生物饵料培养学重点加资料

1、精选优质文档-倾情为你奉上绪 论1.生物饵料特指经过人工筛选的、可进行人工培养的、适合养殖对象食用的优质的饵料生物。生物饵料可分为植物性生物饵料（光合细菌及单细胞藻类）和动物性生物饵料（轮虫、卤虫、枝角类等）两类。2.饵料生物是指生活在海洋、江河、湖泊等水域中，可供水产动物食用的各种水生微生物、动、植物，如：细菌、酵母、单细胞藻类，轮虫，卤虫、等。3.生物饵料培养学是主要研究生物饵料的筛选、培养及其营养价值评价的一门应用学科。4.生物饵料培养学的主要内容和任务：生物饵料的筛选；生物饵料规模化或大量培养技术研究；生物饵料的营养价值评价。5.优良生物饵料所应具备的条件：生物饵料的个体大小必须适合养

2、殖对象的摄食；生物饵料在水中的运动速度与在水层中的分布情况，应便于养殖动物的摄食；生物饵料的营养价值高，容易被养殖对象消化吸收；生物饵料及其代谢产物无毒或毒性小，不危及养殖对象的健康；生物饵料的生命周期短，生长繁殖迅速；生物饵料对环境的适应能力强，易于大量培养。6.生物饵料的优点：对养殖水体的水质影响较小，且有改善水质的作用；营养丰富，含未知的生物活性物质，能满足水产动物的营养需求；规格多样，满足养殖对象不同生长阶段的具体需求；容易被消化，自身含消化酶，可弥补幼体消化能力的不足；可获得性佳。7. 什么是清水育苗和绿水育苗，为什么绿水育苗得到广泛认可？第二章 光合细菌的培养1. 光合细菌是一大类

3、在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称。其最本质的特点是能在厌氧和光照条件下进行不产氧的光合作用。2. 水产上使用的光合细菌多为红螺菌科的菌种。水产上应用价值大的红螺菌科的红假单胞菌属3. 光合细菌的色素主要有菌绿素a，b，c，d，e及类胡萝卜素。菌绿素是光合细菌进行光合磷酸化，将光能转变成化学能的媒介，而类胡萝卜素的主要作用是捕获光能（天线色素）及起光氧化的保护剂作用（防止菌绿素受光氧化损伤）。4. 光合细菌的色素主要存在细胞内的载色体或绿色包囊中，载色体或绿色包囊是光合细菌进行光合磷酸化的部位（细胞器）。5. 载色体存于与红螺菌科和着色菌科，由细胞膜陷入细胞质内而形成，并与细胞膜相连。

4、绿色包囊存在于绿杆菌科和绿色丝状菌科，分散附着于细胞膜下面，是一个独立的球形细胞器。6. 光合细菌菌种的分离的步骤：（1）采样。根据光合细菌生长所需的条件，有选择的采集含光合细菌的水样和土样。一般在有机物污染严重，缺氧的环境中采样；（2）富集培养。光合细菌分离成功的关键，在于选择适宜的富集和分离的培养基，提供符合光合细菌生长需要的厌氧环境，适宜的温度（25-35），一定的光照（500010000lx）。一般采用液体富集培养基，重复多次富集培养；（3）分离纯种。将富集后的菌液进行固体培养基涂布或划线培养，挑取单菌落，重复多次分离，可得纯培养。7. 光合细菌的培养方式：封闭式厌气光照培养 主要用于

5、小规模培养；放式微气光照培养 可用于生产性大规模培养8. 光合细菌菌种保藏的方法：（1）低温保藏法 4 左右低温冰箱保存，时间在3060 d，也可在棉塞上浸蜡，一般可达34个月，至半年之久；（2）低温定期移植保存法这是一种经典的简易保存法，即菌种接种于所要求的斜面培养基上，置最适温度下培养，至菌落形成后，置于低温、干燥处保存，每隔36个月移植培养一次。（3）液体石蜡法选用优质纯净的液体石蜡灭菌除水分后加到斜面上，并用蜡封上，放阴凉室温即可（4）冷冻干燥法；（5）超低温保藏将欲保藏的菌种悬液或菌块（常用保护剂为10 %甘油或5 %10 %二甲基亚砜）密封于安瓿瓶内，先控制致冷速度，预冻后，储藏于

6、-150-196 液态冰箱中保存，保存期间需注意及时补充液氮。9. 光合细菌在水产上的应用：作为养殖水体的水质净化剂，降解小分子有机物，降低水体中的COD，氨氮；作为人工配合饵料的添加剂，光合细菌菌体富含营养物质，粗蛋白含量（65.45%）同含有丰富的B族维生素；作为动物性生物饵料的饵料，用于培养轮虫、卤虫、枝角类等动物性生物饵料；病害的防治作用，防治鲤鱼烂鳃病、瞎眼病，金鱼的水霉病，黑鲷的烂尾病，鳗鱼的水霉病和赤鳍病。第二章 单细胞藻类的培养1. 微藻的用途：作为食品及食品的添加剂；饵料或饲料添加剂；提取活性物质（DHA、EPA、类胡萝卜素等）；水处理；生物学研究；水产养殖上生态防病；生产新

7、能源2. 水产养殖中常用的单胞藻的培养生态和应用情况。小球藻温度：1035；最适光强：10000lx；最适pH： 68；应用：培养动物性生物饵料，水色及水质的调控。微绿球藻 （眼点拟微球藻）适宜培养条件：温度：2530；盐度： 436；最适光强：10000lx；最适pH： 7.58.5；应用：贝类育苗，河蟹幼体及动物性生物饵料，水色及水质的调控。亚心形扁藻 适宜培养条件：温度：2028 ；盐度： 3040；光强：500010000 lx；最适pH： 7.58.5应用：贝类育苗，轮虫培养三角褐指藻 适宜培养条件：温度：1015 ；盐度： 2532；光强：30005000 lx；最适pH： 7.5

