第4章 血凝分析

1、第四章第四章 血凝分析血凝分析主讲：周振华 一、血管壁的止血功能(P153) 二、血小板的止血功能(P155) 三、抗凝及纤溶系统(P156)1 1、血管收缩、血管收缩2 2、血小板血栓形成、血小板血栓形成3 3、血液凝固、血液凝固 血液凝固是由凝血因子按一定顺序相血液凝固是由凝血因子按一定顺序相继激活而生成的继激活而生成的凝血酶凝血酶最终使纤维蛋白原最终使纤维蛋白原变为纤维蛋白的过程。因此，凝血过程可变为纤维蛋白的过程。因此，凝血过程可分为分为凝血酶原酶复合物的形成凝血酶原酶复合物的形成、凝血酶原凝血酶原的激活的激活和和纤维蛋白的生成纤维蛋白的生成三个基本步骤。三个基本步骤。出血与凝血机制出

2、血与凝血机制出血与凝血机制出血与凝血机制生理性止血过程示意图生理性止血过程示意图5HT5HT：5 5羟色胺，羟色胺，TXATXA2 2: :血栓烷血栓烷A A2 2凝血凝血酶原酶酶原酶复合物复合物可通过可通过内源性内源性凝血途径和外凝血途径和外源性凝血途径源性凝血途径生成。生成。凝血途径 （简化）（简化）凝血酶原凝血酶原 血凝仪可进行血栓与止血的实验室检查。 可为出血性和血栓性疾病的诊断、溶栓以及抗凝治疗的监测及疗效观察提供有价值的指标。 血凝仪检测原理血凝仪检测原理（二）底物显色法（二）底物显色法 生物化学法生物化学法：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子：以底物释放产色基团量的变化测定有

3、关因子（一）凝固法（一）凝固法 生物物理法生物物理法电流法电流法纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白导电导电光学法光学法散射比浊法散射比浊法凝固过程中散射光变凝固过程中散射光变化化透射比浊法透射比浊法凝固过程中吸光度变化凝固过程中吸光度变化浊度变化浊度变化光度变化光度变化双磁路磁珠法双磁路磁珠法钢珠振幅衰减程度判断终点钢珠振幅衰减程度判断终点光电磁珠法光电磁珠法吸光度衰减程度判断终点吸光度衰减程度判断终点（三）免疫学法（三）免疫学法 抗原抗体抗原抗体免疫扩散法免疫扩散法火箭电泳火箭电泳双向免疫电泳双向免疫电泳免疫比浊免疫比浊ELISA法法直接比浊直接比浊乳胶比浊乳胶比浊散射比浊散射比浊透射比浊

4、透射比浊样本预温槽样本预温槽试剂预温槽试剂预温槽加样器加样器检测系统（光、磁）检测系统（光、磁）微机微机4.检测系统检测系统 仪器检测系统通常包括两种以上的检测方法：仪器检测系统通常包括两种以上的检测方法：双磁路磁珠法、散射比浊法、透射比浊法、底物双磁路磁珠法、散射比浊法、透射比浊法、底物显色法等等。显色法等等。5.计算机系统计算机系统 系统软件控制凝血仪的所有工作过程，并将系统软件控制凝血仪的所有工作过程，并将检测到的数据进行分析处理最终得到测试结果。检测到的数据进行分析处理最终得到测试结果。对检测结果进行存储、质控统计等工作对检测结果进行存储、质控统计等工作6.输出设备输出设备 通过计算机

5、屏幕或打印机输出测试结果。通过计算机屏幕或打印机输出测试结果。 第三节第三节 血凝分析临床应用血凝分析临床应用凝血四项：凝血四项：PT、APTT、Fbg、TT 检测出血性疾病检测出血性疾病 检测血栓性疾病检测血栓性疾病 手术前止血功能检查手术前止血功能检查 临床抗凝治疗监测临床抗凝治疗监测 弥漫性血管内凝血的检测弥漫性血管内凝血的检测 病人准备：病人准备：药物影响。药物影响。 抗凝药、抗血小板药、溶栓防栓药，抗凝药、抗血小板药、溶栓防栓药，如如APCAPC、避孕药。、避孕药。抗凝：抗凝： 抗凝剂：抗凝剂：109mmol/L109mmol/L枸橼酸钠枸橼酸钠1:91:9 试管：真空抗凝管、塑料试

6、管试管：真空抗凝管、塑料试管注意事项：注意事项：采血顺利、混匀充分；立即送采血顺利、混匀充分；立即送检，检，2h2h完成。完成。反应总原理 PT(凝血酶原时间凝血酶原时间)APTT（活化部分凝血活酶时间）（活化部分凝血活酶时间）Fib（纤维蛋白原）（纤维蛋白原）TT（凝血酶时间）（凝血酶时间）病人血浆病人血浆不同反应试剂不同反应试剂检测血浆凝固检测血浆凝固的时间的时间 反映外源性凝血途反映外源性凝血途径中径中II、V、VII、X因子水平的实验。因子水平的实验。1、原理：一步凝固法：在抗凝血中，加入过量的组织凝血活酶（含TF）和适量的钙离子，即可满足外源性凝血的全部条件。从加入试剂到血浆到血浆开

7、始凝固所需的时间即血浆凝血酶原时间。 参考范围参考范围 平均值为（平均值为（12121 1）s s，超过正常对照值，超过正常对照值3s3s 为异常。为异常。凝固时间凝固时间血浆血浆 组织凝血活酶（组织凝血活酶（TFTF） CaCa2+2+ PTPT延长：延长： 先天凝血因子异常先天凝血因子异常, ,如如I I、IIII、V V、VIIVII、X X因子中某因子中某一项或几项因子水平缺乏。可用于外源凝血因子缺陷一项或几项因子水平缺乏。可用于外源凝血因子缺陷的筛查。的筛查。 后天凝血因子缺乏，如肝脏疾病、肝硬化（大多后天凝血因子缺乏，如肝脏疾病、肝硬化（大多数凝血因子由肝脏合成）、维生素数凝血因子

