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1、现代生物科技专题试题精选基因工程1某DNA分子中含有某限制酶的一个识别序列,用该限制酶切割该DNA分子,可能形成的两个DNA片段是( )2下列有关基因工程的叙述,正确的是( )A载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达B目的基因导入受体细胞后,受体细胞即发生基因突变C目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物D限制性核酸内切酶和DNA聚合酶是两类常用的工具酶3限制酶是一群核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI,EcoRI,Hind以及BgI的辨识序列:箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片

2、段末端,可以互补结合?其正确的末端互补序列为()ABamHI和EcoRI;末端互补序列AATTBBamHI和Hind;末端互补序列GATCCBamHI和BgI;末端互补序列GATCDEcoRI和Hind;末端互补序列AATT4一环状DNA分子,设其长度为1。限制性内切酶A在其上的切点位于0.0处;限制性内切酶B在其上的切点位于0.3处;限制性内切酶C的切点未知。但C单独切或与A或B同时切的结果如下表,请确定C在该环状DNA分子的切点应位于图中的哪处()C单独切长度为0.8和0.2的两个片段C与A同时切长度为2个0.2和1个0.6的片段C与B同时切长度为2个0.1和1个0.8的片段A0.2和0.

3、4处B0.4和0.6处C0.5和0.7处D0.6和0.9处5下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamH或EcoR或Pst的酶切位点。现用BamH和EcoR两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是( )TDNA用于转移TDNA的基因复制方向复制起始点A1为BamH,2为EcoR,3为BamH,4为PstB1为EcoR,2为BamH,3为BamH,4为PstC1为Pst,2为EcoR,3为EcoR,4为BamHD1为Bam

4、H,2为EcoR,3为Pst,4为EcoR6土壤农杆菌是基因工程中将目的基因导入植物细胞时常用的中间媒介。它含有一个大型的Ti质粒(如右图所示),在侵染植物细胞的过程中,其中的TDNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因,以下分析不合理的是( )A若用Ti质粒作为抗旱基因的载体,目的基因的插入位置应该在TDNA片段内,且要保证复制起始点和用于转移TDNA的基因片段不被破坏B将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时,可以用CaCl2处理细菌以增加细胞壁的通透性C用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染正在组织培养中的植物细胞,再将被感染后的细胞培养成植株,就可能获得具

5、有抗旱基因的植物D若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因,则说明该基因工程项目获得成功7下面是四种不同质粒的示意图,其中ori为复制必需的序列,amp为氨苄青霉素抗性基因,tet为四环素抗性基因,箭头表示同一种限制性内切酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是( )A基因amp和tet是一对等位基因,常作为基因工程中的标记基因B质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNAC限制性内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键D用质粒4将目的基因导入大肠杆菌,该菌不能在含四环素的培养基上生长8如图,有关工具酶功能的叙述错误的是( )A限制性内切酶可切断a处BDNA聚合酶可连

6、接a处C解旋酶可使b处解开DDNA连接酶可以连接c处9下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容,正确的组合是( )供 体剪 刀针 线运载体受 体A质粒限制性内切酶DNA连接酶提供目的基因的生物大肠杆菌等B提供目的基因的生物DNA连接酶限制性内切酶质粒大肠杆菌等C提供目的基因的生物限制性内切酶DNA连接酶质粒大肠杆菌等D大肠杆菌等DNA连接酶限制性内切酶提供目的基因的生物质粒10用人的胰高血糖素基因制成的DNA探针,检测下列物质,不可能形成杂交分子的是( )A人胰岛A细胞中的DNA B人胰岛A细胞中的mRNAC人胰岛B细胞中的DNA D人胰岛B细胞中的mRNA11下列关于转基因植物的叙述