8、8.5应用：甲壳类、贝类及棘皮动物的幼体饵料小新月菱形藻 适宜培养条件：温度1520 ；盐度： 2532；光强：30008000 lx；最适pH ：7.58.5应用：甲壳类、贝类及棘皮动物的幼体饵料牟氏角毛藻适宜培养条件：最适温度：30 ；盐度： 1015；光强：1000015000 lx；最适pH：8.08.9应用：斑节对虾、泥蚶育苗中肋骨条藻 适宜培养条件：温度：2030 ；盐度：1530；光强：5000 lx；最适pH： 7.58.5应用：斑节对虾、河蟹育苗等鞭金藻3011 适宜培养条件：最适温度：2030 ；盐度：1030；光强：70009000 lx；最适pH： 7.58.5应用：贝

9、类及棘皮动物的育苗湛江等鞭金藻 适宜培养条件：最适温度：2532；盐度：22.735.8；光强：500011000lx；最适pH：7.58 应用：贝类及棘皮动物的育苗钝顶螺旋藻 适宜培养条件：最适温度：3037 ；盐度：可驯化；光强：3000035000lx；最适pH：8.69.5应用：观赏鱼配合饵料、贝类和甲壳类育苗3.细胞藻类的培养方式按培养纯度分为 纯培养：即无菌培养，是指排除了包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。单种培养指可有细菌存在但无其他藻类存在的培养，水产上室内水泥池培养。混合培养是指一培养体系中同时存在两种以上的微藻细胞，各种微藻细胞同时生长。在室外土池施肥培养单细胞藻类

10、是一典型的混合培养。按培养体系的密闭性 开放式培养指藻液直接与外界空气相通的一种培养方式，但培养过程中易受敌害生物的污染。封闭式培养指在一相对封闭的体系中培养单胞藻，这种培养方式主要用于保种，有时也用于生产性培养中藻种级培养。按采收的方式，则有一次性培养、半连续培养和连续培养之分。按培养的目的和规模藻种培养（一级培养），指以保存藻种为目的藻类培养，多采用封闭式不充气培养方式培养。中继培养（二级培养），指为生产性培养提供大量藻种为目的藻类培养，可采用封闭式或开放式培养方式。生产性培养（三级培养）是以大量生产藻细胞为目的培养，多采用开放式（封闭式）充气培养。4. 单细胞藻类的培养设施藻种室：是进行

11、藻种的分离、培养及保存的场所，也是开展藻类生长情况微观检查的场所。，保温性能良好，易清洁消毒，防污染能力强，应配有恒温光照培养箱及各种小型培养容器。清洗消毒室：是进行培养器皿和工具清洗及消毒的场所，配备有清洗水池、消毒池等设施和烘箱、高压蒸汽灭菌锅、炉灶等设备。培养室：进行藻类的中继培养和生产性培养的场所。装配有培养容器、培养架和培养池等设施，要求采光好，配备有人工光源，最好可调温。培养容器：主要有各种规格的三角烧瓶、广口玻璃缸、细口玻璃瓶、透明塑料袋等。培养池：用于生产性培养用，一般池深80cm，面积在210平方米。池内壁贴白色瓷砖。水处理系统：通常需配备过滤装置和消毒池。最常用的过滤装置为

12、沙滤池。充气系统：空气在注入藻液之前最好经过空气过滤器或洗气装置。5. 藻类一次性培养的生长模式及影响因素延缓期：接种后的短时间内藻类繁殖缓慢，细胞数无明显改变。原因有：藻种质量问题，接种的藻种来自不良环境或藻种“老化”；接种的藻种数量偏少，培养液中缺乏一定数量的由生活藻细胞自身产生的能够促生长繁殖的生物活性物质；新旧培养液成分的差异过大指数生长期 细胞迅速生长繁殖，藻细胞数量随培养时间的延长呈几何级数递增。影响藻类生长繁殖效率有：培养条件，在最适宜的培养条件下，藻类具有最高的生长繁殖效率；藻的品种相对生长下降期 藻细胞繁殖趋缓，细胞数量增加速度减慢。原因：养盐耗净；二氧化碳供应不足；培养液酸

13、碱度改变；藻类细胞浓度过密，光照不足；藻类代谢废物的自体抑制。静止期 藻类生长逐渐下降，最终生长停止，进入静止期，藻细胞数保持相对恒定。死亡期 藻细胞大量老化死亡，细胞数量迅速减少6. 如何缩短或消除延缓期的出现（1）选择处于新陈代谢快，生长旺盛（处于指数生长期）的藻细胞作藻种。（2）接种时保证藻种的浓度达到一定的数量，选择偏高浓度接种。（3）选择合适的培养液（包括配方组成及营养盐浓度），减少新旧培养液之间的营养盐差异。7. 如何增加指数生长期的生长效率 选择生长性能优良的品系，同时提供其生长的最佳环境和营养水平。8. 如何延长指数生长期，推迟相对生长下降期出现（1）适时添加营养盐，保证培养液

14、中充足的营养。（2）人工充二氧化碳，保证藻液中二氧化碳不成为生长的限制因子。在生产中可间歇充含1%5%二氧化碳的混合空气，以达到补充二氧化碳的目的。（3）定期检测并调整培养液的pH，使之处于藻类生长的适宜范围。（4）增强光照强度，保证充足的光照。（5）改变培养方式，变一次性培养为半连续培养，及时稀释培养液中的有自体抑制作用的代谢废物。9. 微藻开放式培养和封闭式培养的优缺点开放式培养 优点：建池简单，投资少，可利用光温适宜但不宜种植传统农作物的地区或产量低的荒漠、盐碱沙地等。生产操作简单；缺点：CO2供应不足，温度不易控制，水分蒸发严重，光能利用率低，占地广大。易污染，生产不稳定，产量和质量难

15、以保证。封闭式培养 优点：具有大的表面积与体积比，有效的光源系统，光能传递到微藻的光程短，具有有效的混合循环系统光能利用率高，可高效灭菌，污染少，易于监测和控制；缺点：夏季温度高（可超出生长适温10-15），过量氧气难以排除。10. 补偿点：细胞光合作用产氧量等于呼吸作用耗氧时的光照强度。不生长、不繁殖11. 光抑制：光照强度超过饱和光照强度时藻体光合作用受到抑制，光合作用速率反而下降的现象。12. 影响光饱和点的因素 营养浓度较高时藻类可较强光照下生长；稀培养物的光饱和点低，反之高一些；低温下光饱和点低13. 二氧化碳 在藻类培养过程中，通过搅拌或晃动藻液，或给培养的藻液充气，都能提供一定二

