宠物临床诊断-生化

1、伊犁职业技术学院伊犁职业技术学院 高高 亮亮目目 录录一、生化仪的介绍（以一、生化仪的介绍（以IDEXX 为例）为例）二、样本采集与制备二、样本采集与制备三、检测指标及临床选择三、检测指标及临床选择四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义一、生化仪的介绍（以一、生化仪的介绍（以IDEXX 为例）为例） 生化仪生化仪 干式干式 时间：时间：8分钟分钟 项目任意（单次最多项目任意（单次最多12项）项） 多种动物不同年龄模式多种动物不同年龄模式 试剂片试剂片将绿色盒子存放在冰箱冷藏室，将绿色盒子存放在冰箱冷藏室，紫色盒子存放在冰箱冷冻室里。紫色盒子存放在冰箱冷冻室里。二、样本采集与制备二、样

2、本采集与制备 全血、血清、血浆的区别？全血、血清、血浆的区别？ 如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本？如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本？ 样品如何保存？样品如何保存？ 采多少样本？采多少样本？ 血浆样本的检查？血浆样本的检查？血浆血浆=血清血清+纤维蛋白原纤维蛋白原血浆血浆=全血全血- 血细胞血细胞二、样本采集与制备二、样本采集与制备 如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本？如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本？全血样本收集全血样本收集血清样本收集血清样本收集血浆样本收集血浆样本收集建议头皮针：静脉采血，小动物多用紫色建议头皮针：静脉采血，小动物多用紫

3、色采血管：红帽、绿帽、紫帽分别指示无采血管：红帽、绿帽、紫帽分别指示无抗凝剂、肝素锂、抗凝剂、肝素锂、EDTA，根据需求自行，根据需求自行选择，采集的血液需立即放入其内。选择，采集的血液需立即放入其内。无菌采血管：一般用无菌采血管：一般用2mL注射器，针头过细易造成溶血注射器，针头过细易造成溶血计数娴熟的专业人员进行操作计数娴熟的专业人员进行操作禁食、禁食、安静的动物：应激可导致血糖显著安静的动物：应激可导致血糖显著升高，镁离子（升高，镁离子（Mg）、天门冬氨酸氨基转）、天门冬氨酸氨基转移酶（移酶（AST）、乳酸脱氢酶（）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌）、肌酐酸激酶（酐酸激酶（CK）磷酸酶（）磷酸

4、酶（PHOS）可能升）可能升高。高。采血视频采血视频点击播放点击播放 如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本？如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本？血清样本收集血清样本收集 全血样本加入无抗凝剂或促凝管中，凝固取上清液全血样本加入无抗凝剂或促凝管中，凝固取上清液血浆样本收集血浆样本收集 全血样本加入全血样本加入肝素锂肝素锂抗凝管中离心，取上清液抗凝管中离心，取上清液二、样本采集与制备二、样本采集与制备 为何建议使用血浆样本进行检测？为何建议使用血浆样本进行检测？ 比血清来的更快，血清凝固期间会造成乳酸、氨等指标的升高，葡比血清来的更快，血清凝固期间会造成乳酸、氨等指标的升高，

5、葡糖糖和总蛋白指标的降低。血浆可实现快速、简便、准确的效果。糖糖和总蛋白指标的降低。血浆可实现快速、简便、准确的效果。 抗凝管为何选择肝素锂而非其他？抗凝管为何选择肝素锂而非其他？ EDTA、枸橼酸钠枸橼酸钠会影响会影响Ca、K等指标的偏差等指标的偏差二、样本采集与制备二、样本采集与制备 样品如何保存？样品如何保存？全血保存全血保存含肝素锂的全血样本必须马上检验。无法在含肝素锂的全血样本必须马上检验。无法在1小时内完成检小时内完成检验时，样本必须离心后，并将血浆转移出保存。验时，样本必须离心后，并将血浆转移出保存。建议您于采血后立即处理及分析样本，可得到最佳结果。建议您于采血后立即处理及分析样

