临床微生物学检验考试重点知识总结

1、临床微生物学检验第一章 微生物感染与宿主免疫根据微生物与人体的关系：有益微生物条件致病微生物 病 原微生物。肠道中双歧杆菌最为典型P11 *1潜伏感染：若宿主与病原病体在相互作用过程中暂时 处于平衡状态，病原体潜伏在病灶内或某些特殊组织内，一般 不排除体外。（如果宿主的抗感染兔疫刃液期，或侵入的病爆体数量增多，毒力较福，机体的组织细胞受到不同程度的损害并 而规一系列临床症状布体征，则祢为 显性感染。）病原微生物的传播V:空气传播飞沫传播接触传播共同媒介 物传播虫媒传播多途径传播P21 2 ,（病原菌的毒力包括侵袭力和毒素。）侵袭力：病原菌 在宿主见传播侵袭定植并逃避免疫的能力，称为侵袭力。由

2、菌体表面结构和侵袭物质等构成P25 3、胞内菌感染免疫：胞内菌分专职和兼职，兼职胞内菌 在宿主体内主要寄居在细胞内生长繁殖，但是亦可在细胞外没 有无活细胞的环境生存繁殖。（如结核分支杆菌麻风分枝杆菌）第二卓细菌的基本形状P38 1、细菌大小以微米um为测量单位。人肉眼的最小分辨率 为0.2mm.按其外形：球菌杆菌螺旋菌 球形呈圆球形、 近圆球形、矛头状和肾形P41 2、鞭毛功能：1）动力：鞭毛是细菌的运动器官，（旋转运动是由基础小体的同心环旋转产生，推动力来自质子动能， 即质子浓度梯度流动所释放的ATP。鞭毛旋转方向决定运动类型，观察细菌动力用悬滴法或压滴法在显微镜下观察其运动， 也可将细菌接

3、种于半固体培养基观察动力）2）鉴别细菌；鞭毛及细，一般染色不能看见，常用特殊染色和镀银染色观察细菌 有无鞭毛及鞭毛数量、分布，可用于鉴别细菌P42 3、性菌毛 可也结合的方式在细菌之间传到DNA导致细菌毒性及耐药性的变异6、糖萼功能1 ）与细菌毒力有关：有糖萼的细菌表面光滑， 不易被细菌细胞吞噬，消化，逃避免疫吞噬后的细菌可在机体 组织细胞中生长繁殖引起感染。2）细菌的鉴别和分形：夹馍物质具有特异性抗原，可作为细菌的鉴别和分形。3）形成生物膜7、革兰阴性菌细胞壁特有组分 一- 磷壁酸8、芽胞功能：1）对热力、干燥、辐射、化学消毒具有强大抵 抗力2）以是否能杀死芽泡作为物品消毒灭菌效果的判断指标

4、， 3）芽泡在菌体的位置和直径的大小随菌种的不同，这种形态特点有利于细菌的鉴别。9、细菌生长曲线： 连续监测细菌不同培养时间的菌落形成单位(CFU,以CFU为纵坐标，培养时间为横坐标做由的反应菌落生长数变化规律的曲线 包括以下三期(1)迟缓期：细菌适应环境的过程，为繁殖做准备(2)对数生长期：最大速率生长分裂，细菌对数增加，此期细 菌代谢活跃稳定，其大小形态、染色、染色性和生化反应典型， 对外界反应敏感(3)稳定期：生长繁殖和死亡处于动态平衡，此期合成较多代谢产物。(4)凋亡期：死亡数大于增加数， 一般不用该期细菌作鉴定和 研究10、选择培养基：在培养基中加入某些特殊化学物质，抑制 某些细菌生

5、长而有助于需要的细菌种类生长，使需要菌从混杂 的微生物群体中分离由来。11、高压蒸汽灭菌：P:103.4KPa T121.3 度t15-20 分钟，可 也杀死繁殖体的芽泡，&补充特性革兰阳 性菌革兰阴性菌强度较强韧较疏松厚度厚20 80mm薄811mm化学组 成肽聚糖 磷壁酸肽聚糖脂蛋 白脂多糖外膜无有周浆间 隙窄窄孔蛋白无有分子渗 透性易渗透不易渗透&细菌的典型生长曲线：迟缓期对数生长期 稳定期 衰亡期第三卓细菌的遗传与变异1细菌的遗传物质包括染色体和质粒，具化学组成为DNA2 *质粒： 是细菌染色体外的 DNA携带某些编码遗传特性的基因，他能独立于染色体外进行自我复制。质粒

6、功能：编码多种蛋白质，赋予宿主菌多种生物功能如毒力因子 致育性 耐药性 解降酶 限制酶 修饰酶)3质粒的特性：(1)不相容性：相似质粒在同一细胞不能共存(2)可转移性：质粒可在细胞间转移， 还可自细菌转移到真核细胞，及转移到哺乳动物细胞， (3)自主复制质粒：利用宿主系统独立于染色体进行复制 (4)质粒可自然丢失或用人工方法 消除4、细菌变异：可变现为形态、结构、菌落、抗原性、毒力、 酶活性、耐药性和宿主范围等的变异5、细菌变异中的培养特性变异* S-R 变异：新从患者体内分离的沙门菌通常为光滑型，经人工培养后菌落呈粗糙型。S-R变异常伴有抗原、毒力和某些生化特性的改变。第四殖病毒的基本性质P

7、83P83 1病毒的结构可分为基本结构和辅助结构。病毒的基本 结构包括核心、衣壳。辅助结构是包膜（是包围在病毒核衣壳 外面的双层膜结构），包膜对乙醍是敏感的， 若呈阳性，则说明 有乙醍存在。第五旗真菌的基本形状P101 1真菌是真核细胞微生物细胞壁为多糖，&基质（高分子复合物组成）：多糖，真菌细胞壁基质中多糖种 类很多，多糖含量在同一真菌细胞壁不同发育阶段也明显不同， 提示其含量直接影响真菌的形态变化，故细胞壁多糖含量可作 为真菌分类依据及真菌感染实验诊断依据&真菌，在含有动物蛋白的培养基上37摄氏度培养时为醉母菌型，在25摄氏度普通培养基上呈丝状菌。真菌生长条件：PH4一6