7、。正确的是( )A转入到油菜的抗除草剂基因,可能通过花粉传入环境中B转抗虫基因的植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率增加C动物的生长激素基因转入植物后不能表达D如转基因植物的外源基因来源于自然界,则不存在安全性问题12蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是( )A氨基酸结构B蛋白质空间结构C肽链结构   D基因结构13科学家将干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达,使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸,结果大大提高-干扰素的抗病性活性,并且提高了储存稳定性,该生物技术为( )A基因工程B蛋白质工程 C基因突变D细胞工程14下列关于蛋白质工程的叙述,不正确的是( )A

8、实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构和功能的关系B基因工程是蛋白质工程的关键技术C蛋白质工程是对蛋白质分子的直接改造D蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程15下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述,正确的是 ( )A基因工程需对基因进行分子水平操作,蛋白质工程不对基因进行操作B基因工程合成的是天然存在的蛋白质,蛋白质工程合成的可以不是天然存在的蛋白质C基因工程是分子水平操作,蛋白质工程是细胞水平(或性状水平)操作D基因工程完全不同于蛋白质工程16(10全国II)下列叙述符合基因工程概念的是( )AB淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B将人的干扰素基

9、因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株C用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株D自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上17(10浙江理综)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是( )A用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C将重组DNA分子导入烟草原生质体D用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞18(07广东生物,23,2分)下列关于基因工程应用的叙述,正确的是( )A基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C一种基因探针能

10、检测水体中的各种病毒D原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良19(07广东生物,26,2分)在已知某小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是( ) A用mRNA为模板逆转录合成DNA B以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C将供体DNA片段转入受体细胞中,再进一步筛选D由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA20下面为植物组织培养过程流程图解,以下相关叙述不正确的是( )有生根发芽能力的胚状结构植物叶片叶组织块b愈伤组织cd人工种子e种苗aA上述过程中脱分化发生在b步骤,形成愈伤组织,在此过程中植物激素发挥了重要作用B再分化发生在d步骤,是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程C从叶组织块到种苗形

11、成的过程说明番茄叶片细胞具有全能性D人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题21用植物激素类似物诱导烟草体外培养的实验结果如下:激素类似物种类及浓度关系6BA6BAIBA6BAIBA6BAIBA实验结果组织块产生愈伤组织愈伤组织分化出芽愈伤组织只有生长愈伤组织有长根的趋势根据实验结果,得出的结论正确的是() AIBA属于细胞分裂素类植物激素,具有促进植物生长生理作用 B愈伤组织分化的方向取决于其两者浓度的大小 C6BA属于生长素类植物激素,具有细胞分裂生理作用 D6BA属于生长素类植物激素,具有组织分化生理作用22下表为环腺苷酸(cAMP)和环鸟苷酸(cGMP)的浓度(

12、M1<M2<M3<M4)对细胞分化的影响情况(“”表示促进分化,“”表示抑制分化)。下列叙述正确的是( )浓度M1M2M3M4cAMPcGMPAcAMP和cGMP的浓度对细胞的分裂和分化具有调控作用BcAMP含量增高时,则促进细胞分裂CcGMP含量增高时,则促进细胞分化DcAMP和cGMP对细胞分裂没有影响23(10南通二模)下列有关植物体细胞杂交技术的描述,不正确的是( )A利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株B获得原生质体的过程中需要纤维素酶和果胶酶C通常用聚乙二醇或灭活病毒诱导原生质体融合D可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂种细胞24(10南京三模)下列关于

13、植物体细胞杂交的叙述,错误的是( ) A不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程 B参与杂种细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和核糖体 C植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制,培育远源杂种植株 D杂种植株表现出的性状是基因选择性表达的结果25.如图是“白菜一甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是( )A.图示“白菜甘蓝”植株不能结籽 B.愈伤组织的代谢是自养需氧型 C上述过程中包含着有丝分裂,细胞分化和减数分裂等过程 D“白菜甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果26(10扬州市四模)将基因型为Aa的植株的花粉和基因型为Bb的植株的花粉,除去细胞壁后,进行原生质体融合,可以

