黄酮类化合物FLAVONOIDS

1、第五章第五章 黄酮类化合物黄酮类化合物FLAVONOIDS第一节第一节 概述概述一、基本结构和分类一、基本结构和分类 （一）基本结构（一）基本结构 1952年以前，黄酮类化合物主要是指基本母核年以前，黄酮类化合物主要是指基本母核为为2-苯基色原酮的一系列化合物。苯基色原酮的一系列化合物。 色原酮色原酮 2-苯基色原酮（黄酮）苯基色原酮（黄酮） OO543218765432187654321OO6 现在的黄酮类化合物则泛指两个苯环（现在的黄酮类化合物则泛指两个苯环（A与与B环）环）通过中央三碳链相互连接而成的一类化合物。通过中央三碳链相互连接而成的一类化合物。 C6-C3-C66O5432187

2、654321 黄酮类化合物的苷元的结构类型根黄酮类化合物的苷元的结构类型根据三碳链氧化程度、据三碳链氧化程度、B环（苯基）环（苯基）连接位置（连接位置（2-位或位或3-位）以及三碳位）以及三碳链是否构成环状分为下列类型：链是否构成环状分为下列类型：黄酮类（黄酮类（flavones）OOHOOHOHOHluteolin木犀草素（木犀草素（luteolin），存在于忍冬藤、菊花、浮萍），存在于忍冬藤、菊花、浮萍中，具有抗菌作用。中，具有抗菌作用。 OOHOOHOHOHluteolin黄芩为清热解毒类黄芩为清热解毒类中药，抗菌成分主中药，抗菌成分主要有黄芩苷要有黄芩苷(baicalin)、次黄芩、次

3、黄芩素素(wogonin)等。等。OOOOOHO黄芩素(黄色)OOOHHOHO黄芩酶黄芩苷COOHHOOHOHOOOOHHOO黄酮醇类（黄酮醇类（flavonols） 槲皮素槲皮素(quercetin)具有抗炎、止咳祛痰等作用。槲具有抗炎、止咳祛痰等作用。槲皮素片用于治疗支气管炎。此外还有降低血压、皮素片用于治疗支气管炎。此外还有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉、增加冠脉血流量等作用。脂、扩张冠状动脉、增加冠脉血流量等作用。 芦丁芦丁(rutin)是槲皮素的是槲皮素的O芸香糖苷。用于治疗芸香糖苷。用于治疗毛细管脆弱引

4、起的出血病，并用作高血压的辅助毛细管脆弱引起的出血病，并用作高血压的辅助治疗剂。治疗剂。RUTINOOOHHOOHOHOrutinoseOOOHHOOHOHOHQUERCETIN 豆科植物豆科植物槐米中含槐米中含有芦丁和有芦丁和槲皮素。槲皮素。二氢黄酮类二氢黄酮类(flavanones) OOOHOCH3rutinose O橙皮苷(hesperidin),具有Vp样作用甘草苷(liquiritin),具有溃疡抑制作用OOOglcHO柚皮素（柚皮素（Naringenin）：来源于芸香科植物柚）：来源于芸香科植物柚(Citrus paradisi Macfadyen)的果实；分子式的果实；分子式C

5、15H12O；分子量；分子量 272.25结构式：结构式： 4二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类(flavanonols) 水飞蓟素是二氢黄酮醇与苯丙素衍生物缩合成的黄酮水飞蓟素是二氢黄酮醇与苯丙素衍生物缩合成的黄酮木脂素类成分。具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝木脂素类成分。具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝炎及肝硬化，代谢中毒性肝损伤。炎及肝硬化，代谢中毒性肝损伤。 OOHOOHOHOOCH2OHOHOCH3水飞蓟素(SILYBIN)5查尔酮类（查尔酮类（chalcones） 查尔酮为苯甲醛缩苯乙酮类化合物，其邻羟查尔酮为苯甲醛缩苯乙酮类化合物，其邻羟基衍生物可视为二氢黄酮的异构体，二者可基衍生物可视为

6、二氢黄酮的异构体，二者可相互转化。相互转化。查耳酮654321654321O 二氢黄酮的吡酮环芳香性低，在碱的作二氢黄酮的吡酮环芳香性低，在碱的作用下易开环生成用下易开环生成6-羟基查耳酮，由无色羟基查耳酮，由无色转为深黄色，后者经酸化又能转化为原转为深黄色，后者经酸化又能转化为原来的二氢黄酮。来的二氢黄酮。OHHOOOHO邻羟基查耳酮二氢黄酮 红花所含的色素红花苷是第一个发现的查耳酮类植红花所含的色素红花苷是第一个发现的查耳酮类植物成分。物成分。 红花在开花初期，花冠呈淡黄色；开花中期，花冠红花在开花初期，花冠呈淡黄色；开花中期，花冠呈深黄色；开花后期或采收干燥过程中由于酶的作呈深黄色；开花

7、后期或采收干燥过程中由于酶的作用，氧化成红色。用，氧化成红色。SO2氧化酶异构化醌式红花苷(红色)红花苷(carthamone)(黄色)新红花苷(neo-carthamin)(无色)OHOOOOglcOHOHOHOHOOglcOHOOHOHOOglcOH菊科植物菊科植物红花。红花。6异黄酮类异黄酮类 (isoflavones) 取代基7,4-二OH4-OH, 7-glc7,4-二OH,8-C-glc化合物名称大豆素大豆苷葛根素OOHOOH主要存在于豆科、鸢尾科等植物中。主要存在于豆科、鸢尾科等植物中。如葛根主要含有下列几种异黄酮类成分。如葛根主要含有下列几种异黄酮类成分。葛根总黄酮具有扩冠、增

