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文档简介
1、MoFloXDP(BD)台式流式细胞分FACSArialll选系统(BeckmanCoulter)高速流式细胞分选系统概述目前公认应用最广泛的高端流式分选速度慢,回收率低,活性分选仪。适合所有细胞,特别是极差,不能实现荧光微弱表达细低含量细胞(可低于百万分之一)胞群体的识别、低含量稀有细年代发展、仪的高速分选和特殊应用(如干细胞的分析分选、肿瘤等大细胞器特点和用户胞、SP细胞、精子、细胞器如线粒细胞周期检测、活细胞细胞周群体体、染色体、微生物、肿瘤大细胞期和SP干细胞实验等高端实等的分析分选),速度快、得率高,验,大部分用户购置后仪器只活性好,可成功用于后续功能研用于分析实验,分选功能无法究,
2、得到国内外用户的普遍验证真正实现分析性能在BeckmanMoFloXDP上,仪器模激光器型号和功率固定,主要块化设计,完全是一个开放平台,采用低成本的小功率激。(标配用户可根据自己的要求自行合理是小功率的激光,可以定制大配备各种波长的大功率商业化激功率)光器包括水冷激光,而且激光功率在BDSORPAria(用户特殊定制可调,并可单独控制开关或同时打型的高端Aria)的流式细胞仪开,激光寿命长,升级空间大。涉上也是选用大功率的激光器配及科研用户尤其是公共平台的实置。验需求非常宽泛,而且不断更新,FACSAriaII配备的375nm激光不同激光器的搭配和功率选择尤为低成本的近紫外激光,并非为重要。
3、在应用方面,大功率的激真正的UV激光,与Hoechst光器可保证更好的荧光分辨率,对和DAPI染料的最佳激发波峰偏于荧光微弱表达差异和荧光连续离较大,并非适宜的激发波长激光器配置表达的细胞群体识别更有优势,同(375nmNearUV激光对DAPI激光器配置时象细胞周期和干细胞研究等对和Hoechst染料的激发效率分分辨率高要求的实验必须使用大别只有80%和58%),而且激功率激光才能得以实现。光功率低下仅7mW,因而激发MoFloXDP配备的355nmTrueUV效率和使用效果大打折扣,并激光位于Hoechst和DAPI活细胞不能真正用于活细胞细胞周期染料的最佳激发波峰处(355nm和SP干细
4、胞检测这些对荧光灵TrueUV激光对DAPI和Hoechst敏度和分辨率要求极高的实验染料的激发效率均高达99%),中。上市以来并没有得到科研直是从事活细胞细胞周期和SP干工作者的普遍认可,也未见有细胞分析分选的研究人员们必不影响力的文献和数据公开发可缺的激光器,实验效果完美,帮表。另外,375nm激光也不能助研究人员成就多篇高水平文章。有效激发Indo-1钙流染料。因同时355nmTrueUV激光还可用此,375nmNearUV无法满足于激发经典的钙流检测染料活细胞相关实验的检测需求。Indo-1,因而在活细胞结构和功能相关的实验中应用广泛。唯一配置两台高精度数字化处理器,NI100M服务器
5、专门来处理荧与流式主机共用一台电脑来处电子系统光和电子信号,Dell工作站专门用理数据,运行速度缓慢,产率来进行仪器控制和数据收集,保证低高效的检测速度和高产率4,294,967,296道/32比特/232,是目前所有仪器中精度最高的(类数字化信号精似数码相机的像素高低差异),细道m比特»度胞分群更好,检测更准确,适于分道/8比特/8析分选稀有和微小荧光表达差异以及荧光连续表达的细胞群体双数字化信号处理器,采样频率单数字化信号处理器,采样频率10MHz(每0.1usee测量一因样本浓度咼、上样速度快而漏检次)细胞,不能被分析到的细胞更不可次)能被分选出来100MHz(每0.01use
