苦参碱的提取

1、2022-5-81XXX1440XX班1440XXXX2022-5-82苦参碱来源理化性质药理用途分离方法苦参碱是由豆科植物苦参的干燥根、植株、果实经苦参碱是由豆科植物苦参的干燥根、植株、果实经乙醇等有机溶剂提取制成的，乙醇等有机溶剂提取制成的， 是生物碱。一般为苦是生物碱。一般为苦参总碱，其主要成分有苦参碱、槐果碱、氧化槐果参总碱，其主要成分有苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱、槐定碱等多种生物碱，以苦参碱、氧化苦参碱碱、槐定碱等多种生物碱，以苦参碱、氧化苦参碱含量最高。其他来源为山豆根及山豆根地上部分，含量最高。其他来源为山豆根及山豆根地上部分，纯品外观为白色粉末。纯品外观为白色粉末。2022-5

2、-83苦参碱来源理化性质2022-5-84物理性质物理性质颜色：纯品外观为白色粉末。久置露空气颜色：纯品外观为白色粉末。久置露空气中，有引湿性，并变为淡黄色。中，有引湿性，并变为淡黄色。气味：无臭，味苦。气味：无臭，味苦。性状：多为晶型，在苦参碱的性状：多为晶型，在苦参碱的、四种类型中分别有不同的性状：四种类型中分别有不同的性状：型，针状型，针状或棱柱状结晶；或棱柱状结晶；型，正斜方形棱柱状结晶；型，正斜方形棱柱状结晶；型，液体；型，液体；型，棱柱状结晶。型，棱柱状结晶。 熔沸点：熔沸点：型，熔点型，熔点76，型，熔点型，熔点87；型，液体，沸点型，液体，沸点223(800Pa)；型，熔点型，

3、熔点84。溶解性：苦参碱既可溶于水，又能溶于氯溶解性：苦参碱既可溶于水，又能溶于氯仿、乙醚、苯、甲苯、二硫化碳等亲脂性溶仿、乙醚、苯、甲苯、二硫化碳等亲脂性溶剂。氧化苦参碱亲水性更强，易溶于水，可剂。氧化苦参碱亲水性更强，易溶于水，可溶于氯仿，难溶于乙醚。苦参中生物碱的极溶于氯仿，难溶于乙醚。苦参中生物碱的极性顺序是：氧化苦参碱羟基苦参碱苦参性顺序是：氧化苦参碱羟基苦参碱苦参碱。碱。2022-5-8药理用途 （1）在医学方面的应用：）在医学方面的应用： 苦参碱对中枢神经具有解热、镇痛、抗惊厥、稳定神经等作用苦参碱对中枢神经具有解热、镇痛、抗惊厥、稳定神经等作用; 对心血管系统具有明显的负性频率

4、和正性肌力作用、能防治动脉粥样硬对心血管系统具有明显的负性频率和正性肌力作用、能防治动脉粥样硬化、减轻心肌损伤等作用化、减轻心肌损伤等作用;对消化系统具有杭肝损伤、抗纤维化、升高对消化系统具有杭肝损伤、抗纤维化、升高白细胞等作用白细胞等作用; 还具有抗肿瘤、抗肝癌等作用。还具有抗肿瘤、抗肝癌等作用。 （2）临床应用：）临床应用： 苦参素的制剂临床主要用于慢性活动性肝炎和慢性迁延性肝炎，对急性苦参素的制剂临床主要用于慢性活动性肝炎和慢性迁延性肝炎，对急性黄疸型肝炎也有作用；也用于慢性宫颈炎，老年性、滴虫性、霉菌性阴黄疸型肝炎也有作用；也用于慢性宫颈炎，老年性、滴虫性、霉菌性阴道炎，附件炎，盆腔炎

5、等，对子宫肌瘤及宫颈癌亦有较好的预防和治疗道炎，附件炎，盆腔炎等，对子宫肌瘤及宫颈癌亦有较好的预防和治疗作用；适用于肿瘤放、化疗引起的白细胞低下及其它原因引起的白细胞作用；适用于肿瘤放、化疗引起的白细胞低下及其它原因引起的白细胞减少症；在心血管疾病中用于心率失常、心率衰竭、心肌炎、冠心病等；减少症；在心血管疾病中用于心率失常、心率衰竭、心肌炎、冠心病等；还可用于湿疹等。苦参碱添加到视网膜母细胞瘤细胞培养导致降低肿瘤还可用于湿疹等。苦参碱添加到视网膜母细胞瘤细胞培养导致降低肿瘤细胞的有丝分裂增殖速率下降，并加快肿瘤细胞细胞凋亡，同时，调节细胞的有丝分裂增殖速率下降，并加快肿瘤细胞细胞凋亡，同时，