8、加冠脉流量及降低心肌耗氧葛根总黄酮具有扩冠、增加冠脉流量及降低心肌耗氧量等作用。大豆素具有类似罂粟碱的解痉作用。量等作用。大豆素具有类似罂粟碱的解痉作用。大豆苷、葛根素及大豆素均能缓解高血压患者的头痛大豆苷、葛根素及大豆素均能缓解高血压患者的头痛等症状。等症状。 豆科植物豆科植物葛。葛。7二氢异黄酮类二氢异黄酮类紫檀素OOOOCH3O8双黄酮类双黄酮类 由二分子黄酮衍生物聚合生成的二聚物，多由二分子黄酮衍生物聚合生成的二聚物，多分布于裸子植物中。银杏中含有多种双黄酮，分布于裸子植物中。银杏中含有多种双黄酮，如银杏素。如银杏素。 GINKGETINOOOHCH3OOCH3OHHOOHOO9花色苷

9、类花色苷类(anthocyanidins) 是使花、叶、果、茎等呈现蓝、紫、红等颜是使花、叶、果、茎等呈现蓝、紫、红等颜色的色素。以苷的形式存在于细胞液中，经色的色素。以苷的形式存在于细胞液中，经水解可生成苷元水解可生成苷元花色素及糖。花色素及糖。矢车菊苷元(兰色)花青素母核OHOOHOHOHO10黄烷黄烷-3-醇醇(flavan-3-ols)及黄烷及黄烷-3，4-二醇二醇(flavan-3,4-diols)类类(+)儿茶素(-)表儿茶素OHOOHOHHOHHOHHOHOOHOHOHOHH11苯骈色酮苯骈色酮 (xanthanes) 87654321异芒果素(isomengiferin)OOH

10、OHOOHOHglc石韦中的异芒果素具有止咳祛痰的功效。石韦中的异芒果素具有止咳祛痰的功效。 水龙骨科植水龙骨科植物石韦。物石韦。12橙酮类化合物橙酮类化合物OCHHOOHOHO硫磺菊素硫磺菊素(sulphuretin)糖糖醋酸-丙二酸途径莽草酸途径RCH2COCoACoAOOCOHx 3OHOOH查耳酮OOOHOO二、黄酮类化合物的生物合成途径二、黄酮类化合物的生物合成途径三、黄酮类化合物的生物活性三、黄酮类化合物的生物活性 1. 对心血管系统的作用对心血管系统的作用 Vp样作用：芦丁、橙皮苷等有样作用：芦丁、橙皮苷等有Vp样作用，样作用，能降低血管脆性及异常通透性，可用作防治能降低血管脆性

11、及异常通透性，可用作防治高血压及动脉硬化的辅助治疗剂。高血压及动脉硬化的辅助治疗剂。 扩冠作用：芦丁、槲皮素、葛根素、人工合扩冠作用：芦丁、槲皮素、葛根素、人工合成的力可定。成的力可定。 降血脂及胆固醇：木樨草素降血脂及胆固醇：木樨草素 芦丁片芦丁片 芦丁是从中国所独有的国槐的花蕾中提取的植物药，芦丁是从中国所独有的国槐的花蕾中提取的植物药，也称维生素也称维生素P，具有降低毛细血管的异常通透性和脆，具有降低毛细血管的异常通透性和脆性的作用，是心脑血管保护药，国内用于心脑血管药性的作用，是心脑血管保护药，国内用于心脑血管药品制剂的主要成分，国外还大量用于食品添加剂和化品制剂的主要成分，国外还大量

12、用于食品添加剂和化妆品。妆品。 鉴别：鉴别： (1)取本品的细粉少许，加氢氧化钠试液取本品的细粉少许，加氢氧化钠试液5mL，溶液显，溶液显橘黄色。橘黄色。(2)取本品的细粉少许，加乙醇取本品的细粉少许，加乙醇15mL，微热使芦丁溶，微热使芦丁溶解，溶液分成二份：一份中加盐酸解，溶液分成二份：一份中加盐酸1mL与金属镁或金与金属镁或金属锌数小粒，渐显红色；另一份中加三氯化铁试液属锌数小粒，渐显红色；另一份中加三氯化铁试液1滴，显棕绿色。滴，显棕绿色。 2. 抗肝脏毒作用抗肝脏毒作用 从水飞蓟种子中得到的水飞蓟素具有保从水飞蓟种子中得到的水飞蓟素具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝炎、肝硬肝作用，用于

13、治疗急、慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤。化及多种中毒性肝损伤。 （+）-儿茶素儿茶素(catergen)也可抗肝脏毒作也可抗肝脏毒作用，治疗脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化用，治疗脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化碳等引起的中毒性肝损伤。碳等引起的中毒性肝损伤。水水飞飞蓟蓟水飞蓟片水飞蓟片 本品为菊科植物水飞蓟（紫花）本品为菊科植物水飞蓟（紫花）Silybum marianum (L) Gacntm的果实，经提取精的果实，经提取精制所得的淡黄色粉末，或结晶性粉末。制所得的淡黄色粉末，或结晶性粉末。无味、无臭、易溶于丙酮、模酸乙酯、无味、无臭、易溶于丙酮、模酸乙酯、乙醇及由醇、难溶于氯仿，不溶于水，乙醇及

14、由醇、难溶于氯仿，不溶于水，主要化学成份为水飞蓟宾（主要化学成份为水飞蓟宾（Silybin) C25H22O10及其异物等黄酮类物质。及其异物等黄酮类物质。功能与主治：本品具有保肝及降血脂作功能与主治：本品具有保肝及降血脂作用，用于治疗慢性肝炎，早期肝硬变、用，用于治疗慢性肝炎，早期肝硬变、代谢中毒性肝损伤及高血脂症。代谢中毒性肝损伤及高血脂症。 3. 抗炎抗炎 芦丁及其衍生物羟乙基芦丁、二氢槲皮素等具芦丁及其衍生物羟乙基芦丁、二氢槲皮素等具 抗炎作用。抗炎作用。 4. 抗菌及抗病毒作用抗菌及抗病毒作用 如木樨草素、黄芩苷、黄芩素如木樨草素、黄芩苷、黄芩素 5. 解痉作用解痉作用 异甘草素、大