16、氧化碳。充含1%5%二氧化碳的混合气体。也可在某些培养液中添加碳酸氢钠作为补充碳源。14. 培养液的配制 培养用水的消毒，配方的选择和营养盐的计算，营养盐的添加等步骤。在往消毒后的培养水中添加营养盐时，应待消毒海水正常后，逐一加入营养盐，并在下一种营养盐加入之前进行充分搅拌。营养盐加入的顺序：先氮后磷再铁15. 藻类接种 在质量上要求：无敌害生物污染、生活力强、生长旺盛，处于指数生长期阶段；藻液的外观颜色正常，无大量沉淀和明显附壁现象；对于有运动能力的种类，还要求上浮明显。接种数量，条件许可时，藻种量尽可能大，藻种级培养时藻种量与培养液量之比为1：21：3，中继培养和生产性培养的接种比例一般不

17、小于1：101：20。藻类接种时间，晴天上午8时10时接种。16. 开放式培养中搅拌和充气的优点 防止藻细胞沉降，减少附壁或沉底；使营养物质分布均匀，防止代谢产物在局部浓度过高；使细胞分布均匀，利于营养和光照的利用；使培养液温度一致；有利于释放光合作用产生的O2和补充CO2；防止水表面产生菌膜。搅拌方式有摇动、搅拌或充气。17. 藻液生长情况检查。宏观上，可检查藻液的颜色、藻细胞的运动或悬浮的情况、有无藻细胞沉淀或附壁，有无菌膜或敌害的产生等。微观上，可在显微镜下检查藻细胞的形态有无异常，有无敌害生物的出现，藻细胞数量增加情况等。18. 藻细胞的采收方法：离心；过滤；沉淀。19. 敌害生物对单

18、胞藻的危害有两方面：掠食；分泌有害物质对单胞藻起抑制和毒害作用.20. 清除、抑制和杀灭敌害生物：过滤法清除大型敌害生物；使用药物抑制或杀灭敌害生物；改变环境条件杀灭敌害生物。21. 藻种分离程序：采样、预培养和分离。22. 藻种的分离方法：微吸管分离法；微水滴分离法；平板分离法；离心法；趋向运动法；稀释法；23. 藻种保藏：把藻种接种在固体和液体的双相培养基上，接种一次可保藏半年到一年。也可接种在固体培养基上。若是短期保藏，一般接种在液体培养基上。接种后可直接移到低温弱光的条件下保藏，也可在适宜条件下培养34天后再移到低温弱光的条件下保藏。第三章 轮虫的培养1. 褶皱臂尾轮虫的摄食：典型的滤

19、食性生物。对饵料的种类无选择性，但对饵料大小有选择。饵料大小宜在25m以下，尤以15m以下最为理想。2. L型轮虫：大型轮虫，即褶皱臂尾轮虫，在水温20以下时占优势；S 型轮虫：小型轮虫，圆型臂尾轮虫在水温20以上时占优势。3. 褶皱臂尾轮虫的生殖和生活史（1）单性生殖 即孤雌生殖、非混交生殖，指母本在繁殖后代的过程中，无需父本配子的参与，母本的卵细胞经有丝分裂形成胚胎。所谓非混交雌体是指通过非混交生殖的方式繁殖子代的雌性轮虫。非混交雌体经过有丝分裂产生双倍体的卵称为非混交卵（非需精卵，夏卵）。非混交卵的卵壳薄而光滑，呈椭圆形，非混交卵无需受精，就能够迅速发育成非混交雌体，又经有丝分裂产生双倍

20、体的非混交卵，一代接一代，这就是单性生殖世代。“爆发式的增殖”（2）两性生殖 又称混交生殖，指母本在繁殖后代的过程中，卵母细胞经减数分裂形成单倍体的卵子，与父本的单倍体精子受精后发育为两倍体的胚胎。混交雌体是指以减数分裂方式形成卵的雌性轮虫。混交雌体经过减数分裂产生单倍体混交卵。混交卵又称需精卵。混交卵若不受精，则发育成单倍体的雄轮虫。雄轮虫以有丝分裂方式形成精子。混交卵若受精， 则发育成休眠卵（冬卵）。4. 诱发两性生殖的因素 培养液的盐度；光照；种群密度；低温刺激；食物的质和量；生育酚；培养液的pH。影响轮虫混交生殖概率的内源性因素有：遗传因素；轮虫孤雌生殖的累积世代数；母轮虫的日龄。5.

21、 褶皱臂尾轮虫的寿命 温度高，寿命短；温度低，寿命长。培养条件好，寿命长；培养条件差，寿命短。饵料质量好，寿命长，反之，则短。我国培养的褶皱臂尾轮虫的寿命，大约为7d10d，如环境条件不好，只活3d4d。6. 褶皱臂尾轮虫的环境适应（1）温度 L型轮虫的适宜温度范围控制在1025，S型轮虫的2535。（2）盐度 适宜繁殖的盐度范围为1030。（3）光照 适宜光照强度范围为4400lx10000lx。（4）酸碱度 中性偏碱性为好。（5）溶解氧 培养水体中溶解氧的含量至少保持在1.5mg/L的水平之上。（6）化学耗氧量 化学耗氧量最好控制在100mg/L以内（7）非离子氨 1mg/L以内。7. 种

22、轮虫分离 主要利用轮虫对缺氧或恶劣环境抵抗力强的特性进行。8. 一次性轮虫培养：在轮虫接种后直至轮虫收获，中间一般不换水。轮虫培养密度高，培养期间水质变化大，培养周期短，产量高但不稳定。生产性培养一般用玻璃钢水槽和小型水泥池(2 m310m3)。培养规程如下：（1）培养容器和培养池的选择和清洗消毒（2）培养用水的处理：沙滤或密筛绢（300目）过滤，并将盐度、温度调节到褶皱臂尾轮虫生长的最适范围，如要在培养用水中先培养单胞藻，则最好用20mg/L的有效氯充分消毒培养用水（3）轮虫饵料的准备：前期大多采用在原池先培养一定量的单胞藻，后期再人工投喂酵母。（4）接种：单纯以单胞藻为饵料，轮虫接种密度可

