生物制药题库

1、第一章：生物药物概述一、填空题1. 我国药物的三大药源指的是 化学药物、 生物药物 、 中草药 。2. 现代生物药物已形成四大类型，包括 重组DNA药物 、基因药物 、天然生物药物 、合成或半合成生物药物 。3. 请写出下列药物英文的中文全称：IFN（Interferon）干扰素、IL (Interleukin) 白细胞介素 、CSF（Colony Stimulating Factor） 集落刺激因子 、EPO（Erythropoietin） （促）红细胞生成素 、EGF（Epidermal Growth Factor） 上皮、表皮细胞生长因子、NGF（Nerve Growth Factor）

2、 神经生长因子 、Ins（Insulin） 胰岛素 、SOD 超氧化物歧化酶 、tPA 组织型纤溶酶原激活剂。抗凝血药 、FDA 美国食品药品监督管理局GMP 药品生产质量管理规范 二、选择题：1、以下能用重组DNA技术生产的药物为 （人生长素、人胰岛素、干扰素、表皮生长因子） （ B ）A、维生素 B、生长素 C、肝素 D、链霉素2、下面哪一种药物属于多糖类生物药物 （ C ）A、洛伐他汀 B、干扰素 C、肝素 D、细胞色素C3、能用于防治血栓的酶类药物有 （ D ）A、SOD B、胰岛素 C、L-天冬酰胺酶 D、尿激酶4、下列属于多肽激素类生物药物的是 （ D ）A、ATP B、四氢叶酸（

3、激素） C、透明质酸（糖胺聚糖） D、降钙素（三十二肽激素）5、蛋白质工程技术改造的速效胰岛素机理是 （ D ）A. 将猪胰岛素B30位改造为丙氨酸，使之和人胰岛素序列一致B. 将A21位替换成甘氨酸，B链末端增加两个精氨酸，使之在pH4溶液中可溶（PH6.8，长效）C. 将B29位赖氨酸用长链脂肪酸修饰，改变其皮下扩散和吸收速度D. 将人胰岛素B28位与B29位氨基酸互换，使之不易形成六聚体三、名词解释1.生物药物：是以生物体、生物组织或其成份为原料（包括组织、细胞、细胞器、细胞成分、代谢、排泄物）综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物。【广义的生物药物包括以动物、植物

4、、微生物和海洋生物为原料制取的各种天然生物活性物质及其人工合成或半合成的天然物质类似物，也包括应用生物工程技术（基因工程、细胞工程、酶工程与发酵工程）制造生产的新生物技术药物（new biotech drug）。】2.生物制品：生物制品（biological products / biologics ）是以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料，应用传统技术或现代生物技术制成，用于人类疾病的预防、治疗和诊断。3.新药: 新药是指未曾在中国境内上市销售的药品。已生产的药品改变剂型、改变给药途径、增加新适应症或制成新的复方制剂，亦按新药管理。4.基因药物: 以遗传物质DNA、RNA为物质基础制

5、造的药物，如核酸疫苗、反义药物四、问答题1.生物药物有哪些特性？1. 药理学特性（1）治疗的针对性强（2）药理活性高（3）毒副作用小，营养价值高（4）生理副作用常有发生：如免疫反应、过敏反应等。2. 理化特性（1）原料中有效物质含量低，杂质种类多且含量高（2）稳定性差（3）易腐败（4）生物药物制剂的特殊要求2.简述新药（新生物药物）的研发过程？新生物药物的研制按其特点可分为5个阶段，即：（1）实验室研究；（2）中试研究；（3）临床前试验；（4）临床试验；（5）生产。第二章：生物药物制剂技术目前生物药物给药方式研究的热点是 缓释型注射剂 和 非注射途径给药。 蛋白质和多肽类药物非注射途径包括 鼻