15、豆素：解除平滑肌痉挛；异甘草素、大豆素：解除平滑肌痉挛； 大豆苷、葛根素及葛根总黄酮可缓解高血压患者大豆苷、葛根素及葛根总黄酮可缓解高血压患者的头痛等症状；的头痛等症状； 杜鹃素、川陈皮素、槲皮素、山奈酚、芫花素、杜鹃素、川陈皮素、槲皮素、山奈酚、芫花素、羟基芫花素：止咳祛痰。羟基芫花素：止咳祛痰。 6. 雌性激素样作用雌性激素样作用 大豆素大豆素(daidzein)等异黄酮具有雌性激素等异黄酮具有雌性激素样作用，可能与它们与己烯雌酚结构类似。样作用，可能与它们与己烯雌酚结构类似。己烯雌酚HOOH大豆素(dadzein)OOHOOH7. 清除人体自由基作用清除人体自由基作用 黄酮类化合物多具有

16、酚羟基，易氧化黄酮类化合物多具有酚羟基，易氧化成醌类而提供氢离子，故有显著的抗氧成醌类而提供氢离子，故有显著的抗氧特点。特点。 另外还有降血脂、血糖，抗动脉粥样另外还有降血脂、血糖，抗动脉粥样硬化及抗癌抗突变等作用。硬化及抗癌抗突变等作用。8.抗肿瘤作用抗肿瘤作用 抗癌新药抗癌新药Flavopiridol的发现与研制的发现与研制 Flavopiridol是一种源于植物（是一种源于植物（CDYSOXYLUM BINECTARIFERUM）的黄酮类化合物。目前正被）的黄酮类化合物。目前正被用于十几项一期和二期的癌症临床试验。最近，不用于十几项一期和二期的癌症临床试验。最近，不同的研究者证实其对艾滋

17、病也有异于其他药物的疗同的研究者证实其对艾滋病也有异于其他药物的疗效。它的早期发现得益于工业界对自然产物的研究效。它的早期发现得益于工业界对自然产物的研究兴趣。在从树皮中提取出纯化合物后，前兴趣。在从树皮中提取出纯化合物后，前HOECHST公司又进行了结构与人工合成的研究。公司又进行了结构与人工合成的研究。由此建立了一系列同型物，包括由此建立了一系列同型物，包括Flavopiridol的专利。的专利。 在在NIH大规模抗癌物筛选中，大规模抗癌物筛选中，Flavopiridol脱颖而出，成为一种新的低毒性的研究药脱颖而出，成为一种新的低毒性的研究药物。它的治癌机理被认为是作用于激酶，物。它的治癌

18、机理被认为是作用于激酶，从而阻断细胞循环。这一解释间接地为从而阻断细胞循环。这一解释间接地为CDK2-Flavopiridol的复合晶体结构所证实。的复合晶体结构所证实。跨学科外向的合作以及现代技术的应用是跨学科外向的合作以及现代技术的应用是加速加速Flavopiridol和其他后续药物的研究与和其他后续药物的研究与开发所不可缺少的。开发所不可缺少的。第二节第二节黄酮类化合物的理化性质及颜色反应黄酮类化合物的理化性质及颜色反应 一、性状一、性状 1. 多为结晶性固体，少为（如黄酮苷类）多为结晶性固体，少为（如黄酮苷类）无定形粉末。无定形粉末。 2. 旋光性：游离苷元中，除二氢黄酮、二旋光性：游

19、离苷元中，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷、黄烷醇及双黄酮有旋光外，氢黄酮醇、黄烷、黄烷醇及双黄酮有旋光外，其余无旋光性。其余无旋光性。 苷类由于结构中引入糖的分子，均有旋苷类由于结构中引入糖的分子，均有旋光性，且多为左旋。光性，且多为左旋。 3. 颜色：与颜色：与分子中是否存在交叉共轭体分子中是否存在交叉共轭体系系助色团的数目及助色团的数目及取代基的位置有关。取代基的位置有关。 色原酮部分原本无色，但在色原酮部分原本无色，但在2位引入苯环位引入苯环后，即形成交叉共轭体系，且通过电子的后，即形成交叉共轭体系，且通过电子的转移，重排，使共轭链延长，而表现出颜转移，重排，使共轭链延长，而表现出颜色。色

20、。OOOOOO黄酮、黄酮醇及苷类黄酮、黄酮醇及苷类 灰黄灰黄-黄色黄色查耳酮查耳酮 黄黄-橙黄色橙黄色二氢黄酮、二氢黄酮醇二氢黄酮、二氢黄酮醇 无色无色异黄酮异黄酮 微黄色微黄色 其中，黄酮、黄酮醇及苷类、查耳酮等因分其中，黄酮、黄酮醇及苷类、查耳酮等因分子中存在交叉共轭体系，在子中存在交叉共轭体系，在7,4位引入位引入-OH, OCH3等供电子基团则促进电子移位、重排，使等供电子基团则促进电子移位、重排，使化合物颜色加深。化合物颜色加深。 花色苷及其苷元的颜色随花色苷及其苷元的颜色随pH的不同而改变：的不同而改变：呈现红（呈现红（pH8.5） 二、溶解度二、溶解度 1. 游离苷元难溶或不溶于