6、e测量一次),数字化采样频保证高效的检测速度和产率,不会率分析速度>7万细胞/秒(受限于8参数>100000细胞/秒(>90%产率,真内,2万细胞/秒时约90%产率,实有效的高速)随速度增加,产率急剧下降,大部分细胞被漏检)10亿个细胞,是目前唯一能满足低细胞、组织来源细胞等,需要一次性收集海量样本,富集显示目的细胞亚群,来保证实验间的重复性和检测圈门的准确性含量细胞(低于百万分之一)精确分析和分选的平台。低含量稀有细单个样本获取胞群体是目前研究的热点如各种处理和存储的功能独特的免疫调节细胞亚群、干250万个细胞细胞数量分选性能采用石英杯分选技术,石英杯际公空气用发和分分选式
7、,这细国在各厂家分析型流式上普遍使际公认的用于咼速分选型流式细田并不适合八选口曰为了检测和分选方胞仪的最佳激发方式,大幅度地提用,并不适合八选,口是为了升分选速度、纯度和细胞活性,细降受到器成本的分选速度选纯度受到非常大的影响,分选到和分选少确产量咼,冋时保证检测的细胞活性差,碎片多、产量和分选准确性低70000细胞/秒(>90%产率,真实分选速度有效的高速),分选速度快,细胞25000细胞/秒在外界停留时间短,活性和后续更5000时秒能更佳,节省实验时间分选纯度分选产率收率)纯度>99%(任何速度下)(回>90%(70000细胞/秒),>98%(25000细胞/秒)回
8、收率>80%(25000细胞/秒)高200KHZ(每秒20万个),液滴振荡频率足够多的液滴,最大限度保证每个液滴振荡频率液滴中只有一个细胞,从而获得较高的分选速度和回收率4路分选,主要的流式分选模式为纯度、富集(注重回收率)和单细胞分选。MoFloXDP独有的混合式分选逻辑:可以根据实验需求和待分选细胞群体比例,在一次分选中同时对不同的分选通道采用不同4路分选,但在一次分选中无法的分选收集模式(部分通道选择富同时对几群细胞按照不同模式4路分选及分集,其余通道选择纯度,即“或”的分选,也无法对同一群细胞同选模式选择逻辑),也可在一次分选中对同一时进行兼顾纯度和得率的分群细胞同时采用富集和纯
9、度两种选,无法解决纯度和得率这一分选模式,以确保高速分选状态下矛盾体为确保纯度而舍弃掉的那部分细胞回收,必要时可重新进行二次分选,真正有效兼顾纯度和产量,尤其适合低含量细胞和来源珍贵的样本最多为384wells单细胞孔板克61536wells隆分选6-1536wells能产牛能产土100KHZ(每秒10万个),只能二二产生相对少的液滴,使得分选速度和回收率较低细胞微阵列分细胞芯片或者客户自定义阵列选喷嘴(1536dropswithina642x555无umarray)提供50200um8种不同规格喷嘴,能分选极小的细胞如微生物和极大细胞如肿瘤细胞、植物细胞等,充分满足生物学各式各样样本仅701
10、30um范围内4种,的多种需求,喷嘴口径需要与细胞无法满足小细胞和大细胞的极大小相匹配,才能保证高速度、高限检测需求,同时不适宜的喷活性,并防止堵塞。喷嘴螺纹式设嘴规格影响细胞分选活性和纯计,易于安装且位置固定,不受操度且易堵塞作者经验影响,內壁为纳米专利涂层,确保细胞活性,可高压灭菌,重复使用软件和操作系统所有操作都可以在触摸屏上完成触摸屏(包括分析/分选/清洗操作步无骤),所有数据在触摸屏上同时显无示,向导式界面,图标按照操作顺序排列,简单,直观,逻辑性强,易掌握基于WindowsXP平台的Summit软件,简单易学,界面友好,功能基于WindowsXP平台的Diva强大,兼容各种标准格式的流式数软件,逻辑复杂,操作繁琐,软件功能据,支持脱机补偿和自动补偿,可不支持直方图overlay,软件响以直接在图形上添加逻辑门和统应速度慢,易死机导致
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