免疫实验诊断.

1、 免疫学实验诊断免疫学实验诊断临床免疫学检查及意义临床免疫学检查及意义 免疫学检查由于具有特异性和敏感性，免疫学检查由于具有特异性和敏感性，在实验诊断中应用越来越广泛。常应用于体在实验诊断中应用越来越广泛。常应用于体液免疫、细胞免疫、感染免疫、肿瘤免疫、液免疫、细胞免疫、感染免疫、肿瘤免疫、变态反应、移植免疫等相关疾病诊断和预后变态反应、移植免疫等相关疾病诊断和预后观察。免疫学检查意义：应用免疫学理论和观察。免疫学检查意义：应用免疫学理论和技术研究疾病的病因、发生、发展和转归，技术研究疾病的病因、发生、发展和转归，帮助疾病诊断和预防治疗。帮助疾病诊断和预防治疗。 AntigenB-lympho

2、cytephagocyte T-lymphocyte Primed TLcytokine Plasma cellantibodyT memory cellB memory cellReviewimmune responseNKcomplementTumor marker其它其它n做免疫学检查思考点做免疫学检查思考点特异性、灵敏性特异性、灵敏性性别、年龄性别、年龄检测物质性质检测物质性质地域性地域性时效性时效性免疫抑制剂等免疫抑制剂等药物影响药物影响n介绍常用免疫学检测方法介绍常用免疫学检测方法凝集沉淀试验凝集沉淀试验流式细胞技术流式细胞技术ELISAELISA发光物标记技术发光物标记技术生物芯

3、片技术生物芯片技术快速金标技术快速金标技术免疫印迹免疫印迹PCR第一节：免疫球蛋白检测第一节：免疫球蛋白检测n免疫球蛋白合成、分泌及特性：免疫球蛋白合成、分泌及特性：合成分泌合成分泌特性特性IgGIgG脾和淋巴结中脾和淋巴结中浆细胞浆细胞抗细菌、抗病毒、抗毒素抗细菌、抗病毒、抗毒素可通过胎盘、可被动免疫可通过胎盘、可被动免疫IgAIgA肠系淋巴组织中浆肠系淋巴组织中浆细胞细胞抗细菌、抗病毒、抗毒素，尤其分泌抗细菌、抗病毒、抗毒素，尤其分泌型在消化道、呼吸道等管腔抗感染型在消化道、呼吸道等管腔抗感染IgMIgM脾和淋巴结中脾和淋巴结中浆细胞浆细胞感染后最早出现，杀菌、溶菌、溶血、感染后最早出现，

4、杀菌、溶菌、溶血、凝集作用明显凝集作用明显IgEIgE粘膜固有层中浆细粘膜固有层中浆细胞分泌胞分泌参与参与I型变态反应型变态反应IgG IgA IgM IgEIgG IgA IgM IgE特性特性主要特性生理变化IgGIgG占总占总Ig70-80%Ig70-80%，能通过胎盘，能通过胎盘，次级免疫应答次级免疫应答孕期含量与母体基本相同，孕期含量与母体基本相同，出生出生3-4月最低，月最低，16岁前达岁前达成人水平成人水平IgAIgA分为血清和分泌型，血清型占分为血清和分泌型，血清型占总总Ig10-15%Ig10-15%，SIgASIgA与局部抗感与局部抗感染相关染相关新生儿含量很低，新生儿含量

5、很低，16岁前达岁前达成人水平成人水平IgMIgM初级免疫应答，可以五聚体形初级免疫应答，可以五聚体形式存在，占总式存在，占总Ig5-10%Ig5-10%20周起合成，新生儿为成人周起合成，新生儿为成人10%，8-10岁达成人水平岁达成人水平IgEIgE血清中含量最低血清中含量最低IgIg，占总占总Ig0.002%Ig0.002%新生儿含量极低，新生儿含量极低，12岁前达岁前达成人水平成人水平IgG IgA IgM IgG IgA IgM IgEIgE病理变化病理变化增高降低IgGIgG慢性感染、慢性肝炎、肝硬化、淋慢性感染、慢性肝炎、肝硬化、淋巴瘤、和某些自身免疫性疾病（如巴瘤、和某些自身免

6、疫性疾病（如SLE)SLE)，免疫增殖疾病（如，免疫增殖疾病（如MMMM）先天免疫缺陷，获得性免疫缺陷先天免疫缺陷，获得性免疫缺陷（如肾病综合征，营养不良，甲（如肾病综合征，营养不良，甲亢），使用免疫抑制剂，重链和亢），使用免疫抑制剂，重链和轻链病等轻链病等 IgAIgA慢性感染、慢性肝炎、肝硬化、淋慢性感染、慢性肝炎、肝硬化、淋巴瘤、和某些自身免疫性疾病（如巴瘤、和某些自身免疫性疾病（如SLE)SLE)，免疫增殖疾病（如，免疫增殖疾病（如MMMM），肾），肾病病IgAIgA降低见于呼吸道反复感染者，降低见于呼吸道反复感染者，先天免疫缺陷，获得性免疫缺陷先天免疫缺陷，获得性免疫缺陷（如肾病综合

