有毒化学物质检验

1、动物性食品中有毒化学物质检验有毒化学物质种类o农药o兽药o生物毒素o重（类）金属o添加剂o环境化学物检验的基本程序检验的基本程序o样品的采集o样品的前处理o样品分析（方法的选择及评价）o数据分析一、取样程序一、取样程序 采样原则采样原则：样品对总体应有充分的代表性：样品对总体应有充分的代表性 总体总体（population)population)：具有相同属性的被：具有相同属性的被检验的食品的总和检验的食品的总和 样品样品（sample)sample)：从总体中抽出的作为总：从总体中抽出的作为总体的代表参加检验的一部分食品体的代表参加检验的一部分食品 1、取样类型（方法）、取样类型（方法） 选

2、择性取样选择性取样：（有目的地）（有目的地） 当观察到不能令人满意的状况并想据当观察到不能令人满意的状况并想据之为物证时；或是为实验室分析提供怀疑之为物证时；或是为实验室分析提供怀疑有掺杂的或缺陷的一个单位食品时。有掺杂的或缺陷的一个单位食品时。客观性取样（客观性取样（随机取样）：随机取样）：能真实地反映总体质量，保持客观性。能真实地反映总体质量，保持客观性。子样子样( (小样小样):):来自于总体来自于总体, ,能够代表总体能够代表总体 性质和质量的一部分或最小包性质和质量的一部分或最小包 装单位。装单位。原始样品原始样品：质量相同的能够代表该批食：质量相同的能够代表该批食 品的小样品的小样

3、, ,混合在一起混合在一起( (或均质或均质后后) )称为原始样品称为原始样品 平均样品平均样品：按按“四分法四分法”缩分后的样品，一缩分后的样品，一般不少于全部检验项目用量的四倍。一份般不少于全部检验项目用量的四倍。一份为检验样品，一份保留样品，一份复验样为检验样品，一份保留样品，一份复验样品。品。留留弃弃四分法：四分法：混匀的粉体或固体颗粒铺平后成大混匀的粉体或固体颗粒铺平后成大致的正方形致的正方形(圆），然后划对角线，取对角圆），然后划对角线，取对角的两份。的两份。2、取样注意事项、取样注意事项 （1 1）须有代表性）须有代表性（2 2）应弄清基本情况）应弄清基本情况货主、来源、种类、批

4、货主、来源、种类、批次、生产日期、总量、次、生产日期、总量、包装堆积形式、运输情包装堆积形式、运输情况、贮存条件况、贮存条件（3 3）子样原始样品平均样品子样原始样品平均样品分析留样分析留样缩分缩分（4 4）一切采样工具均清洁、干燥、无异味。）一切采样工具均清洁、干燥、无异味。微生物检查时应无菌取样。微生物检查时应无菌取样。 检验某些项目时，还应注意特殊要求。检验某些项目时，还应注意特殊要求。如黄曲霉毒素检验时，应避免阳光、紫外如黄曲霉毒素检验时，应避免阳光、紫外线的照射；铅测定时，应先对容器去铅处线的照射；铅测定时，应先对容器去铅处理等。理等。盛放容器？盛放容器？ 干燥洁净密闭的干燥洁净密闭

5、的玻璃、聚乙烯瓶玻璃、聚乙烯瓶/袋袋（5 5）采样后贴上标签。）采样后贴上标签。 封口，以防调换、污染、降解。封口，以防调换、污染、降解。 速送实验室保存速送实验室保存( (不及时检测须冷藏不及时检测须冷藏/ /冷冻冷冻) )。 采样后到检验时，样品不能发生明显的特采样后到检验时，样品不能发生明显的特性改变。性改变。样品名、编号、批号、样品名、编号、批号、取样日期地点、取样人取样日期地点、取样人3、样品采集方法、样品采集方法采样工具：采样工具： 依据食品的形态如液体、固体颗粒依据食品的形态如液体、固体颗粒或粉状等采用不同的采样工具或粉状等采用不同的采样工具 o固体颗粒或粉体混匀后采用三层（上、

6、中、固体颗粒或粉体混匀后采用三层（上、中、下）五点（周围四点和中心）法采样下）五点（周围四点和中心）法采样o 袋装样品按区分点进行抽样，采用四分法袋装样品按区分点进行抽样，采用四分法缩分缩分 o 包装堆垛的产品，采用包装堆垛的产品，采用“五点法五点法”采样采样五点法采集五点法采集u新鲜肉类、水产品新鲜肉类、水产品 从同一批不同个体取子样，多个子样混匀后即从同一批不同个体取子样，多个子样混匀后即为原始样品，子样量较多时，可缩分为为原始样品，子样量较多时，可缩分为原始样品。原始样品。 猪肉：大腿内侧肌或背最长肌，肥瘦分开。猪肉：大腿内侧肌或背最长肌，肥瘦分开。 鱼：较大者可按头、中、尾分别取样混合

