4体外诊断试剂性能评价方法

1、、名词：1. STDEVP和STDEV,STDEV求的是样本的标准差,STDEVP求的是总体的标准差。STDEV平方=1/（n-1）KXi-X平均值）平方;STDEVP平方=1/n（Xi-X平均值）平方2. SD是标准差指平均值附近波动范围，SE是标准误指抽样误差3. 参考物质：也称标准品或标准物质，物理或化学成分已经充分确定,标准品的特性应该清楚明确，理想的标准品应该是纯品。4. 质控品：含量已知基质和标本相同特性明确的物质。5. 空白限（LOB）空白样品最大观测值而不被认为是假阳性6. 检出限（LOD）样品的最低检出浓度7. 定量限（LOQ）系统能够检测到可靠结果的最低样品浓度8. 分析灵

2、敏度：即最低检出量是指在统计学意义上能与零剂量区别的量，95%可信限计算。以X+2SD（夹心法试剂盒）或均值X-2SD（竞争抑制法试剂盒）9. 功能灵敏度：低值样本倍比稀释后重复测定，计算变异系数（CV%）,CV%大于20%时所对应的剂量点10. 检出低限（lowerlimitofdetection,LLD）:分析物最低要达到多少浓度，才能不被检测为0,不会产生假阴性11. 特异性：样本中结构类似物与抗体结合产生交叉反应产生干扰，干扰大特异性差，评价干扰的方法为特异性测试如交叉反应率12. 测量区间：由低值和高值构成的封闭区间13. 溯源性：是一条不间断的比较链，使测量结果或者测量标准的值能够

3、追溯到规定的国家或者国际标准，是测量值与国家或国际标准方法或值相比较而评价目前的的值标准性。一、性能评估主要指标：1. 灵敏度分析灵敏度:一般用95%可信限计算：重复测定零剂量点（n10）,以X+2SD（夹心法试剂盒）或均值X-2SD（竞争抑制法试剂盒）功能灵敏度：反应量的变异系数（CV%）,CV%大于20%时所对应的剂量点极限参数(LOB,LOD,LOQ,LMR,LLR)空白限（LOB）空白样品单侧95%分布的上限为LOB。空白限主要用于减少一类和二类错误，一类假阳性指空白单侧5%的存在未假阳性，概率为5%。二类错误为假阴性，低浓度分析物5%的概率被检测为空白样品。a=p=5%条件下呈正态分

4、布，即LoB=pB+1.645oB。如果空白值呈非正态分布，将数据由小到大排列，估计第95百分位数所在位置为NB（95/100）+0.5的值。检出限LOD:空白限针对的是空白值，用一类二类错误（a=p=5%条件）来确定空白限，而检出限是对低浓度样品而言，用一类二类错误（a=p=5%条件）来确定样本的浓度，因为样品检测是有误差的，为了最大可能证明是样品不是空白，它是比空白限大的，确定方法是至少60次低浓度样本检测，农度在LOB-4LOB之间，正态分布为LOD=LOB+1.65SDS定量限LOQ:定量限针对的既不是空白也不是低值样本而是样本的误差，其误差符合实验室要求：TE（总误LLLL1JT4N

5、olddidu-EKl口el筋:I卍巴4北日edLOQAtl33OH4UFtdRpoifDisQ-ibniLLJuuf13nuLOrriiLLtiopIlfJ11rnstjilinTLCHimT.qQ)E*nnhlIn!*ehE誌卍ttryt.bnrafccHyCjcwI2. 特异性交叉反应率：测定结果（物质的量）与该类似物的量的比值的百分率指单位浓度的影响大小比例实际测量值：某些物质如激素不能直接用定量，只能用活性单位表示，每一种物质的活性单位代表含义不同，不能表示交叉反应率，只能用实测值表示。3. 线性评价：分析测量范围：标本不需要任何稀释浓缩预处理条件下直接测量表本得到分析物测范围。但是

6、必须符合方法学性能，误差满足方法规定指标。（临床参考）临床可报告范围：可采用标本稀释，浓缩或其它预处理下分析物的范围，它扩展了分析测量范围（临床应用）可报告范围：实验室可以建立或者验证的准确度实验结果范围也成为线性范围（实验应用）1）样本数量证明：5-7个样本2次；确认：7-9覆盖线性，2-3次；建立：9-11次样本超出线性20%-30%，2-4次测定。2）混合血清样本：X低浓度下线；X5高浓度混合血清上限；乂昇乙+徨；%3：2心5；X4:1Xi+3X53）检查离群点，线性回归：极差D=Y1-1-Y1-4；D1=（Y1-1-Y1-2）/D,D2=（Y1-3-Y1-4）/D,ffi大于0.765

7、（0.05），值大于0.889（0.01）为离群点。4）计算回归分析，选择合适的数学模型拟合，一般r大于0.99.双对数数学模型（适用于非竞争性双位点夹心法标记免疫分析），双对数数学模型为InY二A+B*lnXlog-logit（适用于竞争法标记免疫分析）数学模型。log-logit数学模型,logitY=A+B*logX,式中：logitY二B/BO/（1-B/BO），还应该有效剂量值（ED25、ED50、ED75或ED20、ED50、ED80），有效剂量值应该在规定范围之内。4. 精密度评价：变异系数（CV%）表示精密度可以用标准差来表示，也可以用变异系数。分析内（intraassay）精

8、密度：重复测定（n10），测定结果的变异系数（CV%）应不高于10.0%。分析间（interassay）精密度：重复测定（n10）,测定结果的变异系数（CV%）应不高于15.0%5. 准确性评价（偏倚）：它包括正确度实验和精密度实验t检验：样本含量较小（例如n30）,总体标准差o未知的正态分布资料。单总体t检验是检验一个样本平均数与一个已知的总体平均数的差异是否显著。当总体分布是正态分布，如总体标准差未知且样本容量小于30,那么样本平均数与总体平均数的离差统计量呈t分布。_負息区卡均曲：定性概念定量测量真实度也叫正确度（均值与真值之间一致性的程度）偏倚（系统误差的度量）精密度（批内和批间）不精密度（随机误差离散程度的度量）精密度（再现性）误差测量（随机误差和系统误差）准确度（单个值和真值之间的一致性程度）由随机误差和系统误差组成1）目前通常是通过标准品核对实验或回收率实验进行考察，标准品核对实验，通过T检验两条曲线没有显著的偏移。实测效价与表示比值在0.9-1.1之间。也可以通过与标准方法比较。方法是标准值+不确定度与标准物质相比较2）回收率实验：回收率=（X2-X1）B*100%X1:原样中被测物质的值；X2:加入标准物质后测定值3）稀释回收率标准抗原稀释成体系溶液，同时测定进行t检验，效价比应在0.900-1.100之间6. （HOOK效应）当标本中被测物浓度超过线性范围上界