD的发生具有重要意义。 目前有许多工具已经用于预测MCI向AD转化的研究，如神经心理学、血 液和脑脊液生化指标、基因和神经影像学等。使用神经心理学量表检测检测认 知功能的变化，如MMSE延迟回忆量表120】、听觉词语学习预测延迟回忆量表 和威斯康辛情节控制量表【2ll等均有一定价值，但预测的敏感性和特异性不高。 结构MRI测量颞角体积和海

42、马结构f22】、颞叶萎缩的沟间距123J以及脑室扩大的体 积和全脑萎缩的体积的年变化率【24】等可检测MCI病人的疾病进展情况，早期预 测转化。扩散张量成像MRI技术 DTIMRI 显示左侧海马弥散系数升高与MCI 转化为AD明显相关【25】。氢质子磁共振波谱 1HMRS 口-动态监测多种重要的脑 肌醇 mI 等在预测MCI的转化中显示了巨大的应用价值【2犯71。多项SPECT和 PET的研究发现，颞顶区、扣带回后部及海马区血流减低高度预示MCI进展为 AD的可能性较大128-30。但是在认知功能正常的老年人脑结构也可能出现类似的 改变，诊断的敏感性和特异性不够理想，并且影像学检查价格昂贵限制

43、其在临 床的应用。脑脊液中中Tau蛋白升高和A142下降在预测MCI转化中最具价 第3章尿AD7c-NTP含量预测轻度认知障碍向AD转化的意义 值，Tau蛋白水平与神经纤维缠结有关，反响脑神经元和轴索变性，而Al-42降 低那么反响淀粉样蛋白的沉积和老年斑的形成，在预测转化中的敏感性和特异性 均较耐叫J。目前公认的AD的危险因素APOE等位基因4也被认为是重要的MCI 转化为AD预测因子【32。此外，其他生物学指标如高同型半胱氨酸、异前列腺 素、低密度脂蛋白等的也在MCI中存在异常，是否对MCI预测转化还有待进一 步研究。 经元胞体中表达，其功能与神经炎的发生及细胞的死亡有关。研究发现【8】用

44、异 元细胞发生许多与AD患者脑神经元相似的变化，如线粒体功能受损，P53和 增强与tau蛋白过度磷酸化引起的细胞骨架损伤呈正相关，而与AB聚集无相关 性。此外，AD7c-NTP表达的增加出现在组织学尚未完全变性的神经元。在疾病 早期， AD7c-NTP在AD患者的脑组织、脑脊液及尿液中即有选择性升高，且 的MCI患者尿AD7c-NTP含量增高，而907的非痴呆对照组中其含量正常。 含量升高，与Goodman等的研究结果接近。我们的研究发现，MCI患者尿 AD7cNTP含量可预测MCI向AD的转化。 通过随访发现，60例患者在1年后，9例 15O 转化为AD，无转化为 其他类型痴呆病例，甚至有7

45、例 117 MMSE评分提高，虽然大局部患者 733 评分未明显下降，仍需进行更长时间的随访分析。本研究中，患者 MMSE评分提高原因可能为：治疗改善作用；测试方法习得作用；测试本身的 不稳定性作用等等多因素共同影响。仅有心理测验得分提高而无大脑病理状态 的改善只是伪逆转，以心理测验成绩提高而认为病情好转可能使医患双方不予 重视而放弃进一步干预治疗。也有研究表吲弘J，相当数量被诊断为MCI的患者 经过10年的随访也没有转化为痴呆。因此有更多研究需深入进行。 含量对MCI转化为AD的价值。因此，今后我们仍需延长对MCI患者的随访 18 及各类 19 第3章尿AD7c-NTP含量预测轻度认知障碍向

46、AD转化的意义 第4节结论 尿AD7c-NTP含量是预测MCI向AD转化的重要指标。 参考文献 参考文献 ME，eta1Rates 1】LaunerLJ，Andersen andriskfactorsfordementiaandAJzheimers K，Dewey disease：resultsfromEURODEM Incidence Researchand pooledanalysesEURODEM Group Work Studiesof GroupsEuropeanDementia【J】Neurology,1999，52 1 ：7884 GERoman a1Dementia in ZX

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