23、小些（0.1个/ml0.5个/ml），若以酵母为饵料进行培养，则适宜的接种量应大些（14个/ml70个/ml）。（5）投饵：以单胞藻为饵料时，一般每天投喂两次，根据培养水体的水色来调整单胞藻的的投喂量。若以鲜酵母为饵料时，每天投喂34次（6）搅拌、充气及生长情况的检查：以单胞藻为饵料，一般不需要连续充气，但在每次投饵后要搅拌水体。若投喂酵母进行生产性培养，则需连续充气。在轮虫培养过程中，每天要定时检查轮虫的活力和密度。（7）收获 轮虫一次性培养的培养周期为3d7d，培养的密度一般可达200600个/ml。用100m网眼的筛绢袋过滤收集。9. 轮虫生长情况检查 肉眼观察：具体可用一个小烧杯取培养

24、池水对着亮光观察，注意轮虫的活动状况和密度。如果轮虫游泳活泼，分布均匀，密度随培养时间的延长明显增加，则表明轮虫的生长情况良好。反之，若观察到的轮虫活动力弱，多沉于底部或黏附于培养容器的壁上，密度随培养时间的延长增加不明显甚至减少，则表明轮虫种群的增长不是很好。镜检：可吸取少量水样于小培养皿中，在解剖镜下镜检。生长良好的轮虫，身体肥壮，肠胃道饱满，游动活泼，多数成体尾部带有13个非混交卵，无雄轮虫和休眠卵的出现。如果镜检水样中的雌轮虫多数不带卵或带有混交卵，且有雄轮虫出现，轮虫活力不强，在培养水体中饵料丰富的情况下轮虫的肠胃道仍不饱满，说明种群的生长情况不好。10. 轮虫半连续培养：成功进行轮

25、虫半连续培养的关键是控制好轮虫的采收量及培养用水水质之间的平衡。半连续培养一般每次培养周期能维持15d25d，最多可达30d。最后全部采收，清池，开始新一轮的培养。11. 轮虫大面积土池培养：利用室外土池培养，培养技术较易掌握，成本低，轮虫培养密度小，但收获量大，轮虫基本靠摄食池塘的天然浮游植物为饵料，轮虫的营养质量好。要点：（1）选择培养池 （2）清池消毒 （3）进水 （4）施肥培养单细胞藻类 （5）接种 （6）日常管理 （7）采收 200目筛绢拖网、光诱12. 轮虫土池池培养的管理要点 主要通过控制轮虫存池数量和维持培养水体中足够的营养盐来调控，必要时可泼洒豆浆进行投饵。轮虫密度维持在5个

26、/ml10个/ml；通过施追肥，维持藻类的增殖，使藻类的净增殖量和池中轮虫的摄食量基本平衡。当气候适宜，轮虫繁殖迅速。池水的透明度在短时间内明显增大，此时应加强轮虫的捕捞力度。13. 种轮虫的保存 一是以活体轮虫的形式保存，一是以轮虫休眠卵的形式保存。14.饵料对轮虫的影响 影响轮虫的生长繁殖，还会影响养殖轮虫的营养成分，尤其是n-3高度不饱和脂肪酸（n-3HUFA）的组成及含量。15. 单细胞藻类作为轮虫饵料的优缺点 各类单胞藻饵料中绿藻优于金藻，金藻又优于硅藻。以单胞藻培养的轮虫，营养价值高。用单胞藻培养轮虫需要许多水池来培养单胞藻，花费大量设备和人力。单一使用单胞藻培养轮虫，轮虫密度不大

27、，在生产性培养中一般密度高的也只有4060个/ml的水平，难以适应生产性苗种培养的需要。16. 酵母类作为轮虫饵料的优缺点 面包酵母不耐盐，在海水中存活时间不长。酵母类作为饵料，成功地使轮虫培养达到400个/ml600个/ml，甚至4000多个/ml的高密度。酵母具有供应稳定、易于贮藏、投喂简便等特点，从而大大简化了培养单胞藻的设备和人力，降低了成本。完全用酵母培养的轮虫在高不饱和脂肪酸的营养上存在重大缺陷，不利仔稚鱼的正常发育。实际生产中，用酵母和海水小球藻配合培养轮虫，已成为一种规范化的轮虫培养技术。17. 酵母轮虫的营养强化方法：（1）用面包酵母和海水小球藻混合培养轮虫，此法可有效提高所

28、培养的轮虫体内的EPA含量（达11%12%）。（2）利用油脂酵母替代普通酵母饲喂轮虫。（3）用海水小球藻对用面包酵母培养的轮虫进行二次强化培养。先用酵母培养大量的轮虫，然后将采收的轮虫集中在小水体中，用海水小球藻培养12小时以上，再将经小球藻培养的轮虫用于投喂苗种。（4）用乳化后的配合鱼油或鱼油微胶囊对面包酵母培养的轮虫进行营养强化。18. 生产中诱发两性生殖形成休眠卵的方法 是以高的种群密度和饥饿刺激相结合进行。即先以常规方法培养轮虫，不采收，待轮虫数量达高峰时，突然停止投喂饵料并停止充气，池中饵料很快耗尽，即会出现两性生殖，生产大量休眠卵。其次，还可以改变盐度或温度，促进轮虫产生休眠卵。1

29、9. 轮虫休眠卵的采集、分离和定量 采表层底泥；制泥浆水；糖盐高渗溶液分离；计数第四章 卤虫的培养1. 卤虫的别名 盐水丰年虫，丰年虾，卤虾2. 卤虫的分类地位 节肢动物门，甲壳纲，鳃足亚纲，无甲目，盐水丰年虫科。A. salina的两层含义：一是表示此卤虫是两性生殖类型的卤虫；二是表示此两性生殖卤虫的确切名称未知3. 卤虫的形态 雄性成体头部的第二触角特化成斧状的把握器，在雌雄交配时用于抱住雌体。通常在高盐水体中，卤虫的外部附肢上的刚毛数减少，刚毛变短。在高盐水体或缺氧水体中，虫体的体色多为红色，而在低盐水体及富含溶解氧的水体中，卤虫体色呈灰白色。在紫外线辐照强的高原地区，卤虫所产休眠卵的颜