7、征，营养不良，甲（如肾病综合征，营养不良，甲亢），重链和轻链病等亢），重链和轻链病等IgMIgM同同IgG外宫内感染可急剧增高外宫内感染可急剧增高基本同基本同IgGIgEIgE同同IgG外过敏性疾病可明显增，外过敏性疾病可明显增，寄生虫感染，间质性肺炎等，特寄生虫感染，间质性肺炎等，特异性异性IgE增高与过敏原相关增高与过敏原相关基本同基本同IgGIgGIgG亚类检测亚类检测nIgGIgG亚类分为亚类分为4 4种，血液中含量种，血液中含量IgG1 IgG2 IgG1 IgG2 IgG3 IgG4IgG3 IgG4，最高和最低可差最高和最低可差1010倍以上，亚类增倍以上，亚类增高或减低通常与总

8、高或减低通常与总IgGIgG相关，但有些患者亚类异相关，但有些患者亚类异常，而总常，而总IgGIgG正常或与亚类异常情况反相。正常或与亚类异常情况反相。n IgG1IgG1缺失常见于免疫缺陷疾病，导致反复感染缺失常见于免疫缺陷疾病，导致反复感染nIgG2IgG2缺陷为缺陷为IgGIgG亚类缺陷中最常见者，且多见于亚类缺陷中最常见者，且多见于儿童儿童 ，可引起呼吸道反复感染，可引起呼吸道反复感染nIgG3IgG3缺陷见于成人反复性呼吸道感染缺陷见于成人反复性呼吸道感染nIgG4IgG4缺陷与缺陷与IgG2IgG2和和IgAIgA缺乏有关。缺乏有关。IgG4IgG4水平升高水平升高见于异位性皮炎、

9、哮喘和某些寄生虫疾病。见于异位性皮炎、哮喘和某些寄生虫疾病。M M蛋白检测临床意义蛋白检测临床意义nM M蛋白或称单克隆免疫球蛋白，是由一种单克隆蛋白或称单克隆免疫球蛋白，是由一种单克隆B B细胞异细胞异常增殖时产生，一般不具抗体活性。常增殖时产生，一般不具抗体活性。n阳性主要见于阳性主要见于1.1.多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤 2. 2.巨球蛋白血症巨球蛋白血症3.3.重链病重链病 4. 4.半分子病半分子病5.5.恶性淋巴瘤恶性淋巴瘤 6. 6.良性良性M M蛋白血症蛋白血症 蛋白电泳蛋白电泳第二节：补体检测（第二节：补体检测（complementcomplement） 补体是主要由巨噬细胞分

10、泌存在于新鲜补体是主要由巨噬细胞分泌存在于新鲜血液中具有酶样活性的球蛋白，补体不耐热血液中具有酶样活性的球蛋白，补体不耐热易降解，故补体检测须用新鲜血清。补体有易降解，故补体检测须用新鲜血清。补体有C1-C9(C1-C9(经典途径）及经典途径）及BFBF、DFDF、PFPF（旁路途径）旁路途径）和补体调节因子组成。临床常作总补体活性和补体调节因子组成。临床常作总补体活性（CH50CH50）和单一因子和单一因子C3C3、C4C4、BFBF及及C1qC1q检测。检测。总补体溶血活性（总补体溶血活性（CH50)CH50)检测检测 增高增高 急性感染、急性组织损伤、恶性肿瘤和风湿病早急性感染、急性组织

11、损伤、恶性肿瘤和风湿病早期，补体增高常与其它血浆蛋白改变相伴随。期，补体增高常与其它血浆蛋白改变相伴随。降低降低 自身免疫性疾病自身免疫性疾病SLESLE的活动期的活动期 急性肾小球肾炎急性肾小球肾炎 冷球蛋白血症等冷球蛋白血症等 严重肝病变严重肝病变 先天性缺乏先天性缺乏SRBCAbcSRBCc c3 3、c c4 4、c c1q1q、B B因子检测因子检测参与途径降低增高C3经典、旁路 1）合成障碍2）消耗过多3）先天缺乏1）急性炎症2）急性组织损伤3）排异反应C4经典C1q经典B因子 旁路第三节第三节 细胞免疫检查细胞免疫检查n簇分化抗原簇分化抗原CDCD（Cluster of diff

12、erentiationCluster of differentiation）: : 细胞在发育分化过程中，细胞表面抗原物质发生细胞在发育分化过程中，细胞表面抗原物质发生变化，变化，CDCD抗原即指细胞变化过程中不同时期产生抗原即指细胞变化过程中不同时期产生的抗原。目前临床的抗原。目前临床CD4CD4（THTH）与与CD8CD8（TSTS）检测应检测应用广泛。簇分化抗原检测方法目前较多采用流式用广泛。簇分化抗原检测方法目前较多采用流式细胞仪技术进行分析，流式细胞免疫分析技术为细胞仪技术进行分析，流式细胞免疫分析技术为特异抗体加标记技术加单细胞检测。特点：特异特异抗体加标记技术加单细胞检测。特点：