21、水，易溶于游离苷元难溶或不溶于水，易溶于MeOH, EtOH, EtOAc, Et2O 黄酮、黄酮醇及查耳酮是平面型分子，分黄酮、黄酮醇及查耳酮是平面型分子，分子堆砌紧密，分子间引力较大，更难溶于子堆砌紧密，分子间引力较大，更难溶于水。水。 二氢黄酮、二氢黄酮醇是非平面型分子，二氢黄酮、二氢黄酮醇是非平面型分子，分子排列不紧密，分子间引力降低，对水分子排列不紧密，分子间引力降低，对水的溶解度较大。的溶解度较大。 花色苷元（花青素）类虽系平面型分子，花色苷元（花青素）类虽系平面型分子，但因以离子形式存在，具有盐的通性，故但因以离子形式存在，具有盐的通性，故亲水性较强，水溶度较大。亲水性较强，水溶

22、度较大。花青素二氢黄酮X -或OH -OORHOH 黄酮苷元引入羟基越多，水溶性越强，黄酮苷元引入羟基越多，水溶性越强，羟基甲基化后，则增加在有机溶剂中羟基甲基化后，则增加在有机溶剂中的溶解度。的溶解度。 如一般黄酮类化合物不溶于石油醚中，如一般黄酮类化合物不溶于石油醚中，可与脂溶性杂质分开，但川陈皮素可与脂溶性杂质分开，但川陈皮素（5,6,7,8,3,4-六甲氧基黄酮）却可溶六甲氧基黄酮）却可溶于石油醚。于石油醚。 2. 黄酮类化合物的羟基苷化后，水溶黄酮类化合物的羟基苷化后，水溶性相应增大，而在有机溶剂中的溶性相应增大，而在有机溶剂中的溶解度相应减小。解度相应减小。 黄酮苷一般易溶于黄酮苷

23、一般易溶于H2O, MeOH, EtOH等，难溶或不溶于苯，氯仿等。等，难溶或不溶于苯，氯仿等。三、酸碱性三、酸碱性 1. 酸性酸性 黄酮类化合物多具有酚羟基而呈酸性，可黄酮类化合物多具有酚羟基而呈酸性，可 溶于碱性水液，吡啶，甲酰胺及二甲基甲溶于碱性水液，吡啶，甲酰胺及二甲基甲酰胺。酰胺。 酸性强弱顺序：酸性强弱顺序：7, 4-二羟基二羟基 7, 或或4羟基羟基 一般酚羟基一般酚羟基5-羟基羟基 此性质可用于提取、分离及鉴定工作。此性质可用于提取、分离及鉴定工作。 2. 碱性碱性 -吡喃酮上的吡喃酮上的1-位氧原子上有未共用电子对，表位氧原子上有未共用电子对，表性微弱的碱性，可与强无机酸如浓

24、硫酸，盐酸生性微弱的碱性，可与强无机酸如浓硫酸，盐酸生成成yang盐，但极不稳定，加水即可分解。盐，但极不稳定，加水即可分解。 黄酮类化合物溶于浓硫酸中生成的黄酮类化合物溶于浓硫酸中生成的yang盐常表性盐常表性特殊的颜色，可用于鉴别。特殊的颜色，可用于鉴别。H2OHClClOOHOO四、显色反应四、显色反应(一一)还原反应还原反应 1. 盐酸盐酸-镁粉（盐酸镁粉（盐酸-锌粉）锌粉）反应反应 黄酮、黄酮醇及二氢黄酮、二氢黄酮醇类在盐酸黄酮、黄酮醇及二氢黄酮、二氢黄酮醇类在盐酸-镁粉作用下，易被氢化还原，迅速生成红镁粉作用下，易被氢化还原，迅速生成红-紫红紫红（个别有绿（个别有绿-兰色）。兰色）

25、。 将样品溶于甲醇或乙醇，加少量镁粉振摇，滴加将样品溶于甲醇或乙醇，加少量镁粉振摇，滴加几滴浓盐酸，几滴浓盐酸，1-2分钟内（必要时微热）即可出现分钟内（必要时微热）即可出现颜色。多显橙红颜色。多显橙红-紫红色，少数兰紫红色，少数兰-紫色，紫色，B环有环有-OH或或OCH3取代时，颜色随之加深，查耳酮、橙取代时，颜色随之加深，查耳酮、橙酮、儿茶素类则不反应。酮、儿茶素类则不反应。 花色素及部分查耳酮、橙酮等在浓盐酸酸性条件花色素及部分查耳酮、橙酮等在浓盐酸酸性条件下也会发生色变，故须先做一对照。下也会发生色变，故须先做一对照。 1. 四氢硼钠反应四氢硼钠反应 与二氢黄酮类化合物产生红与二氢黄酮

26、类化合物产生红-紫色。紫色。 取样品取样品10mg溶于甲醇，加溶于甲醇，加NaBH4 10mg，再滴加再滴加1%浓盐酸或浓硫酸，呈红浓盐酸或浓硫酸，呈红-紫色。紫色。（二）金属盐类试剂的络合反应（二）金属盐类试剂的络合反应 黄酮类化合物分子结构中多有黄酮类化合物分子结构中多有3-OH, 4=O; 5-OH, 4=O; 邻二酚羟基，常可与铝盐、铅邻二酚羟基，常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐等试剂生成有色络合物。盐、锆盐、镁盐等试剂生成有色络合物。1. 铝盐铝盐 1%AlCl3或或Al(NO3)3： 生成络合物为黄色生成络合物为黄色( max=415nm)，并有，并有荧光。荧光。2. 铅盐铅盐 1%P

