7第七讲-第三章 实验动物学微生物控制

1、n 一、基本概念：一、基本概念：n无特定病原体动物无特定病原体动物(specific pathogen free animal,SPF)是指机体内无特定的是指机体内无特定的微生物和寄微生物和寄生虫生虫存在的动物，而非特定的微生物和寄生虫存在的动物，而非特定的微生物和寄生虫是允许存在的。是允许存在的。n1978年，英、美、日、法等国协商制定了应年，英、美、日、法等国协商制定了应排除的病原微生物小鼠有排除的病原微生物小鼠有22种、大鼠种、大鼠18种、种、豚鼠豚鼠18种、地鼠种、地鼠15种、兔种、兔16种。种。 第三节第三节 无特定病原体动物（无特定病原体动物（SPFSPF动物）动物）n我国（我国（

2、1992年）医学实验动物标准中，规年）医学实验动物标准中，规定了定了SPF动物应排除的病原微生物和病毒的动物应排除的病原微生物和病毒的种类如下：种类如下：n细菌：细菌：小鼠有小鼠有19种、大鼠种、大鼠18种、豚鼠种、豚鼠16种种、地鼠、地鼠16种、兔种、兔16种、猫种、猫2种、犬种、犬3种、猴种、猴3种。种。n病毒：病毒：小鼠有小鼠有17种、大鼠种、大鼠13种、豚鼠种、豚鼠7种、种、地鼠地鼠5种、兔种、兔4种、猫种、猫6种、犬种、犬6种、猴种、猴6种。种。n详见表详见表3-1 小小鼠鼠 大大鼠鼠豚豚鼠鼠地地鼠鼠兔兔猫猫狗狗猴猴细菌细菌病毒病毒19171813167165164263636寄生虫

3、寄生虫无体内外所有寄生虫无体内外所有寄生虫表表3-2 3-2 卫生部对实验动物生物监测标准卫生部对实验动物生物监测标准n二、饲养与监测二、饲养与监测nSPF动物动物来源于无菌动物或悉生动物，来源于无菌动物或悉生动物，必须饲养在屏障系统中，所以屏障系统必须饲养在屏障系统中，所以屏障系统也称为也称为SPF设施。设施。n通常通常SPF动物室都经严格净化，严格控动物室都经严格净化，严格控制病原微生物的侵入。制病原微生物的侵入。n在对在对SPF动物饲养过动物饲养过程中，时间长了，难程中，时间长了，难免不发生污染。免不发生污染。n所以不仅对所以不仅对SPF动物动物需要定期监测，而且需要定期监测，而且对对S

4、PF动物动物一般都作一般都作周期性重建周期性重建(F56代代淘汰制度淘汰制度)。n三、应三、应 用用n国际上公认国际上公认SPF动物适用于所有科学研究，是动物适用于所有科学研究，是目前国际标准级别的实验动物。目前国际标准级别的实验动物。n生产各种疫苗所用的动物都生产各种疫苗所用的动物都应为应为SPF级动物。级动物。nSPF动物应用价值在于它没有人畜共患病病原动物应用价值在于它没有人畜共患病病原体、没有主要传染病病原体、没有对实验结果体、没有主要传染病病原体、没有对实验结果可能产生干扰的微生物。可能产生干扰的微生物。 nSPF动物不存在隐性感染（动物不存在隐性感染（清洁级就有清洁级就有）。）。n

5、隐性感染不会影响动物健康的外表，容易被忽隐性感染不会影响动物健康的外表，容易被忽视，但却能给实验带来严重的干扰。视，但却能给实验带来严重的干扰。类别类别无菌动物无菌动物SPF动物动物普通动物普通动物传染病传染病无无无无有或可能有有或可能有寄生虫寄生虫无无无无有或可能有有或可能有试验结果试验结果明确明确明确明确有疑问有疑问应用动物数应用动物数少少少少多或大量多或大量统计价值统计价值很好很好可能好可能好不准确不准确长期实验长期实验可能好可能好可能好可能好有困难有困难死亡率死亡率很低很低低低高高长期实验存活率长期实验存活率 约约100%约约90%约约40%实验标准设计实验标准设计可能可能可能可能不可