13、特异性、灵敏性高、检测精密度均较以前手工操作高性、灵敏性高、检测精密度均较以前手工操作高很多。很多。流式细胞仪检测简介流式细胞仪检测简介n 淋巴细胞表面标志检测淋巴细胞表面标志检测E E玫瑰花形成实验玫瑰花形成实验TCSRBCSRBCSRBCSRBCSRBCSRBCSERSERSERSERSERSERT T细胞表面标志检测细胞表面标志检测n CD3 CD3（总（总T T细胞）、细胞）、E E玫瑰花试验检测临床意义玫瑰花试验检测临床意义 增高：甲亢、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力、器增高：甲亢、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力、器 官移植后排异反应官移植后排异反应 减低：减低：AIDSAIDS、胸

14、腺发育不良、联合免疫缺陷、也可见胸腺发育不良、联合免疫缺陷、也可见 于放疗和化疗及免疫抑制类药物治疗于放疗和化疗及免疫抑制类药物治疗 CD4CD4、CD8CD8检测临床意义检测临床意义 CD4CD4+ +增高：类风湿关节炎活动期，自身免疫疾病增高：类风湿关节炎活动期，自身免疫疾病 CD4CD4+ +减低：减低：AIDSAIDS等病毒感染、免疫抑制剂治疗、严重等病毒感染、免疫抑制剂治疗、严重 创伤、大手术等创伤、大手术等 CD8CD8+ +增高：传染性单核细胞增多症和巨细胞病毒感染增高：传染性单核细胞增多症和巨细胞病毒感染 急性期、慢性乙型肝炎急性期、慢性乙型肝炎 CD8CD8+ +降低：部分自

15、身免疫性疾病、降低：部分自身免疫性疾病、型糖尿病等型糖尿病等B B细胞表面标志检测细胞表面标志检测nB B细胞表面抗原和表面受体检测临床意义细胞表面抗原和表面受体检测临床意义表面抗原表面抗原CD19CD19、CD20CD20、CD21CD21、CD22CD22CD19CD19增高：增高：B B细胞系统恶性肿瘤细胞系统恶性肿瘤CD19CD19降低：体液免疫缺陷疾病降低：体液免疫缺陷疾病CD21CD21为为EBEB病毒和病毒和CD3CD3受体受体CD20CD20在在B B细胞激活后逐步降低细胞激活后逐步降低CD22CD22在在B B细胞激活时逐步增高细胞激活时逐步增高 SmIg BSmIg B细胞

16、表面特异性标志细胞表面特异性标志SmIgSmIg增高：增高：B B细胞恶性增殖相关疾病，如慢淋、毛细胞白细胞恶性增殖相关疾病，如慢淋、毛细胞白血病、巨球蛋白血症。血病、巨球蛋白血症。SmIgSmIg降低：体液免疫缺陷相关疾病降低：体液免疫缺陷相关疾病CD4/CD8CD4/CD8测定临床意义测定临床意义nCD4/CD8CD4/CD8测定临床意义测定临床意义增高：多见于自身免疫性疾病，如类风关活动期、增高：多见于自身免疫性疾病，如类风关活动期、多发性硬化症、多发性硬化症、SLESLE、器官移植后排异反应、膜器官移植后排异反应、膜性肾小球肾炎等性肾小球肾炎等降低：降低：AIDSAIDS、瘤型麻风病、

17、恶性肿瘤发作期、传瘤型麻风病、恶性肿瘤发作期、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染急性期、染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染急性期、血吸虫病等。血吸虫病等。淋巴细胞功能检测淋巴细胞功能检测nT T淋巴细胞转化试验意义淋巴细胞转化试验意义细胞生物学功能的体外试验，应用于免疫缺陷、增强、细胞生物学功能的体外试验，应用于免疫缺陷、增强、移植等。实验要求较高。移植等。实验要求较高。转化率增高：转化率增高：DownDown氏综合症氏综合症转化率降低：细胞免疫功能低下或缺陷相关疾病转化率降低：细胞免疫功能低下或缺陷相关疾病nNKNK细胞活性测定意义细胞活性测定意义NKNK细胞无需抗原刺激可直接杀伤靶细胞，

