分光光度法测铁3

1、分光光度法测铁分光光度法测铁一、一、 实验目的实验目的二、二、实验原理实验原理 在在 pH=911.5 的的 NH3.H2O-NH4Cl 溶液中溶液中，Fe3+与与磺基水杨酸反应生成磺基水杨酸反应生成组成比组成比1:3的黄色的黄色稳定稳定配合物配合物。Fe3+3COO-OHSO3-Fe36-COO-O-SO3-+ 3 H+(黄色配合物) 该该配合物在碱性溶液中的最大吸收波长为配合物在碱性溶液中的最大吸收波长为 420 nm，可在此波长下测量吸光度可在此波长下测量吸光度，由朗伯，由朗伯-比耳定律计算铁含比耳定律计算铁含量。量。（1 1）分光光度计仪器结构）分光光度计仪器结构三、分光光度计的使用方

2、法三、分光光度计的使用方法（2 2）分光光度计使用方法）分光光度计使用方法 通电通电-仪器自检仪器自检-预热预热20 min； 用用键设置测试模式为透射比（键设置测试模式为透射比（T）MODE MODE 键键透射比（透射比（T T） 波长选择：用波长调节旋钮设置所需的波长波长选择：用波长调节旋钮设置所需的波长 调零调零 打开样品室盖，在打开样品室盖，在T方式下按方式下按“0%”键，此时仪键，此时仪器自动校正后显示器自动校正后显示“0.000”。“0%”键键T T模式模式 调满调满 在比色皿槽中，依次放入参比液，样品液在比色皿槽中，依次放入参比液，样品液1 1和样品液和样品液2 2等，盖上样品室

3、盖等，盖上样品室盖( (注意透光截面垂直于光路方向注意透光截面垂直于光路方向) )。参比液参比液样品液样品液1 1样品液样品液2 2样品液样品液3 3 将参比液拉入光路中，按将参比液拉入光路中，按“100%T”键调键调T为为100%，此，此时仪器显示时仪器显示“BLA”，表示仪，表示仪器正在自动校正，校正完毕后器正在自动校正，校正完毕后显示显示“100.0”。 样品测定：样品测定： 将将MODE转换为转换为“ABSORBANCE”，显色屏读数，显色屏读数为为0.000，然后将样品液分别拉入光路中，此时显示，然后将样品液分别拉入光路中，此时显示测得的样品吸光度。测得的样品吸光度。分光光度计的使用

4、注意事项：分光光度计的使用注意事项： (1) 比色皿的清洁程度，直接影响实验结果。因此，比色皿的清洁程度，直接影响实验结果。因此，特别要将比色皿清洗干净。装样前处理：自来水反复冲特别要将比色皿清洗干净。装样前处理：自来水反复冲洗洗蒸馏水漂洗蒸馏水漂洗2次次待装溶液漂洗待装溶液漂洗2次。必要时，需用次。必要时，需用浓硝酸或铬酸洗液短时间浸泡。浓硝酸或铬酸洗液短时间浸泡。 用完后用自来水和蒸馏用完后用自来水和蒸馏水洗净并用檫镜纸檫干放回比色皿盒中。水洗净并用檫镜纸檫干放回比色皿盒中。 (2) 拿放比色皿时，应持其拿放比色皿时，应持其“毛面毛面”，不要接触，不要接触“光光面面”。光面光面毛面毛面（3

5、）若比色皿外表面有液体，应用擦镜纸朝同一方向）若比色皿外表面有液体，应用擦镜纸朝同一方向拭干，以保证吸光度测量不受影响。拭干，以保证吸光度测量不受影响。 (4) 比色皿内盛液应为其容量的比色皿内盛液应为其容量的2/3，过少会影响实，过少会影响实验结果，过多易在测量过程中外溢，污染仪器。验结果，过多易在测量过程中外溢，污染仪器。容容量量的的2/32/3 (5) 比色皿的光面要与光源在一条线上。比色皿的光面要与光源在一条线上。光透过窗口光透过窗口四、实验步骤四、实验步骤 取系列取系列50 mL容量瓶容量瓶并编号，按下表配制系列溶液。并编号，按下表配制系列溶液。以以试剂空白试剂空白作参比溶液作参比溶液，在，在420 nm波长下波长下测定测定各溶液各溶液的吸光度。的吸光度。xA 以