化学发光微粒子免疫分析法在梅毒血清学检测中的临床应用

1、化学发光微粒子免疫分析法在梅毒血清学检测中的临床应用廖冰洁,周迎春,何惠,郭卫真,卢东荣(广州中医药大学第一附属医院,广东广州510405摘要目的通过与梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST的对比分析,探讨化学发光微粒子免疫分析(CMIA法在梅毒螺旋体(TP感染血清学检测中的临床应用。方法用CMIA法对门诊和住院患者标本进行梅毒筛查,阳性标本进一步进行TPPA和TRUST检测。结果8560例血清标本经CMIA筛查共检出阳性283例。283例阳性标本经TPPA法检测阳性247例,阳性检出率为8727%;而TRUST检测172例,阳性检出率为6077%。TRUST检出

2、率与CMIA和TPPA比较有显著性差异(P均005;CMIA检出率和TPPA比较有显著性差异(P005。其中CMIA浓度1 5S/CO67例,TPPA和TRUST阳性分别为38例和7例;CMIA浓度5 10 S/CO35例,TPPA和TRUST阳性分别为30例和12例;CMIA浓度10S/CO181例,TPPA和TRUST阳性分别为179例和153例。结论CMIA敏感性优于临床常用的TPPA,重复性好,操作简便,可用于梅毒初筛,阳性标本应结合TP-PA及临床资料确诊;TRUST滴度可用于临床疗效观察。关键词梅毒螺旋体;化学发光微粒子免疫分析;梅毒螺旋体明胶凝集试验;甲苯胺红不加热血清试验中图分

3、类号R44661文献标识码B文章编号10088849(201304043302梅毒是由梅毒螺旋体(TP感染引起的性传播疾病,TP 又称苍白密螺旋体。近年来梅毒发病率有上升趋势,其传染性与危害性大,早期诊断、及时治疗已成为当前梅毒治疗中最为重要的问题1。为了控制梅毒的院内感染,卫生部已规定凡是手术、输血及各种创伤性检查的患者,均需进行TP特异性抗体的血清学检测。目前我院建立了用化学发光微粒子免疫分析(CMIA法进行梅毒筛查,阳性结果经梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA确证,并以甲苯胺红不加热血清试验(TRUST滴度为疗效观察的梅毒检测体系。现报道如下。1临床资料1.1标本来源本院2011年15月门

4、诊及住院患者血清标本8560例,男4682例,女3878例;年龄19 71岁,平均33岁。1.2仪器及试剂TRUST试剂由上海荣盛生物药业有限公司提供;TPPA试剂盒由日本富士株式会社提供;CMIA使用美国雅培i2000sR及其配套试剂,测试时试剂均在有效期内。1.3检测方法CMIA法对临床标本进行筛查,测得梅毒螺旋体特异性抗体(TPAb结果大于1S/CO为阳性(参考范围0 1S/CO,阳性标本进一步进行TPPA和TRUST检测;把TPAb含量按照10S/CO、5 10S/CO、1 5S/CO 分成高、中、低3个浓度血清,与TPPA和TRUST滴度检测结果对比分析。所有操作严格按照仪器及试剂盒

5、说明书进行,并加入相应质控物测。1.4统计学处理采用SPSS110软件进行统计学处理,计数资料比较用配对资料的 2检验。检验水准=005。2结果2.1CMIA筛查阳性标本TPPA和TRUST检测情况比较8560例标本经CMIA检测阳性283例占331%。283例中,TRUST阳性检出率为6077%(172/283,TPPA阳性检出率为8727% (247/283,2种方法比较有显著性差异(P005。2.2CMIA高、中、低浓度TPPA和TRUST阳性检出情况比较见表1。表1CMIA筛查阳性标本高、中、低浓度TPPA和TRUST检测结果比较例(%方法高浓度n阳性中浓度n阳性低浓度n阳性TPPA1

6、81179(98893530(85716738(5672 TRUST181153(84533512(3429677(10453讨论本试验显示我院门诊及住院患者术前、输血及各种创伤性检查的梅毒感染率为331%,人体感染梅毒螺旋体后血清中产生的抗螺旋体特异性抗体相比非螺旋体特异性抗体出现早、消失迟,即使经过正规抗梅毒治疗仍可检测出其特异性抗体,甚至可终生检出。非特异性抗体受多种因素影响,很多因素会造成非螺旋体检查的假阳性,诸如一些其他的感染性疾病诸如疟疾、结核和麻风等2。由于疾病早期人体对螺旋体的体液免疫主要以IgM为主,其后再出现IgG和IgA,而非螺旋体抗体多检测的是IgG抗体,故在疾病早期,

7、TRUST常显示阴性结果,造成假阴性。本试验显示:CMIA检测浓度在1 5 S/CO时TRUST阳性检出率仅1045%,与理论相吻合。CMIA筛查阳性标本,TRUST阳性检出率为6077%,与文献34报道基本一致。TRUST的敏感性和特异性均低于TP-PA和CMIA法,加上TRUST方法不易于自动化,其结果判断存在主观性,已不适合作为梅毒的筛查方法,但其滴度可作为临床疗效观察的指标。TPPA是目前临床最为常用的梅毒检测试验,除对期梅毒(初期梅毒敏感性稍低外,对其余各期梅毒敏感性和准确性均较高5。本研究结果可看出CMIA检测浓度在1 5 S/CO时,TPPA阳性检出率仅为5672%,支持上述观点