18、可释放细胞无需抗原刺激可直接杀伤靶细胞，可释放IFN-rIFN-r、TNF-BTNF-B和和GM-CSF,GM-CSF,在机体抗肿瘤和抗感染免疫中发挥重要在机体抗肿瘤和抗感染免疫中发挥重要作用作用增高：感染早期，器官移植干扰素等免疫增强剂治疗增高：感染早期，器官移植干扰素等免疫增强剂治疗降低：恶性肿瘤，免疫缺陷疾病，使用免疫抑制剂。降低：恶性肿瘤，免疫缺陷疾病，使用免疫抑制剂。细胞因子检查细胞因子检查 细胞因子种类繁多，功能复细胞因子种类繁多，功能复杂，多种因子可具有相同功能，杂，多种因子可具有相同功能，各种细胞因子间可互相作用，细各种细胞因子间可互相作用，细胞因子功能同时受到细胞因子受胞因子

19、功能同时受到细胞因子受体功能影响，因此在选择检测项体功能影响，因此在选择检测项目和结果分析时要综合考虑。目和结果分析时要综合考虑。细胞因子细胞因子产生产生细胞细胞靶靶细胞细胞对靶细胞主要作用对靶细胞主要作用IL-2TLTLNKBL促进生长和细胞因子产生促进生长和细胞因子产生促进生长和活化促进生长和活化生长及抗体合成生长及抗体合成IL-6MC、TL、内皮细胞内皮细胞TL& BL成熟成熟BL 肝脏肝脏辅助刺激济辅助刺激济生长生长急性期反应物（纤维蛋白原）急性期反应物（纤维蛋白原）TNFMC、TLPMN内皮细胞内皮细胞丘脑下部丘脑下部肝脏肝脏肌肉脂肪肌肉脂肪TL& BL活化（炎症）活化（炎症）活化（

20、炎症、凝集）活化（炎症、凝集）发热发热急性期反应物（血清淀粉样急性期反应物（血清淀粉样A蛋白）蛋白）分解蛋白（恶病质）分解蛋白（恶病质）辅助刺激剂辅助刺激剂IFN纤维母细胞、纤维母细胞、MC所有所有NK抗抗病毒，抑制细胞增殖，加强病毒，抑制细胞增殖，加强MHC1类表达和活化类表达和活化肿瘤标志物的概念肿瘤标志物的概念n一般而言，一般而言，TMTM是指存在于肿瘤细胞内或肿瘤细胞表达及脱是指存在于肿瘤细胞内或肿瘤细胞表达及脱落的物质，或是宿主对肿瘤反应而产生的物质。由于肿瘤落的物质，或是宿主对肿瘤反应而产生的物质。由于肿瘤发生、发展原因至今尚未完全解决，提示肿瘤的标志也并发生、发展原因至今尚未完全

21、解决，提示肿瘤的标志也并未完全明确，所以肿瘤标志物概念还有待补充和修正。未完全明确，所以肿瘤标志物概念还有待补充和修正。nTumor markers are substances, usually proteins, Tumor markers are substances, usually proteins, that are produced by the body in response to that are produced by the body in response to cancer growth or by the cancer tissue itself. Some ca

22、ncer growth or by the cancer tissue itself. Some tumor markers are specific, while others are seen tumor markers are specific, while others are seen in several cancer types. Many of the well-known in several cancer types. Many of the well-known markers are also seen in non-cancerous conditions. mark

23、ers are also seen in non-cancerous conditions. Consequently, these tumor markers are not Consequently, these tumor markers are not diagnostic for cancer. diagnostic for cancer. 第四节：肿瘤标志物本质第四节：肿瘤标志物本质n广义上肿瘤标志物是指与肿瘤发生、发展、消亡相广义上肿瘤标志物是指与肿瘤发生、发展、消亡相关的各种物质。包含遗传物质（如致癌或抑癌基关的各种物质。包含遗传物质（如致癌或抑癌基因）、病毒（如因）、病毒（如

24、EBV-IgAEBV-IgA与鼻咽癌与鼻咽癌) )、酶（、酶（NSE)NSE)、激、激素（素（HCG)HCG)和临床应用广泛的一些肿瘤抗原（和临床应用广泛的一些肿瘤抗原（CEACEA、AFP)AFP)等。等。n肿瘤细胞本身产生的肿瘤标志物常分为两类：肿瘤细胞本身产生的肿瘤标志物常分为两类：1 1）当）当理化、病毒、遗传等因素引起正常细胞内基因突变理化、病毒、遗传等因素引起正常细胞内基因突变而发生癌变时，癌变细胞内及表达在其表面的蛋白而发生癌变时，癌变细胞内及表达在其表面的蛋白质等成份发生某种变化，形成肿瘤抗原，这种抗原质等成份发生某种变化，形成肿瘤抗原，这种抗原可以表达在正常细胞，而肿瘤细胞表

25、达高，也可因可以表达在正常细胞，而肿瘤细胞表达高，也可因肿瘤导致组织结构变化，肿瘤抗原进入血液，如肿瘤导致组织结构变化，肿瘤抗原进入血液，如PSAPSA ；或仅在胚胎组织中表达，正常成人细胞中不；或仅在胚胎组织中表达，正常成人细胞中不表达，在发生肿瘤时又重新表达，如表达，在发生肿瘤时又重新表达，如AFPAFP、CEACEA。 2 2）由肿瘤细胞产生的特殊抗原，这种抗）由肿瘤细胞产生的特殊抗原，这种抗原在性质上与正常细胞所表达的抗原不同。原在性质上与正常细胞所表达的抗原不同。癌基因的发现证明正常细胞有癌基因存在，癌基因的发现证明正常细胞有癌基因存在，只是处于不表达状态，其一旦被激活，就只是处于不