6、能不可能实验结果的讨论实验结果的讨论价值价值很高很高高高有疑问有疑问 表表3-33-3几种实验动物应用价值的比较几种实验动物应用价值的比较n日本国立卫生试验所日本国立卫生试验所生物安全性试验研究中心生物安全性试验研究中心按照日本政府的规定，按照日本政府的规定，对所有医药品、化妆品对所有医药品、化妆品、食品添加物、农药、化学物质、家庭用品、食品添加物、农药、化学物质、家庭用品、动物用医药品、饲料添加物等，都必须进行生动物用医药品、饲料添加物等，都必须进行生物安全性试验，物安全性试验，合格者方准许正式生产，投放合格者方准许正式生产，投放市场。市场。n其试验内容包括：一般毒性试验、特殊毒性试其试验内

7、容包括：一般毒性试验、特殊毒性试验、在体内衍变过程、变异原性试验及一般生验、在体内衍变过程、变异原性试验及一般生物学试验，共物学试验，共5大项大项(见表见表3-4)，这些试验所用，这些试验所用的大、小鼠必须的大、小鼠必须是是SPF级级(表表3-5)。安全性试安全性试验的种类验的种类医医药药品品化化妆妆品品食食 品品添添 加加物物农农药药化化学学物物质质家庭家庭用品用品动动物物用用医医药药饲饲料料添添加加物物一一 般般毒毒 性性试试 验验急性毒性试验急性毒性试验亚急性毒亚急性毒慢性毒性慢性毒性特特 殊殊毒毒 性性试试 验验局部刺激试验局部刺激试验变态反应试验变态反应试验致畸形试验致畸形试验繁殖试

8、验繁殖试验依赖试验依赖试验致癌性试验致癌性试验 表表3-4日本关于生物安全性试验动物的规定日本关于生物安全性试验动物的规定安安 全全 性性 试试 验验 的的 种种 类类动动 物物 要要 求求.急性毒性试验急性毒性试验4周龄的周龄的SPF小鼠、大鼠，经小鼠、大鼠，经1周适应后使用；周适应后使用；2.53.0kg的兔，经两周适应后使用；的兔，经两周适应后使用；67月龄的毕克狗，经月龄的毕克狗，经1周周适应使用。适应使用。.大鼠的亚急性及慢性毒大鼠的亚急性及慢性毒性试验性试验兔的亚急性毒性试验兔的亚急性毒性试验毕克狗的亚急性及慢性毒毕克狗的亚急性及慢性毒性试验性试验4周龄的周龄的SPF大鼠，经大鼠，

9、经1周适应后使用；周适应后使用；约约2.5kg的兔；的兔；67月龄的毕克狗，经月龄的毕克狗，经4周适应后使用。周适应后使用。. 生殖试验（妊娠前和妊生殖试验（妊娠前和妊娠初期服药反应）娠初期服药反应）5周龄雄性和周龄雄性和12周龄雌性周龄雌性SPF小鼠、大鼠，经小鼠、大鼠，经1周检疫适周检疫适应后使用应后使用. 致癌性试验致癌性试验4周龄的周龄的SPF小鼠、大鼠，经小鼠、大鼠，经1周检疫适应后使用周检疫适应后使用. 生殖试验（器官形生殖试验（器官形成期的服药试验）成期的服药试验）生殖试验（产前生殖试验（产前1周和周和哺乳期服药试验）哺乳期服药试验）12周龄的周龄的SPF小鼠、大鼠，经小鼠、大鼠

10、，经1周检疫适应后使用，周检疫适应后使用，2.5 kg左右的雌兔，经左右的雌兔，经4周检疫适应后使其交配妊娠用于周检疫适应后使其交配妊娠用于实验实验12周龄的周龄的SPF小鼠、大鼠，经小鼠、大鼠，经1周检疫适应后，使其交配周检疫适应后，使其交配妊娠后用于实验妊娠后用于实验表表3-5 日本对供安全性试验动物的要求日本对供安全性试验动物的要求n一、清洁级动物（一、清洁级动物（CL）n1.基本概念：基本概念：是指动物体内、外不携带是指动物体内、外不携带有人畜共患病病原体，或动物传染病病有人畜共患病病原体，或动物传染病病原体，并对科学研究无干扰的动物。原体，并对科学研究无干扰的动物。n清洁级动物是根据