8、T30 （或室温22254）P102 2、营养体呈多细胞类型的真菌是由菌丝和胞子交织组成，称为丝状菌或霉菌；营养体呈单细胞类型的真菌又称 醉母第六旗微生物分类与命名P113 1、细菌的科学名称（学名）的生物双命名式， 具备拉丁 化文字的形式和明i分类等级的一两个特点即一个著名和一个 种石构成，属一名叁前是名词，目字殍大写，种命叁后，是帝容 词，示论是否人居或她名均需小写一两者用斜体要示，细窗学 ,名的印支译金则神茗叁前，扇茗叁后，细窗也习惯通店俗名女口 结核杆菌第七卓感染病病原学诊断与预防P126 1细菌感染病病原学检查的标本采集的原则：尽早采集：一旦怀疑细菌感染，应及时采集标本进行细菌 学检

9、验。选择不同采集时机和标本种类：根据临床症状和流行病学 资料可预测感染性疾病的病原体， 根据病程和感染部位的不同， 选择合适时机采集不同种类标本。在抗生素应用前采集：应尽可能在抗生素留取前标本。遵守无菌操作：应严格注意无菌操作，不得被其他部位细菌污染。盛放标本的容器应无菌。正确保存和运送：采集的标本及时运送，如路途遥远，一般应冷藏（但对脑膜炎和淋病奈瑟菌，需保温3537 C）P127 2、微生物检验中常用的染料（1）酸性染料：电离后带负电荷，能与带正电荷的物质结合，细菌一般带负电荷，与酸性染料不着色3、革兰染色的影响因素：涂片厚薄酒精脱色时间染液 储存时间细菌生长时期128 4、倾注平板接种法

10、常： 用的与接种 生乳、饮水、尿液 标本的菌数测定P128 5、碳水化合物代谢实验氧化发醉实验（O-FS实验）又称HL。 细菌在分解葡萄糖的过程中，必须以分子氧作为电子受体的称为氧化型。这类细菌通常是专性需氧菌，在无氧环 境中不能分解葡萄糖。细菌在分解葡萄糖的过程中，可以进行 无氧降解的，称为发醉型，此类细菌无论在有氧无氧的环境都 能分解葡萄糖，通常为兼性厌氧菌。不分解葡萄糖的细菌，称 为产碱型。利用此实验区分细菌代谢类型。肠杆菌科细菌为发醉型，非发醉菌通常为氧化型和产碱型， 此外，微球菌属可氧化葡萄糖，葡萄糖菌属能发醉葡萄糖。P129 2、B-半乳糖昔酶实验（ONPG （总J吉）：只有B -

11、半乳糖昔酶而缺乏半乳糖昔渗透酶（或是其活性很弱）的细菌，不 能很快将乳糖运送到细菌细胞内，需要几天时间乳糖才能被分 解。称迟缓分解乳糖。ONPGJ乳糖分子结构相似，且分子较小， 不需要半乳糖甘渗透酶的运送就可进入菌细胞内。P131 3 氧化酶试验（是什么，怎么做，用途）：氧化酶或 称细胞色素氧化酶，是细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶。作 氧化酶试验时，此酶首先使细胞色素C氧化，然后氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。本试验肠杆菌科阴 性，弧菌科和非发醉菌阳性（个别菌种除外），奈瑟菌属阳性。P130 4、蛋白质和氨基酸的代谢实验回噪（靛基质）实验；细菌分解蛋白月东中的色氨酸生成阻噪，与

12、试剂中的对二氨基苯 甲醛作用，形成红色玫瑰回噪P133 5、凝固酶试验 （CNS金黄色葡萄糖球菌产生凝固酶， 使血浆凝固。而表皮及腐生葡萄糖球菌的凝固酶则阳性，用于治病性葡萄球菌鉴别实验6、抗原测定 凝集试验玻片法凝集试验：用于细菌菌种鉴定 和分型，取已知型别的抗血清 1滴滴在玻片的一端，用接种环 取菌液混匀成悬液。另取生理盐水一滴滴在载玻片另一端，用 接种环取细菌混匀成悬液。轻轻摇晃玻片，如果加入抗血清生 现凝集颗粒，而对照侧仍然混匀浑浊，则凝集阳性。特点：方 法简单，快速，特异性强7、荚膜肿胀实验：有荚膜的细菌如肺炎链球菌等，当与相应 的抗血清反应时荚膜将明显曾宽，在显微镜下可见在蓝色细菌

13、 周围有边界清晰的环状物，厚薄不等，而对照侧无，则为荚膜 肿胀实验阳性8、外斐实验：为一种非特异血清学试验反应，该实验用与立克次体有共同抗原的变形杆菌 OX19 OX2 OXk代替立克次体， 进行凝集反应，来判断患者血清中有无抗立克次体抗体。是奥 些立克次体病的辅助诊断试验9、病毒大小的测定方法：1）电子显微镜直接测定，2）超过滤法，3）超速离心法10、病毒分离培养方法：动物接种、鸡胚接种、组织培养（主 流方法，包括原代和次代细胞培养、二倍体细胞培养：广泛用 于病毒分离和疫苗接种、传代细胞培养）第八旗抗微生物化学疗法P157 1 .纸片扩散法（K-B法）：培养基：pH为7.27.4 ,琼 脂厚