26、表达状态，其一旦被激活，就失去正常调控，使细胞发生癌变。而由于失去正常调控，使细胞发生癌变。而由于癌基因表达产物与肿瘤抗原的关系至今未癌基因表达产物与肿瘤抗原的关系至今未完全清楚，所以目前未发现很特异的肿瘤完全清楚，所以目前未发现很特异的肿瘤抗原（基因理论和动物实验得到证实）。抗原（基因理论和动物实验得到证实）。肿瘤标志物的分类肿瘤标志物的分类血清血清胚胎抗原胚胎抗原肿瘤相关糖肿瘤相关糖脂及糖蛋白脂及糖蛋白激素肽、激素肽、酶、蛋白等酶、蛋白等 瘤标志物目前有瘤标志物目前有100100多种。尚未有统一全面的分多种。尚未有统一全面的分类标准。常分为血清类标准。常分为血清/ /血浆肿瘤标志物和组织肿

27、瘤标志物。血浆肿瘤标志物和组织肿瘤标志物。组织组织分化标志分化标志转移潜转移潜在性标志在性标志癌基因及癌基因及抑癌基因抑癌基因增殖标志增殖标志理想肿瘤标志物的要求理想肿瘤标志物的要求TM特性要求特性要求与临床意义与临床意义灵敏灵敏含量与肿瘤含量与肿瘤病情相符病情相符部位特异部位特异肿瘤特异肿瘤特异早发现早发现早诊断早诊断判断复发判断复发区分良性与恶性区分良性与恶性鉴定肿瘤类型鉴定肿瘤类型器官部位器官部位特异特异病程和病程和治疗观察治疗观察TMTM检测临床意义检测临床意义n辅助临床早发现、早诊断辅助临床早发现、早诊断n帮助区分区分良性与恶性肿瘤帮助区分区分良性与恶性肿瘤n协助临床肿瘤类型鉴定及肿

28、瘤部位鉴别协助临床肿瘤类型鉴定及肿瘤部位鉴别n帮助临床对肿瘤病程判断帮助临床对肿瘤病程判断n治疗效果观察，提前判断复发治疗效果观察，提前判断复发几种肿瘤标志物检测意义几种肿瘤标志物检测意义标志物标志物性质性质相对特异肿瘤相对特异肿瘤其它肿瘤其它肿瘤其它疾病其它疾病AFP甲胎蛋白甲胎蛋白胚胎类胚胎类糖蛋白糖蛋白原发性肝细胞癌原发性肝细胞癌睾丸癌、畸胎睾丸癌、畸胎瘤瘤肝炎、肝硬化等肝炎、肝硬化等CEA癌胚抗原癌胚抗原胚胎类胚胎类糖蛋白糖蛋白直肠癌、结肠癌、直肠癌、结肠癌、胃癌、胰腺癌胃癌、胰腺癌乳腺癌、肺癌乳腺癌、肺癌等等肠道息肉、炎症，肠道息肉、炎症，肝、肺等炎症肝、肺等炎症PSA前列腺额前列腺

29、额特异抗原特异抗原具有酶样具有酶样活性蛋白活性蛋白前列腺癌前列腺癌肾肾癌、膀胱癌癌、膀胱癌前列腺肥大和炎症、前列腺肥大和炎症、泌尿生殖系统疾病泌尿生殖系统疾病CA15-3糖蛋白糖蛋白乳腺癌乳腺癌肺癌、肾癌等肺癌、肾癌等肝、肠等非肿瘤疾肝、肠等非肿瘤疾病病CA125糖蛋白糖蛋白卵巢癌卵巢癌乳腺癌、胰腺乳腺癌、胰腺癌等癌等卵巢囊肿、肝炎等卵巢囊肿、肝炎等CA199糖蛋白糖蛋白胰腺癌胰腺癌胃癌、结肠癌胃癌、结肠癌等等急性胰腺炎、肝硬急性胰腺炎、肝硬化等化等几种肿瘤标志物检测意义几种肿瘤标志物检测意义标志物标志物性质性质相对特异肿相对特异肿瘤瘤其它肿瘤其它肿瘤其它疾病其它疾病CA72-4糖蛋白糖蛋白胃