11、我国国情而设定的等清洁级动物是根据我国国情而设定的等级动物，目前在我国已成为适用于科研级动物，目前在我国已成为适用于科研的标准的实验动物，其种群来源于的标准的实验动物，其种群来源于SPF动物或剖腹产动物。动物或剖腹产动物。第四节第四节 清洁级动物与普通级动物清洁级动物与普通级动物n2 2、清洁级动物特点及应用、清洁级动物特点及应用n清洁级动物比普通级动物要求排除的微生清洁级动物比普通级动物要求排除的微生物和寄生虫多，但比物和寄生虫多，但比SPF动物少。即就微生动物少。即就微生物净化程度物净化程度CL比比CV高，而比高，而比SPF低。低。n清洁级动物除肉眼观察无病外，尸体解剖清洁级动物除肉眼观察

12、无病外，尸体解剖时，主要脏器、组织时，主要脏器、组织无论是肉眼观还是病无论是肉眼观还是病理组织切片均应无病变。理组织切片均应无病变。n清洁动物饲养清洁动物饲养于温湿度恒定的、十万级于温湿度恒定的、十万级空气净化的空气净化的半屏障系统半屏障系统中，其所用的饲中，其所用的饲料、垫料、笼器具等都经过消毒灭菌处料、垫料、笼器具等都经过消毒灭菌处理，理，饮用水除用高压灭菌外饮用水除用高压灭菌外，也可采用，也可采用pH2.52.8的酸化水，工作人员需换灭的酸化水，工作人员需换灭菌工作服、鞋、帽、口罩等进入动物室菌工作服、鞋、帽、口罩等进入动物室进行操作。进行操作。n目前一般都饲养在目前一般都饲养在IVC系

13、统中。系统中。n清洁级动物近年来在我国得到较广泛的清洁级动物近年来在我国得到较广泛的应用。它较普通动物健康，又应用。它较普通动物健康，又较较SPF动动物易达到质量标准物易达到质量标准，在动物实验中可免在动物实验中可免受动物疾病的干扰，其敏感性与重复性受动物疾病的干扰，其敏感性与重复性亦较好。亦较好。n但国际上普遍认为但国际上普遍认为清洁动物仅适合于短清洁动物仅适合于短期或中期部分科研实验。期或中期部分科研实验。 清洁级动物微生物控制标准基本上清洁级动物微生物控制标准基本上与与SPF动物相同。动物相同。 不同之处不同之处是在是在抗体检查中，抗体检查中，清洁级动物经清洁级动物经常可以查出常可以查出

14、鼠脑膜炎病毒鼠脑膜炎病毒和和鼠肝炎病毒抗鼠肝炎病毒抗体体的存在。这一点会对个别实验产生不良的存在。这一点会对个别实验产生不良的影响。如隐性感染了鼠肝炎病毒的小鼠的影响。如隐性感染了鼠肝炎病毒的小鼠，就会影响小鼠的免疫应答和肿瘤研究。，就会影响小鼠的免疫应答和肿瘤研究。 清洁级动物清洁级动物是我国常用的实验动物，可应我国常用的实验动物，可应用于生物医学研究的各个领域。用于生物医学研究的各个领域。n二、普通级动物（二、普通级动物（conventional animal CV）n1.1.概念：不携带人畜共患病病原体和动物急概念：不携带人畜共患病病原体和动物急性传染病病原体的实验动物。性传染病病原体的

15、实验动物。n2.2.特点：特点：n微生物控制要求最低。微生物控制要求最低。n生理学特性：健康的外貌，正常的饮食，生理学特性：健康的外貌，正常的饮食，眼角、鼻腔无分泌物附着，尸检无眼观病灶眼角、鼻腔无分泌物附着，尸检无眼观病灶n普通级小鼠应排除的病原微生物，常见普通级小鼠应排除的病原微生物，常见的有：的有：n鼠疫杆菌、流行性出血热病毒、脑膜炎鼠疫杆菌、流行性出血热病毒、脑膜炎病毒、沙门氏菌、皮肤真菌、弓形体及病毒、沙门氏菌、皮肤真菌、弓形体及体外寄生虫等对人体和动物危害较大的体外寄生虫等对人体和动物危害较大的病原体。病原体。n为了预防人和动物共患病及动物群中急为了预防人和动物共患病及动物群中急性