14、度为4mm对营养要求较高的细菌如链球菌、肠球菌属、 流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌等需加入相应的营养添加剂。细菌接种：用0.5麦氏比浊管校正菌液浓度（1.5 xi08CFU/ml）, 在琼脂表面均匀涂布接种 3次，每次旋转平板60以保证接种 菌的均匀分布，各纸片中心相距 >24mm纸片距平板内缘>15m, 苛养菌应孵育在含 CO2的环境中，肠球菌检测对苯咬西林和万 古霉素的耐药性须孵育 24h。2、（K-B法）原理：将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测 试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后 不断向纸片周围扩散，形成梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度周 围细菌生长被抑制，从而

15、形成无菌生长的透明圈或抑菌圈。抑菌圈的大小反应测试菌对测定药物的敏感性，并与该药对测试 菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关3、纸片扩散法（K-B法影响因素：）1.培养基：培养基的质量 如 pH、硬度、湿度、深度。2.药敏纸片：药敏纸片的含药量、药 敏纸片的保存和厚薄。3.接种菌量4.试验操作质量：孵育条件和温度、时间，抑菌圈测量工具精确度。P158 4、稀释法 （稀释法是定量测定抗菌药物抑制细菌生长 作用的体外方法分肉汤稀释法和琼脂稀释法）稀释法测得的莫 抗菌药物能抑制待测菌肉眼可见的最低生长的最低药物浓度称 为最低抑菌浓度（MIC）,为体外药敏实验中衡量细菌对抗菌药 物敏感性的指标。P160

16、 5、E-实验E实验室一种结合稀释法和扩散法的原理和 特点测定微生物对抗菌药物敏感度的定量技P160 6、联合药物敏感试验：体外联合药物敏感试验的意义：1）治疗混合性感染；2）预防或延迟细菌耐药性的发生；3）联合用药可以减少剂量以避免达到毒性剂量；4）联合用药比单一用药时常常效果好6.1 抗菌药物联合用药由现的四种结果（ 1）拮抗作用（2） 无关作用：两种药物联合作用活性等于单独活性（3）协同作用：两种药物联合作用显著大于单独的总和第九卓微生物检验质M保证与生物安全P177 1、培养基的一般质量控制：（1 ）外观：每种培养基均应标注清楚，体液培养基无浑浊，固体培养基应无菌落生长，不 干裂。（2

17、）无菌试验：培养基制作完成后，应检测每批培养基 的灭菌效果，无菌生长为合格。（3）培养基的量：斜面培养基的长度为试管长度的 2/3 ,双塘铁培养基底层至少有1cm的直立段。MH¥板的厚度为 4mm即直径为 90mml勺平皿，注入25ml 的培养基即可。其他平板厚度二般为3mm在90mm直径的平皿中注入1520ml的培养基。（4）培养基pH:配制好的培养基 pH应与规定的pH相差± 0.2匹内。（5）性能试验：每一批新配 制的、新购入的培养基，均应用已知性质的标准菌株进行预测， 合格方可使用。2灭菌器：最好在温度计上装好温度记录装置，或用生物指示 剂嗜热脂肪芽胞杆菌的培养液或

18、菌片，化学指示剂如变色的指 示剂等监视灭菌效果P188 3、生物安全水平及适用范围：一级生物安全防护实验室BSL-1:是微生物基础实验室，进行试验用的都是最低等级的污染物或安全的微生物，并且完全 符合标准实验室操作，如枯草芽泡杆菌等。二级生物安全防护实验室BSL-2:适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物，属于第 三类病原微生物的如：沙门菌属、 乙型肝炎病毒等的试验操作。进行规范的此等级的实验操作， 试剂需放在开放的台面上，特别注意带上口罩、隔离衣、手套 等三级生物安全防护实验室BSL-3:操作对象一般是可以经呼吸道传播的危险微生物，如：结核分枝杆菌。四生物安全防护实验室级BSL-4:进行试

19、验研究的物质是一些非常高危险性并且可以致命的有毒物质，可以通过空气传播 并且现今并没有有效的疫苗或者治疗方法来处理，如：由血热病毒。第十卓医院感染1、医院感染（NI）又称医院获得性感染：是指感染来自医院或 医疗机构，包括在医院获得而生院后才发现的感染，但不包括 入院前已经感染或入院时处于潜伏期的感染。探视者在医疗机 构获得的感染，工作人员的职业性感染也属于医院感染，入院 48h后发生的感染通常认为是医院感染191 2医院感染病原体特点（1）大多数为条件致病微生物（2）多数病原菌对抗菌药物具有耐药性或多重耐药（3）免疫功能低下患者可以感染多种病原体（4）病原体以细菌最多见，真菌感染明显增多第H一

20、旗血液感染P200 1 ,血培养的指征：当患者发热（大于或等于 38 C）,或 低体温（小于或等于36 C）时，或外周白细胞计数超过10*10八9/L（特别是存在核左移时），或绝对粒细胞减少（成熟中 性粒细胞计数少于1*10A9/L ）或合并有明显感染症状体征和伴 有感染病灶存在时，就应该采血进行血液细菌培养。怀疑有脓 毒血症的患者应尽早血液细菌培养。P201 2如何正确的血液标本的采集（1）采血时机：理想的血液细菌培养应该是在患者接受抗生素治疗之前进行，细菌 入血大约在1h发生寒战，故采集血培养应尽可能在患者寒战或 发热前。（2）采血部位：应行经皮外周静脉穿刺采血，常使用1%2%J碘伏进行皮

21、肤消毒。（3）采集分数：对每名患者应至少从不同部位采集血培养23份，这样可以提高检测阳性率。 对怀疑亚急性感染性心内膜炎的患者，应间隔 1h, 连续采集3分血进行培养。要同时使用需氧和厌氧培养瓶，分 别注入。（4）采血量： 通常采血量应是培养基 1/5或1/10 ,成人患者每次最后采集1015ml,血液注入一个血培养瓶。对于儿童患者，最好使用儿童专用培养瓶，每瓶至少注入血液 15ml.。（5）血培养瓶的使用：根据不同的血培养方法，采集到的血液标本应立即注入血培养瓶或含有聚茴香磺酸钠即 SPS的无菌容器中。并尽快培养。（脑膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌 和厌氧消化链球菌不能用）的无菌容器中，并尽快进行培