30、色多为深棕色，相反，在紫外线辐照弱的区域，卤虫所产休眠卵的颜色多为浅棕色，乃至灰色。4. 卤虫的的发育 历经卵、无节幼体、后无节幼体、拟成虫期幼体和成虫等阶段。I 龄无节幼体（也称初孵无节幼体），体长一般为400m500m。初孵无节幼体靠消化自身贮存的卵黄维持新陈代谢。初孵无节幼体在适宜的温度条件下，一般在12h后可蜕皮，发育成 II 龄无节幼体，开始外源性营养。无节幼体在第4次蜕皮后，变态成拟成虫期幼体。初孵无节幼体经1215次蜕皮后，变态成成虫。卤虫从孵化到性成熟最短只需8天，一般需14d21d。性成熟的卤虫，在环境、饵料适宜的情况下，一般每隔3d5d，即可产卵一次。每次产卵量2个300个

31、，一般为80个150个。卤虫的寿命一般为2个月3个月，可产卵10次左右。5. 卤虫的生殖类型 由种的特性决定，不会受环境因子的改变而改变。根据其生殖类型的不同，卤虫可分为孤雌生殖的卤虫种和两性生殖的卤虫种。6. 卤虫的生殖方式 与其生殖类型无关。生殖方式受内外界环境因子的影响，环境的变化会引起卤虫生殖方式的改变，卤虫生殖方式有都卵胎生方式关卵生方式。以卵生方式繁殖时，又有两种情况：产夏卵和产冬卵（休眠卵）。夏卵，也叫非滞育卵，卵外无厚的硬壳，在适宜的温度、盐度条件下，无需特殊处理24h内即能发育成自由泳动的无节幼体。冬卵，也叫滞育卵，休眠卵，卵外有厚的棕色硬壳，胚胎发育过程中有休眠期，需特殊的

32、处理才能发育成无节幼体。7.卤虫食性 滤食性，只要是数微米至50微米的颗粒状物质均可被卤虫摄食，而对大小为5m16m的颗粒有较高的摄入率。卤虫对食物的种类没有选择性，仅对食物的大小有选择。8. 卤虫休眠卵 卵壳部分包括3层结构。最外层是咖啡色硬壳层，硬壳层的主要成分是脂蛋白、几丁质和正铁血红素；中间层为外表皮膜，具有筛分作用，能阻止相对分子量比二氧化碳大的物质渗透入膜；壳的最内层为胚表皮。膜内的胚胎为一约有4000个细胞的原肠胚。滞育卵：是由内源性、生理性或结构性机制引起的发育暂时停止，处于滞育状态的卤虫卵，即使在良好的环境条件下胚胎也不能进一步发育。滞育状态的解除为激活，只有经过激活后滞育卵

33、才有可能恢复发育。静止卵：由于外界不良环境条件所导致的低代谢水平的状态。不良环境条件通常包括低湿，低温，缺氧等。处于静止状态的卵，一旦外界环境条件得到改善，正常的新陈代谢就会恢复。9. 自然界卤虫分布地区特点：能够持续保持稳定的高盐度；在冬季有冰冻期；在有明显的旱季和雨季的地区。10.我国的卤虫资源分布 主要集中在我国的西北内陆盐湖和华北盐田。海盐区的卤虫以孤雌生殖为主，而内陆湖盐区的卤虫以两性生殖为主。两性生殖的卤虫卵径比孤雌生殖的卤虫卵径小。我国绝大多数产地的卤虫卵的营养价值较高。无论是产自沿海盐田或是内陆盐湖，大多含有较高含量的高不饱和脂肪酸EPA，属海水型卤虫。11. 卤虫在水产上的应

34、用形式 初孵无节幼体，卤虫去壳卵，卤虫中后期幼体及成体（鲜活、冰冻或卤虫干粉）等。12. 影响卤虫卵孵化的因素子 （1）光照：利于胚胎发育，光照不足，孵化推迟或根本不孵化（2）盐度：盐度越高，破壳时间越长，孵出的幼体所含能量相对低，生产一般使用10-20的低盐度；13. 卤虫卵去壳 可使用次氯酸钠或次氯酸钙氧化除去咖啡色的硬壳层。去壳过程：（1）卤虫卵的冲洗、浸泡 浸泡于25的淡水或海水2小时后可达到充分吸水。（2）配制去壳液 去壳液通常用次氯酸钠溶液、氢氧化钠和海水按一定比例配制而成。一般每克干燥虫卵需使用0.5g有效氯和0.15g氢氧化钠，而去壳液的总体积按每克卵14ml的比例配置。（3）

35、去壳 将冲洗、浸泡好的卤虫卵沥干后转移到一定量的去壳液中并不断搅拌。（4）冲洗、脱氯 当去壳完成，卵的颜色呈现橘红色，用孔径为120m的筛网收集去壳卵，并用足量的自来水或海水充分冲洗，直到闻不到氯的气味。然后将去壳卵浸入1%2%的硫代硫酸钠溶液中脱氯约1分钟，进一步用自来水或海水冲洗。14. 卤虫卵去壳过程中的变化 在去壳过程中，卤虫卵的颜色由棕色变成灰白色，最后呈橘红色，同时可感受到去壳液的温度会上升。15. 使用卤虫去壳卵的优缺点 （1）去壳液在去壳的同时，还具有消毒的作用 （2）不存在初孵无节幼体使用过程中出现的因卵壳和未孵化卵所引起的苗种肠梗阻或充当病原固着基的危害。 （3）卤虫卵内的