27、bAc2或碱式醋酸铅水液。生成黄或碱式醋酸铅水液。生成黄-红色沉淀。红色沉淀。 醋酸铅可沉淀具有邻二酚羟基或兼有醋酸铅可沉淀具有邻二酚羟基或兼有3-OH, 4=O或或5-OH, 4=O者。者。 碱式醋酸铅可沉淀具有一般酚类化合物。碱式醋酸铅可沉淀具有一般酚类化合物。 3. 锆盐锆盐: 2%氯氧化锆甲醇液氯氧化锆甲醇液观察颜色2%枸橼酸甲醇液黄色1ml2% ZrOCl210ml甲醇溶样品0.5-1mg黄色不褪黄色褪去2%枸橼酸黄色锆络合物 锆盐3-OH, 4=O5-OH, 4=O 4. 镁盐镁盐 醋酸镁甲醇液作显色剂，可在纸上进行。醋酸镁甲醇液作显色剂，可在纸上进行。 二氢黄酮（醇）类显天蓝色荧

28、光，若具有二氢黄酮（醇）类显天蓝色荧光，若具有C5-OH，色泽更明显。色泽更明显。 而黄酮、黄酮醇及异黄酮类则显黄而黄酮、黄酮醇及异黄酮类则显黄-橙黄橙黄-褐色。褐色。 5. 氯化锶氯化锶(SrCl2) 使具有邻二酚羟基的黄酮显绿使具有邻二酚羟基的黄酮显绿-棕色棕色-黑色沉淀。黑色沉淀。 6. 氯化铁氯化铁(FeCl3) 检查酚羟基。检查酚羟基。 多数黄酮类化合物具有酚羟基，可产多数黄酮类化合物具有酚羟基，可产生正反应，生成绿、蓝、黑、紫等颜生正反应，生成绿、蓝、黑、紫等颜色。色。（三）硼酸显色反应（三）硼酸显色反应 条件：条件：1 具有下列结构（具有下列结构（5-羟基黄酮，羟基黄酮，2-羟基

29、查耳酮）羟基查耳酮） 2 有无机酸或有机酸存在有无机酸或有机酸存在在草酸存在下，显黄色并带绿色荧光。在草酸存在下，显黄色并带绿色荧光。在枸橼酸丙酮存在条件下，只显黄色而无荧光。在枸橼酸丙酮存在条件下，只显黄色而无荧光。 CCCOOH（四）碱性试剂显色反应（四）碱性试剂显色反应 日光及紫外光下，通过纸斑反应，观察样日光及紫外光下，通过纸斑反应，观察样品用碱性试剂处理后的色变情况。品用碱性试剂处理后的色变情况。 1. 二氢黄酮类易在碱液中开环，转变成相二氢黄酮类易在碱液中开环，转变成相应异构体应异构体查耳酮类化合物，显橙查耳酮类化合物，显橙-红色。红色。HOHOHOOO 2. 黄酮醇类在碱液中先呈

30、黄色，通入空黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色，据此可与黄酮类区别。气后变为棕色，据此可与黄酮类区别。 3. 黄酮类化合物当分子中有邻二酚羟基黄酮类化合物当分子中有邻二酚羟基取代或取代或3,4-二羟基取代时，在碱液中不二羟基取代时，在碱液中不安定，很快氧化，由黄色安定，很快氧化，由黄色深红色深红色绿绿棕色沉淀。棕色沉淀。(五五)与五氯化锑的反应与五氯化锑的反应 查耳酮的无水查耳酮的无水(!)CCl4溶液与五氯化锑作溶液与五氯化锑作用生成红或紫红沉淀用生成红或紫红沉淀,黄酮、黄酮醇、二黄酮、黄酮醇、二氢黄酮类显黄氢黄酮类显黄-橙黄色。橙黄色。 方法：方法：样品样品5-10mg溶于溶于5

31、ml无水无水CCl4中，中，加加1ml 2%的五氯化锑的的五氯化锑的CCl4溶液。溶液。 反应必须无水，否则生成沉淀不稳定。反应必须无水，否则生成沉淀不稳定。（六）（六）Gibbs反应反应 检查检查5-OH对位未被取代的黄酮。对位未被取代的黄酮。 将样品溶于吡啶中，加入将样品溶于吡啶中，加入Gibbs试剂显蓝试剂显蓝或蓝绿色。或蓝绿色。Gibbs试剂试剂: 甲液：甲液：0.5%2,6-二氯苯醌二氯苯醌-4氯亚胺的乙醇氯亚胺的乙醇溶液。溶液。 乙液：硼酸乙液：硼酸-氯化钾氯化钾-氢氧化钾缓冲液氢氧化钾缓冲液(pH9.4)第三节第三节黄酮类化合物的提取分离黄酮类化合物的提取分离 一、提取一、提取

32、黄酮类化合物在花、液、果等组织中，多以黄酮类化合物在花、液、果等组织中，多以苷的形式存在；苷的形式存在； 在木部坚硬组织中，多以游离苷元形式存在；在木部坚硬组织中，多以游离苷元形式存在； 根据化合物极性不同，溶解性不同，采用不根据化合物极性不同，溶解性不同，采用不同溶剂提取。同溶剂提取。1. 苷元苷元 多用多用CHCl3、Et2O、EtOAc等极性较小溶等极性较小溶剂提取；剂提取； 对于多对于多OCH3化的成分，用苯、石油醚提化的成分，用苯、石油醚提取；取； 对于极性大的成分，如查耳酮、橙酮、双对于极性大的成分，如查耳酮、橙酮、双黄酮、羟基黄酮等，用黄酮、羟基黄酮等，用EtOAc、EtOH、M