14、得到多少种基因型不同的细胞( )A6种B8种C10种D12种27(10盐城市三调)用植物细胞工程技术将天竺葵与香茅草进行杂交可产生驱蚊香草。下列有关培育过程的叙述,不正确的是( ) A原生质体的融合常用PEG作为诱导剂 B形成的愈伤组织其代谢类型是自养需氧型 C由杂种细胞杂种植株,要通过有丝分裂和细胞的分化 D该项生物工程技术可克服远缘杂交不亲和的障碍28(10南通市三模)在动物细胞培养过程中,下列处理不恰当的是( )A培养液和培养用具要进行无菌处理 B提供种类齐全的营养物质C提供纯氧以保证细胞的呼吸作用 D保证提供适宜的温度和pH29(10苏北四市三模,9)下列关于细胞工程的叙述中,错误的是

15、( )A植物细胞融合必须先制备原生质体B试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面C动物细胞培养过程中要保持一定浓度的CO2,其目的是促进动物细胞呼吸D用于培养的植物器官或组织属于外植体30某同学在学习“细胞工程”时,列表比较了动植物细胞工程的有关内容,你认为有( )处不正确?植物细胞工程动物细胞工程技术手段植物组织培养 植物体细胞杂交动物细胞培养和融合 单抗制备等特殊处理酶解法去除细胞壁胰蛋白酶处理制细胞悬浮液融合方法物理方法 化学方法物理方法 化学方法 生物方法典型应用人工种子 种间植物单克隆抗体的制备培养液区别蔗糖是离体组织赖以生长的成分动物血清不可缺少A0 B1 C2 D331(10南通

16、市三模,17)在试管牛的生产过程中,不是必需的操作是( )A卵母细胞的采集和培养 B受精卵中导入抗病毒基因C精子的采集和获能 D胚胎的早期培养和移植32(08上海生物)制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括( )细胞培养 细胞融合 胚胎移植 细胞核移植ABCD33(07天津)利用细胞工程方法,以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是( )A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体B体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D利用该单克隆抗体与SARS

17、病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者34(10南通二模)下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述,正确的是( )A采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用B排卵就是排出成熟卵细胞的过程C卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成D受精作用完成的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体35(10苏北四市二模,23)下图是利用某植物(基因型为AaBb)产生的花粉进行单倍体育种的示意图,据图判断正确的有( )植株B植株A花粉A过程通常使用的试剂是秋水仙素,作用时期为有丝分裂间期 B通过过程得到的植株A基因型为aaBB的可能性为1/4 C过程属于植物的组织培养,在此过程中必须使用一定

18、量的植物激素D与杂交育种相比,该育种方法的优点是能明显提高变异幅度36(苏、锡、常、镇四市二)胚胎工程技术在生产中的应用不包括( )A移植胚胎干细胞使退化的组织修复并恢复正常功能B进行胚胎移植充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能C采用机械方法将早期胚胎分割产生同卵双胎D在小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体37(10盐城市三调)英国研究者取人的皮肤细胞核与去核牛的卵细胞重组,培育出混合胚胎,但该胚胎只成活了3天。此项技术与一般治疗性克隆研究相比较,其发展优势是( )A最终可培育产生转人类基因动物 B可望解决人类卵细胞资源稀缺问题C可望有效解决器官移植产生的排斥反应 D可望构建人体器官克隆体系38(

19、10盐城市三调)下列生物工程技术中一定要来自同一个物种的是( )核移植中细胞核和细胞质来源 牛胚胎移植中公牛与母牛牛胚胎移植中胚胎的供体与受体 植物体细胞杂交中两个体细胞ABC D39(10南京三模)取某哺乳动物的染色体DNA被32P标记的精子与未被标记的卵细胞进行体外受精和早期胚胎培养。若不考虑染色体变异,下列关于该受精卵形成及其分裂所产生后代细胞的说法,错误的是( )A第二次卵裂结束时,最多有4个细胞带放射性B次级卵母细胞在受精作用过程中完成减数第二次分裂C取胚胎细胞制片观察,并不是每个细胞内都可以看到染色体D获能的精子与卵子相遇,释放顶体酶穿过透明带进入放射冠40、(2010安徽安庆四校