22、养。）无论是否已注入血液标本，血液培养瓶均不应冷藏或冷冻保存。 为了同时检生厌氧菌，可同时培养。P202 3、血液标本的细菌学检查全自动法 全自动血培养仪的检测原理：微生物在生长过程中消耗培养基内的营养物质 产生二氧化碳，通过 CO2感应器反映二氧化碳浓度变化，以此 判断瓶内有无微生物生长，也可观察瓶内细菌培养生长曲线。，检测方法：（1）放射性细胞标记法，（2）特异性CO2感受器培 养（3）荧光检测培养第十二卓中枢神经系统感染1,中枢神经系统感染的细菌真菌检查标本采集（收集脑脊液5ml10ml,分装于3支无菌小瓶中立即送检。取第二 支或最浑浊的一支做微生物学检查。）标本采集后应在常温下立即送检

23、，培养脑脊炎奈瑟菌，流感嗜血杆菌等苟养菌时， 应将标本置于35*C保存送检。用于常规细菌检测的脑脊液 量应1ml或大于1ml;用于检测抗酸菌的脑脊液量应为5ml或大于5ml2、直接图片检查：流行性脑脊髓膜炎患者可取皮肤瘀点渗 由液图片检查，若为革兰阴性双球菌，肾形或咖啡豆样，凹 面相对，为于白细胞内外，则提示脑膜炎奈瑟菌感染 第十三旗皮肤及软组织感染1皮肤及软组织感染细菌学检查标本采集：a封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取脓液和脓肿壁标本置于厌氧运送培 养基内送检 &b 放线菌感染标本： 选取流由脓液的硫“硫磺 样颗粒”置于无菌试管内送检。第十四旗呼吸系统感染急性上呼吸道感染约有 7

24、0唯U 80灿病毒引起。2、痰液标本的采集法中的气管镜采集法：通过支气管镜用保护性导管支气管刷采取的呼吸道标本，受上呼吸道菌群污染的 可能性最小，最适合进行细菌培养（包括需氧与厌氧培养）。3、上呼吸道标本的检查方法（1）、直接图片检查（2）分离培养：常规接种血平板、巧克力平板及麦康板平板。4、痰液标本的检查方法【 一般细菌、真菌涂片检查目的是 确定标本是否适合做细菌培养，采用标本直接涂片镜检，依据 在低倍视野中鳞状上皮细胞 <10个，或白细胞>25个，同时几乎 见不到鳞状上皮细胞为符合要求的痰标本，否则视为不合格痰 标本初步判定是否有病原菌存在】。第十五章胃肠道感染 消化道感染病及

25、临床特征常 见疾病崎床特征食物中毒餐后半小时至48h可出现腹痛、恶心、呕吐、 丽等症状。有些表现为神经系统症状，如 头痛、怕冷、贪贰、乏力、瞳孔散大、视力模糊、 吞咽及呼吸困难等霍乱 腹泻是发病的第一个症状， 其特点为无发热， 急后重感，多数不伴腹痛，起初大便含粪质， 后为黄色水样便或“米沿水”样便；喷射状呕吐。 不同程度的脱水、肌肉痉挛、低血钾、尿毒 症、酸中毒及循环衰竭等病毒性腹 泻腹泻呕吐。轮状病毒性腹泻秋冬季发生率最 高，夏季发病率较低、水样便、发热者多为低热伤寒高热且持续不退；食欲不振，舌尖与舌缘的 年病红，即伤寒舌。 腹胀，多有便秘，少数 则以腹泻为主，右下腹可后轻度压痛， 重者可

26、启 昏迷或由现脑膜刺激征，脾月底。结肠炎黏液便及脓血便样腹泻，重者数十次或腹泻 与便秘交替由现，左下腹或下腹阵痛，严重便秘， 还可有腹胀、消瘦、乏力、肠鸣、失眠、多梦怕 冷等症状细菌性痢 疾发热腹痛、黏液脓血样腹泻、里急后重。中毒型急性发作时， 可由现高热、感染性休克症 状，启时由现脑水肿和呼吸衰竭1.消化道感染细菌的检测方法：直接涂片检查：粪便标本中由于含有大量的正常菌群，在直接涂片上根据其染色性和形态 无法区别病原菌，故一般不做直接涂片检查。2 .分离培养与鉴定：常规粪便培养，同时选用肠道强选择性培 养基（ss平板或XLD或H日和弱选择性培养基（如 Mac或EM或中国蓝平板）3 .与抗生素

27、相关性腹泻（ADD有关的病原菌主要有：艰难梭菌、金黄色葡萄糖菌、产气荚膜梭菌等。4 .葡萄球菌：将怀疑为金黄色葡萄球菌的感染的黄绿色水样粪 便，接种高盐甘露醇培养基或高盐卵黄平板培养。第十七章泌尿系统感染1 .膀胱穿刺法：常采用耻骨上膀胱穿刺抽取尿液法，该方法是 目前判断膀胱内有无细菌感染的金标准，常在怀疑厌氧菌感染 时采用。用于怀疑厌氧菌感染。2 .怀疑结核分枝杆菌感染时用 集尿法采集。3 .尿液中一般细菌及假丝醉母菌培养菌落计数>105CFU/ml提示可能为泌尿系统感染。第十八章生殖系统感染1 、培养法是WHO1I荐的淋病筛查的唯一方法，也是实验室诊断的“金标准”。2 .脑脊液VDR