6、腔、口服、直肠、口腔、透皮、眼内和肺部给药。 第三章 ：基因工程制药1. CHO 中国仓鼠卵巢 细胞 2. 基因工程中原核表达常用的宿主有 大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌 等；常用的真核表达系统有 酵母、哺乳动物细胞、丝状真菌 等。3. 大肠杆菌表达系统的缺点是不能进行 翻译后修饰 ，因而像EPO等基因的表达需使用 真核 表达系统。4. 分泌表达是指将目的基因嵌合在 编码原核蛋白信号肽序列 基因下游进行表达，从而使目的基因分泌到细胞周质或培养基中。 5. 中国药典规定热原检查采用 家兔 法， 细菌内毒素 检查采用鲎试剂法。6. 用大肠杆菌作宿主表达重组DNA 药物，缺点是 （ C ）A.蛋白质

7、表达量低 B.生长慢 C.产物无糖基修饰 D.难以获得工程菌7. 下面表达系统为原核表达系统的是 （A ）A. E.coli B.毕赤酵母 C.昆虫细胞 D.动物细胞8. 如果用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为周质，下面哪种细胞破碎的方法最佳？ （ C ）A.匀浆法 B.超声波法 C. 渗透压休克法 D. 冻融法1. 基因工程 ：基因工程（genetic engineering）是指在基因水平上采用与工程设计十分类似的方法，按照人们的需要进行设计，然后按设计方案创建出具有某种新的性状的生物新品系，并使之稳定地遗传给后代。基因工程的核心是构建重组体DNA的技术，所以基因工程有时也称为基因操作

8、或重组DNA技术。 2. 蛋白质工程 ：蛋白质工程（Protein engineering）：根据对已知蛋白质结构和功能的了解，借助计算机辅助设计，利用基因定点突变等技术对现有蛋白质结构基因进行改造，或直接从头设计全新的蛋白质序列，从而获得改良的蛋白质或自然界没有的全新蛋白质的技术过程。有人将其称为“第二代基因工程”。3.基因工程制药的基本过程？基因工程药物制备的一般过程：第四章 发酵工程技术概论世界上一个抗生素产品是 青霉素 ，第二个抗生素是 链霉素 。发酵工业的生产水平取决于三个要素：生产菌种、发酵工艺 和 发酵设备。冷冻干燥过程中常用的冷冻保护剂有 脱脂乳 和 蔗糖 。微生物发酵主要的三

9、种方式 分批发酵 、 补料分批发酵、 连续发酵 。微生物菌种的分离和纯化可以用的方法有平板划线法 和稀释平板法 。目前常用的诱变剂可分为物理诱变剂 、 化学诱变剂 和 生物诱变剂 三大类。常用的菌种保藏方法有：斜面低温保存、液体石蜡封藏法 、冷冻干燥法、 液氮超低温保藏法 、 甘油冷冻法 、 其他干燥保藏法：沙土保藏法 等。 以下可用于菌种纯化的方法有 （B ）A高温灭菌 B 平板划线 C 富集培养 D 诱变处理菌种保藏的目的及方法？（一）保存目的：防止退化（二）菌种退化检查方法（三）菌种退化防止方法 防止基因突变：如低温保藏 少转接传代 分离单菌落，制作平行的菌种斜面 选择培养条件（四）菌种

10、保藏方法理想的菌种保藏方法应具备的条件：经长期保藏后菌种存活、不退化；保证高产突变株不改变表型和基因型，特别是不改变初级代谢产物和次级代谢产物生产的高产能力。先挑选优良纯种，然后创造一个有利于休眠的条件，如低温、干燥、缺氧、避光等，以降低菌种代谢活动的速度。菌种保藏方法：斜面低温保存 液体石蜡封藏法 冷冻干燥法液氮超低温保藏法甘油冷冻法 其他干燥保藏法：沙土保藏法第五章 酶工程制药1. 固定化酶常采用的方法可分为 吸附法 、 共价结合法 、 交联法 和 包埋法 四大类。2. 为什么要对酶进行化学修饰？人为地改变天然酶的一些性质，创造天然酶所不具备的某些优良特性甚至创造出新的活性，来扩大酶的应用