20、联考)现在有一个婴儿在出生后医院为他保留了脐带血,在以后他生长发育过程中如果出现了某种难治疗的疾病,就可以通过血液中的干细胞来为其治病,关于这个实例说法正确的是( ) A用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病,需要激发细胞的所有全能性 B用脐带血中的干细胞能够治疗这个孩子所有的疾病 C如果要移植用他的干细胞培育出的器官,需要用到细胞培养技术 D如果要移植用他的干细胞培育出的器官,应该长期给他使用免疫抑制药物41(10江苏生物)下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊的叙述,错误的是( )A对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理B人工授精后的一定时间内,收集供体原肠胚用于胚胎分割C利用胚胎分割技术可

21、以获得两个基因型完全相同的胚胎D一次给受体母羊植入多个胚胎,可增加双胞胎和多胞胎的比例42(10江苏生物老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的一淀粉样蛋白体,它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降,某些基因的突变会导致一淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是( )A胚胎移植技术B胚胎干细胞技术C单克隆抗体技术D基因治疗技术43当卵细胞达到( )时期时,才具备与精子受精的能力 A.减数第二次分裂后期 B.减数第一次分裂末期 C.减数第二次分裂中期 D. 减数第二次分裂结束成熟44(08江苏生物,6,2分)动物和人体内具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞。对下图的相关叙述中

22、,错误的是( )Aa过程表示干细胞能自我更新Bb、c过程表示干细胞具有分化能力Ca、b、c过程中细胞的遗传信息表达情况不同Db过程形成的细胞直接组成器官,可供器官移植使用45(10苏北四市二模,13)右图是某生态工程示意图,有关说法错误的是( )A用玉米的副产品玉米芯生产木糖醇,可增加经济效益B用残渣来培育食用菌和蛆蛹,实现了物质的多级利用C用蛆蛹粪便作为有机肥还田,运用了能量循环再生的原理D该生态工程的运转离不开人的管理46(08广东生物,16,2分)要实现人与自然的和谐发展,下列措施最合理的是( )A通过生物技术手段,转化淀粉生产可再生能源B使用化学农药防治病虫害,保证粮食稳产C发展生态农

23、业,实现物质和能量的多级利用D大力开垦湿地,扩大粮食种植面积47(07广东生物,16,2分)“猪一沼一茶”是华南山地丘陵地区常见的生态农业模式,由种植(茶树)、养殖(猪)、农户(人)和沼气生产(微生物)四个子系统构成。该生态农业模式( )A是由茶树、猪、人和微生物组成的生态系统 B实现了物质和能量在系统中的多级循环利用C使整个生产过程进人了废物资源化的良性循环 D注重系统内部的自身调节作用,不需要外部投人48(07重庆理综,1,6分)稻鸭萍共作是一种新兴的生态农业模式,其中,水生植物红萍(满江红)适生于荫蔽环境,可作为鸭子的饲料,鸭子能吃有害昆虫并供肥,促进水稻生长,对以此模式形成的生态系统,

24、下列叙述错误的是CA该生态系统的主要功能是物质循环和能量流动B鸭子既是初级消费者,又是次级消费者C生物群落由水稻、红萍、鸭子和有害昆虫组成D水稻和红萍分层分布,能提高光能利用率49(07四川理综,3,6分)在社会主义新农村建设中,四川某地通过新建沼气池和植树造林,构建了新型农业生态系统(如图所示)下列有关叙述不正确的是C粪便林地饲料家禽家畜林产品沼气池粪便燃料人农作物秸杆沼渣沼液作肥料A该生态 系统中,处于条二营养级的生物有人和家禽家畜B该生态系统中,人的作用非常关键,植物是主要成分C该生态系统的建立,提高了各营养级间的能量传递效率D沼气池的建造和植树造林,提高了该生态系统的稳定性50我国科学