8、。由于TPPA操作较为繁琐,检测时间较长,不适合大批量检测,结果判断常有主观性等原因,故有其使用的局限性。CMIA检测梅毒抗体是近年来应用的一项新方法,由于CMIA使用全自动重组TP抗原(TPN15、TPN17和TPN47包被微粒子检测血清抗体,可大大降低假阳性,真正两步骤免疫测定法,避免钩状效应,且可同时检测IgG和IgM,减少假阴性。有报道CMIA检测各期梅毒患者梅毒抗体的敏感性均较高,为987% 1000%,特异性为999%6。从以上试验也可看出CMIA敏感性高于TPPA,尤其是低含量标本,差异更明显。CMIA检测时具有快速和高通量的优点,有利于大量标本的筛查,可为梅毒血清学诊断试验的首

9、选筛查方法。由于梅毒患者在不同分期梅毒抗体出现早晚有差异,故应同时检测梅毒非特异性抗体与特异性抗体,以防止梅毒患者的漏诊7。在临床应用中,CMIA可与非梅毒螺旋体血清试验如TRUST进行联合检测;并对CMIA阳性结果进TPPA复查,对不一致的结果再与临床沟通,以便为临床提供准确的结果,尽量减少医患纠纷。参考文献1Vardas P,Marketou MCRP in no n dippers:new perspectives andold queriesJJ Hum Hypertens,2008,22(7:4474492尹建奇,李晓娥,刘平英,等2592份血清中梅毒血清学生物学假阳性结果的临床分析

10、J中国皮肤性病学杂志,2001,15(5:3173183李金明临床酶免疫测定技术M北京:人民军医出版社,2005:1374宋继权,盛晚香,冯谊,等ELI SA在梅毒血清学诊断中的应用J中国皮肤性病学杂志,2000,14(3:2582595王华,李代渝,雷丽明梅毒螺旋体血清学检测方法比较J中华检验医学杂志,2007,30(6:6606616Marangoni A,Sambri V,Accardo S,et alEvaluation of Liaisontreponem a screen,a novel recombinant antigen-based chemilum in-escence i

11、mmunoassay forlaboratory diagnosis of syphilisJClinDiagn Lab Immunol,2005,12(10:123112347Cottone S,Mule G,Nardi E,et alRelation of Creactive protein tooxidative stress and to endothelial activation inessential hypertensionJAm J Hypertens,2006,19(3:313318收稿日期20111210康复科住院患者尿路感染病原菌的分布及其耐药性李玉敏,魏宏莲,时东彦(

12、河北医科大学第二医院,河北石家庄050000摘要目的了解康复科住院患者尿路感染病原菌的分布及其耐药情况。方法收集住院患者尿培养结果,并采用WHONET56软件对结果进行统计分析。结果共分离出152株病原菌,分别为大肠埃希菌72株(474%,肠球菌20株(132%,肺炎克雷伯菌16株(105%,铜绿假单胞菌16株(105%和酵母菌4株(26%。革兰阴性杆菌对头孢呋辛、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星和复方新诺明的耐药率较高;肠球菌属对大多数常用抗菌药物表现出较高耐药性。结论革兰阴性菌是住院康复患者尿路感染的主要病原菌;耐药菌株特别是多重耐药菌株增加较快。关键词尿路感染;病原菌;耐药性;康复中图分类号

13、R4465文献标识码B文章编号10088849(201304043402尿路感染是泌尿系统最常见的疾病,目前已成为医院内常见的感染之一,其发病率仅次于呼吸道感染和术后伤口感染1。尿路感染常严重影响住院患者的康复治疗。如果使用抗生素不合理或治疗不彻底,细菌的耐药程度将增加,这样会导致多重耐药菌株的出现和迅速扩散2,给患者的康复治疗带来困难。为了解我院康复科患者泌尿系感染病原菌分布及对抗菌药物的耐药情况,现对2010年1月2011年12月我院康复科住院患者送检的尿标本进行细菌培养和常规药敏试验,对病原菌的分布及其耐药性进行统计、分析。旨在通过回顾性分析住院患者尿路感染病原菌的分布及其耐药性,为临床

14、合理选择抗生素提供依据,提高患者的康复治疗效果。1临床资料1.1菌株来源菌株来自2010年1月2011年12月康复科住院患者送检清晨中段尿培养。嘱患者留取晨起第1次中段尿,女性均要求清洗外阴部后留取标本(避免污染,标本置于无菌小瓶中立即送检。1.2菌株的分离培养每份标本混匀后分别取10L接种血平板、麦康凯、沙氏培养基,置35培养箱孵育18 24h,做菌落计数和菌株鉴定。如在血平板上培养到革兰阴性菌菌落数105cfu/mL,革兰阳性菌菌落数104cfu/mL,若细菌培养有致病菌生长,且菌落计数革兰阳性球菌104cfu/mL 或革兰阴性杆菌105cfu/mL,且超过2次培养出同一细菌即认定是细菌培养阳性标本(当有2种致病菌生长时,选计数