11、领域，促进生物技术的发展。通过酶的分子改造可克服上述应用中的缺点，使酶发挥更大的催化功效，以扩大其在科研和生产中的应用。 通常，酶经过改造后会生各种各样的变化，概括起来主要有： 提高生物活性（包括某些在修饰后对效应物反应性能的改变）； 增强在不良环境（非生理条件）中的稳定性； 针对异体反应，降低生物识别能力。 可以说，酶的化学修饰在理论上为生物大分子结构与功能关系的研究提供了有力的实验依据和证明，是改善酶学性质和提高其应用价值的一种非常有效的措施。3. 抗体酶催化抗体（catalytic body）：是利用酶反应中底物过渡态类似物作为半抗原刺激免疫系统所产生的一类能够专一识别和催化酶反应中的底

12、物反应过渡态的一类单克隆抗体。催化抗体是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物，本质上是一类具有催化活力的免疫球蛋白，在其可变区赋予了酶的属性，因此催化抗体也叫抗体酶（abzyme）。第六章 动物细胞工程制药1. 细胞培养根据培养细胞的种类可分为 原代培养 和 传代培养 两种方式。2. 生产用的动物细胞类型有 原代细胞 、 已建立的二倍体细胞系 、 可无限期传代的转化细胞系 、 融合细胞系 、 基因工程细胞系 。3. 实验室中常加的双抗是 青霉素 和 链霉素 ，以防细胞污染。4. 用于动物细胞培养主要有三种培养基： 天然 培养基、 合成 培养基和 无血清 培养基。6. 在动物细胞培养

13、过程下列几种试剂的作用：RPMI 1640 维持细胞的生存 ，Hanks液 维持细胞渗透压、调控培养液酸、碱度平衡 ，NaHCO3 调节培养基PH ，青霉素 防止微生物污染 ，胰蛋白酶 水解细胞间的蛋白质 。7. 属于人源细胞系的是（B ）。A .CHO-K1 B. WI-38 C .BHK-21 D .Vero（CHO-K1（Chinese hamster ovary cell）：从中国仓鼠卵巢中分离的上皮样细胞。WI-38：正常胚肺组织人二倍体细胞系BHK-21（Baby hamster kidney cell）：从5只生长1d的幼仓鼠肾脏中分离的Vero：从正常成年非洲绿猴肾脏分离的。M

14、RC-5：从正常男性肺组织人二倍体细胞系Namalwa：从肯尼亚患有Burkitt淋巴瘤病人获取，建成的人的类淋巴母细胞。)8. 在动物细胞培养过程中，要用 胰蛋白 酶对取出的动物组织进行处理。9. 细胞株 通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株（Cell Strain）。也就是说，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。10. 二倍体细胞系的定义及特点 二倍体细胞系：原代细胞经过传代、筛选、克隆、纯化后，获得具一定特征的细胞系特点：细胞分裂增值旺盛，具有二倍体核型，具有贴壁依赖和接触抑制的特性，可传代培养50代，无致

15、癌性。11. 利用动物细胞生产生物技术药物的优、缺点？ 优点：细胞产品多半分泌于胞外，收集纯化方便；能得到较为完善的翻译后修饰，特别是糖基化，与天然产品更为一致，更适于临床使用。 缺点：培养条件要求高，成本贵，产量低。 12. 思考：在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？ 胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞。 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适 宜的pH为7.2-7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶（7.2-8.4）的活性较高。第七章 植物细胞工程制药1. 植物细胞

16、培养常用的灭菌剂有 次氯酸钙 、 次氯酸钠 和 氯化汞 。2. 植物细胞培养的培养基的主要成分包括无机盐、碳源、有机氮源、 植物生长激素 、维生素等化学成分。使用最广泛的是MS培养基和LS培养基。3. 植物细胞培养两步法中，第一步使用 生长 培养基，第二步 生产 培养基。第八章 抗体制药1. 对鼠源性单抗进行改造的目的： 降低鼠源性单克隆抗体分子的免疫原性 、 降低相对分子量，增加组织通透性 。2. 单克隆抗体药物经历了 鼠源性抗体 、 人鼠嵌合抗体 、 人源化抗体 和 全人源抗体 的发展，抗体药物向 低抗原性 、 高特异性 方向发展。3. 在制备单克隆抗体的过程中，进行了两次筛选，其目的不同