25、家运用基因工程技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达,培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是() A抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具和运载体 B重组DNA分子中增加一个碱基对,不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物,从而造成基因污染 D转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的51为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对)

26、第一步水解产物(单位bp)第二步水解产物(单位bp)A酶切割2100将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割1900 2001400 800 60010001000500500B酶切割2500将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割1900 6001300800 50012001000 200经A酶和B酶同时切割1900 1000 800 600 500 200(1)该实验设计主要体现了_原则。(2)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为_个和_个。(3)根据表中数据,请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。(4)已知BamH 与Bgl的识别序列及切割位点如右图

27、所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH 和Bgl识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后“AGATCC/TCTAGG”和_序列明显增多,该过程中DNA连接酶催化_键的形成。52(10扬州市四模,30)(8分)土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌,它带有一个大的质粒叫Ti质粒(含冠瘿瘤基因),它携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段,只有TDNA片段才转入植物细胞的基因组。结构及转化过程如图所示,回答相关问题。(1)若用Ti质粒作为抗旱基因的载体,为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤,需对Ti质粒进行修饰,即,将抗旱基因转

28、移至Ti质粒的中,且要保证复制起始位点和不被破坏。然后在一定条件下将外植体在含有的土壤农杆菌的稀释培养基上培养,使得抗旱基因转入植物细胞并整合到植物基因组中。(2)将上述外植体置于一个含有某种抗生素的合适培养基中进行筛选,发生转化的外植体通过形成愈伤组织,再通过产生不定芽和体细胞胚再长出整个植物。(3)基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定,如果培育成的植株能适应干旱环境,还应进行水平鉴定,以确定该变异能否遗传给后代。为获得纯合的转基因植株,还需要对转基因植株进行严格的 。携带H基因的重组表达载体A携带H基因的重组表达载体B5导入大肠杆菌导入培养动物细胞6真核细胞表达H蛋白原核细胞表达H蛋白5

29、3(10苏北四市三模,9)(7分)某研究小组进行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作,下图为他们前期研究工作的简要操作流程图:H1N1流感病毒提取RNADNA选择性扩增H基因(1)实验步骤所代表的反应过程是;在步骤之前扩增H基因常采用的方法与体内DNA复制相比,反应体系需加入种引物和。(2)某志愿者接种甲型H1Nl流感疫苗后,第15天感染甲型H1N1流感病毒,则体内细胞将迅速增殖分化形成细胞,从而产生大量抗体。(3)机体能合成数百万种特异性抗体,抗体种类如此多的原因是其结构中的。(4)在炎热的夏季,山西某地在未执行冷藏要求的情况下运输甲型H1N1流感疫苗,结果导致给学生注射的甲型H1N1流感疫

30、苗无效,请分析疫苗失活的主要原因是。54(10苏北四市二模,29)(8分)应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题:资料1:蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”,有着超强的抗张强度。可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法培育转基因蜘蛛羊。 资料2:注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦。将疫苗藏身水果蔬菜中,人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力,因而无需免疫接种,这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。(1)过程所需要的工具酶有,构建的蜘蛛丝蛋白基因表达载体一般由、 、启动子、终止子等部分组

31、成。(2)过程将重组质粒导入山羊受体细胞时,采用最多也最有效的方法是。 通过过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器,从中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。(3)如果将过程获得的早期胚胎进行如图分割,则操作正确的是。(4)通过培育转基因莴苣,相比诱变育种和杂交育种方法,具有和等突出优点。55(10南通市三模)(7分)2009年10月,我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程,据图回答:人工合成杀虫基因(crylA)农杆菌Ti质粒含杀虫基因的重组质粒含重组质粒的土壤农杆菌华恢1号抗虫水稻含杀虫基因的水稻胚细胞(1)过程应用的主要生物技术是。(2)杀虫基