16、传染病的发生，性传染病的发生，普通级动物在饲养管普通级动物在饲养管理中必须采取一定的防护措施。理中必须采取一定的防护措施。n普通级动物的饲养管理：普通级动物的饲养管理：n饲料、垫料不需要高压消毒；饲料、垫料不需要高压消毒；n饮用水要符合城市饮水卫生标准；饮用水要符合城市饮水卫生标准；n青饲料应经洗净后再喂；青饲料应经洗净后再喂；n外来动物必须严格隔离检疫；外来动物必须严格隔离检疫；n饲养室内要有防野鼠、防昆虫的设备；饲养室内要有防野鼠、防昆虫的设备；n要坚持经常性的环境卫生及笼器具的清要坚持经常性的环境卫生及笼器具的清洗消毒，严格处理淘汰及死亡动物；洗消毒，严格处理淘汰及死亡动物；n限制无关人

17、员进人动物室。限制无关人员进人动物室。 n病毒性疾病疾病疾病病原病原媒介动物媒介动物人类临床症状人类临床症状传染途径传染途径猴疱疹病毒感染猴疱疹病毒感染(B-Virusinfection) cercopithecine Herpesvirus Type 1猕猴类猕猴类肌痛、发热、头痛；迅速发肌痛、发热、头痛；迅速发展的上行性麻痹；感觉异常展的上行性麻痹；感觉异常、复视、运动失调、潴尿、复视、运动失调、潴尿、抽搐、吞咽困难，死亡抽搐、吞咽困难，死亡唾液唾液(咬伤咬伤)、抓、抓伤伤马尔堡病毒症马尔堡病毒症 (Marburg-Viresdisease) M a r b u r g -Virus 非洲

18、绿猴非洲绿猴 肌痛、发热、头痛、器官肌痛、发热、头痛、器官坏死、出血性休克、眼结膜坏死、出血性休克、眼结膜溢血、恶心、呕吐、严重下溢血、恶心、呕吐、严重下痢、白细胞减少，急性死亡痢、白细胞减少，急性死亡接触、空气传染接触、空气传染；人类之间可经；人类之间可经由血液、分泌物由血液、分泌物或精液传染或精液传染 痘病毒症痘病毒症 (PoxMrusdisease) Pox virus其他灵长其他灵长类类 类似天花症状，如发热、类似天花症状，如发热、皮疹、头痛、咽喉痛、虚脱皮疹、头痛、咽喉痛、虚脱、偶有腹痛，严重致死、偶有腹痛，严重致死接触传染或呼吸接触传染或呼吸道感染道感染猴痘猴痘(Monkeypox

19、) Pox virus猕猴类猕猴类 眼睑、脸部、身体或生殖眼睑、脸部、身体或生殖器有局部的卵圆形或圆形隆器有局部的卵圆形或圆形隆起红斑起红斑接触传染接触传染附：人畜共患病附：人畜共患病续表续表疾病疾病病原病原媒介动物媒介动物人类临床症状人类临床症状传染途径传染途径 麻疹麻疹(Measles；Rubeola)Paramyxo virus 自然宿主为自然宿主为人群，灵长类人群，灵长类患病后可感染患病后可感染人类人类发热、结膜炎、鼻炎、发热、结膜炎、鼻炎、咳嗽、有红晕小白点于咳嗽、有红晕小白点于颊部黏膜，在脸部及其颊部黏膜，在脸部及其他部位出现皮疹他部位出现皮疹空气传染、呼吸道分空气传染、呼吸道分泌

20、物接触能传染泌物接触能传染甲型肝炎甲型肝炎(Hepatitis A)Hepatitis A virus 黑猩猩、械黑猩猩、械猴、石蟹猕猴猴、石蟹猕猴、枭猴、枭猴 发热、身体不适、厌食发热、身体不适、厌食、恶心、腹部不适、黄、恶心、腹部不适、黄疸疸粪便排毒、经口或胃粪便排毒、经口或胃肠道外途径感染肠道外途径感染出血热出血热(Korean h e mo r r h a g i c fever) Hantaan Virus 大鼠、小鼠大鼠、小鼠肌痛、咳嗽，发热、腹肌痛、咳嗽，发热、腹泻、出血、蛋白尿、肾泻、出血、蛋白尿、肾脏损害，严重致死脏损害，严重致死吸入感染、啮齿类动吸入感染、啮齿类动物咬伤、伤