30、癌胃癌结肠癌、卵巢癌结肠癌、卵巢癌SCC糖蛋白鳞状上皮细糖蛋白鳞状上皮细胞癌抗原胞癌抗原胚胎类胚胎类糖蛋白糖蛋白子宫颈癌子宫颈癌肺癌、鼻咽癌肺癌、鼻咽癌肝炎、结核肝炎、结核TPA组织多肽抗原组织多肽抗原胚胎类胚胎类糖蛋白糖蛋白支气管癌支气管癌膀胱癌膀胱癌肝炎肝炎PAP前列腺酸性磷酸酶前列腺酸性磷酸酶酶酶前列腺癌前列腺癌前列腺肥大前列腺肥大或炎症或炎症NSE神经元特异性烯醇神经元特异性烯醇化酶化酶酶酶小细胞肺癌小细胞肺癌其他非小细胞肺其他非小细胞肺癌、神经内分泌癌、神经内分泌肿瘤等肿瘤等血小板和红血小板和红细胞中存在细胞中存在肿瘤标志物的选择建议肿瘤标志物的选择建议TM肝癌肝癌AFPCEA CA

31、19-9 AFUSF胰腺癌胰腺癌CA19-9CA242CA50CA125 CEA胃癌胃癌CEACA19-9CA72-4PGCA242结直肠癌结直肠癌CEACA19-9CA72-4CA242TPS肺癌肺癌NSECEACYFRA21-1TPS乳腺癌乳腺癌CEACA15-3Her-2/neuTPS女性生殖系统肿瘤女性生殖系统肿瘤宫颈癌HPV,SCC卵巢癌CA125生殖细胞癌HCG前列腺癌前列腺癌PSAPSMPACP恶性淋巴瘤恶性淋巴瘤LDH2-MG CA125TNF脑胶质瘤脑胶质瘤 NSE BEHABGFAPVEGF鼻咽癌鼻咽癌VCA-IgAEA-IgASCCTPS骨转移肿瘤骨转移肿瘤骨吸收指标 骨

32、形成指标同一肿瘤多种肿瘤标志物选择同一肿瘤多种肿瘤标志物选择1000255075100灵敏度%假阳性率（1-特异度）%AFP检测CEA检测0255075无意义试验ROC曲线 人类具有完善的免疫系统，正常情况下，免疫人类具有完善的免疫系统，正常情况下，免疫系统具有识别自我与异己的功能，因而能够防御异系统具有识别自我与异己的功能，因而能够防御异物入侵，而对自身组织不产生或产生极微弱的免疫物入侵，而对自身组织不产生或产生极微弱的免疫应答反应，称自身耐受。一旦机体外部或内部因素应答反应，称自身耐受。一旦机体外部或内部因素发生改变，可使免疫耐受受到影响，导致免疫系统发生改变，可使免疫耐受受到影响，导致免

33、疫系统对自身组织产生明显的免疫应答反应。如是低限度对自身组织产生明显的免疫应答反应。如是低限度和非持久性，一般影响不大，高限度和持久存在则和非持久性，一般影响不大，高限度和持久存在则引起自身免疫性疾病。自身免疫性疾病血清学检测引起自身免疫性疾病。自身免疫性疾病血清学检测方法很多，特异性较差，动态检测可帮助临床对预方法很多，特异性较差，动态检测可帮助临床对预后及疗效观察。后及疗效观察。第五节第五节 自身抗体检测自身抗体检测荧光免疫技术荧光免疫技术n目前常用于免疫组化和自身抗体检测，特定可用目前常用于免疫组化和自身抗体检测，特定可用于定位。较多用于于定位。较多用于PCRPCR和流式细胞技术和流式细

34、胞技术细胞核常见自身抗体检测及临床意义常见自身抗体检测及临床意义 名称名称 临床意义临床意义类风湿因子（类风湿因子（RFRF）类风湿性关节炎及其它免疫性疾病类风湿性关节炎及其它免疫性疾病抗抗ds-DNAds-DNA抗体抗体 SLESLE的较特异性抗体的较特异性抗体抗抗SmithSmith抗体抗体 SLESLE的较特异性抗体的较特异性抗体抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体 药物性狼疮及其它免疫性疾病药物性狼疮及其它免疫性疾病抗核糖核蛋白抗体抗核糖核蛋白抗体 混合结缔组织病、混合结缔组织病、SLESLE等等抗抗SS-ASS-A和和SS-BSS-B抗体抗体 干燥综合症、干燥综合症、SLESLE、RARA等等抗

35、抗Scl-70Scl-70抗体抗体 系统性硬化症等系统性硬化症等抗线粒体抗体抗线粒体抗体 原发性胆汁性肝硬化等原发性胆汁性肝硬化等常见自身抗体检测及临床意义常见自身抗体检测及临床意义名称名称 临床意义临床意义Jo-1Jo-1抗体抗体 肌炎和间质性肺纤维化肌炎和间质性肺纤维化抗中性粒细胞胞浆抗体抗中性粒细胞胞浆抗体 血管炎症、自身免疫血管炎症、自身免疫 性肝病等性肝病等抗甲状腺球蛋白抗体抗甲状腺球蛋白抗体 乔本氏甲状腺炎等甲乔本氏甲状腺炎等甲 状腺疾病状腺疾病抗血小板抗体抗血小板抗体 血小板减少症血小板减少症抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体 自身免疫性肝病自身免疫性肝病抗精子抗体抗精子抗体 男子不育症男