6、本，可得到最佳结果。血清、血浆保存血清、血浆保存血清或血浆必须先与血细胞分离后才能保存。移液管小心的移至血清或血浆必须先与血细胞分离后才能保存。移液管小心的移至新的采血管，关紧管盖避免污染及蒸发。不要有任何气泡存在，新的采血管，关紧管盖避免污染及蒸发。不要有任何气泡存在，会影响血清蛋白。若您无法在会影响血清蛋白。若您无法在4小时内完成检验，冷藏保存。若小时内完成检验，冷藏保存。若您无法在您无法在48小时内完成检验，冷冻保存。小时内完成检验，冷冻保存。二、样本采集与制备二、样本采集与制备 采多少样本？采多少样本？依据：依据：做多少项目做多少项目公式：公式：试剂片试剂片 8 8，样本总量，样本总量

7、(uL)=50uL(uL)=50uL基本量基本量+10uLx+10uLx试剂片数试剂片数 试剂片试剂片 8 8，样本总量，样本总量(uL)=100uL(uL)=100uL基本量基本量+10u1x+10u1x试剂片数试剂片数样本需求量参考表样本需求量参考表试剂片数试剂片数样本量样本量(u1)(u1)试剂片数试剂片数样本量样本量(u1)(u1)1 1606010102002002 2707011112102103 3808012122202204 4909013132302305 510010014142402406 611011015152502507 712012016162602608 81

8、3013017172702709 919019018182802800.5 CC的全血可以得到的全血可以得到225u1血浆，足矣！血浆，足矣！ 血浆样本的检查？血浆样本的检查？ 为何检查？为何检查？ 指示什么？指示什么？二、样本采集与制备二、样本采集与制备不同情况下可能会影响结果，如不同情况下可能会影响结果，如:溶血。您可藉由这溶血。您可藉由这些肉眼观察离心后的样本，以修正您的检测组合。些肉眼观察离心后的样本，以修正您的检测组合。黄疽黄疽视觉视觉:样本呈透明淡黄色到不透明的棕色。样本呈透明淡黄色到不透明的棕色。象征象征:阻塞或肝脏疾病，血管内的溶血。阻塞或肝脏疾病，血管内的溶血。额外测试项目额

9、外测试项目:肝脏相关酶，总胆红素，肝脏相关酶，总胆红素，PCV(红细胞压积红细胞压积)。溶血溶血视觉视觉:样本呈透明的淡到深红色。样本呈透明的淡到深红色。象征象征:红细胞在采血中损坏或是血管内的溶血。红细胞在采血中损坏或是血管内的溶血。额外测试项目额外测试项目:总胆红素，总胆红素，PCV(红细胞压积红细胞压积)厚的白血细胞层厚的白血细胞层视觉视觉:白细胞层白细胞层(介于血浆或血清和浓缩红细胞之间介于血浆或血清和浓缩红细胞之间)特别宽。特别宽。象征象征:白细胞和白细胞和/或血小板过多。或血小板过多。额外测试项目额外测试项目:总白细胞计数和分类，血小板计数。总白细胞计数和分类，血小板计数。二、样本

10、采集与制备二、样本采集与制备 血浆样本的检查？血浆样本的检查？ 指示什么？指示什么？血脂血脂视觉视觉:样本呈苍白色，牛奶状，甚至有浮游的脂样本呈苍白色，牛奶状，甚至有浮游的脂肪球状颗粒。肪球状颗粒。象征象征:最近食用脂类食物或脂肪代谢功能不足。最近食用脂类食物或脂肪代谢功能不足。额外测试项目额外测试项目:血脂和肝脏相关酶。血脂和肝脏相关酶。三、检测指标及临床选择三、检测指标及临床选择内分泌：内分泌：碱性磷酸酶（碱性磷酸酶（AKP）肌酸激酶（肌酸激酶（CK-NAC）葡萄糖葡萄糖(GLU-0X)胆固醇（胆固醇（CHOL）钙（钙（Ca）磷（磷（P）钠（钠（Na）钾（钾（K）镁（镁（Mg） 白蛋白（白

