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文档简介

1、1 实验一实验一 细菌的简单染色细菌的简单染色一、内容：一、内容： 1 1、学习普通光学显微镜的基本使用、学习普通光学显微镜的基本使用 2 2、学习细菌涂片及作简单染色的方法学习细菌涂片及作简单染色的方法二、菌种：二、菌种： 苏云金芽孢杆菌（苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis B. t ）三、操作：（一）制涂片三、操作：（一）制涂片 1 1、涂片：在干净载玻片一侧滴一滴蒸馏水。按无菌操作要求，用接种环、涂片：在干净载玻片一侧滴一滴蒸馏水。按无菌操作要求，用接种环 从从 从培养基上蘸取从培养基上蘸取苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌（注意取菌不要太多，不要刮下培（注意取菌不要

2、太多，不要刮下培 培培 养基），浸入水滴中，打散成菌悬液。再从中蘸取少量菌液在玻养基），浸入水滴中，打散成菌悬液。再从中蘸取少量菌液在玻 玻玻 片另一侧涂成薄薄一层。片另一侧涂成薄薄一层。 2 2、干燥：使涂层自然干燥，勿用酒精灯近距离烤干。、干燥：使涂层自然干燥，勿用酒精灯近距离烤干。 3 3、固定：待涂层干燥后，玻片通过火焰固定菌体（通过三次）、固定：待涂层干燥后，玻片通过火焰固定菌体（通过三次） 4 4、染色：、染色：1 12 2滴复红染料，染滴复红染料，染1 12 2分钟分钟 5 5、水洗：自来水洗去染料。、水洗：自来水洗去染料。 6 6、观察：吸水纸吸去多余水分，置、观察：吸水纸吸去

3、多余水分，置 显微镜载物台上显微镜载物台上 打散菌体打散菌体无菌操作取菌滴水滴水2三、操作三、操作（二）镜检观察：（二）镜检观察： 开启显微镜电源，调开启显微镜电源，调整光源强弱和物镜到整光源强弱和物镜到载物台的距离，按载物台的距离，按10 x10 x，40 x 40 x ，100 x100 x物镜的顺物镜的顺序观察菌体和芽孢。序观察菌体和芽孢。 操作注意：操作注意： 1 1、镜检时，物镜的选、镜检时，物镜的选 择必须遵循先低倍，择必须遵循先低倍， 后高倍的原则。后高倍的原则。 2 2、调节焦距时，应先将载物台与物镜头靠至最近，再旋动调焦螺旋，在、调节焦距时，应先将载物台与物镜头靠至最近，再旋

4、动调焦螺旋，在载物台远离物镜头的过程中找准焦距。不能在眼睛看目镜的同时，通过载物台远离物镜头的过程中找准焦距。不能在眼睛看目镜的同时，通过上升载物台来调焦，以免物镜头压碎载玻片。上升载物台来调焦，以免物镜头压碎载玻片。 3 3、 100 x 100 x物镜观察时，先在物镜观察时，先在 40 x 40 x下找到细菌涂片的合适目标，在目标上滴下找到细菌涂片的合适目标，在目标上滴一滴香柏油，将一滴香柏油，将100 x100 x物镜浸入油滴中，再调焦观察。实验完毕，用擦镜物镜浸入油滴中，再调焦观察。实验完毕，用擦镜纸蘸二甲苯拭抹镜头纸蘸二甲苯拭抹镜头 （不可用卫生纸）（不可用卫生纸）三、作业：三、作业：绘出绘出100 x

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