8、由肝脏合成）、维生素K K缺乏（可见于阻塞缺乏（可见于阻塞性黄疸）。可用作肝脏蛋白质合成功能的检测手段。性黄疸）。可用作肝脏蛋白质合成功能的检测手段。 DICDIC后期后期( (由于大量消耗和产生的由于大量消耗和产生的FDPFDP拮抗凝血酶的拮抗凝血酶的作用使作用使PTPT延长，因此可用作延长，因此可用作DICDIC的检测）、口服抗凝药的检测）、口服抗凝药（可密定、华法林，（可密定、华法林，PTPT最敏感）、肝素等。最敏感）、肝素等。 PTPT缩短：缩短： 高凝状态：高凝状态：DICDIC早期，心梗、脑血栓形成，深静脉早期，心梗、脑血栓形成，深静脉血栓形成，口服避孕药，血栓形成，口服避孕药，P

9、TPT时间缩短，但并不常见。时间缩短，但并不常见。1.1.凝血酶原时间比值（凝血酶原时间比值（PTRPTR） PTR = PTPTR = PT受检受检 /PT/PT对照对照 参考值为参考值为0.850.851.151.152.2.国际标准化比值（国际标准化比值（INRINR） （WHOWHO规定口服抗凝剂患者的报告方式）规定口服抗凝剂患者的报告方式） INR= PTR INR= PTRISI ，参考值为，参考值为0.0.-1.-1. ISI ISI：国际敏感指数：国际敏感指数是反映内源性凝血途是反映内源性凝血途径中径中VIIIVIII、IXIX、XIXI、XIIXII因子水平的实验，因子水平的

10、实验，APTT只反映因子水平，并不反映凝血因子是否活化。原理：在抗凝血浆中，加入过量的活化接触因子激活剂（如白陶土）和部分凝血活酶（代替血小板磷脂），再加入适量的钙离子即可满足内源凝血的全部条件。从加入钙离子到血浆开始凝固所需的时间即为活化部分凝血活酶时间。参考范围参考范围 32-43 32-43秒，受检者较正常对照值延长秒，受检者较正常对照值延长10s10s以上才有意义。以上才有意义。l白陶土（接触因子激活剂）白陶土（接触因子激活剂）l部分凝血活酶（脑磷脂）部分凝血活酶（脑磷脂）l Ca2+凝固时间凝固时间血浆血浆 APTTAPTT延长：延长： 、和和因子中某一项或几项因子水平缺乏；血友病甲

11、、血因子中某一项或几项因子水平缺乏；血友病甲、血友病乙。友病乙。 肝脏疾病、肝硬化、肝脏疾病、肝硬化、DICDIC后期继发纤溶亢进时，敏感性略差。后期继发纤溶亢进时，敏感性略差。 肝素治疗的监护：肝素治疗的监护：一般在肝素治疗期间，一般在肝素治疗期间，APTTAPTT维持在正常对照的维持在正常对照的1.5-2.51.5-2.5倍适宜。倍适宜。 溶栓治疗时溶栓治疗时，ATPPATPP与与PTPT、TTTT应将值控制在正常值的应将值控制在正常值的2 2倍。倍。 APTTAPTT缩短：缩短： 见于血液呈高凝状态，见于血液呈高凝状态，DICDIC早期、血栓前状态、血栓性疾病。早期、血栓前状态、血栓性疾

12、病。检测原理：血浆中加入过量的凝血酶，使纤维蛋白原变成检测原理：血浆中加入过量的凝血酶，使纤维蛋白原变成纤维蛋白。纤维蛋白。参考值参考值：2-4g/L 2-4g/L 意意 义义 减少：减少： 1 1先天性纤维蛋白原缺乏症，原发性先天性纤维蛋白原缺乏症，原发性FgFg减少、原减少、原 发纤溶发纤溶 2 2DICDIC晚期（消耗过多）晚期（消耗过多） 3 3严重肝病严重肝病 增高：增高： 1 1高凝状态：血栓性疾病，急性炎症、手术创高凝状态：血栓性疾病，急性炎症、手术创 伤、恶性肿瘤等伤、恶性肿瘤等 (Fg(Fg是急性时相蛋白是急性时相蛋白) ) 2 2生理性：部分正常老人，妊娠晚期生理性：部分正

13、常老人，妊娠晚期反映反映共同途径是否存在抗凝或纤溶亢进共同途径是否存在抗凝或纤溶亢进血浆血浆凝固时间凝固时间标准凝血酶标准凝血酶原理：在抗凝血浆中加入“标准化”凝血酶溶液，直接将纤维蛋白原转变为纤维蛋白，测定血浆开始凝固所需的时间。 参考范围参考范围：16-1816-18秒，秒， 以超过正常对照以超过正常对照3 3秒以上为有病理意义秒以上为有病理意义 TTTT延长延长1 1、血浆纤维蛋白原水平低下，如低、血浆纤维蛋白原水平低下，如低( (无无) )纤维蛋白原血症，异纤维蛋白原血症，异常纤维蛋白原血症等。常纤维蛋白原血症等。(FIB(FIB减少时减少时TTTT延长延长) )2 2、循环中有抗凝血酶活性增高，如、循环中有抗凝血酶活性增高，如FDPFDP存在、高肝素血症、存在、高肝素血症、抗凝血酶抗凝血酶活性增