28、L（性病研究实当佥室实验）实验有助于神经梅毒的 诊断。神经梅毒脑脊液检查淋巴细胞Lo3 .淋病奈瑟菌、衣原体、生殖道支原体、杜克嗜血杆菌的分离 培养是淋病、生殖道沙眼衣原体感染、生殖道支原体感染、软 下疳实验室诊断的“金标准”，阳性者可确诊。4 . 梅毒的实验诊断：神经梅毒脑脊液检查淋巴细胞 高0X10A6/L ,蛋白>50mg/dl阴道分泌物湿片高倍显微镜下可 见有成簇吸附小杆菌、细胞边缘晦暗、呈锯齿形的上皮细胞即 线索细胞，提示可能为细菌性阴道病。第二十章先天及新生儿感染1.孕期妇女的TORCH勺检测成为优生优育最主要的检测项目。 “T”代表弓形虫、“R”代表风疹病毒、“C”代表巨细

29、胞病毒、 “H”代表单纯疱疹病毒、"O'代表其它的感染因素。第二十二章球菌1 .肺炎链球菌：在平板上形成灰白色、 圆形、扁平的细小菌落， 若培养时间过长可因产生自溶酶而形成脐状凹陷。2 .血标本应先增菌培养、脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物直 接接种平板，金黄色葡萄球菌在周围有透明（ B）溶血环。3 . A群链球菌（也称化脓性链球菌）：治病力强，引起急性呼吸 道感染、丹毒、软组织感染、猩红热等，还可致急性肾小球 肾炎，风湿热等变态反应性疾病。4 . B群链球菌（又称无浮链球菌）：引起新生儿败血症和脑膜炎。5 .草绿色链球菌：引起亚急性细菌性心内膜炎。6 .抗链球菌溶素 O试验常

30、用于风湿热的辅助诊断。7 .脑膜炎奈瑟菌： 引起化脓性脑脊髓膜炎菌血症期取血液，有由血点或瓶阮者取瘀斑渗生液，由现脑商新激症状 时取脑脊液。上呼吸道感染、带菌者取鼻咽分泌物。置 35 培养24h。（3）直接显微镜检查：脑脊液离心，取沉淀物涂片， 或取瘀斑渗河东涂片做革兰染色或美蓝染色镜检。如在中性粒细胞内、外有格兰阴性双球菌，可作由初步诊断。阳性率 达80%&右。0）血液或脑脊液标本先经血清肉汤培养基增菌 后，在接种巧陶平板，5%CO潴养。分离培养：肠球菌 分为天然耐药性和获得耐药性。8 .淋病奈瑟菌：（。引起性传播疾病淋病 直接显微镜检查脓 性分泌物涂片，里兰染色镜检。如在中性病前胞

31、内发现有革 兰阴性双球菌时，结合临床症状可初步诊断。男性尿道分泌 物阳性检生率可达 98%女性较低，仅50%-70% （3）分离培 养：细菌培养仍是目前世界卫生组织推荐的筛选淋病患而隹一可靠的方法。标本应接种于预温的巧克力平板，5%-10%CO2培养。为提高阳性率，常采用含有万古霉素、多黏菌素、制 霉菌素等多种抗菌药物的选择性培养基（MTM MD。9 .淋病奈瑟菌与脑膜炎奈瑟菌的鉴别：色主要特征：革兰阴性球菌，肾性或咖啡豆状，成双排列，凹湎E列，常位于中 性粒细胞内外。 氧化酶与触酶阳性，脑膜炎奈瑟菌分解 葡萄糖、麦芽糖产甑木产气；淋病奈瑟菌只分解葡萄糖，产 酸不产气。*9. CAM嗓验（原理

32、、方法、用途）：原理：无乳链球菌 能产生CAMF0子，它可促进金黄色葡萄球而血能力，使其产生显著的协同溶血作用。方法：实验时先将金黄色葡萄球菌（ATCC25923,沿直径划处种，再沿该线垂直方向接种无乳链球菌，两线不得相接，间隔约34mm 35 c孵育过夜，两种划线交界处由现箭头状溶血，即为阳性反应。 用途：本法可作为无氧链球菌的初步鉴定试验。肠球菌与化脓性链球菌的鉴别：（12/13）10 . PYR试验：是一种快速筛选鉴定试验，用于鉴定能产生 叱咯烷酮芳基酰胺酶的细菌，如肠球菌、化脓性链球菌、草绿 色气球菌和某些凝固酶阴性葡萄球菌等。11 .盐耐受试验：肠球菌能在含 6.5%NaCl的心浸液

33、肉汤中生12 .奈瑟菌生物学特性：为革兰阴性双球菌，需氧型，营养要 求高，需在含有血液、血清等培养基中生长，最适生长35C,最适PH7.4-7.6,5%CO2可促进生长，脑膜炎奈瑟菌在巧克力平 板上35c培养18-24h ,形成直径1-2mm圆形凸起，光滑湿润、 半透明、边缘整齐菌落，血平板上不要求比脑膜炎奈瑟菌更高， 只能在巧克力平板和专用培养基中生长。第二十三章肠杆菌科1 、肠杆菌科生物学特性：共同特性：革兰阴性杆菌，大小为0.3-1.0um x1-6um,无芽泡，有菌毛，多数有周身鞭毛。 需氧或兼性厌氧，营养要求不高，在普通培养基上生长良 好，血平板生长为灰白、湿润、光滑的菌落，在肠道选

34、择性 培养（MAC EMB SS）上，因乳糖分解或不分解，生长为不 同特征的菌落。生化反应活跃，发醉葡萄糖，氧化酶阴性（邻单胞菌除外），触酶阳性（痢疾志贺菌除外），能还原硝 酸盐为亚硝酸盐。肠杆菌科抗原构成主要的有菌体抗原（O抗原）、鞭毛抗原（H抗原）、表面抗原和菌毛抗原等； 表面抗原可阻断 O抗原与相应抗体之间的反应。肠杆菌科细菌抵抗力不强。大部分肠道致病菌不分解乳糖，在MAC 上形成无色。2 .肥达反应：（1）用来辅助诊断伤寒和副伤寒。通常伤寒沙门 菌。凝集效价兰1 : 80, H效价呈1 : 160;副伤寒A、B、C的H 效价兰1: 80有诊断意义。（2）需要动态观察。单次检测效价 增高