33、e2CO、MeOH;H2O(1;1)等溶剂提取。等溶剂提取。 2. 苷类苷类 水或热水提取，（多糖苷在热水水或热水提取，（多糖苷在热水 中溶解度较大，在冷水中溶解度较中溶解度较大，在冷水中溶解度较小）；小）； 也可用也可用EtOH、MeOH、EtOAc提取。提取。 3. 含羟基的苷或苷元，可用碱水提取。含羟基的苷或苷元，可用碱水提取。 4. 提取花青素类可加入少量酸，但一般提取花青素类可加入少量酸，但一般黄酮类化合物则应避免。黄酮类化合物则应避免。二、粗提物的精制处理二、粗提物的精制处理 1溶剂萃取法去杂溶剂萃取法去杂 石油醚：除去叶绿素、胡罗卜素等脂溶性色素石油醚：除去叶绿素、胡罗卜素等脂溶

34、性色素 水溶醇沉：除去蛋白质、多糖、大分子水溶性水溶醇沉：除去蛋白质、多糖、大分子水溶性物质物质 逆流分配：水逆流分配：水-乙酸乙酯，正丁醇乙酸乙酯，正丁醇-石油醚石油醚 在萃取除杂的同时，可使不同极性或极性相差在萃取除杂的同时，可使不同极性或极性相差较大者分离，如极性不同的苷和苷元，极性苷较大者分离，如极性不同的苷和苷元，极性苷元和非极性苷元。元和非极性苷元。2碱水提酸沉淀法碱水提酸沉淀法 适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提取。取。 注意事项：注意事项： 酸碱度不宜过大酸碱度不宜过大 邻二酚羟基的保护：碱性条件下，邻二酚羟邻二酚羟基的保护：碱性条

35、件下，邻二酚羟基易被氧化，加硼砂保护基易被氧化，加硼砂保护 石灰乳的加入可除去果胶、粘液等水溶性酸石灰乳的加入可除去果胶、粘液等水溶性酸性杂质性杂质3炭粉吸附法炭粉吸附法 适用于苷类的精制工作。适用于苷类的精制工作。 植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，过滤得吸附苷的活性炭粉末。过滤得吸附苷的活性炭粉末。 依次用沸甲醇、沸水、依次用沸甲醇、沸水、7%酚酚/水、水、15%酚酚/醇洗脱，分步收集、检查、合并。醇洗脱，分步收集、检查、合并。 大部分苷类可用大部分苷类可用7%酚酚/水洗下，经减压水洗下，经减压浓缩至小体积，乙醚除酚，余下水层经浓缩至小体积，乙醚除酚，

36、余下水层经减压浓缩得较纯黄酮苷。减压浓缩得较纯黄酮苷。4离子交换法离子交换法 用阳离子交换树脂从水提液中吸附黄酮用阳离子交换树脂从水提液中吸附黄酮类化合物，与不被吸附的杂质分离，再类化合物，与不被吸附的杂质分离，再用甲醇将黄酮类化合物洗脱。用甲醇将黄酮类化合物洗脱。 RSO3-H+ ArOH（黄酮）（黄酮） 无法交换，无法交换，故实际上树脂仅起到吸附作用。故实际上树脂仅起到吸附作用。三、分离三、分离 1. 极性大小不同，利用吸附或分配原理极性大小不同，利用吸附或分配原理进行分离进行分离 常用吸附剂有聚酰胺、硅胶、纤维素粉。常用吸附剂有聚酰胺、硅胶、纤维素粉。 ）聚酰胺层析：主要有聚己内酰胺型）

37、聚酰胺层析：主要有聚己内酰胺型(Perlon)、六次甲基二胺已二酸盐、六次甲基二胺已二酸盐(Nylon)型、聚乙烯吡咯烷酮型、聚乙烯吡咯烷酮(Polyclar)型三种。型三种。 其原理是酰胺羰基与黄酮酚羟基形成氢其原理是酰胺羰基与黄酮酚羟基形成氢键缔合而吸附，吸附能力与酚羟基多少、键缔合而吸附，吸附能力与酚羟基多少、位置及氢键缔合力大小有关。位置及氢键缔合力大小有关。 各种溶剂在聚酰胺柱上洗脱能力由弱至各种溶剂在聚酰胺柱上洗脱能力由弱至强依次为：强依次为： 水，甲醇，丙酮，氢氧化钠水溶液，甲水，甲醇，丙酮，氢氧化钠水溶液，甲酰胺，二甲基甲酰胺，脲素水溶液。酰胺，二甲基甲酰胺，脲素水溶液。黄酮类

38、化合物从聚酰胺柱洗脱时有下列规律：黄酮类化合物从聚酰胺柱洗脱时有下列规律：苷元相同，洗脱先后顺序一般为：苷元相同，洗脱先后顺序一般为： 三糖苷三糖苷 双糖苷双糖苷 单糖苷单糖苷 苷元苷元母核上增加羟基，洗脱速度相应减慢母核上增加羟基，洗脱速度相应减慢 羟基位置的影响：具有邻位羟基黄酮羟基位置的影响：具有邻位羟基黄酮 具有对具有对位（或间位）羟基黄酮位（或间位）羟基黄酮不同类型的黄酮类化合物，先后流出顺序一般不同类型的黄酮类化合物，先后流出顺序一般是：是： 异黄酮异黄酮 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 黄酮黄酮 黄酮醇黄酮醇分子中芳香核、共轭双键多者吸附力强，故查分子中芳香核、共轭双键多者吸附力强，故查耳

39、酮往往较相应的二氢黄酮难于洗脱。耳酮往往较相应的二氢黄酮难于洗脱。）硅胶层析）硅胶层析 对酚羟基多的黄酮类，如多羟基黄酮及对酚羟基多的黄酮类，如多羟基黄酮及 其苷类，硅胶减活性使用其苷类，硅胶减活性使用对酚羟基少的黄酮类，如甲基化、乙酰对酚羟基少的黄酮类，如甲基化、乙酰化黄酮及二氢黄酮、异黄酮，则无须减化黄酮及二氢黄酮、异黄酮，则无须减活性。活性。2. 利用分子大小不同，用葡聚糖凝利用分子大小不同，用葡聚糖凝 胶分子筛分离胶分子筛分离 主要用两种型号的凝胶主要用两种型号的凝胶 Sephadex-G型和型和Sephadex-LH20型型 分离游离黄酮主要是吸附作用，极性小分离游离黄酮主要是吸附作