32、因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构,设计并人工合成的,这属于工程技术范畴。(3)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制性内切酶作用位点),据图分析:人工改造时,要使抗虫基因表达,还应插入_。人工改造时用限制酶处理,其目的是:第一,去除质粒上的(基因),保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于_。第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等。若用限制酶分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功

33、导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的现象是。(4)若限制酶切割DNA分子后形成的粘性末端为,则该酶识别的核苷酸序列是。56(10盐城市三调)(8分)科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组,并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答:(1)步骤和中常用的工具酶是。(2)经过和步骤后,有些质粒上的基因内插入了外源目的基因,形成重组质粒。(3)步骤是的过程。为了促进该过程,应该用处理大肠杆菌。(4)步骤:将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养,目的是筛选。能在C中生长的大肠杆菌有种。(5)步骤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落,分别

34、接种到D(含氨苄青霉素和四环素)和E(含四环素)两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于(选填“D”或“E”)上,请在图中相应的位置上圈出来。57(10天津理综,7I,14分)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性金银,BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答:(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含的培养基上进行。(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是(

35、填字母代号)。A启动子 BtetR C复制原点 DampR(3)过程可采用的操作方法是(填字母代号)。A农杆菌转化 B大肠杆菌转化 C显微注射 D细胞融合(4)过程可采用的生物技术是。(5)对早期胚胎进行切割,经过程可获得多个新个体。这利用了细胞的性。(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用(填字母代号)技术。A核酸分子杂交 B基因序列分析 C抗原抗体杂交 DPCR58(10江苏生物,27,8分)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:(1)一个图1所示的质粒分子经Sma 切割前后,分别含有个游离的磷酸基团。(2)若对图中质粒进行

36、改造,插入的Sma酶切位点越多,质粒的热稳定性越。(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Srna 切割,原因是。(4)与只使用EcoR I相比较,使用BamH 和Hind 两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止。(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入酶。(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了。(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。59(10福建理综,32,10分)红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于

37、治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限,目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)期间要生产流程如右图。(1)图中所指的是技术。KS*5U.C#O(2)图中所指的物质是,所指的物质是。(3)培养重组CHO 细胞时,为便于清除代谢产物,防止细胞严物积累对细胞自身造成危害,应定期更换。(4)检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的细59、胞,可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成60(10南通二模)(8分)在植物组织培养过程中,愈伤组织的成功诱导是至关重要的步骤。科学家以食用稗的成熟胚作为外植体,在

38、基本培养基上研究植物生长调节剂对食用稗愈伤组织诱导的影响。实验结果如下表。请回答相关问题:培养基代号2,4D/mg·L16BA/mg·L1愈伤组织诱导率/L11006541L22006876L33009101L430025448L530055735L630105171注:愈伤组织诱导率(%)产生愈伤组织的外植体数/接种外植体总数×100%(1)从上表可以知道,在基本培养基中添加较高浓度的有利于食用稗胚形成愈伤组织,而添加则不利于食用稗胚愈伤组织的形成。(3)影响愈伤组织成功诱导的因素除植物生长调节剂外,培养的环境条件也是重要的因素。现给你提供200个已经消毒过的食

39、用稗的成熟胚,在上述研究的基础上,探究光照对愈伤组织形成的影响。实验步骤:将200个已经消毒过的食用稗的成熟胚平均分为甲、乙两组,分别接种到培养基上;。预期实验结果和结论:。61、(10苏北四市二模,27,6分)下图为单克隆抗体制备流程示意图。(1)单克隆抗体制备技术的基础是 。(2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基中培养,目的是。在细胞培养过程中,培养液中需要添加无机盐,但要注意无机盐的 ,以保证生命活动的正常进行。 (3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到710个细胞mL,每孔滴入0.1ml细胞稀释液,其目的是 。(4)若用15N标记的氨基酸培养能

