洁净区地漏的清洁消毒周期方法

1、验证/确认方案审批表验证/确认方案名称洁净区地漏的清洁消毒周期验证方案验证/确认方案编号验证/确认方式同步验证职责姓名部门职位/岗位签名日期p«.JX起草人*|XX"%/审核人Vy'ii卜7*!VXX-1批准人目录1 .概述也'1.、2 .验证目的3 .验证范围4 .验证小组成员及职责：5 .验证内容5.1 验证前的检查5.2 验证步骤6 .偏差分析及处理7.SOP的修订8 .验证结果与评价9 .拟定再确认周期10 .验证时间安排11 .参考文献、111_12.附件1 .概述：本公司D级洁净区生产车间均装有洁净地漏，洁净地漏由盖板、地漏槽、水封盖组成。按照“

2、洁净区地漏清洁标准操作规程”，每周对地漏清洁，清洁后使用0.1%新洁尔灭、75%乙醇溶液对地漏进行液封，每月轮换一次消毒液，用于防止微生物的滋生以及下水道内的废气倒灌入洁净室造成污染，保证生产环境、检验环境符合规定，最终保证药品质量。本方案通过生产车间地漏清洁后，对地漏注入一定量的消毒液，取消毒后第1天、第3天、第5天、第7天、第9天的消毒滞留液，按确认的消毒液微生物限度检查法计数方法进行检验，检查地漏消毒滞留液的微生物状况，以验证消毒效果，确认的消毒周期。参与本次验证的人员均应经过培训。7(iIi,i,2.验证目的：按照“洁净区地漏清洁标准操作规程”对洁净区地漏进行清洁消毒，确认清洁方法的有

3、效性及消毒效期，从而避免洁净区地漏内微生物的滋生。3 .验证范围：本方案适用于本公司洁净区地漏的清洁消毒周期。4 .验证小组成员及职责：4.1 验证小组成员名单：验证小组姓名部门职称/职务负责内容组长成员4.2 职责4.2.1 验证委员会4.2.1.1负责验证方案的审核批准。4.2.1.2 负责验证的协调工作，保证本验证方案规定项目的顺利实施。对验证工作中出现的问题提出改进意见并监督落实。4.2.1.3 负责验证数据及结果的审核。4.2.1.4 负责验证报告的审批。4.2.1.5 负责发放验证合格证书。4.2.2质量管理部4.2.2.1 负责制定验证方案。4.2.2.2 负责组织验证的实施。4

4、.2.2.3 负责收集整理各项验证材料，汇总形成验证报告。4.2.2.4 负责对验证出现的变更、偏差等情况进行调查及处理。5.验证内容5.2.1 新洁尔灭的消毒原理：新洁尔灭是一种阳离子表面活性剂，能破坏细胞膜，改变细胞的渗透性，使细菌破裂；还能使蛋白质变性，抑制细菌体内某些酶，使之失去活性；因具有良好的表面活性，还可高浓度聚集于菌体表面，影响细胞的新陈代谢，从而杀灭细菌。5.2.2 75%乙醇的消毒原理：乙醇能够渗入细胞体内，能够吸收细菌蛋白的水分，使其脱水变性凝周，从而达到杀灭细菌。=1-L.5.2.3 消毒剂配制方法：按“清洁剂、消毒剂配制标准操作规程”进行配制。5.2.3.1 75%L

5、醇溶液：洗净配制容器及量具，根据需配制75%L醇的量分别计量所需乙醇及纯化水，将量取乙醇加入容器中，加入计量量的纯化水搅拌均匀，稀释成75%L醇溶液，置干燥的洁净容器内密闭保存。5.2.3.2 0.1%新洁尔灭溶液：洗净配制容器及量具，根据需配制0.1%新洁尔灭溶液的量分别计量所需新洁尔灭及纯化水，将量取新洁尔灭加入容器中，加入计量量的纯化水搅拌均匀，稀释成0.1%新洁尔灭溶液，置干燥的洁净容器内密闭保存。5.2.4 地漏的清洁方法：按“洁净区地漏清洁标准操作规程”5.2.4.1 打开不锈钢盖，拿起多孔挡板，置于桶内。5.2.4.2 将适量洗洁精溶液倒入地漏环形水封中，用塑料刷对地漏内表面进行

6、刷洗。取一桶纯化水仔细冲洗地漏内表面后，然后用洁净布将地漏液封内残留的纯化水擦干，再用消毒剂进行喷洗消毒，并使消毒剂在地漏中形成液封。5.2.4.3 按顺序盖上已消毒备用的多孔挡板，不锈钢盖。5.2.4.4 将待清洁的不锈钢盖和多孔挡板移至卫生洁具间，用塑料刷蘸洗洁精对其进行刷洗至无污垢，用纯化水冲洗干净后，用消毒剂浸泡后取出，备用。5.2.5消毒液的微生物限度检查法计数方法的确认5.2.5.1 消毒液的微生物限度检查法计数方法：拟采用薄膜过滤法去除残留消毒剂，通过薄膜过滤和冲洗的方法，去除试验体系中的残留消毒剂，以便准确检测出试验体系中仍然存活的微生物及其欢迎共阅数量。本方法可去除残留消毒剂