36、子不育症抗心磷脂抗体抗心磷脂抗体 SLESLE、RARA等疾病等疾病HLA-B27 HLA-B27 强直性脊椎炎等强直性脊椎炎等第六节第六节 感染免疫检查感染免疫检查n人体感染病原体后经过一段时间产生抗体人体感染病原体后经过一段时间产生抗体一般可持续数月或数年，因此抗体检测可一般可持续数月或数年，因此抗体检测可判断现症感染和既往感染情况判断现症感染和既往感染情况 风湿热是一种变态结缔组织疾病，常见有风湿风湿热是一种变态结缔组织疾病，常见有风湿性心脏病、风湿性关节炎等。风湿热常由性心脏病、风湿性关节炎等。风湿热常由A A 组溶血组溶血性链球菌引起，此菌可产生一种性链球菌引起，此菌可产生一种“O”

37、O”溶血素具有抗溶血素具有抗原性，原性，ASLOASLO就是检测机体产生的抗溶血素就是检测机体产生的抗溶血素“O”O”抗体。抗体。 链球菌感染后抗链球菌感染后抗“O”O”的产生一般在一周左右，的产生一般在一周左右，4-64-6周达高峰。可见于风湿性心脏病、风湿性关节周达高峰。可见于风湿性心脏病、风湿性关节炎、急性肾小球肾炎、呼吸道感染等。炎、急性肾小球肾炎、呼吸道感染等。ASLOASLO动态检动态检测对病程及疗效观察意义较大，结合测对病程及疗效观察意义较大，结合CRPCRP和和ESRESR检测检测临床意义更大。临床意义更大。抗链球菌溶血素抗链球菌溶血素“O”O”检测（检测（anti-strep

38、tolysin anti-streptolysin O ASLOO ASLO） 伤寒是由伤寒杆菌引起的急性肠道传染病。伤伤寒是由伤寒杆菌引起的急性肠道传染病。伤寒杆菌有两种抗原，即菌体抗原寒杆菌有两种抗原，即菌体抗原“O”O”抗原和鞭毛抗原和鞭毛抗抗“H”H”原。肥达氏反应就是检测由上述两种抗原原。肥达氏反应就是检测由上述两种抗原刺激机体产生的抗体。刺激机体产生的抗体。 肥达氏反应用于辅助诊断伤寒和副伤寒感染，肥达氏反应用于辅助诊断伤寒和副伤寒感染，由于抗体产生需要一定时间，故第一周阳性率由于抗体产生需要一定时间，故第一周阳性率10%10%，第二周达第二周达60%-70%60%-70%，第四周

39、达，第四周达90%90%。临床常以二次标。临床常以二次标本（早期和中期或恢复期）的凝集效价变化来判断本（早期和中期或恢复期）的凝集效价变化来判断是否感染。伤寒病人的是否感染。伤寒病人的“O”O”抗体较抗体较“H”H”出现早，出现早，存在时间短，存在时间短，“H”H”相反。预防接种可引起相反。预防接种可引起“H”H”增增高，高，“O”O”正常。正常。肥达氏试验肥达氏试验OH可能情况可能情况升高升高正常正常伤寒发病早期、或其它沙门伤寒发病早期、或其它沙门氏菌感染交叉反应氏菌感染交叉反应正常正常升高升高预防接种、既往感染预防接种、既往感染升高升高升高升高患伤寒可能性较大患伤寒可能性较大升高升高 A/

40、B/C升高升高可能患副伤寒甲、乙、丙可能患副伤寒甲、乙、丙肥达氏试验肥达氏试验 结核分枝杆菌主要引起细胞免疫，结核分枝杆菌主要引起细胞免疫，但也可引起体液免疫产生特异性但也可引起体液免疫产生特异性IgGIgG抗抗体，临床常用体，临床常用ELISAELISA方法检测特异性方法检测特异性IgGIgG抗体，抗体，PCRPCR方法检测结核方法检测结核DNADNA，但两但两种方法均存在部分假阳性，样本找结种方法均存在部分假阳性，样本找结核杆菌方法最为经典。核杆菌方法最为经典。结核抗体和结核抗体和DNADNA检测检测幽门螺杆菌检测幽门螺杆菌检测n幽门螺杆菌（幽门螺杆菌（HpHp）感染是人类最常见的慢性感染