11、蛋白（ALB）总蛋白（总蛋白（TP）总胆红素（总胆红素（TB）总胆汁酸（总胆汁酸（TBA）直接胆红素（直接胆红素（DBB）谷草转氨酶（谷草转氨酶（AST）谷丙转氨酶（谷丙转氨酶（ALT）r-谷氨酰转移（谷氨酰转移（r-GT）胆碱酯酶（胆碱酯酶（CHE）碱性磷酸酶（碱性磷酸酶（AKP) 尿素氮（尿素氮（BUN）肌酐（肌酐（Cr）尿酸（尿酸（UA） 乳酸脱氢酶（乳酸脱氢酶（LDH）血钾（血钾（K）血钙（血钙（Ca）肌酸激酶（肌酸激酶（CK-NAC） 血糖血脂：血糖血脂：葡萄糖葡萄糖(GLU-0X)甘油三脂甘油三脂(TG)酮体酮体胆固醇（胆固醇（CHOL）果酸胺（果酸胺（FMN）高密度脂高密度脂 蛋

12、白胆固醇（蛋白胆固醇（HDC-C)低密度脂蛋白胆固醇（低密度脂蛋白胆固醇（LDC-C） 电解质：电解质：钠（钠（Na）氯（氯（Cl）碳酸氢盐碳酸氢盐镁（镁（Mg）无机磷（无机磷（P）钙（钙（Ca） 淀粉酶（淀粉酶（AMY）脂肪酶脂肪酶(LIPA)三、检测指标及临床选择三、检测指标及临床选择四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义增高临床意义：增高临床意义：脱水脱水-呕吐、腹泻、休克呕吐、腹泻、休克-相对增多相对增多慢性和免疫介导的疾病慢性和免疫介导的疾病-细菌性传染病和细菌性传染病和自体免疫疾病，特别是猫传染性腹膜炎自体免疫疾病，特别是猫传染性腹膜炎-球球蛋白，特别是蛋白，特别是-球蛋

13、白的升高球蛋白的升高。多发性骨髓瘤、淋巴肉瘤、浆细胞瘤多发性骨髓瘤、淋巴肉瘤、浆细胞瘤 总蛋白（总蛋白（TP）四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义-蛋白蛋白肝脏合成肝脏合成白蛋白白蛋白-球蛋白球蛋白、-球蛋白球蛋白纤维蛋白原纤维蛋白原淋巴细胞、浆细胞合成淋巴细胞、浆细胞合成免疫球蛋白免疫球蛋白检测目的：检测目的：总蛋白与其他检查肝肾功总蛋白与其他检查肝肾功能、脱水程度、有无蛋白质流失性肠能、脱水程度、有无蛋白质流失性肠道疾病或免疫球蛋白疾病一起检测时，道疾病或免疫球蛋白疾病一起检测时，可提供有用的讯息。此项目单独检测可提供有用的讯息。此项目单独检测时无法提出具体诊断意义，因为它缺时

14、无法提出具体诊断意义，因为它缺乏特异性。乏特异性。 降低临床意义：降低临床意义：水相对增多（少见）水相对增多（少见）多为医源性多为医源性过多的蛋白丢失过多的蛋白丢失-低白蛋白血症低白蛋白血症最常见（最小，易丢失）最常见（最小，易丢失） 肾蛋白丢失肾蛋白丢失 见于肾病综合征、肾小球性肾炎、淀粉见于肾病综合征、肾小球性肾炎、淀粉性样变等。这可通性样变等。这可通 过检查尿中是否存在蛋白来证实过检查尿中是否存在蛋白来证实。 肠蛋白丢失肠蛋白丢失(蛋白丢失性肠病蛋白丢失性肠病) 在小动物中，要考虑在小动物中，要考虑的疾病有淋巴癌、绒毛萎缩、大肠炎和嗜酸性肠炎。的疾病有淋巴癌、绒毛萎缩、大肠炎和嗜酸性肠炎