40、产生单克隆抗体的细胞,放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是。62(07安徽省六校四月高三联合考试,30)(20分)美国科学家已经在实验室中成功培育出膀胱,并顺利移植到7名患者体内。其培育过程是:从患者的膀胱上取下普通邮票一半大小的活细胞样本,膀胱从外到内是由三层构成,即肌肉、胶原质和膀胱上皮。研究人员将活细胞样本中胶原质剥下,将肌肉细胞和膀胱上皮细胞分别置于不同的培养皿中培养,约一周后将这些细胞放在一些海绵形状的可生物降解的由胶原质制成的“支架”上继续培养,再过7周左右,原先的数万个细胞已经繁殖到15亿个左右,布满“支架”,膀胱上皮在内,肌肉在外。医生将“新膀胱”移植到患者膀胱的上面。这样新

41、器官会继续生长并与老器官“重组”取代老器官中丧失功能的部分。培育过程如下图所示:根据以上资料回答下列问题:(1)a过程属于细胞工程中的,与植物组织培养的培养基相比,其培养基的主要不同点是含有。该过程属于代培养。从患者的膀胱上取下的活细胞样本,在培养之前,需用酶处理,以分散细胞。(2)b过程由数万个细胞繁殖到15亿个细胞是的结果,由这些细胞再形成肌肉和膀胱上皮的过程要经过。(3)新器官与老器官的“重组”是否会导致基因重组?为什么?;。(4)“新膀胱”移植后,是否会引起免疫反应?为什么?。63(11分)现有甲乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们

42、是否有毒性,并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的 身份参与此项研究,完成下列实验报告,并回答有关问题。、实验材料:活的小白鼠胚胎。、药品用具:胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。、实验原理:_, 根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。、实验步骤:(1)制备细胞悬浮液:把活的小白鼠胚胎放入在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织 离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。(2)进行细胞培

43、养:取A、B、C三个洁净的培养瓶,_。向A、B两培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙,并将培养瓶摇匀。C瓶不作处理,作为对照。_。(3)制作临时装片:当细胞繁殖到大约第8代左右时,同时从恒温箱中取出三个培养瓶,用胰蛋白酶液处理, 使培养的细胞从瓶壁上脱落,再加入动物细胞固定液以迅速杀死细胞并固定细胞分裂相。静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的悬浮液。滴在与培养瓶有相同编号的 载玻片的中央,_,35min后,盖上盖玻片,制成临时装片。(4)镜检和统计:把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于_期的细胞,并与 _对比以确认发生上述变异的细胞,同时统计该期变异的细胞占该细胞总数

44、的百分数(Q值)。V、结果与结论:经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3、QB=12.5、QC=0.1,由此可知该实验的结论是_。64.(10全国新课标,40,15分)请回答:(1)植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的,繁殖种苗的速度。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养,最终能够形成完整的植株,说明该叶肉细胞具有该植物的全部。(2)把试管苗转接到新的培养基上时,需要在超净工作台上进行,其原因是避免的污染。(3)微型繁殖过程中,适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗,而与配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长,促使愈伤组织产生和生长,需要使

45、用的生长调节剂是 (脱落酸、2,4-D)。(4)将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后,单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析,随着培养基中蔗糖浓度的增加,光合作用强度的变化趋势是,单株鲜重的变化趋势是。据图判断,培养基中不含蔗糖时,试管苗光合作用产生的有机物的量(能、不能)满足自身最佳生长的需要。(5)据图推测,若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力,应 (降低,增加)培养基中蔗糖浓度,以便提高试管苗的自养能力。65(09山东理综)人参是一种名贵中药材,其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下:人参根切块诱导愈伤组织单细胞或小细胞团悬浮

46、培养细胞培养物收集培养物干粉提取人参皂苷细胞分离请回答:(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基,分装后要进行。接种前,要对人参根进行。(2)用于离体培养的根切块,叫做。培养几天后发现少数培养基被污染,若是有颜色的绒毛状菌落,属于污染;若是有光泽的黏液状菌落,属于污染。(3)用少量 酶处理愈伤组织,获取单细胞或小细胞团,在液体培养基中进行悬浮培养,可有效提高人参皂苷合成量。(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶液,从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用方法,操作时应采用加热。病毒提取RNADNAA基因A基因表达载体受体细胞A蛋白小鼠皮下效应B淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞X抗A蛋白的单克隆抗体66、(09山东