41、）感染是人类最常见的慢性感染之一，与胃十二指肠等消化系统疾病密切相关。之一，与胃十二指肠等消化系统疾病密切相关。由于由于HPHP感染具较大危害性，故近几年感染具较大危害性，故近几年HPHP检测方法检测方法被高度重视，也取得飞速发展。目前诊断幽门螺被高度重视，也取得飞速发展。目前诊断幽门螺杆菌感染的方法很多，依据是否需做内窥镜检查杆菌感染的方法很多，依据是否需做内窥镜检查分为侵入性和非侵入性两大类分为侵入性和非侵入性两大类 。侵入性常做尿。侵入性常做尿素酶试验。非侵入性试验除素酶试验。非侵入性试验除C C1313或或C C1414 呼气试验外，呼气试验外，目前血清学目前血清学HPHP是诊断现症感

42、染较好方法，易于儿是诊断现症感染较好方法，易于儿童童HPHP感染检测和体检普查。感染检测和体检普查。梅毒血请学检测梅毒血请学检测 当机体感染梅毒螺旋体后，会产生二种抗体，当机体感染梅毒螺旋体后，会产生二种抗体，一种为抗类脂抗体，另一种为抗螺旋体抗原抗一种为抗类脂抗体，另一种为抗螺旋体抗原抗体，后者较前者特异性强。由于目前螺旋体体体，后者较前者特异性强。由于目前螺旋体体外培养较难，故血清学检测是目前临床常用检外培养较难，故血清学检测是目前临床常用检查方法。常用方法有快速血浆素反应（查方法。常用方法有快速血浆素反应（RPRRPR）和梅毒螺旋体血凝试验（和梅毒螺旋体血凝试验（TPPATPPA），后者

43、特异性），后者特异性高一般用于确定试验，高一般用于确定试验，RPRRPR一般作过筛试验和一般作过筛试验和既往感染标志。既往感染标志。TORCHTORCH感染免疫学检测感染免疫学检测病原病原类型类型常规检测常规检测引起主要疾病引起主要疾病弓形虫弓形虫toxoplasma gondii寄生虫寄生虫IgM抗体抗体人畜共患。胎儿感染，可引起人畜共患。胎儿感染，可引起流产、中枢神经疾病等流产、中枢神经疾病等风疹病毒风疹病毒Rubella virusRNAIgG/IgM抗体抗体胎儿感染，可引起流产、畸形胎儿感染，可引起流产、畸形等等巨细胞病毒巨细胞病毒Cytomegalo virusDNAIgG/IgM抗

44、体，核酸抗体，核酸成人成人99%感染过感染过CMV,免疫功免疫功能低下者易再感或复燃，能低下者易再感或复燃，CMV可通过胎盘感染胎儿可通过胎盘感染胎儿,影响较大影响较大单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒Herps simplex virusDNAIgG/IgM抗体抗体疱疹性口腔炎、角膜炎、脑膜疱疹性口腔炎、角膜炎、脑膜炎等，孕妇感染可导致流产等炎等，孕妇感染可导致流产等n日本血吸虫抗体检测日本血吸虫抗体检测n机体感染血吸虫后可产生特异抗体，可作血清机体感染血吸虫后可产生特异抗体，可作血清IgGIgG、IgMIgM、IgEIgE检测，帮助临床诊断和流行病检测，帮助临床诊断和流行病调查。调查。n常用方法：环

45、卵沉淀试验，常用方法：环卵沉淀试验， ELISAELISA法特异抗体法特异抗体检测检测n血吸虫感染早期引起肝、脾肿大，晚期发展为血吸虫感染早期引起肝、脾肿大，晚期发展为门脉高压、巨脾和腹水。门脉高压、巨脾和腹水。n简介囊虫抗体检测简介囊虫抗体检测 猪肉绦虫的幼虫寄生人体猪肉绦虫的幼虫寄生人体, ,机体产生特异抗体机体产生特异抗体. .寄生虫感染免疫学检测寄生虫感染免疫学检测 CRPCRP是一种急性时相蛋白，由肝脏合成，能激活是一种急性时相蛋白，由肝脏合成，能激活补体促进细胞吞噬等免疫功能。近年来补体促进细胞吞噬等免疫功能。近年来CRPCRP检测被广检测被广泛应用。泛应用。CRPCRP增高特点为

46、：急性期增高明显，预后降低迅速，增高特点为：急性期增高明显，预后降低迅速，且受其它因素影响很小，特异性较差。且受其它因素影响很小，特异性较差。明显增高：急性细菌性感染、严重创伤、烧伤、大手明显增高：急性细菌性感染、严重创伤、烧伤、大手术、风湿病活动期等。术、风湿病活动期等。 轻度增高：病毒感染、恶性肿瘤、心血管疾轻度增高：病毒感染、恶性肿瘤、心血管疾 病、肝炎、移植等。病、肝炎、移植等。 冷球蛋白特征：冷球蛋白特征：3737C C溶解，温度降低凝固溶解，温度降低凝固 循环复合物检测：循环复合物检测：丙反应蛋白和冷球蛋白及循环复合物检测丙反应蛋白和冷球蛋白及循环复合物检测艾滋病血清血检查艾滋病血清血检查 艾 滋 病 又 称 获 得 性 免 疫 缺 陷