15、。 出血出血 当全血丢失时，血浆蛋白的丢失会引起低蛋白当全血丢失时，血浆蛋白的丢失会引起低蛋白血症，同时存在贫血。这是评估再生性贫血，出血性贫血症，同时存在贫血。这是评估再生性贫血，出血性贫血，还是溶血性贫血最容易的方法血，还是溶血性贫血最容易的方法(如果是后者，血浆蛋如果是后者，血浆蛋白不会下降白不会下降)。 烧伤烧伤 大面积皮肤烧伤渗出血清，可引起低蛋白血症。大面积皮肤烧伤渗出血清，可引起低蛋白血症。蛋白合成的下降蛋白合成的下降-营养不良、营养不良、吸收障碍吸收障碍、肝衰肝衰 白蛋白（白蛋白（ALB）。 球蛋白（球蛋白（GLOB） 全身性慢性感染 骨髓瘤、淋巴瘤 自身免疫性疾病增高 免疫抑

16、制剂使用过度 动物先天性免疫缺陷 肾上腺皮质激素不足降低四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义-蛋白蛋白四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义-酶酶 谷丙转氨酶谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶（ALT）来源：来源：主要存在于肝脏主要存在于肝脏(犬猫犬猫)、心脏和骨骼肌中（大动物）。、心脏和骨骼肌中（大动物）。 在犬猫方面，此酶对肝脏具有特异性。在犬猫方面，此酶对肝脏具有特异性。A LT存在于存在于细胞质中细胞质中，当细，当细胞膜通透性改变或细胞坏死时它会被释放到血液中。胞膜通透性改变或细胞坏死时它会被释放到血液中。检验目的：检验目的：犬猫的肝脏有无受损。犬猫的肝

17、脏有无受损。作用：作用：催化丙氨酸和催化丙氨酸和酮戊二酸转氨生成丙酮酸和谷氨酸。酮戊二酸转氨生成丙酮酸和谷氨酸。检查适应症：检查适应症：腹泻、黄疸、腹水、精神不振和厌食，以及难以诊断的疼痛时。腹泻、黄疸、腹水、精神不振和厌食，以及难以诊断的疼痛时。ALT值升高：值升高：肝病：肝病：见于肝坏死、肝肿瘤、脂肪肝及肝炎、肝硬化、肝脓肿和见于肝坏死、肝肿瘤、脂肪肝及肝炎、肝硬化、肝脓肿和肝胆炎时。肝脏损伤（自然、手术、外伤）肝胆炎时。肝脏损伤（自然、手术、外伤）药物：药物：氯丙嗪氯丙嗪 、利福平、利福平 、红霉素、氯霉素、四环素、庆大霉素、红霉素、氯霉素、四环素、庆大霉素、皮质类固醇抗惊厥药（扑癫酮、

18、苯巴比妥）等药物。皮质类固醇抗惊厥药（扑癫酮、苯巴比妥）等药物。中毒：中毒：四氯化碳，铅、汞等重金属，砒霜等中毒四氯化碳，铅、汞等重金属，砒霜等中毒传染病：传染病：犬传染性肝炎、猫传染性腹膜炎、钩端螺旋体病。犬传染性肝炎、猫传染性腹膜炎、钩端螺旋体病。ALT值降低：没有意义。值降低：没有意义。四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义-酶酶 谷草转氨酶谷草转氨酶/天门冬氨酸氨基转移酶（天门冬氨酸氨基转移酶（AST）作用：作用：AST催化天门冬氨基酸和催化天门冬氨基酸和酮戊酸转氨生成草酰乙酸和谷氨酸酮戊酸转氨生成草酰乙酸和谷氨酸。来源：来源：广泛地分布于机体中，特别是骨骼肌、心肌、肝脏和红

19、细胞。广泛地分布于机体中，特别是骨骼肌、心肌、肝脏和红细胞。检验目的：检验目的：检查肝脏，心肌或骨骼肌有无受损。此酶对任何器官或组织受检查肝脏，心肌或骨骼肌有无受损。此酶对任何器官或组织受损都损都不是一项专一或敏感的指标。不是一项专一或敏感的指标。AST升高：升高：心肌疾病、骨骼肌疾病、肝细胞受损、人为误差（溶血）心肌疾病、骨骼肌疾病、肝细胞受损、人为误差（溶血）AST降低：降低：没什么意义没什么意义四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义-酶酶 ALP（ALKP）：碱性磷酸酶）：碱性磷酸酶 ALP是体内分布最广泛的酶之一是体内分布最广泛的酶之一，主要存在于肝脏和骨骼中；，主要存在于肝