21、口污染物咬伤、伤口污染淋巴细胞脉络丛淋巴细胞脉络丛 脑膜炎病毒感染脑膜炎病毒感染症症 (Lyphocytic choriomeningitis virus infection) Lyphocytic choriomeningitis virus 小鼠、仓鼠小鼠、仓鼠类似流行性感冒的症状类似流行性感冒的症状，头痛、肌痛、发热、，头痛、肌痛、发热、恶心、呕吐、喉痛、畏恶心、呕吐、喉痛、畏光。光。接触感染接触感染(接触小鼠接触小鼠粪便和尿液粪便和尿液)；吸入；吸入；咬伤，或由节肢动；咬伤，或由节肢动物如蚊子、蟑螂传播物如蚊子、蟑螂传播狂犬病狂犬病 (Rabies)R h a b d o virus

22、所有哺乳类所有哺乳类头痛、肌痛、发热、恐头痛、肌痛、发热、恐水、狂妄、抽搐、昏厥水、狂妄、抽搐、昏厥、死亡、死亡 咬伤、皮肤伤口或黏咬伤、皮肤伤口或黏膜感染含狂犬病毒的膜感染含狂犬病毒的唾液唾液 n细菌性疾病细菌性疾病 疾病疾病病原病原媒介动物媒介动物人类临床症状人类临床症状传染途径传染途径全身性感染全身性感染 (Systemic infections) 布氏杆菌病布氏杆菌病 (Brucellosis)犬犬 B r u c d l a C a n i s 、 猪、 猪Brucella suis 犬、牛、猪、犬、牛、猪、羊羊发热、头痛、恶心、体发热、头痛、恶心、体重减轻。有可能发生菌重减轻。有可

23、能发生菌血症，睾丸炎、不育等血症，睾丸炎、不育等由接触感染，可经口、由接触感染，可经口、皮肤、呼吸道、尿液、皮肤、呼吸道、尿液、黏膜感染黏膜感染钩端螺旋体病钩端螺旋体病(Leptospirosis) Leptospirosis interro-gans各种脊椎动物各种脊椎动物的哺乳类、两的哺乳类、两栖类、爬行类栖类、爬行类 精神萎靡、体重减轻精神萎靡、体重减轻、呕吐、下痢、发热、呕吐、下痢、发热、黄疸、突发性死亡黄疸、突发性死亡接触感染动物的尿液，接触感染动物的尿液，由创伤、皮肤或口腔感由创伤、皮肤或口腔感染染鼠疫鼠疫(Plague) Yersinia(Past e u r e l l a )

24、 pestis 鼠 类 、 猫 、鼠 类 、 猫 、犬、兔、山羊犬、兔、山羊 淋巴结型鼠疫：发热淋巴结型鼠疫：发热、淋巴结肿大与发炎。、淋巴结肿大与发炎。化脓型鼠疫：全身性尤化脓型鼠疫：全身性尤其是肺、脑膜化脓其是肺、脑膜化脓由蚤传染。另外，接触由蚤传染。另外，接触受感染的动物，或吸入受感染的动物，或吸入带菌的空气感染。皮肤带菌的空气感染。皮肤伤口或黏膜亦可感染伤口或黏膜亦可感染鹦鹉热鹦鹉热 (Psittacosis) Chlamydia psittaci 多种鸟类多种鸟类(鹦鹦鹉科、火鸡、鹉科、火鸡、鸽、鸭等鸽、鸭等) 呈急性或隐性感染，呈急性或隐性感染，包括发热、厌食、肌痛包括发热、厌食、

25、肌痛、干咳。、干咳。与带病原的渗出物、分与带病原的渗出物、分泌物、排泄物接触传染泌物、排泄物接触传染，或经呼吸道感染，或经呼吸道感染鼠咬热鼠咬热(Rat-BiteFever) Streptobacillus monili-fonnis spirillum minus 大鼠等啮齿类大鼠等啮齿类 发热、淋巴结肿大、发热、淋巴结肿大、发抖、头痛、肌痛发抖、头痛、肌痛 被带菌的大鼠、小鼠、被带菌的大鼠、小鼠、犬、猫咬伤，由空气、犬、猫咬伤，由空气、灰尘或饮用污染的牛乳灰尘或饮用污染的牛乳感染感染 n续表续表疾病疾病病原病原媒介动物媒介动物人类临床症状人类临床症状传染途径传染途径呼吸道感染呼吸道感染 (