6、调节蛋白细胞或使凋亡周期发生相应的变化蛋白细胞或使凋亡周期发生相应的变化2022-5-8分离方法1 酸水提取法酸水提取法 苦参以稀酸水渗漉，酸水提取液通过强酸性阳离子交换树脂提取总生物碱。苦参以稀酸水渗漉，酸水提取液通过强酸性阳离子交换树脂提取总生物碱。苦参碱和氧化苦参碱的分离，利用二者在乙醚中的溶解度不同进行。氧化苦参碱和氧化苦参碱的分离，利用二者在乙醚中的溶解度不同进行。氧化苦参碱的苦参碱的NO半极性配位键，极性大，在水中溶解度较大，在乙醚中溶半极性配位键，极性大，在水中溶解度较大，在乙醚中溶解度较小。将总生物碱溶于氯仿，加入解度较小。将总生物碱溶于氯仿，加入10倍量乙醚，氧化苦参碱沉淀析

7、出倍量乙醚，氧化苦参碱沉淀析出. 具体操作流程实例：具体操作流程实例：1.1取粉碎的苦参样品取粉碎的苦参样品,用用80%的酸性乙醇的酸性乙醇(pH=24)渗漏提取至无生物碱反应渗漏提取至无生物碱反应,提取液减压浓缩后用适量的自来水溶解提取液减压浓缩后用适量的自来水溶解,滤除不滤除不溶物溶物,上清液用氯仿反复萃取至无生物碱反应上清液用氯仿反复萃取至无生物碱反应,回收氯仿后得到苦参总生物回收氯仿后得到苦参总生物碱。碱。1.2苦参总生物碱用硅胶柱层析分离苦参总生物碱用硅胶柱层析分离,溶剂溶剂:氯仿、甲醇、氨水氯仿、甲醇、氨水(9:1:0.3),在此在此溶剂下溶剂下,氧化苦参碱氧化苦参碱Rf=0.28

8、(与标准样对照与标准样对照),将相同组分合并将相同组分合并,浓缩至适量后浓缩至适量后按按1:1加入乙醚加入乙醚,滤除沉淀物滤除沉淀物,上清液继续加入乙醚至氧化苦参碱全部沉淀上清液继续加入乙醚至氧化苦参碱全部沉淀,次日过滤次日过滤,用丙酮重结晶得到氧化苦参碱单体用丙酮重结晶得到氧化苦参碱单体,120烘干烘干3h,mp.206.5,与与标准品混合后测熔点标准品混合后测熔点,熔点相同。熔点相同。2022-5-8分离方法2 浸泡超声提取法生产工艺步骤浸泡超声提取法生产工艺步骤2.1 将苦参根干燥粉碎，粒度将苦参根干燥粉碎，粒度60目，目，1：61：10的重量比例的重量比例与与60%乙醇溶液混合，乙醇溶

9、液混合，25C搅拌过夜。搅拌过夜。2.2 以以19200kHz频率超声振荡频率超声振荡30min；过滤除去不溶物，提；过滤除去不溶物，提取液于取液于80C蒸干。蒸干。2.3 取上述干粉约取上述干粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入氯仿入氯仿25mL，浓氨试液，浓氨试液0.3mL，称定重量，摇匀，室温放置，称定重量，摇匀，室温放置过夜（过夜（16h以上），再称定重量，补足损失的溶剂量，振摇后以上），再称定重量，补足损失的溶剂量，振摇后放置，用滤纸滤过。精密量取滤液放置，用滤纸滤过。精密量取滤液10mL，置水浴蒸干，残渣，置水浴蒸干，残渣加乙醚加乙醚5

10、mL放置。精密加硫酸滴定液（放置。精密加硫酸滴定液（0.01moll-1）10 mL，摇匀，置水浴上加热使残渣完全溶解并除尽乙醚，放冷。加新摇匀，置水浴上加热使残渣完全溶解并除尽乙醚，放冷。加新沸后放冷的蒸馏水沸后放冷的蒸馏水15mL与甲基红指示液与甲基红指示液2滴，用氢氧化钠滴定滴，用氢氧化钠滴定液（液（0.02moll-1） 滴定至黄色，即得。每滴定至黄色，即得。每1mL的硫酸滴定液的硫酸滴定液（0.01moll-1） 相当于相当于4.967mg的苦参碱。的苦参碱。2022-5-8分离方法3 高温浸泡提取法生产工艺步骤高温浸泡提取法生产工艺步骤3.1 将苦参根干燥粉碎，粒度将苦参根干燥粉碎