20、脏和骨骼中；血浆血浆ALP正常值的范围非常广正常值的范围非常广；成骨细胞活性较高的幼年动物，其成骨细胞活性较高的幼年动物，其ALP水平较高水平较高。轻度生理性增高幼龄犬猫骨骼发育期骨折愈合期妊娠期中度增高骨软化症骨肿瘤骨质疏松佝偻病肝病甲亢重度增高肝外胆道 阻塞胆汁淤积性肝炎胆囊疾病犬AKP升高提示 肝病、库兴氏综合症、糖皮质激素或抗癫痫药物治疗猫AKP升高提示 糖尿病、胆管炎、胆管性肝炎、肝脂变、甲亢。骨源性骨源性ALP的升高，通过肝实质性酶的不升高和黄疸缺乏，的升高，通过肝实质性酶的不升高和黄疸缺乏，很容易与肝胆疾病区别。很容易与肝胆疾病区别。胆道疾病，特别是阻塞，会引起血浆胆道疾病，特别

21、是阻塞，会引起血浆ALP的大量升高的大量升高，可可通过通过ALP的显著升高而肝实质性酶不发生任何变化来鉴别。的显著升高而肝实质性酶不发生任何变化来鉴别。四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义-酶酶 （CK）CPK：肌酸激酶：肌酸激酶 存在于骨骼肌、心肌和脑等组织的细胞浆和线粒体中。检验目的是存在于骨骼肌、心肌和脑等组织的细胞浆和线粒体中。检验目的是检查骨骼肌检查骨骼肌或心肌有无受损或心肌有无受损。最常见的异常原因是。最常见的异常原因是外伤或过度运动造成骨骼肌的病变外伤或过度运动造成骨骼肌的病变。增高：增高：心肌炎、心肌梗塞；脑血管意外、脑膜炎、脑梗死、脑缺血；皮肌炎、肌心肌炎、心肌梗

22、塞；脑血管意外、脑膜炎、脑梗死、脑缺血；皮肌炎、肌营养不良、肌肉损伤、甲状腺机能减弱、肺水肿、肺梗死、肌肉物理性损伤。营养不良、肌肉损伤、甲状腺机能减弱、肺水肿、肺梗死、肌肉物理性损伤。降低：降低：血样放置时间过长（血样放置时间过长（2小时）小时） AMYL：淀粉酶：淀粉酶 主要存在于胰腺中，通常通过肾脏排泄。临床上主要用于主要存在于胰腺中，通常通过肾脏排泄。临床上主要用于诊断急性坏死性诊断急性坏死性胰腺炎。胰腺炎。在该疾病中，淀粉酶从细胞中漏出，并开始消化自己的组织。在该疾病中，淀粉酶从细胞中漏出，并开始消化自己的组织。有急有急性腹痛和呕吐的症状，性腹痛和呕吐的症状，可能会被误认为是小肠内有

23、异物，如果不能确定的话，可能会被误认为是小肠内有异物，如果不能确定的话，就应该检查淀粉酶就应该检查淀粉酶(和脂肪酶和脂肪酶)。轻度到中度的非特异性的升高，可见于其它急性的腹轻度到中度的非特异性的升高，可见于其它急性的腹部疾病部疾病(包括肠梗阻包括肠梗阻)和肾衰。和肾衰。四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义检验此项目的主要目的：检测碳水化合物的代谢情形。检验此项目的主要目的：检测碳水化合物的代谢情形。 葡萄糖（葡萄糖（GLU）增高：增高：生理性高血糖：生理性高血糖：餐后餐后 紧张紧张 兴奋兴奋 疼痛疼痛 注射可的松注射可的松病理性高血糖：病理性高血糖：糖尿病、胰腺炎、酸中毒、癫痫、抽