40、用，极性小大洗脱。大洗脱。 分离黄酮苷类，主要是分子筛作用，分子大分离黄酮苷类，主要是分子筛作用，分子大小小洗脱。洗脱。 总的洗脱顺序：糖多的苷总的洗脱顺序：糖多的苷糖少的苷糖少的苷游离苷元游离苷元（极性小（极性小大）大） 常用洗脱剂：常用洗脱剂：碱性水溶液，含盐水溶液碱性水溶液，含盐水溶液 醇及含水醇醇及含水醇 含水丙酮，甲醇氯仿含水丙酮，甲醇氯仿 利用酸性强弱，采用利用酸性强弱，采用pH梯度萃取法梯度萃取法 混 合 物 溶 于 有 机 溶 剂 ， 依 次 用 混 合 物 溶 于 有 机 溶 剂 ， 依 次 用 NaHCO3、Na2CO3、0.2%NaOH、4%NaOH萃取，相应的黄酮类化合

41、物洗萃取，相应的黄酮类化合物洗脱顺序：脱顺序：7,4二羟基二羟基7或或4羟基羟基一一般酚羟基般酚羟基羟基黄酮羟基黄酮根据分子中某些特定官能团进行分离根据分子中某些特定官能团进行分离 醋酸铅沉淀法醋酸铅沉淀法 硼酸络合法：根据具有邻二酚羟基的黄硼酸络合法：根据具有邻二酚羟基的黄酮与硼酸络合，生成物易溶于水的性质酮与硼酸络合，生成物易溶于水的性质与其它类型黄酮分离。与其它类型黄酮分离。 通常在不与水混溶的有机溶剂如乙醚中，通常在不与水混溶的有机溶剂如乙醚中，用硼酸液萃取，水相即为邻二酚羟基类用硼酸液萃取，水相即为邻二酚羟基类黄酮。黄酮。举例：从芹菜举例：从芹菜Apium graveolens L.

42、种种子中分离子中分离graveobiodide A及及BR=芹菜糖II（无邻二酚羟基）I（具有邻二酚羟基）OOROOHOCH3OHOOROOHOHOH浅黄色蔟状结晶(graveobioside A)(I)乙醇重结晶黄色结晶浓缩至小体积，冰箱放置沉淀(PbS)滤液浅黄色针晶(graveobioside B) (II)乙醇重结晶黄色结晶溶于少量乙醇中，放置晶块同铅盐(A)法进行复分解黄色铅盐沉淀(B)加入碱式醋酸铅的热水溶液至沉淀完全，过滤悬浮乙醇中，通H2S，过滤滤液棕色沉淀(A)溶于热水中，煮沸，逐滴加入中性醋酸铅的热水溶液，直至不再析出沉淀为止，乘热过滤醚不溶物减压浓缩后，用醚处理杂质提取液

43、乙醇提取脱脂药料石油醚浸泡脱脂原料（种子）第四节第四节黄酮类化合物的检识与结构测定黄酮类化合物的检识与结构测定目前主要采用的方法有：目前主要采用的方法有：与标准品或与文献对照与标准品或与文献对照PPC或或TLC得到得到的的Rf或或hRf值（值（Rf 100）分析对比样品在甲醇溶液中及加入酸、分析对比样品在甲醇溶液中及加入酸、碱或金属盐类试剂后得到的碱或金属盐类试剂后得到的UV光谱光谱1H-NMR 13C-NMR MS一、层析在黄酮类鉴定中的作用一、层析在黄酮类鉴定中的作用1. 纸层析纸层析(PPC) 苷类成分可采用双向展开，第一相展开采苷类成分可采用双向展开，第一相展开采用醇性溶剂，如用醇性溶

44、剂，如BAW系统（正丁醇：系统（正丁醇： 醋醋酸：水酸：水4：1：5上层）；第二相展开用水性上层）；第二相展开用水性溶剂，如氯仿：醋酸：水（溶剂，如氯仿：醋酸：水（3：6：1） 苷元则多采用醇性溶剂。苷元则多采用醇性溶剂。 花色苷及其苷元，可用含盐酸或醋酸的溶花色苷及其苷元，可用含盐酸或醋酸的溶剂。剂。2. 薄层层析薄层层析(TLC) ）硅胶薄层）硅胶薄层 用于弱极性黄酮较好。用于弱极性黄酮较好。 常用甲苯：甲酸甲酯：甲酸（常用甲苯：甲酸甲酯：甲酸（5：4：1）；苯：）；苯：甲醇（甲醇（95：5）或苯：甲醇：冰醋酸（）或苯：甲醇：冰醋酸（35：5：5）等。等。 ）聚酰胺层析）聚酰胺层析 适用范

45、围广，可分离含游离酚羟基或其苷类。适用范围广，可分离含游离酚羟基或其苷类。 常用展开系统：乙醇：水（常用展开系统：乙醇：水（3：2）；丙酮：水）；丙酮：水（1：1）等。）等。 显 色 剂 ： 紫 外 光 ；显 色 剂 ： 紫 外 光 ； 2 % 三 氯 化 铝 甲 醇 液 ；三 氯 化 铝 甲 醇 液 ； 1%FeCl3 / 1%K3Fe(CN)6(1:1)混合液。混合液。二、紫外光谱在黄酮类鉴定中的应用二、紫外光谱在黄酮类鉴定中的应用 可用于确定黄酮母核类型及确定某些位置是否含可用于确定黄酮母核类型及确定某些位置是否含有羟基。有羟基。 一般程序：一般程序： 测定样品在甲醇中的测定样品在甲醇中