35、不能定论，应在病程中逐周动态复查。效价递增或恢复期 比初次效价兰4倍者有诊断意义。（3） O抗原刺激机体产生IgM 抗体，生现较早而在血清中存在时间较短。3 .志贺菌属的微生物学检验：标本采集分离培养：将标 本接种于 MAC/EMBSS, 35 c培养1824h观察结果，有无色半 透明菌落生长，应作进一步检查。鉴定：氧化酶阴性，KIA:KA,不产生月尿酶，动力阴性，IMViC为一/+ + o血清学鉴定：首先志贺菌属4种多价血清做玻片凝集试验，如凝 集，再进一步做血清定型鉴定。4 .鼠疫耶尔森菌 是烈性传染病鼠疫的病原菌，是我国甲类传染 病。（属肠杆菌科）5 .肠由血性大肠埃希菌：其主要血清类型

36、为O157:H7。6 .沙门菌属性生物学特性：大多数菌株因产生 H2S,在SS琼脂 上形成黑色中心的菌落。7 .沙门菌素标本采集：疑为伤寒、副伤寒可于第1周采集血液， 第2、3周取粪便，第3周取尿液，全病程取骨髓做培养。8 .急性细菌性痢疾：典型菌痢临床表现为腹痛、发热、水样便， 后转为脓血粘液便，伴里急后重。9 .志贺氏菌微生物学检验：标本采集、直接显微镜检查、分离 培养、鉴定（生化反应鉴别、血清学鉴定）。10 .变形杆菌的迁徙生长：在营养琼脂和血平板上普通变形杆 菌和奇异变形杆菌的大多数菌株可呈波纹薄膜状生长。11 .变形杆菌的鉴定：根据典型的迁徙现象，迅速分解尿素， 苯丙氨酸脱氨酶阳性，

37、 KIA为KA+ IMViC为-/ + + - ，可 鉴定为变性杆菌。12 .外-斐试验：临床上以变形杆菌 X菌株的O抗原与立克次 体病患者血清做定量凝集试验，辅助诊断立克次体病。13 .小肠结肠炎耶尔森菌为革兰阴性球杆菌，4-40 C均能生长，（4C增菌试验）。第二十四章 非发醉革兰阴性杆菌1 、铜绿假单胞菌的微生物学检验：（1）标本采集：不同的标本，如痰、伤口分泌物、尿液、脓及穿刺液、血液、脑脊 液、胸腹水、关节液。（2）直接显微镜检查：分泌物直接涂 片革兰染色镜为革兰阴性杆菌。（3）分离培养：将标本接种血平板，3537 C, 1824h,典型的铜绿假单胞菌落，中等 大小，表面菌属光泽。（

38、4）鉴定：产生水溶性蓝绿色、特殊 的气味、氧化酶试验阳性，作非发醉菌微量生化鉴定。（5）生物学特性：在血平板、麦康凯平板上形成的菌落表现为：扁平湿润、锯齿状边缘，常呈融合性生长，表面常可见金属 光泽。2 .不动杆菌 属为一群不发醉糖类、氧化酶阴性、硝酸盐还原 阴性、不能运动的革兰阴性杆菌。不动杆菌致病物质与所致疾病：不动杆菌广泛分布于自然界和医院环境中，是长期住院 患者第二位的非发醉革兰阴性杆菌，为条件致病菌。3 .非发醉革兰阴性杆菌：是一群不发醉葡萄糖或仅以氧化形式 利用葡萄糖的需氧或碱性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌；在分 类学上分别属于不同的科、属何种，但具有类似的表型特征， 如，多为需氧菌

39、，菌体直而细长，大小为（1-5） umx （0.5-1 ）um,绝大多数动力阳性，最适生长温度一般为30-37 C。（主要有假单胞菌属、不动杆菌属）4 .不动杆菌微生物学检验：鉴定：一些培养物经涂片、染色，如为革兰阴性成双排列的球杆菌，形态似奈瑟菌；KIL底层及斜面均不变色、无动力；氧化酶阴性，硝酸盐还原试验阴性， 可初步确定为不动杆菌属的细菌。5 .窄食单胞菌药物敏感试验：本菌对大多数临床常用的抗生素 如氨基糖昔类和很多B -内酰胺类（包括对铜绿假单胞菌很有效的抗生素，如碳青霉烯类）天然耐药主要与该菌存在一种锌 离子依赖金属B-内酰胺酶有关，但对甲氧节氨喀陡-磺胺甲嗯 嚏一般均敏感。6 .嗜

40、麦芽窄食单胞菌：鉴定：在血平板或麦康凯平板上生长良好；动力阳性；氧化酶阴性，氧化麦芽糖产酸，但氧化葡萄 糖较慢可产弱酸性反应；赖氨酸脱竣酶阳性、DNA酶阳性；一些菌株产生黄色色素；对碳青霉烯类抗生素天然耐药。生化反应特征：氧化酶阴性，DNA酶（这是将本菌与其他氧化分解 葡萄糖革兰阴性杆菌相区别的关键因素）和赖氨酸脱竣酶阳性，葡萄糖氧化分解缓慢，可快速氧化分解麦芽糖明胶水解试验阳 性，部分菌株（约占 39%）硝酸盐还原试验阳性；分解硝酸盐 产氮气阴性，精氨酸双水解酶实验阴性， 精氨酸双水解酶阴性， 鸟氨酸脱竣酶阴性，回噪生成阴性，一般不分解尿素。第二十五章弧菌属和气单胞菌属1 .古典生物型和El