26、 Respiratory lnfections) 结核病结核病(Tuberculosis) Mycobacteriu m t u -berculosis 犬、猫、猴犬、猫、猴 咳嗽、生痰、咳血、体咳嗽、生痰、咳血、体重减轻、无力疲倦、发重减轻、无力疲倦、发热、发冷、恶病质热、发冷、恶病质 吸入传染，或经口腔、吸入传染，或经口腔、伤口及消化道感染伤口及消化道感染 肠道感染肠道感染 ( Entericlnfections)沙 门 氏 菌 病沙 门 氏 菌 病 (Salmonellosis)Salmonella t y p h i m u -r i u m S enteritidis鼠类、犬、猫鼠类

27、、犬、猫、灵长类、灵长类急性肠胃炎，腹痛、腹急性肠胃炎，腹痛、腹泻、恶心、发热、厌食泻、恶心、发热、厌食经由食物、饮水感染经由食物、饮水感染 志贺氏菌病志贺氏菌病 (Shigellosis) Sflexneri，SSonnei，及，及Sdysenteriae 豚鼠、鼠类豚鼠、鼠类、犬、灵长类、犬、灵长类 急性下痢、发热、恶急性下痢、发热、恶心、有时伴有呕吐、先心、有时伴有呕吐、先急后重、痛经与毒血症急后重、痛经与毒血症 接触或口腔感染接触或口腔感染 肠道耶氏症肠道耶氏症 (Enteric Yersiniosis) Y e r s i n i a Enterocolitica 犬、猫、豚鼠犬、猫

28、、豚鼠、兔、灵长类、兔、灵长类 发热、下痢、腹痛。后发热、下痢、腹痛。后遗症有关节炎，虹膜炎遗症有关节炎，虹膜炎、皮肤溃疡、肝脾脓肿、皮肤溃疡、肝脾脓肿 接触感染动物或其粪便接触感染动物或其粪便，亦可经口感染，亦可经口感染 疾病疾病病原病原症状症状传播方式传播方式控制控制小鼠脱 脚 病小鼠脱 脚 病(ectromelia)Mouse pox virus脚、尾、鼻出现脚、尾、鼻出现皮疹和溃疡，严皮疹和溃疡，严重出现尾坏死脱重出现尾坏死脱落。落。皮肤伤口、呼吸道、消化道皮肤伤口、呼吸道、消化道兔兔 出 血 症出 血 症R a b b i t hemorrhagic diseaseR a b b i

29、 t hemorrhagic disease virus三、动物急性传染病三、动物急性传染病n由于普通级动物（由于普通级动物（CV）是微生物控制等）是微生物控制等级最低的实验动物，级最低的实验动物，对实验结果的准确性对实验结果的准确性较差较差，因而国际上普遍认为仅可作生物医因而国际上普遍认为仅可作生物医学中学中教学演示教学演示之用，或作为某些科学研究之用，或作为某些科学研究为探索方法而从事的为探索方法而从事的预试验预试验之用。之用。n不可供科研、生产和检定之用，不可供科研、生产和检定之用，由于普通由于普通动物繁殖力强，生产量大，适宜作一般性动物繁殖力强，生产量大，适宜作一般性的实验用。的实验用

30、。3 3、普通级动物的应用、普通级动物的应用n监测程序：监测程序：1. 微生物检测程序微生物检测程序 分离血清，检查病分离血清，检查病 毒抗体或其它病原的抗体毒抗体或其它病原的抗体 气管分泌物，肠内容物，气管分泌物，肠内容物， 脏器分离细菌脏器分离细菌 真菌检查真菌检查动物编号外观检查麻醉皮肤取样取血无菌解剖检测检测报告附：第五节附：第五节 实验动物微生物及寄生虫监测实验动物微生物及寄生虫监测 （武汉大学）（武汉大学）2. 寄生虫检测程序寄生虫检测程序 弓形虫检测弓形虫检测 体外寄生虫检测体外寄生虫检测 体内寄生虫检测体内寄生虫检测 体外寄生虫检测体外寄生虫检测动物编号外观检查麻醉拔毛或梳毛取

31、血挤压或刀片刮取皮层物取样检测检测报告解剖、脏器、肠内容物、粪便取样n取样要求与监测规则：取样要求与监测规则：1. 普通动物、清洁级动物和无特定病原体普通动物、清洁级动物和无特定病原体 动物每三个月至少检测一次。动物每三个月至少检测一次。2. 无菌动物每年至少检测一次。无菌动物每年至少检测一次。3. 每每2-4周检测一次粪便标本。周检测一次粪便标本。实验动物不同生产繁殖单元取样数量实验动物不同生产繁殖单元取样数量群体大小，只群体大小，只取样数量取样数量 500 5只只 10只只 20只只 每个隔离器检测每个隔离器检测2只只监测方法：监测方法：1. 实验动物病毒检测：实验动物病毒检测：1）血清学