7、；鱼：较大者可按头、中、尾分别取样混合；较小者，将整条（或同批多条）可食较小者，将整条（或同批多条）可食用部分全部混合。用部分全部混合。u包装成箱产品包装成箱产品 所采样品应能代表产品货层或产品堆垛的所采样品应能代表产品货层或产品堆垛的每一层、全部各层和层中各部分。每一层、全部各层和层中各部分。 采集的子样数一般为数量的平方根。采集的子样数一般为数量的平方根。 采用采用“回填法回填法”抽样。抽样。u液体、半固体食品液体、半固体食品 先行充分混匀后再采样，使用特别的采样器先行充分混匀后再采样，使用特别的采样器或用虹吸法分层、分点取样，然后再进行有效或用虹吸法分层、分点取样，然后再进行有效的混合。

8、的混合。 u无菌取样无菌取样 无菌取样只能使用经过消毒的器械和容器。无菌取样只能使用经过消毒的器械和容器。 需要切割样品时，应尽量使用不锈钢器具，需要切割样品时，应尽量使用不锈钢器具，便于消毒。便于消毒。无菌取样无菌取样 进行微生物检验，无菌取样时还应同时做进行微生物检验，无菌取样时还应同时做容器开启对照和封闭对照。容器开启对照和封闭对照。 封闭对照封闭对照：提交一个封闭的消毒样品容器，以提交一个封闭的消毒样品容器，以 显示盛放样品的容器是经过杀菌的，显示盛放样品的容器是经过杀菌的， 与样品中发现的微生物没有关系。与样品中发现的微生物没有关系。开启对照开启对照：在取样点，使无菌容器暴露在空气在

9、取样点，使无菌容器暴露在空气 中的时间与取样时相同。以了解取中的时间与取样时相同。以了解取 样地点空气中细菌存在的情况。样地点空气中细菌存在的情况。4、采样数及量u采集的子样数采集的子样数 一般不少于一般不少于 n n 的平方根。的平方根。u原始样品量原始样品量 全部分析所需量的四倍。全部分析所需量的四倍。5、样品保存 防止污染；防止腐败变质防止污染；防止腐败变质 ； 稳定水分；固定待测成分。稳定水分；固定待测成分。 净：保证采样工具及器皿的清洁干净净：保证采样工具及器皿的清洁干净密：稳定水分，防止挥发成分的损失，避免引密：稳定水分，防止挥发成分的损失，避免引入污染物入污染物 冷：冷藏运输与保

10、存，降低化学反应速度、酶冷：冷藏运输与保存，降低化学反应速度、酶活性和微生物生长活性和微生物生长 快：采样后应尽快进行分析，避免变化快：采样后应尽快进行分析，避免变化二、食品样品的前处理 1、食品样品的常规处理、食品样品的常规处理 2、食品样品的无机化处理、食品样品的无机化处理 wet digeation 3、残留物的提取、分离、浓缩、残留物的提取、分离、浓缩1、食品样品的常规处理、食品样品的常规处理o除去非食用部分除去非食用部分 o除去机械杂质除去机械杂质o 均质（匀）化处理均质（匀）化处理（1）湿法消化法（）湿法消化法（wet digeation)（2）干灰化法（dry ashing)3、

11、残留物的提取、分离和浓缩、残留物的提取、分离和浓缩（1 1）提取分离方法）提取分离方法 液液萃取液液萃取 SPESPE（solid phase extraction)/solid phase extraction)/固相微萃取固相微萃取 微波辅助萃取微波辅助萃取(microwave-assisted extraction)(microwave-assisted extraction) MSPDE(matrix solid phase dispertion MSPDE(matrix solid phase dispertion extraction) extraction)基质固相分散萃取基质固

12、相分散萃取超临界流体萃取超临界流体萃取(super critical fluid (super critical fluid extraction, SFE) extraction, SFE)SPE（solid phase extraction)o微量样品处理技术，主要用于样品的分离、纯化和微量样品处理技术，主要用于样品的分离、纯化和浓缩。浓缩。o能避免液能避免液- -液萃取所带来比如液萃取所带来比如不完全的相分离、较不完全的相分离、较低的定量分析回收率低的定量分析回收率、产生大量的有机废液、产生大量的有机废液o采用高效、高选择性的固定相，提取效率好，容易采用高效、高选择性的固定相，提取效率好