17、，第一次是通过筛选获得杂交瘤细胞 ，第二次是通过筛选获得 能产生所需抗体的杂交瘤细胞 。4. “生物导弹”是指 （A ）A. 单克隆抗体 B. 杂交瘤细胞 C. 能产生特定抗体的B淋巴细胞 D. 在单抗上连接抗癌药物5. 关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（D ）A. 可以制成诊断盒，用于疾病的诊断 B. 可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C. 可以利用基因工程技术生产 D. 可以在生物体内生产，不能在体外生产6. 单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ D）A. B淋巴细胞 B. T淋巴细胞 C. 骨髓瘤细胞 D. 杂交瘤细胞7. 人-鼠嵌合抗体人-鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的

18、恒定区融合而得到的抗体。特点：保持鼠源性单克隆抗体的抗原结合的特异性；与鼠单抗相比，对人的免疫原性大大降低，利于在人体内应用，所以目前已制备出上百种抗各种抗原（包括肿瘤相关抗原）的嵌合抗体。8. 与单克隆抗体相比，基因工程抗体有何优点？ 1. 通过基因工程技术的改造，可以降低甚至消除人体对抗体的排斥反应；2. 基因工程抗体的分子量较小，可以部分降低抗体的鼠源性，更有利于穿透血管壁，进入病灶的核心部位；3. 根据治疗的需要，制备新型抗体；4. 可以采用原核细胞、真核细胞和植物等多种表达方式，大量表达抗体分子，大大降低生产成本。 9. 抗血清制备过程中为何用胃酶消化？10. 噬菌体抗体库技术的特点

19、？1. 模拟天然全套抗体库（1）抗体文库可以达到1011库容，能包含B细胞全部克隆。（2）建库的外源基因来自人外周血、骨髓或脾脏的淋巴细胞提取的mRNA反转录形成的cDNA扩增，这是人体多克隆细胞的总mRNA 。（3）使用的通用引物采自多个人体，具有人的种属普遍性。（4）VH和VL随机重组增加抗体的多样性。2. 避开了人工免疫和杂交瘤技术由于抗体库的大容量和极高的筛选效率，使得可以调出任意抗体基因，用基因工程方法制备抗体，因而能免除使用人工免疫动物和细胞融合技术。3. 可获得高亲和力的人源化抗体在噬菌体抗体库中，VH和VL基因的随机重组模拟了体内抗体亲和力成熟过程，所用抗体基因又都是来自人体，

20、因此产生的抗体必然都是高亲和力的。11. 多抗、单抗及基因工程抗体的比较1. 多克隆抗体：由多个B细胞克隆产生的，针对多种抗原决定簇的混合抗体。 获得的主要途径：动物免疫血清；恢复期或预防接种人群。 优点：作用全面中和抗原、免疫调理、CDC、ADCC等作用；来源广泛、制备容易。 缺点：特异性不高、易发生超敏反应应用受限2. 单克隆抗体：由一个识别一种抗原表位的B细胞克隆产生的同源抗体。 特点：理化性质、分子结构、遗传标志、生物学特性等完全相同的均一性抗体 优点：结构均一、纯度高、特异性强、效价高、血清交叉反应少/无，制备成本低。 缺点：鼠源性，对人具有较强的免疫原性。3. 基因工程抗体：采用基

21、因工程方法制备的抗体。 特点：既保持单克隆抗体的均一性，特异性强的优点，又能克服鼠源性的不足。 优点：人源化或全人源抗体均一性强，可工业化生产。 缺点：亲和力弱，效价不高。第九章 生化制药工艺技术基础 如果想要从生物材料中提取辅酶Q10，应该选取下面哪一种动物脏器 （ D ） A胰脏 B肝脏 C小肠 D心脏 由于目的蛋白质和杂蛋白分子量差别较大，拟根据分子量大小分离纯化并获得目的蛋白质，可采用 （C ） ASDS凝胶电泳 B盐析法 C凝胶过滤 D吸附层析 分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用 （ A ） A分离量大分辨率低的方法 B分离量小分辨率低的方法 C分离量小分辨