41、 Tor生物型的不同生物学特征特征古典生物型El Tor生物型羊红细胞溶血D鸡红细胞凝集+V-P试验+多黏菌属B敏感试 验+IV组噬菌体裂解+V组噬菌体裂解+2 .副溶血弧菌：鉴定：在TCBS平板上形成绿色或蓝绿色菌落。3 .创伤弧菌：该菌引起的疾病最为严重。引起的菌血症和伤口 感染病程进展快而致命。4 .神奈川现象：从腹泻患者标本中分离到的95%上菌株在含人。型红细胞或兔红细胞的我萋培养基上可产生B-溶血现象5 .副溶血弧菌：副溶血弧菌是一种嗜盐性细菌，主要存在 于近海的海水和海产品种。是我国沿海地区最常见的食物中毒 病原菌。其主要通过菌毛的粘附， 产生耐热直接溶血素和耐 热相关溶血素两种致

42、病因子，THD有2个亚单位，能耐受100C、 10min不被破坏。动物实验表明有细胞毒性、心脏毒性和肠毒 性，可致人和兔红细胞溶血， 其致病性与溶血能力呈平行关系。 TRH生物学性与 THD相似。6 .微生物学检验：（1）标本采集：霍乱是烈性传染病，尽量在 发病早期，使用抗生素之前采集标本。可取患者“米沿水”样 便，亦可采取呕吐物或肛门拭子。（2）直接显微镜检查：图片染色镜检：取标本直接涂片两张。干后用乙醇或甲醇固定， 革兰染色。镜检有无“鱼群”样排列的革兰阴性弧菌。动力和制动试验：直接取“米沿水”样便制成悬滴标本，用暗视野或相差显微镜观察呈穿梭样运动的细菌。同法制备另一悬滴标 本，在悬液中加

43、入1滴不加防腐剂的多价诊断血清，可见最初 呈穿梭样运动的细菌停止运动并发生凝集，则为制动试验阳性。可初步推断有霍乱弧菌存在。（3）分离培养：将标本直接接种 于碱性腺水，或将运送碱性培养基的表层接种于碱性腺水 35 C、6-8h后，接种至TCBC平板或4号琼脂平板或庆大霉素 琼脂平板，35 C、12-18h观察菌落形态。在 TCBC平板上形成 黄色，4号琼脂或庆大霉素琼脂平板上呈灰褐色中心的菌落， 均为可以菌落。（4）鉴定：霍乱弧菌主要特征：革兰染色阳性、动力阳性，TCBC平板上形成黄色、4号琼脂或庆大霉素琼 脂平板上呈灰褐色中心的菌落，氧化酶阳性，发醉葡萄糖和蔗 糖，赖氨酸、鸟氨酸脱竣酶阳性精

44、氨酸双水解酶阴性，无盐培 养基上生长，在含有高于 6%M化钠的培养基上不能生长。7 .溶血弧菌的分离培养：可将标本直接接种于 TCBC平板或嗜盐菌选择平板，在TCBC平板上形成绿色或蓝绿色。8 .霍乱弧菌的生物学特性：霍乱弧菌为兼性厌氧菌，营养要 求不高，在普通琼脂上生成良好。16-44 C均可生长,37 c最适。具有耐碱性，在PH6.8-10.2 范围均可生长，在PH8.2-9.0的碱性蛋白陈水或碱性平板生长迅速。在TCBC选择性培养基上，发醉蔗糖产酸，菌落呈黄色。 在含有亚磷酸钾的选择 培养基上可将磷离子还原成磷，形成灰褐色菌落中心。在血平板上菌落较大可在无盐培养基上生成O131群霍乱弧菌

45、在含明胶的培养基上可形成不透明浅灰色菌落，周围有一圈不 透明带，有荚膜。第二十六章 弯曲菌属和螺杆菌属1 .弯曲菌属：为微需氧菌，多氧或无氧的环境下均不生长，最 适生长环境是5% 02、10%CO2 85%N2勺微氧环境。2 .常见弯曲菌的主要鉴定菌种鉴定特征马尿酸盐 水解25 C生长42 C生长空肠弯曲 菌空肠亚 种十一十大肠弯曲 菌一一十胎儿弯曲 菌胎儿亚 种一十一胎儿弯曲 菌性病亚 种一十一3 .螺杆菌属其他诊断方法：活检组织快速尿素酶试验（RUT）、 13C或14C标记尿素呼气试验（UBT）第二十七章苛养菌1 .卫星现象：将流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌共同培养时，因金黄色葡萄球菌能合成

46、较多的V因子，靠近金黄色葡萄球菌周围的流感嗜血杆菌菌落较大，距离越远的菌落越小，这 种现象称为卫星现象。2 .鲍特菌属：的所有菌种均为专性需氧菌。其中百日咳鲍特菌 对营养要求最为复杂，血培养基和巧克力培养基上均不能生 长，常用的培养基为 鲍一金培养基 （BG）。 军团菌属常 用的培养基是BCYEaW养基，不能在血平板上生长。3 .军团菌属：常用的是BCYE*养基，主要成分是活性炭醉母 浸由液，加上铁、L-半胱氨酸和a-酮戊二酸4 .嗜肺军团菌：在空调冷凝水中的检生率最高第二十八章需氧革兰阳性杆菌1 .炭疽芽胞杆菌：简称炭疽杆菌，是最早发现的病原菌，也 是芽胞杆菌属中致病力最强的一种，引起人、兽

47、共患的烈性传染病一一炭疽。边缘不整呈卷发状2 .串珠试验 将待检菌种于含 0.050.5U/ml青霉素的培养 基中35 c培养6h后，炭疽杆菌形态发生变化，菌体成为 大而均匀的圆球状成串排列，为炭3 .李斯特菌属：兼性厌氧，营养要求不高，普通培养基上即 可生长。在平板4 .上形成圆形、光滑的灰白色菌落，有狭窄B溶血环。在肉汤培养基中浑浊生长， 表面形成菌膜。在半固体培养基中 沿穿刺线向四周蔓延生长，形成倒伞状。能在4摄氏度条件下生长，可形成冷增菌5 .加特纳菌属：直接显微镜检查 革兰染色可见上皮细胞（细 胞浆呈红色，细胞核为蓝紫色）被大量革兰阳性或染色不定小杆菌覆盖，导致细胞边缘不清，称为线索