13、，容易达到达到定量萃取定量萃取，快速快速和和自动化自动化，具有能显著，具有能显著减少溶减少溶剂用量剂用量，消除某些干扰杂质等优点。消除某些干扰杂质等优点。 （2 2）浓缩方法：）浓缩方法： N N2 2吹干浓缩吹干浓缩-氮吹仪氮吹仪 负压加热蒸发浓缩负压加热蒸发浓缩-旋转蒸发仪旋转蒸发仪 KDKD浓缩器浓缩器 色谱柱吸附浓缩色谱柱吸附浓缩旋转蒸发仪K-D浓缩器三、常用检验方法三、常用检验方法感观检验感观检验o以人的感觉为依据，凭人的眼耳鼻舌身等以人的感觉为依据，凭人的眼耳鼻舌身等感觉器官对食品的质量进行检验（视觉检感觉器官对食品的质量进行检验（视觉检查、听觉检查、嗅觉检查、味觉检查、触查、听觉

14、检查、嗅觉检查、味觉检查、触觉检查）按国家标准规定的方法进行，对觉检查）按国家标准规定的方法进行，对检验人员和环境有严格的要求检验人员和环境有严格的要求微生物检验微生物检验o是指利用某些微生物在有一定的化学是指利用某些微生物在有一定的化学物质存在时，其生长受到抑制或产生物质存在时，其生长受到抑制或产生一定的物质，根据生长受抑制的程度一定的物质，根据生长受抑制的程度或特殊性质可以判断此种化学物质的或特殊性质可以判断此种化学物质的量。量。 物理化学方法检验物理化学方法检验 是利用物质的物理化学性质来进是利用物质的物理化学性质来进行分析的方法。行分析的方法。 物理法物理法 如比重、粘度、旋光测定如比

15、重、粘度、旋光测定 化学法化学法 如滴定分析、重量分析如滴定分析、重量分析仪器分析方法仪器分析方法光谱法光谱法：可见：可见紫外、荧光、原子吸收法、紫外、荧光、原子吸收法、 电位分析法等电位分析法等色谱法色谱法：气相色谱法、高效液相色谱法、：气相色谱法、高效液相色谱法、 凝胶色谱法、薄层色谱法等凝胶色谱法、薄层色谱法等波谱法波谱法：质谱分析法、核磁共振分析法等：质谱分析法、核磁共振分析法等 联用技术联用技术：GC-MSGC-MS，HPLC-MSHPLC-MS免疫分析方法免疫分析方法 是利用是利用抗原抗体抗原抗体的特异结合来分析的方法。的特异结合来分析的方法。 放射免疫分析（放射免疫分析（RIAR

16、IA） 酶联免疫测定法（酶联免疫测定法（ELISAELISA） 荧光免疫测定法（荧光免疫测定法（FIAFIA） 免疫亲和色谱法（免疫亲和色谱法（immuno-affinity immuno-affinity chromatogrphychromatogrphy，IAC IAC ） 免疫分析方法免疫分析方法 荧光偏振免疫测定法（荧光偏振免疫测定法（fluorescence fluorescence polarization immunoassaypolarization immunoassay，FPIAFPIA 胶体金免疫测定法（胶体金免疫测定法（colloidal gold colloidal

17、 gold immunoassayimmunoassay，CGIACGIA） 酶联传感器分析法酶联传感器分析法 四、检测结果及检验方法的评价四、检测结果及检验方法的评价1 1、误差的表示、误差的表示o准确度准确度o精密度精密度 相对平均偏差相对平均偏差 = = 标准差标准差 相对标准偏差（相对标准偏差（RSDRSD）/ /变异系数变异系数CV CV 相对相差相对相差% % %100|XnXXi1)(2nXXS%100XSRSD100)(|22121XXXX2 2、分析方法的评价、分析方法的评价 评价指标：评价指标：准确度准确度：回收率、标准曲线线性范围、相关：回收率、标准曲线线性范围、相关系数

18、系数灵敏度灵敏度：检测限、定量限：检测限、定量限精密度精密度：重复性（批内批间精密度）：重复性（批内批间精密度）重现性重现性 （1）回收率（加样回收率）回收率（加样回收率） 回收率回收率= 加入标准物质量得值样品本底值加入标准物质后样品测一般要求平均回收率在一般要求平均回收率在80%80%以上，变化范以上，变化范围在围在70%70%110%110%。 回收率偏低回收率偏低表明方法的表明方法的准确度、灵敏度较准确度、灵敏度较差差回收率高低与添加的标准物质的浓度有关。回收率高低与添加的标准物质的浓度有关。（2）标准曲线标准曲线 绘制标准曲线绘制标准曲线 建立回归方程建立回归方程 ：y = a + bx y = a + bx 线性（形）范围线性（形）范围 相关系数相关系数 r r r0.9 3 3、检测限与定量限、检测限与定量限(1) (1) 检测限检测限(Limit of Detection ,LOD (Limit of Detection ,LOD ） 在在LODLOD水平，定量可靠性水平，定量可靠性( (如精密度、回收率等如精密度、回收率等) )不作要求。不作要求。 残留检测方法的残留检测方法的LOD0.1MRL LOD0.1MRL (2) (2) 定量限（定量限（Limit of Quantition ,LOQLimit