36、能量储存物质（海藻糖）基本没有被分解消耗。（4）去壳卵的制作过程简单，便捷。 （5）不完全的去壳有利于卤虫卵的孵化，可提高孵化率，缩短孵化时间。缺点：投喂后在正常海水中会下沉，在大多数情况下，不利养殖对象摄食。16. 卤虫卵加工的目的 一是解除卤虫卵的滞育状态，二是使解除了滞育的静止卵能够方便的使用或储存。17. 卤虫卵滞育解除的方法 反复脱水、低温刺激、光照处理、紫外线照射、磁场感应、有机溶剂浸泡、甲醛溶液浸泡、过氧化氢浸泡、二氧化碳处理等。其中最常用的是低温刺激和反复脱水。18. 卤虫卵储存 无氧、干燥、真空条件下19. 卤虫卵的质量判别 可从卵的外观质量，孵化性能及营养价值三方面进行判定

37、。（1）外观质量的判别：色泽与气味；泥沙含量；破壳与碎壳；空壳；含水率；大小判别；细菌含量等指标。（2）孵化特性的判别：孵化率；孵化效率，指每克卤虫卵能够孵化出的无节幼体的只数；孵化产量，指每克虫卵能够孵化出的无节幼体的总干重（毫克）；孵化速度。 （3）营养价值的判别：化学分析法；二是生物饲养评定法。10. 卤虫无节幼体的分离 通常采用静置和光诱相结合的方法。当虫卵的孵化完成后，停止充气，并在孵化容器顶端蒙上黑布，静置10分钟。在黑暗环境中，未孵化率最先沉入池底，并聚集在容器的锥形底端，而卵壳则漂浮在水体表层。初孵无节幼体大多聚集在水体的中下层。将最先流出的未孵化卵排掉，在出水口套上120目的

38、筛绢网袋，收集无节幼体。当容器中液面降到锥形底部，取走筛绢网袋，将卵壳排掉。将筛绢袋中的无节幼体转移到装有干净海水的分离水槽中，利用无节幼体的趋光性，进一步做光诱分离，得到较为纯净的卤虫无节幼体。第五章 其他生物饵料的培养1. 桡足类能提高海水鱼幼体的成活率和促进生长的原因 （1）桡足类是鱼虾蟹的天然饵料，摄食桡足类无节幼体能刺激或诱发其开口阶段的摄食反应；（2）海水幼鱼对其他生物饵料（轮虫）的利用率比较低（3）桡足类的营养与其他生物饵料相比，营养价值高，能满足鱼虾幼体的生长需求2. 哲水蚤目和猛水蚤目作为生物饵料的优缺点 （1）哲水蚤类无节幼体个体小，完全浮游生活，适于海水鱼幼体摄取，但只能

39、达到较低密度(100-200个/L)，且将C18:3n3脂肪酸转换为n3HUFA的能力有限；（2）猛水蚤无节幼体可达较高密度（个/L），将C18:3n3脂肪酸转换为n3HUFA的能力较强，但其营底栖生活，限制了幼体摄食1. 生物饵料：指经过筛选的优质的，进行人工培养后投喂给养殖对象食用的活的饵料生物。2. 饵料生物：指在海洋、江河、湖泊等水域中生活的各种可供水产动物食用的水生动、植物。3. 饲料：指凡饲养动物（如禽、畜等）的食物。主要指陆上动物。4. 饵料：指鱼、虾、贝等水产动物的食物。5. 纯培养：是无菌培养，指排除了包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。6. 单种培养：指区别于纯培养的

40、不排除细菌存在的培养。7. 一次培养：又称有限培养，是在一定的容器中，接入少量藻种，在适宜的环境条件下培养，待藻细胞达到一定的密度后，便一次性采收或进一步扩大培养。8. 半连续培养：又称间收培养，是在一次性培养的基础上，当培养的藻液达到一定密度后，每天采收一部分，收获量根据需要及藻液的生长情况而定，并加入新的营养液，继续培养。9. 连续培养：是在培养容器内，新的培养液不断流入，达到一定密度的培养液不断流出。培养液的流入量和流出量可根据微藻的生长情况及需要进行人为控制，保持平衡。一般在在室内进行，采用自动控温、人工光源、封闭式通气培养。10. 封闭式培养：指把培养液密封在透明的容器中，与外界空气

41、隔离，暴露在阳光中，CO2完全采用人工供给的方法。11. 开放式培养：指把藻类培养在开敞容器中，如广口玻璃瓶、水族箱、玻璃钢水槽、水泥池等。因光照充足、通风较好，藻细胞生长繁殖迅速，但与外界接触面大，易污染。12. 小型培养：又称保种培养或一级培养，目的是培养和供应藻种以进行纯藻种的分离、培养、保存和开展科学研究等。一般采用封闭式不充气一次性培养方式，培养容器一般采用1003000ml的三角烧瓶。13. 中继培养：又称二级培养，目的是藻种扩大培养，供应生产性大量培养的藻种。一般在室内大的玻璃容器或塑料大袋中进行，根据需要可分为一级中继培养和二级中继培养。14. 大量培养：也叫生产性培养或三级培

42、养，目的是为培养动物提高大量单胞藻饵料。有室内和室外两种。目前主要采取室内、开放式、通气、一次性或半连续培养法，培养容器有大型玻璃钢水槽、大型水泥池或塑料薄膜袋等（也有用土池）。15. 母液：母液是培养液的浓缩，是为减少每次称量的麻烦，根据配方配成的浓营养溶液。16. 贮液：指固体营养元素为减少每次称量的麻烦和使用方便而配成的重量百分比溶液。17. 辅助生长有机物质：是培养液中对单胞藻的生长有辅助促进作用的有机物质。18. 延缓期：单细胞藻类在接种培养开始的一段时间内，藻细胞数目没有明显改变，表现出一暂时的静止状态。19. 指数生长期：指单细胞藻类细胞迅速地生长繁殖，细胞数目以几何级数增加。2