48、细胞6 .白喉棒状杆菌：所致的疾病白喉为急性呼吸道传染病。用亚甲兰、Albert法、Neisser法等染色可显示菌体有浓 染的异染颗粒，排列成念珠状或位于菌体两段，是本菌的形态鉴别特征。假膜：在黏膜局部定植并产生外毒素，引 起局部炎症和败血症，黏膜上皮细胞渗生的纤维蛋白和局 部细菌、炎症细胞、坏死组织凝结在一起形成灰白色膜成 为假膜。7 .微生物学检查：（1）标本采集：从疑似假膜的边缘采集分 泌物，未见假膜者采集鼻咽部或扁桃体粘膜分泌物。（2）直接显微镜检查：涂片、革兰染色，镜检发现革兰阳性棒 状杆菌，形态典型且有明显异色颗粒，可初步报告。（3）分离培养：标本分离可用亚硫酸钾血平板、血平板，纯

49、培 养用吕氏血清斜面。（4）鉴定：阳性；分解葡萄糖，麦芽 糖、半乳糖、糊精，不分解乳糖、甘露醇，重型迟缓分解 蔗糖，还原硝酸盐、不液化明胶，阻噪和月尿酶试验阴性。第三十章分支杆菌属1 .分枝杆菌属 是分枝杆菌科的唯一菌属。 根据其生物学特性和 致病性，可分为结核分枝杆菌复合群、非结核分枝杆菌和麻 风分枝杆菌2 .肺结核最可靠微生物方法分离培养。3 .结核分枝杆菌： 革兰染色不易着色，抗酸染色阳性。经萋 - 尼抗酸染色后，结核分枝杆菌呈红色，其他细菌和背景物资呈蓝色。有毒力的菌株在液体培养基中呈束状生长。实验室 常用酸或碱处理标本中的粘稠物质并杀死杂菌，以利于分离培养涂片镜检结果 应报告“找到抗

50、酸菌”或“未找到抗酸菌”， 而不能报告为“找到结核分枝杆菌”。4 .结核菌素试验：是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对 结核分枝杆菌是否产生 迟发性变态反应 的一种试验。利用机 体感染结核分枝杆菌后， 抗结核免疫与迟发型超敏反应同时 并存的原理，通过检测机体对结核菌素有无迟发型超敏反 应，从而了解机体是否有过结核分枝杆菌感染，或对结核分 枝，是否具有免疫力。5 .结核菌素试验：结核菌素是结核杆菌的菌体成分，有两种： 旧结核菌素（OT）和纯蛋白衍生物（PPD .目前都用PPD.PPD 有两种：结核分枝杆菌制成的 PPD-C和卡介苗制成BCG-PPD, 每0.1ml含五个单位。试验时，取0.1m

51、lPPD注射两前臂皮内，4872h后，红肿硬节超过 5mm#为阳性，表示感染 过结核分枝杆菌或接种过卡介苗，但不一定患结核 病：=15mmj强阳性，表示可能有活动性结核，应进行进一步检查；5mm#为阴性，表示未感染过结核分枝杆菌， 但应 排除原发结核病早期、老年人、严重结核病（如粟粒性肺结 核、结核性脑膜炎）或有其他严重疾病（如麻疹、淋巴瘤、 白血病、艾滋病）以及用免疫抑制剂等。此试验主要用于：1.选才i BCG接种对象及测定接种效果 2.作为婴幼儿结核病诊断的参考 3.在未接种BCG的人群中做 结核分枝杆菌感染的流行病学检查4.测定肿瘤患者的细胞免疫功能第三十一章厌氧菌1 .在临床厌氧菌感染

52、中，绝大多数是由无芽胞厌氧菌引起的内 源性感染。2 .厌氧菌感染的临床及细菌学特征：1.感染局部有气体产生2.发生在粘膜附近的感染3.深部外伤 4.有特殊的分泌物5.某些抗生素治疗无效的感染6.细菌学特征3 .培养方法：经接种的厌氧培养基应立即放入厌氧环境，置 35-37摄氏度条件下培养 48-72h。常用有厌氧罐（盒）培养 法、厌氧气袋法、厌氧手套箱培养法4 .厌氧手套箱 是目前国际上公认的厌氧菌培养箱最佳设备。5 .产气荚膜梭菌在牛乳培养基中，可产生大量气体将凝固的酪蛋白冲散形成蜂窝状，有“汹涌发醉”现象，可作为产气荚 膜梭菌的鉴定之一。6 .革兰阴性无芽胞厌氧杆菌的类杆菌属：包括脆弱内杆

53、菌、多形类杆菌、普通类杆菌、吉氏类杆菌、粪类杆菌、埃氏类杆 菌、屎类杆菌、卵形类杆菌、粪便类杆菌、单形类杆菌第三十二章螺旋体和支原体1.支原体一群没有细胞壁、介于细胞与病毒之间、能在人工培 养基中生长繁殖的最小的原核细胞型微生物，形态上呈高度多形性，最小个体直径 200以m左右，可通过滤菌器。性状支原体细菌L型形态多形性多形性大小0.2 0.3um0.6 1.0um细胞壁无无细胞膜含胆固醇不含胆固醇菌落油煎蛋状油煎蛋状通过滤器能能遗传性与细菌无关与原细菌相同回复成菌落不能台匕 目匕对青霉素不敏感不敏感致病性支原体肺炎等慢性感染2.血清学检查：1.非密螺旋体抗原试验 2.密螺旋体抗原试验 患者血、尿标本培3.养后，若培养基呈云雾状混浊，暗视野镜鉴有钩端螺旋体的群、型特异性血清鉴定菌群、菌型后，可报告：“培养由XXX 型钩端螺旋体”。如培养1个月仍无生长者，可报告“血（尿） 钩端螺旋体培养阴性”。人类主要支原体生物学性状支原