11、，粒度60目，目，1：61：10的重量比例的重量比例与与60%乙醇溶液混合，乙醇溶液混合，80C搅拌过夜。搅拌过夜。3.2 过滤除去不溶物，提取液于过滤除去不溶物，提取液于80C蒸干。蒸干。3.3 取上述干粉约取上述干粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入氯仿入氯仿25mL，浓氨试液，浓氨试液0.3mL，称定重量，摇匀，室温放置，称定重量，摇匀，室温放置过夜（过夜（16h以上），再称定重量，补足损失的溶剂量，振摇后以上），再称定重量，补足损失的溶剂量，振摇后放置，用滤纸滤过。精密量取滤液放置，用滤纸滤过。精密量取滤液10mL，置水浴蒸干，残渣，置水浴

12、蒸干，残渣加乙醚加乙醚5 mL放置。精密加硫酸滴定液（放置。精密加硫酸滴定液（0.01moll-1） 10mL，摇匀，置水浴上加热使残渣完全溶解并除尽乙醚，放冷。加新摇匀，置水浴上加热使残渣完全溶解并除尽乙醚，放冷。加新沸后放冷的蒸馏水沸后放冷的蒸馏水15mL与甲基红指示液与甲基红指示液2滴，用氢氧化钠滴定滴，用氢氧化钠滴定液（液（0.02moll-1）滴定至黄色，即得。每）滴定至黄色，即得。每1mL的硫酸滴定液的硫酸滴定液（0.01moll-1）相当于）相当于4.967mg的苦参碱。的苦参碱。2022-5-8分离方法4 碱性醇提取法工艺步骤碱性醇提取法工艺步骤4.1 将苦参根干燥粉碎，粒度将

13、苦参根干燥粉碎，粒度60目，目，1：61：10的重量比例的重量比例与与60%乙醇溶液（含有乙醇溶液（含有0.02%氨水）混合，氨水）混合，80C搅拌过夜。搅拌过夜。4.2 过滤除去不溶物，提取液于过滤除去不溶物，提取液于80C蒸干。蒸干。4.3取上述干粉取上述干粉0.5g，精密称定，置于锥形瓶中，加入氯仿，精密称定，置于锥形瓶中，加入氯仿25ml浓氨试剂浓氨试剂0.3ml，称定重量，摇匀，室温放置过夜，再称，称定重量，摇匀，室温放置过夜，再称定重量，补足损失的溶剂，摇匀。过滤。精密量取定重量，补足损失的溶剂，摇匀。过滤。精密量取10ml，置，置水浴蒸干，残渣加水浴蒸干，残渣加5ml乙醚。置水浴

14、上加热至完全溶解并除尽乙醚。置水浴上加热至完全溶解并除尽乙醚。加蒸馏水乙醚。加蒸馏水15ml，甲基红指示液，甲基红指示液2滴，用氢氧化钠滴定液滴，用氢氧化钠滴定液（0.02molL）滴定至黄色，即得。每毫升硫酸滴定液相当于）滴定至黄色，即得。每毫升硫酸滴定液相当于4.967mg的苦参碱。的苦参碱。2022-5-8检测中的分离方法高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)：以液体为流动相，采用高压输液系统，：以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被

15、分离后，进入检测器进行泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。其用于液液分离时，流动相和固定相检测，从而实现对试样的分析。其用于液液分离时，流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱，溶质在两相间进流失），有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行分配。达到平衡时，服从于高效液相色谱计算公式：行分配。达到平衡时，服从于高效液相色谱计算公式：K=Cs/Cm=kVm/Vs.式中式中,Cs溶质在固定相中浓度；溶质在固定相中浓度；Cm-溶质在流动相中的浓度；溶质在流动相中的浓度； Vs固定相固定相的体积；的体积；Vm流动相的体积。流动相的体积。LLPC与与GPC有相似之处，即分离的顺有相似之处，即分离的顺序取决于序取决于K,K大的组分保留值大；但也有不同之处大的组分保留值大；但也有不同之处,GPC中，流动相对中，流动相对K影响不大影响不大,LLPC流动相对流动相对K影响较大。