43、0. 相对生长下降期：细胞生长繁殖的速度与指数生长期比较，逐步下降，但细胞数目仍在增加。21. 饱和白昼：指在较强光照范围下，光照时间增加，藻细胞数目并不增加的光照时间。22. 最适光照强度：也称饱和光照强度，指藻类光合作用或细胞分裂速率达到最大值时的光照强度。23. 补偿光照强度：藻类光合作用放出的氧与呼吸作用消耗的氧恰好相等，细胞只能维持基础代谢，不能生长时的光照强度。24. 藻菌共生：某些单细胞藻类（如中肋骨条藻、日本星杆藻等）必须与细菌互相依存才能良好生长的生长方式。25. 敌害生物：单胞藻培养过程中，危害单胞藻生长繁殖的生物。26. 生殖量：枝角类一个孤雌生殖雌溞育儿囊中每胎的胚胎或

44、幼溞数。27. 总生殖量：枝角类一个孤雌生殖雌溞一生所产的幼溞总数。28. 生殖率：枝角类一个孤雌生殖雌溞每十天（或单位时间内）的平均产卵次数。29. 龄期：枝角类从幼龄开始，每脱皮1次增加1龄，每两龄之间的发育期称龄期。30. 非混交雌体：轮虫、枝角类等某些浮游动物的休眠卵和夏卵在环境条件适宜时发育成的雌性个体。31. 混交雌体：轮虫、枝角类等某些浮游动物夏卵受混合刺激（或环境不良时）后发育成的雌性个体。32. 雄体：轮虫、枝角类等某些浮游动物混交雌体的混交卵未经受精而发育成的雄性个体。33. 混合刺激：温度、光照、食物、密度等的综合变化。34. 夏卵：又称非混交卵。指轮虫、枝角类等某些浮游

45、动物非混交雌体产出的卵。卵形，壳薄而光滑。35. 休眠卵：轮虫、枝角类等某些浮游动物混交雌体在年轻时与雄虫交配，混交卵与精子结合成的受精卵形成的厚壳卵。可抵抗干燥、低温等不良环境，需经一定的休眠期才能发育，且总是发育为非混交雌体。36. 混交卵：轮虫、枝角类等某些浮游动物混交雌体产出的卵，经受精形成休眠卵，不受精，发育成雄体。37. 滞育：桡足类在环境不良时常停留在幼体或成体的某一期而不再发育的现象。二、简述题1. 简述生物饵料培养的意义及选择生物饵料的条件？答：生物饵料培养的意义：生物饵料的培养是解决水产动物养殖饵料的一个重要方面，特别是苗种培育阶段，生物饵料培养是目前解决幼体饵料的主要方法

46、，发挥着不可替代的作用，其培养的成功与否，往往直接关系着人工育苗的成败和技术水平的高低。选择生物饵料的条件：（1）个体大小应适合于不同养殖动物不同发育阶段的摄食；（2）在水中的运动和分布应便于养殖动物的摄食；（3）营养丰富且容易被养殖动物消化吸收，有较高的饵料效率；（4）代谢产物对养殖动物无毒或毒性很小；（5）对环境的适应力强，生长、繁殖迅速；（6）容易进行大量培养，且培养密度大，产量高，成本低；2. 简述单细胞藻类的主要特点及其在水产养殖上的应用？答：单细胞藻类的特点：（1）能进行光合作用，且利用太阳光能效率高。（2）营养丰富。蛋白质含量高，氨基酸的种类组成与比例合理；脂肪含量高，富含不饱和

47、脂肪酸；含有多种维生素和药用成分。（3）生长繁殖迅速。（4）对环境适应性强。（5）容易培养。单细胞藻类在水产养殖上的应用：（1）直接作为水产动物幼体和成体的饵料。如作为大多数贝类幼体、虾类的蚤状幼体和糠虾幼体、海参的鳟形幼体等，及瓣鳃类成体的饵料。（2）用于培养动物性生物饵料。如作为轮虫、枝角类、桡足类等的饵料。（3）用于改善育苗和养殖水质。3. 请分别写出绿藻门、硅藻门和金藻门各3种常用单胞藻培养种，及单胞藻常见的高温种和低温种各2种。答：绿藻门：小球藻、微绿球藻、扁藻、塔胞藻、盐藻、栅藻等硅藻门：角毛藻、小硅藻、三角褐指藻、中肋骨条藻等金藻门：等鞭金藻8701（低温种）、等鞭金藻3011（

48、高温种）、湛江叉鞭金藻、绿色巴夫藻常见高温种：角毛藻、等鞭金藻3011常见低温种：小硅藻、三角褐指藻4. 简述目前单细胞藻类的培养方式有哪些？答：目前单细胞藻类的培养方式主要有：（1）按培养的场所分室内培养和室外培养（2）按培养基的形态分固体培养和液体培养（3）按培养的纯度分纯种培养和单种培养（4）按藻液的流动情况分静止培养和循环流动水培养（5）按气体交换情况分充气培养和不充气培养（6）按采收方式分一次培养、连续培养和半连续培养（7）按藻液与外界接触程度分封闭式培养和开放式培养（8）按培养规模和目的分小型培养、中继培养和大量培养5. 简述单胞藻培养的一般工艺流程？6. 请写出3母液的配方及其配

49、制中的注意事项？答：3母液配方：KNO3 100g EDTA-Na2 20gK2HPO4 10g VB1 6mgFeSO4 2.5g VB12 50ugMnSO4 0.25g 蒸馏水 1000ml培养液配制中的注意事项：（1）保种用的营养盐应用试剂级（A·R或C·P），而一般生产性培养只需选用纯和工业纯。（2）营养元素的加入要有一定的顺序，一般先加N，再加P，后加Fe。同时，Fe应在EDTA之后加。（3）维生素溶液的配制要将各种维生素分别溶解后再混合。若培养用水是加热消毒，一定要待冷却后才能加入。（4）每加入一种营养元素，要搅拌均匀后再加入第二种。7. 简述单胞藻培养用水的