7、对微生物的杀灭和抑制作用。5.2.5.2 验证目的：通过消毒液的微生物限度检查法计数方法的确认，可确认所选方法是否对测试消毒剂有良好的去除作用，对试验微生物以及其恢复期培养是否有害或不良影响。5.2.5.3 菌液制备：接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，培养1824小时；接种白色念珠菌于改良马丁琼脂培养基中，培养2448小时；将上述培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50100cfu的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中，培养57天，加入35ml含0.05%(ml/ml)聚山梨脂80的0.9%无菌氯化钠溶液，将抱子洗脱。然

8、后，吸出抱子悬液(用管口带有薄的无菌纱布能过滤菌丝的、%I-无菌移液管)至无菌试管内，用含0.05%(ml/ml)聚山梨脂80的0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含抱子数50100cfu的抱子悬液，备用。5.2.5.4 试验组：取75%酉精、0.1%新洁尔灭各1ml至适量pH7.0无菌氯化钠-蛋白冻缓冲液中摇匀，经薄膜过滤后，再用500mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白冻缓冲液冲洗滤膜，每次冲洗约50ml,在最后一次冲洗液中分别加入上述5种试验菌50100cfu,过滤，取出滤膜，菌面朝上，贴于营养琼脂培养基及玫瑰红钠琼脂培养基上。5种试验菌各平行制备两份。5.2.5.5 菌液组：测定所加的试验菌数

9、，在最后一次冲洗液中加入上述5种试验菌50100cfu,过滤，取出滤膜，菌面朝上，贴于营养琼脂培养基及玫瑰红钠琼脂培养基上。一一-'i>|5.2.5.6 供试品对照组：取75%S精、0.1%新洁尔灭各1ml至适量pH7.0无菌氯化钠-蛋白冻缓冲液中摇匀，经薄膜过滤后，再用500mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白冻缓冲液冲洗滤膜，每次冲洗约50ml,过滤，取出滤膜，菌面朝上，贴于营养琼脂培养基及玫瑰红钠琼脂培养基上。每种培养基各平行制备两份。5.2.5.7 稀释剂对照组：用500mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白冻缓冲液冲洗滤膜，每次冲洗约50ml,在最后一次冲洗液中分别加入上述5种试验菌

10、50100cfu,过滤，取出滤膜，菌面朝上，贴于营养琼脂培养基及玫瑰红钠琼脂培养基上。5种试验菌各平行制备两份。5.2.5.8 培养及计数：将上述营养琼脂培养基倒置于3035oC培养箱培养3大；玫瑰红钠琼脂培养基倒置于2328oC培养箱培养5天，必要时可延长至7天，计数。5.2.5.9 验证次数：验证重复3次。5.2.5.10 可接受标准：在3次独立的平行试验中，稀释剂对照组及试验组的菌数回收率均不低于70%5.2.5.11 结果判断：在3次独立的平行试验中，稀释剂对照组及试验组的菌数回收率均不低于70%照该检验方法进行检验，若任一次t佥中试验组的菌数回收率低于70%则应采用其它方法进行检验。

11、5.2.5.12 回收率的计算试验组的菌回收率（%=试验组的平均菌落数-供试品对照组的平均菌落数X100%菌液组的平均菌落数稀释剂对照组白菌回收率（%=稀释剂对照组平均菌落数X100%菌液组的平均菌落数消毒液的细菌、霉菌及酵母菌计数方法的确认5.2.6地漏清洁消毒周期的验证5.2.6.1 试验用具：5ml移液管、1ml移液管、10ml试管、培养皿、不锈钢勺子，灭菌备用。5.2.6.2 取样方法：取样前先用已灭菌的不锈钢勺子在地漏边缘轻轻搅拌，用5ml移液管吸取地漏消毒滞留液5ml转移至10ml的试管中，密闭，待检。5.2.6.3 取样地点：5.2.6.4 取样计划与周期：取消毒后第1天、第3天

12、、第5天、第7天、第9天的地漏消毒滞留液进行微生物限度检查，以此为一个验证周期。5.2.6.5 验证次数：75叱醇溶液、0.1%新洁尔灭溶液各做一个验证周期。5.2.6.6 验证方法：按上述5.2.5已确认的消毒液的微生物限度检查法计数方法进行验证。先用少量的pH7.0无菌氯化钠-蛋白冻缓冲液润湿滤膜，将装有待检地漏消毒滞留液的试管振摇均匀，取待检液1ml至适量pH7.0无菌氯化钠-蛋白冻缓冲液中，混匀，过滤，用500mlpH7.0无菌氯7'iIi.i,化钠-蛋白冻缓冲液冲洗滤膜。滤后取出滤膜，菌面朝上分别贴于已制备好的营养琼脂培养基及玫,11j1现红钠琼脂培养基平板上。阴性对照：取1ml的pH7.0无菌氯化钠-蛋白冻缓冲液照上述方法操作，阴性对照不得有菌生长。每种培养基各制备2张滤膜。细菌在30c35c培养3大，霉菌及酵母菌在23c28c培养5天，必要时可延长至7天。5.2.6.7 可接受标准细菌、霉菌及酵母菌数010CFU/mb8 .验证结果与评价8.1 验证结束后将所得数据及记录进行收集及整理，起草验证报告，对验证内容和结果进行分析、评价，最后得出验证结论。8.2 将验证所得结果与可接受标准进行对比，在验证周期内，按确认的消毒液的微生物限度