32、诊断：血清学诊断：血凝抑制试验（血凝抑制试验（HI）；）；酶联免疫吸附试酶联免疫吸附试验（验（ELISA）。）。2）病原学检查：病原学检查：接种细胞培养物观察接种细胞培养物观察CPE出现（鼠痘、鼠肝炎）；血吸出现（鼠痘、鼠肝炎）；血吸附试验（仙台病毒）；免疫酶试验（附试验（仙台病毒）；免疫酶试验（LCM病毒）。连续病毒）。连续三次传代未有病毒迹象为阴性。三次传代未有病毒迹象为阴性。接种敏感动物，观察发病、抗体产生、病理改变、接种接种敏感动物，观察发病、抗体产生、病理改变、接种动物病毒再分离。动物病毒再分离。动物组织细胞传代培养。动物组织细胞传代培养。3）病毒颗粒、抗原和核酸的检出病毒颗粒、抗原

33、和核酸的检出a.光镜光镜检查病理改变或包涵体的存在。检查病理改变或包涵体的存在。b.电镜电镜检查组织内或排泄物中的病毒颗粒检查组织内或排泄物中的病毒颗粒c.PAGE、PCR检查病毒核酸。检查病毒核酸。d.免疫法检查组织内、排泄物中的病毒抗免疫法检查组织内、排泄物中的病毒抗原。原。2. 实验动物细菌检测：实验动物细菌检测：1）正常动物主要取）正常动物主要取气管或鼻咽分泌物气管或鼻咽分泌物和和盲肠内盲肠内容物容物作细菌培养。作细菌培养。2）发病动物对发生病变的各组织和脏器做细菌）发病动物对发生病变的各组织和脏器做细菌检查。检查。3）细菌监测多采用）细菌监测多采用病原学病原学方法。方法。3. 实验动

34、物寄生虫检测：实验动物寄生虫检测：1）体内寄生虫检查）体内寄生虫检查a.直接涂片：适于肠道蠕虫虫卵、肠道原虫及血直接涂片：适于肠道蠕虫虫卵、肠道原虫及血液内寄生虫。液内寄生虫。b.虫卵收集：虫卵收集：饱和生理盐水漂浮饱和生理盐水漂浮；沉淀集卵沉淀集卵，用，用于吸虫卵；于吸虫卵；透明胶纸粘取透明胶纸粘取，用于蟯虫卵；，用于蟯虫卵；尿液尿液检查检查，用于鼠膀胱线虫卵；，用于鼠膀胱线虫卵；尸体剖检尸体剖检。c.2）体外寄生虫检查）体外寄生虫检查d.被毛检查、透明胶纸粘取、皮刮取法、黑背景被毛检查、透明胶纸粘取、皮刮取法、黑背景法法n附：第六节附：第六节 生物安全生物安全 （武汉大学）（武汉大学）n生

35、物安全：生物安全：n指由于职业或现代生物技术的开发和应用指由于职业或现代生物技术的开发和应用，造成的对人体健康和生态环境的潜在威，造成的对人体健康和生态环境的潜在威胁及应采取的一系列有效预防和控制措施胁及应采取的一系列有效预防和控制措施n生物安全因素包括：生物安全因素包括：病原微生物因素、转病原微生物因素、转基因动物因素、变应原因素。基因动物因素、变应原因素。n1. 病原微生物因素病原微生物因素n1) 逸散方式：逸散方式：n 天然逸散方式：经尿液、唾液和粪便天然逸散方式：经尿液、唾液和粪便排出或从皮肤损害部位释出。排出或从皮肤损害部位释出。n 人为逸散方式：采血、活体检查和尸人为逸散方式：采血、活体检查和尸检。检。实验室生物安全标志或标识实验室生物安全标志或标识2) 2) 传播方式：传播方式： 污染的针头和注射器以及直接与感染动物接污染的针头和注射器以及直接与感染动物接触，占引起感染的触，占引起感染的40%40%，为最常见传播方式。，为最常见传播方式。 气容胶的形成及散播气容胶的形成及散播气容胶：是能较长时间悬浮在空气中的固态或气容胶：是能较长时间悬浮在空气中的固态或液态微粒。气容胶微粒越小，在空中停留时间液态