实验四红细胞抗体吸收试验

1、实验八 红细胞抗体吸收试验Erythrocyte antibody absorption test一、检测原理 1.一定稀释度的抗体加入已知抗原的红细胞（检测抗体）一定稀释度的抗体加入已知抗原的红细胞（检测抗体） 或被检红细胞加入已知效价的特异性抗血清（检测红细胞或被检红细胞加入已知效价的特异性抗血清（检测红细胞抗原）抗原） 2.溶液中的抗体就会结合到红细胞上，离心后将经过抗原溶液中的抗体就会结合到红细胞上，离心后将经过抗原吸收的血清和红细胞分开。吸收的血清和红细胞分开。 3.将吸收前、后的血清倍比稀释再与已知抗原的红细胞共将吸收前、后的血清倍比稀释再与已知抗原的红细胞共同温育，检查血清和红细

2、胞中抗体效价是否降低或消失。同温育，检查血清和红细胞中抗体效价是否降低或消失。若明显降低或消失，证明抗体已被红细胞吸附，血清中含若明显降低或消失，证明抗体已被红细胞吸附，血清中含有与红细胞抗原相对应的抗体，或被检红细胞血型与加入有与红细胞抗原相对应的抗体，或被检红细胞血型与加入的已知抗原的红细胞相同。的已知抗原的红细胞相同。 二、仪器和试剂【器材】尖滴管、刻度吸管、小试管、离心机。【标本】静脉血。【试剂】1标准抗A、抗B血清。22% A型及B型红细胞生理盐水悬液。3生理盐水。三、实验步骤n采集静脉血采集静脉血23mln分离血标本分离血标本: 分离出血清和红细胞，分别作好标记分离出血清和红细胞，

3、分别作好标记 .n制备压积红细胞制备压积红细胞 将患者红细胞用生理盐水洗涤将患者红细胞用生理盐水洗涤3次，次，离心后弃去上层液。离心后弃去上层液。n标定抗血清标定抗血清 将标准抗将标准抗A（抗（抗B）血清倍比稀释，分别加入等量）血清倍比稀释，分别加入等量2% A型型及及B型红细胞生理盐水悬液，室温下反应型红细胞生理盐水悬液，室温下反应15min后，后，1 000r/min离心离心 1min，观察凝集结果。选择出现（）凝集强度最高的，观察凝集结果。选择出现（）凝集强度最高的1管稀释度管稀释度作为抗作为抗A（抗（抗B）吸收用作标定血清（一般应稀释到）吸收用作标定血清（一般应稀释到1 32）。）。

4、姓名血浆姓名血球压积RBC抗A标定抗A标定已准备好2%ARBC2%BRBC三、实验步骤抗体吸收：抗体吸收：n取取2支小试管，分别标记抗支小试管，分别标记抗A、抗、抗B。 n按标记分别加入抗按标记分别加入抗A、抗、抗B标定血清标定血清0.5ml。n分别加入被检者压积红细胞分别加入被检者压积红细胞0.5ml。 n混匀，混匀，4放置放置1h，每，每10min摇动摇动1次，使其充分接触次，使其充分接触 n1 000r/min离心离心3min后，将上清液分别移入另后，将上清液分别移入另2支试管，并支试管，并标记抗标记抗A吸收液和抗吸收液和抗B吸收液吸收液。 抗A标定抗B标定0.5ml0.5ml0.5ml

5、压积RBC0.5ml压积RBC4放置1h1 000r/min离心3min抗B吸收液抗A吸收液三、实验步骤n抗体鉴定：抗体鉴定：20支小试管支小试管12340.2mln.s0.2mln.s0.2mln.s0.2mln.s0.2mln.s抗B吸收液0.2ml抗A吸收液0.2ml未吸收抗A标定液0.2ml未吸收抗B标定液0.2ml0.2 ml2 : 4 : 8 : 16 : 320.2 ml0.2 ml0.2 ml0.2ml2%A型RBC0.2ml2%B型RBC混匀，1000r/min，1min，观察四、结果判断：吸收后抗体效价较吸收前降低2个滴度以上（Am亚型除外）者为阳性 n吸收后抗吸收后抗A效

6、价较未吸收抗效价较未吸收抗A效价显著降低或消失为效价显著降低或消失为A型型 n吸收后抗吸收后抗B效价较未吸收抗效价较未吸收抗B效价显著降低或消失者为效价显著降低或消失者为B型型 n吸收后抗吸收后抗A及抗及抗B效价都较未吸收抗效价都较未吸收抗A及抗及抗B效价显著降低者为效价显著降低者为AB型型 n吸收后抗吸收后抗A及抗及抗B效价较未吸收抗效价较未吸收抗A及抗及抗B效价无明显差异者为效价无明显差异者为O型。型。n如试验的目的是鉴定如试验的目的是鉴定A亚型，则按被检红细胞的吸收强度亚型，则按被检红细胞的吸收强度A1A2A3AXAm规律来判定规律来判定 五、报告方式n本人血型为：六、注意事项n抗抗A、抗、抗B血清应标定，其效价不宜过高，应血清应标定，其效价不宜过高，应先将抗血清的效价稀释到先将抗血清的效价稀释到1 32为宜。因为抗为宜。因为抗血清抗体效价太高，抗血清中的抗体被亚型红血清抗体效价太高，抗血清中的抗体被亚型红细胞吸收后，效价下降不明显，难以判断结果细胞吸收后，效价下降不明显，难以判断结果 n洗涤红细胞时生理盐水应尽量除尽，以免抗血洗涤红细胞时生理