22、率高的方法 D各种方法都试验一下，根据试验结果确定第十章 生化药物制造工艺 氨基酸药物分为 个别氨基酸制剂 和 复方氨基酸制剂 两类。 目前构成天然蛋白质的20种氨基酸的生产方法有 蛋白质水解法 、 发酵法 、 酶转化法 、 化学合成法 。 酶转化法与直接发酵法生产氨基酸的反应本质相同，均属酶转化反应。但两者相比，酶转化法所需设备及工艺简单，产物浓度 高，转化率及生产效率 高，生产周期 短 ， 副产物 少，酶的利用率也高。 目前国内外生产氨基酸输液组方中含5山梨醇或木糖醇，作用是 以补充能量、促进氨基酸的吸收和利用 ；半胱氨酸作为 稳定剂。 氨基酸有哪些生产方法？各有什么主要特点？ 答：氨基酸

23、的生产方法有四种：蛋白质水解法，发酵法，酶转化法，化学合成法。 （1）蛋白质水解法：以毛发、血粉及废蚕丝等蛋白质为原料，通过酸、碱或酶水解成多种氨基酸混合物，经分离纯化获得各种药用氨基酸的方法称为水解法。水解法生产氨基酸的主要过程为水解、分离和结晶精制三个步骤。本法优点是原料来源丰富，投产比较容易。 缺点是产量低，成本高。 目前用水解法生产的氨基酸有L-胱氨酸、L-半胱氨酸、L-亮氨酸、L-酪氨酸等。 （2）发酵法：发酵法是指以糖为碳源、以氨或尿素为氮源，通过微生物的发酵繁殖直接生产氨基酸；或是利用菌体的酶系，加入前体物质合成氨基酸的方法。微生物利用碳源、氮源及盐类几乎可合成所有氨基酸。目前绝

24、大部分氨基酸皆可通过发酵法生产，优点是直接生产L-型氨基酸；其缺点是产物浓度低，设备投资大，工艺管理要求严格，生产周期长，成本高。 （3）酶转化法：酶转化法亦称为酶工程技术，实际上是在特定酶的作用下使某些化合物转化成相应氨基酸的技术。基本过程是以化学合成的、生物合成的或天然存在的氨基酸前体为原料，将含特定酶的微生物、植物或动物细胞进行固定化处理，通过酶促反应制备氨基酸。酶工程法与直接发酵法生产氨基酸的反应本质相同，皆属酶转化反应，但前者为单酶或多酶的高密度转化，而后者为多酶低密度转化。酶工程技术工艺简单，产物浓度高，转化率及生产效率较高，副产物少，固定化酶或细胞可进行连续操作，节省能源和劳务，

25、并可长期反复使用。 （4）化学合成法：以-卤代羧酸、醛类、甘氨酸衍生物、异氰酸盐、乙酰氨基丙二酸二乙酯、卤代烃、-酮酸及某些氨基酸为原料，经氨解、水解、缩合、取代及氢化还原等化学反应合成-氨基酸的方法称为化学合成法。一般合成法包括卤代酸水解法、氰胺水解法、乙酰氨基丙二酸二乙酯法、异氰酸酯（盐）合成法及醛缩合法等；产物皆为DL-型氨基酸混合物。不对称合成法包括直接合成、-酮酸反应及不对称催化加氢等方法；产物为L-型氨基酸。优点：可采用多种原料和多种工艺路线，以石油化工产品为原料时，成本较低，生产规模大，适合工业化生产。缺点：生产工艺复杂。 简述氨基酸输液的定义，氨基酸输液的组方原理和原则，常用的