47、理综)人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图:请回答:(1)过程代表的是。(2)过程构建A基因表过载体时,必须使用和两种工具酶。(3)过程采用的实验技术是,获得的X是。对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以疑似患者体内分离病毒,与已知病毒进行比较;或用图中的进行特异性结合检测。67(08海南生物,25,18分)某二倍体植物是杂合体,图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答:花药中未成熟

48、的花粉愈伤组织X丛芽(芽)完整植株(1)图中表示的是该花粉培养过程中的过程,表示的是过程,X代表的是,表示的是过程,表示的是诱导过程。(2)图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条,具体通过那一条途径主要取决于培养基成分中的种类及其浓度配比,最后获得的来源于为成熟花粉的完整植株都称为植株(甲)。未成熟花粉经培养能形成完整植株,说明为成熟花粉具有。(3)对植株进行,才能使其结实产生后代(乙),否则植株甲只有通过的方式才能产生后代(丙)。乙、丙两种植株中,能产生可育花粉的是 植株,该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为种,该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为种。花药培养在育种上的特殊

49、意义是,从而开辟育种新途径。68、(2009海南生物,26,18分)请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题: (1)精细胞经变形后,高尔基体发育形成精子的顶体,顶体内含有的能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。 (2)某动物排卵时,减数第一次分裂尚未完成,此时卵子处于卵母细胞阶段,当该细胞发育至减数第二次分裂期时,才具备受精能力。若在卵黄膜和透明带之间看到两个极体,则表明过程已完成。 (3)动物的早期胚胎移植到同种且与供体相同的动物体内,使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。为了获得更多的早期胚胎,常用激素对供体进行处理,其目的是获得更多的,经人工受精后可得到早期胚胎。用某染料鉴定胚

50、胎细胞是否为活细胞时,发现活胚胎细胞不能被染色,其原因是活细胞膜。(4)若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体,可对发育到桑葚期或囊胚期阶段的早期胚胎进行处理,再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存,应将其置于条件下。69、2010广东深圳3月)牛胚胎移植的基本程序如图,请据图回答:供体母牛同期发情处理受体母牛妊娠检查acb供体公牛配种质量检查、培养分娩(胚胎移植的犊牛) (1)图中a、b、c过程分别是指 、。 (2)供体母牛的主要职能是;受体母牛必须具备。 (3)为了提高牛胚胎的利用率,常采取的方法是;处理的时期是;理由是。 (4)从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞,

51、称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有。 (5)你认为胚胎移植技术在生产实践中的主要意义有哪些?。70(11分)自然界有一种含有叶绿体的原生动物眼虫,这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活。某同学提出问题“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗?”他尝试设计出下列具体的实验方案。请你据所学知识,并结合题给信息完善该实验设计方案,并回答相关问题。植物材料诱导出愈伤组织除去细胞壁,得到原生质体动物胚胎细胞培养电脉冲融合融合的胚胎细胞培养6分裂形成胚胎7将胚胎移植到代孕母体的子宫中8动植物杂交种出生9实验原理:根据绿眼虫的特点,动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。实验步骤设计如下:(1)中所选植物材料的细胞中,必须有的细胞器是。(2)过程所用的酶是。(3)过程除了用电刺激之外,还可以用等做诱导因素。(4)过程动物细胞体外培养需要满足的条件是(至少答出2种)。(5)你认为该动植物杂种细胞应该(有或没有)细胞壁,理由是。71(10南通二模)(8分)下图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所作的一系列研究,请据图分析回答:(1)过程将胚胎干细胞置于射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上,并加入动物血清、抗生素等物质,维持细胞不分化的状态。在此过程中,饲养层提供干细胞增殖所需的_,加入抗生素是为

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