24、搐、颅外伤、颅内出血、脑糖尿病、胰腺炎、酸中毒、癫痫、抽搐、颅外伤、颅内出血、脑膜炎、肾上腺皮质机能亢进、甲状腺和脑垂体前叶功能亢进以及频死期膜炎、肾上腺皮质机能亢进、甲状腺和脑垂体前叶功能亢进以及频死期降低：降低：生理性低血糖：生理性低血糖：饥饿饥饿病理性低血糖：病理性低血糖：胰岛胰岛B细胞增生或瘤，垂体前叶功能减退、肾上腺功能减退、肝病细胞增生或瘤，垂体前叶功能减退、肾上腺功能减退、肝病后期、甲状腺和脑垂体前叶功能减退、坏死性肠炎、消化吸收不良、慢性贫血。后期、甲状腺和脑垂体前叶功能减退、坏死性肠炎、消化吸收不良、慢性贫血。 胆固醇（胆固醇（CHOL）检验目的：是甲状腺功能低下的指针。检验

25、目的：是甲状腺功能低下的指针。最常见的异常原因：甲状腺功能低下。最常见的异常原因：甲状腺功能低下。四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义 肌酐（肌酐（CREA） 肌酐是肌酐是肌肉代谢过程中肌胺酸降解的产物肌肉代谢过程中肌胺酸降解的产物。每天产生的量是相当稳定的，。每天产生的量是相当稳定的，不会不会随年龄、饮食、运动或损伤作用而改变随年龄、饮食、运动或损伤作用而改变。经肾脏过滤及肾小管分泌排出体外。经肾脏过滤及肾小管分泌排出体外。血浆血浆肌酐浓度的变化肌酐浓度的变化只与肌酐的排泄有关只与肌酐的排泄有关，也就是说，它更，也就是说，它更准确反映了肾的功能准确反映了肾的功能。既然肌酐比尿素对

26、肾衰更特异更敏感，为什么还要同时测定尿素呢？既然肌酐比尿素对肾衰更特异更敏感，为什么还要同时测定尿素呢？1、肌酐在血浆样品中、肌酐在血浆样品中易易变质变质。2、有些物质容易干扰肌酐的检测，胆红素降低肌酐浓度，头孢增加肌酐的浓度。、有些物质容易干扰肌酐的检测，胆红素降低肌酐浓度，头孢增加肌酐的浓度。3、由于尿素受许多因素影响，故尿素的测定也可以为病畜提供比肌酐更多的信息。、由于尿素受许多因素影响，故尿素的测定也可以为病畜提供比肌酐更多的信息。降低没有临床意义降低没有临床意义；增加到；增加到250mol/L左右时，可能是左右时，可能是肾肾前性的原因前性的原因引起的引起的(脱水或心衰脱水或心衰)；超

27、过该值时，；超过该值时，肾是有问题肾是有问题的的(除非存在膀胱破裂或尿道阻塞除非存在膀胱破裂或尿道阻塞)；当血浆肌酐的浓度超过；当血浆肌酐的浓度超过500mol/L时，情况就十分严重了；浓度超过时，情况就十分严重了；浓度超过1000mol/L的情况，见于的情况，见于肾衰后期、膀胱破裂和尿道阻塞肾衰后期、膀胱破裂和尿道阻塞。四、主要检测指标临床意义四、主要检测指标临床意义 尿素氮（尿素氮（BUN）蛋白质蛋白质分解后产生的分解后产生的氨氨具有相当的毒性，具有相当的毒性，它会在它会在肝脏肝脏中转变成中转变成尿素尿素并由并由肾肾小管滤小管滤过后排出体外。过后排出体外。检验检验主要目的是肾脏疾病主要目的是肾脏疾病的指标。的指标。肾衰实际上只是可以肾衰实际上只是可以影响血浆尿素浓度的疾病之一影响血浆尿素浓度的疾病之一，当心基于尿素浓度升高当心基于尿素浓度升高把心脏疾病误诊为肾衰的情况。把心脏疾病误诊为肾衰的情况。还是还是监测慢性心衰治疗效果监测慢性心衰治疗效果的一种有效方法。的一种有效方法。当血浆尿素水平高于当血浆尿素水平高于60mmol/L时，治愈希望很小时，治愈希望很小(除非除非进行肾移植技术进行肾移植技术)，建议安乐死。，建议安乐死。治疗治疗肾衰肾衰方法方法主要是主要是喂低蛋白、低钾、