26、氨基酸输液有哪几种类型？（1）定义：多种结晶L-氨基酸依特定比例混合制成的静脉内输注液称为氨基酸输液。（氨基酸输液可直接注入进食不足者的血液中，促进蛋白质、酶及肽类激素的合成，提高血浆蛋白浓度与组织蛋白含量，维持氮平衡，调节肌体正常代谢。） （2）组方原理和原则：种优良的氨基酸输液注入人体后，各种氨基酸能得到最有效地利用，其组成平衡，使临床症状得到改善，体重增加而无代谢并发症，血浆游离的氨基酸谱无显著变化。（目前国内外生产氨基酸输液组方中必须含八种必需氨基酸和两种半必需氨基酸，所有氨基酸均为L-型；另外，组方中尚需含5山梨醇或木糖醇，以补充能量、促进氨基酸的吸收和利用；同时加半胱氨酸作为稳定剂

27、，由此方能构成优良的氨基酸输液。） （3）类型： 目前临床使用的胰岛素来源有 动物胰脏来源 、半合成胰岛素 、 重组DNA技术生产胰岛素 。 下列属于多肽药物的是（A） A降钙素 B干扰素 C白蛋白 D IgG 下列药物分类不属于蛋白质药物的是（C） A 白细胞介素 B 肿瘤坏死因子 C 甲状腺多肽激素 D 胰岛素 酶促半合成人胰岛素经胰蛋白酶的转酰胺作用，将猪胰岛素转化为人胰岛素B30。再用离子交换层析纯化，可得到高纯度人胰岛素。 酸醇提取法制备胰岛素的生产工艺要点？离体后，蛋白水解酶类能分解胰岛素使之失活。因此，要立即深冻，先在-30以下急冻后转入-20保存备用。如用液氮或干冰速冻，效果更

28、好。在胰脏中，胰尾部分胰岛素含量较高，如单独使用可提高收率10 %。结晶胰岛素需进一步纯化。具有抗肿瘤作用的酶（C ） A溶菌酶 B 胰蛋白酶 C天冬酰胺酶 D细胞色素C用猪心提取细胞色素C的工艺要点？细胞色素C存在于自然界中一切生物细胞里，其含量与组织的活动强度成正比。以哺乳动物的心肌、鸟类的胸肌和昆虫的翼肌含量最多，肝、肾次之，皮肤和肺中最少。以下为实验报告补充，仅供参考：尽量除去猪心非心肌组织，脂肪、血管、韧带和积血。提取、中和步骤要注意调pH。吸附、洗脱步骤应严格掌握流速。盐析时，加入固体硫酸铵，要边加边搅拌，不要一次快速加入。逐滴加入三氯乙酸溶液，搅匀，加完后，尽快离心。透析袋使用前

29、要检漏。 下列属于多糖药物的是（ C ） A干扰素 B胰岛素 C肝素 D胆固醇 大部分黏多糖与蛋白质结合于细胞中，因此需用 酶解法 或 碱解法 使糖-蛋白质间的结合键断裂，促使多糖释放。 提取法制备辅酶Q10的要点？ 辅酶Q10又称为泛醌Q10，为黄色或淡橙黄色、无臭、无味结晶性粉末，易溶于氯仿、苯、四氯化碳，溶于丙酮、乙醚、石油醚；微溶于乙醇，不溶于水和甲醇。熔点49。以下为实验报告补充，仅供参考：在醇碱皂化时，由于乙醇存在，长时间的皂化，讲导致CoQ10环上甲氧基与乙醇中的乙氧基换位，生成单或双氧基衍生物，因此为了避免这些杂质的产生，皂化限制在30min内，皂化后，迅速冷却。石油醚较易挥发，萃取过程要注意放气。制备过程要注意闭光。洗脱过程中需严格控制流速。制备过程中，注意采集样品，以备检测。第十一章 微生物药物制造工艺 青霉素属于 -内酰胺 类抗生素，它的性质很不稳定，用溶剂萃取法分离时，整个提炼过程应在 低温 、 快速 、 严格控制pH值 进行。 链霉素是 氨基糖苷 类抗生素；红霉素 大环内酯 类抗生素。 克拉维酸是微生物产生的 （B ） A. HMG-CoA 还原酶抑制剂 B.-内酰胺酶抑制剂 C.氨基糖苷类抗生素 D.大环内