50、一般处理流程和用漂白粉消毒的具体方法。答：单胞藻培养用水的一般处理流程：用漂白粉消毒的具体方法：20ppm有效氯漂白粉处理1224h加入等量硫代硫酸钠清除余氯强充气并经2h沉淀后吸取上清液作培养用水。8. 简述如何判断单胞藻生长的好坏？主要是每天上、下午定时各作一次全面观察（肉眼观察），通过颜色、运动、沉淀、附壁和菌膜的有无等了解并掌握藻类的生长情况，必要时配合显微镜检查，以检查鉴定敌害生物及杂藻，并进行藻类细胞计数，确定细胞浓度等。如果接种后，颜色由浅到深改变不明显，表明繁殖速度慢；如果出现其他特别的颜色，表明有敌害生物的污染。如果在天气正常时，藻类细胞白天也不上浮或上浮的比例不大，以及出现

51、大量沉淀且经搅拌后又很快下沉，属不正常现象。生长良好的微藻不附壁，产生附壁，说明环境不适，生长不好。水面出现菌膜。表明有真菌或细菌生长 。9. 画图并说明单胞藻在一次性培养中生长繁殖的特征？答：一次性培养是在培养容器中，按照藻类的营养要求，制成含有藻类必须的营养成分的培养液，接种入少量藻种，放置在适宜的光照、温度条件下，搅拌或充气进行的培养。单胞藻在一次性培养中，藻细胞的生长繁殖表现出一特定的模式曲线，通常可划分为5个时期：延缓期、指数生长期、相对生长下降期、静止期、死亡期。（1）延缓期：在接种培养开始的一段时间内，藻细胞数目没有明显改变，表现出一暂时的静止状态。（2）指数生长期：细胞迅速地生

52、长繁殖，细胞数目以几何级数增加。（3）相对生长下降期：细胞生长繁殖的速度与指数生长期比较，逐步下降，但细胞数目仍在增加。（4）静止期：细胞数目保持稳定。（5）死亡期：藻细胞大量死亡，细胞数目迅速减少。10. 简述单胞藻培养过程中延缓期产生的原因及消除措施？答：单胞藻培养过程中延缓期产生的原因：（1）接种藻种来自不良环境的“老化”藻种。（2）藻类的生长繁殖需要在培养液中有一定数量的由藻类自身分泌的特殊物质。（3）接种细胞从老培养液到新培养液，环境变化太大，必须有一个适应时间。延缓期消除措施：（1）接种处于指数生长期的藻种；（2）适当增大接种比例；（3）分次加入培养液，减小新老培养液中营养盐浓度的

53、差异。11. 简述光照对单胞藻培养的影响。答：（1）不同光质对单胞藻的作用不同。红外光和紫外光对藻类有杀害作用，藻类能吸收利用的是可见光。不同光质还影响单胞藻光合作用的效率和产物。（2）大多单细胞藻类喜漫射光，而忌直射光。（3）不同藻类的适光范围不同。在适光范围内，光照强度增加，光合作用速度加快。光合作用或细胞分裂速率达到最大值时的光照强度为饱和光照强度；藻类光合作用放出的氧与呼吸作用消耗的氧恰好相等，细胞只能维持基础代谢，不能生长时的光照强度为补偿光照强度。（4）光时的作用受光强、温度、营养盐及其他环境因子的影响。如果光照强度弱，需要光照时间长，光照强度强，则需要光照时间短。低温下，藻新陈代

54、谢速度慢，补偿光照强度低，饱和白昼现象较为显著。（5）间歇光的同化作用效果比与间歇照明时间总和相等的连续照明要大许多。12. 简述单胞藻的培养管理有哪些内容和要求？答：（1）日常管理工作。包括搅动和充气，调节光照，控温，注意酸碱度的变化，防虫和防雨等。（2）生长情况的观察和检查。颜色、运动、沉淀、附壁和菌膜等情况的观察。当肉眼观察发现不正常时，利用镜检来帮助确定导致不正常的原因。（3）出现问题的分析处理。13. 敌害生物对单胞藻的危害表现在哪些方面，其污染的途径有哪些？答：敌害生物对单胞藻的危害主要通过两个方面：（1）直接吞食。一些较大的敌害生物，如轮虫、游仆虫、尖鼻虫、变形虫、海生残沟虫等，

55、直接吞食藻类。（2）通过分泌有害物质对单胞藻起抑制和毒害作用。往往比直接吞食的危害程度严重得多。敌害生物污染的途径：（1）水。加热消毒中加热温度不够或持续时间不够；漂白粉消毒未测定有效氯含量或处理时间不够等造成水消毒不彻底。（2）空气。开放式静止和充气培养中，敌害生物（多数是23um的单细胞绿藻类）通过空气污染难以避免。（3）容器和工具。消毒不彻底引起污染。（4）肥料不干净。（5）昆虫。带进敌害生物或在培养池中产卵。（6）操作不严。操作前，手未消毒；操作时，不遵守操作规程。14. 藻种的分离与保存各有哪些方法？答：藻种分离方法（1）根据生态条件进行分离（2）微吸管分离法（3）水滴分离法（4）平

56、板分离法（5）稀释法（6）抗菌素分离法藻种保存方法：（1）低温弱光保种法（2）循环移养保种法15. 简述褶皱臂尾轮虫的分类地位和形态特征并用图式画出轮虫的生活史？分类地位：轮虫门、单巢目（或单巢纲、游泳目）、（臂尾轮虫科、臂尾轮虫属）形态特征：轮虫雌雄异体且异形，是形态变异极大的动物。雌体分头部、躯干部、足（尾）部三部分。身体前端，为一发达的头冠，上有纤毛环，头冠之后，被一透明（很薄）、光滑的被甲包裹。尾部：很长，上有环纹，后端有一对铗状趾。（消化道内具咀嚼器。）16. 简述轮虫营养强化的原因及常用方法？答：轮虫营养强化的原因：轮虫是目前海水鱼类育苗中最重要的开口饵料，其所含的营养成分对鱼类的生长速度、抗病力和成活率等均有重要影响。在各种营养成分中，以-3系列不饱和脂肪酸（HUFA），特别是廿碳五烯酸（EPA）和廿二碳六烯酸（DHA）的缺乏造成危害最为严重。轮虫体内的EPA/DHA主要是从其摄食的饵料获取的。单胞藻中EPA/DHA的含量通常都比较高，完全用单胞藻培养的轮虫，一般不缺乏EPA/DHA。完全用酵母培养的轮虫严重缺乏