46、的UV谱以了解母核类型；谱以了解母核类型； 在甲醇溶液中分别加入各种诊断试剂后测在甲醇溶液中分别加入各种诊断试剂后测UV谱谱和可见光谱以了解和可见光谱以了解3,5,7,3,4有无羟基及邻二酚羟有无羟基及邻二酚羟基；基； 苷类可水解后（或先甲基化再水解），再用上苷类可水解后（或先甲基化再水解），再用上法测苷元的法测苷元的UV谱以了解糖的连接位置。谱以了解糖的连接位置。（一）黄酮类化合物在甲醇溶液中的紫外光谱（一）黄酮类化合物在甲醇溶液中的紫外光谱 多数黄酮类化合物由两个主要吸收带组成：多数黄酮类化合物由两个主要吸收带组成： 带带I在在300-400nm区间，由区间，由B环桂皮酰系统的环桂皮酰系统

47、的电子跃迁所引起；电子跃迁所引起；OOOO带带II在在240-285nm区间，由区间，由A环苯甲酰系统环苯甲酰系统的电子跃迁所引起。的电子跃迁所引起。OOOO带带 I I ( 2 4 0 -285nm)（苯甲（苯甲酰系统）酰系统）带带I(300-400nm)桂皮酰系统桂皮酰系统类类 型型说说 明明250-285304-350黄酮类黄酮类-OH越多，越多，带带I带带II越红越红移移B环环3,4有有-OH基，带基，带II为 双 峰 （ 主为 双 峰 （ 主峰伴肩峰）峰伴肩峰）328-357黄酮醇类黄酮醇类(3-OR)352-385黄酮醇类黄酮醇类(3-OH)245-270270-295300-40

48、0异黄酮类异黄酮类二 氢 黄 酮二 氢 黄 酮（醇）（醇）B环上有环上有-OH, OCH3对带对带I影响不大影响不大220-270340-390或或340-390(Ia) 300-320(Ib)查耳酮类查耳酮类查耳酮查耳酮2-OH使带使带I向红移向红移影响大影响大370-430(3-4个小峰个小峰)橙酮类橙酮类不同类型黄酮类化合物的紫外光谱2加入诊断试剂后引起的位移及结构测定加入诊断试剂后引起的位移及结构测定加入试剂加入试剂带带II带带I说明说明样品样品+MeOH2 5 0 -285304-385两峰强度基本相同，具体位置与两峰强度基本相同，具体位置与母核上电负性取代基母核上电负性取代基(-O

49、H, -OCH3)有关，有关，-OH, -OCH3越多，越多，越长移越长移+NaOMe或或+NaOHA 环 有环 有 -OH，红，红移小，无移小，无意义意义 40-60nm（ 不变或增强）不变或增强） 50-60nm（ 下降）下降）有有4-OH，无，无3-OH有有3-OH，无，无4- OH有有3,4-OH或或3,3,4-OH（衰减更快）（衰减更快）7-OH带带I，II随加随加NaOMe时间延长，逐渐衰减时间延长，逐渐衰减320-330nm有小峰有小峰+NaOAc(未熔溶未熔溶) 5-20有有3-OH,4OH也也发生红移，发生红移，但意义不大但意义不大7-OH加入试剂加入试剂带带II带带I说明说

50、明+NaOAc/H3BO3 5 -10 12-30有有6,7-OH或或7,8-OH (5,6-OH无无)B环有邻二酚羟基环有邻二酚羟基AlCl3/HCl 60 50-60 35-55 17-20 0有有3-OH有有3,5-二二OH有有5-OH，无，无3-OH有有6-OR无无3-OH, 5-OH或或6-OR存在存在AlCl3光谱光谱-AlCl3/HCl光谱光谱30-4050-650B环有邻二酚羟基环有邻二酚羟基A,B环皆有邻二酚羟基环皆有邻二酚羟基A,B环皆无邻二酚羟基环皆无邻二酚羟基说明：说明：1）+NaOMe, OHOMe，红移，红移 另有有另有有3,4-OH或或3,3,4-OH时，在时，在

51、 NaOMe作用下易氧化破坏，故峰有衰减。作用下易氧化破坏，故峰有衰减。2）NaOAc为弱碱，仅使酸性较强者，如为弱碱，仅使酸性较强者，如7,4-OH解离。解离。OOO3）HCl/H2OAlCl3Al3+OOOHOHOHOAl3+Al3+OOOOOHOOOOHOHHOOH形成络合物的能力：形成络合物的能力：黄酮醇黄酮醇3-OH 黄酮黄酮5-OH（二氢黄酮（二氢黄酮5-OH） 邻二邻二酚羟基酚羟基 二氢黄酮醇二氢黄酮醇5-OH邻二酚羟基和二氢黄酮醇邻二酚羟基和二氢黄酮醇5-OH在酸性条件下不与在酸性条件下不与AlCl3络合；络合；但不在酸性条件下，五者皆与但不在酸性条件下，五者皆与Al3+络合；

52、络合；形成络合物越稳定，红移越多。形成络合物越稳定，红移越多。4）二者相减可检测邻二酚羟基。）二者相减可检测邻二酚羟基。 从中药柴胡中得到山奈苷，酸水解从中药柴胡中得到山奈苷，酸水解PPC检查出鼠李糖，该苷及苷元的检查出鼠李糖，该苷及苷元的UVmax(nm)谱如下，解析结构。谱如下，解析结构。山奈苷山奈苷 带带II 带带IMeOH 265 345NaOMe 265 388 43，4-OHAlCl3 275 399 54，5-OHAlCl3/HCl 275 399AlCl3= AlCl3/HCl：无邻二酚羟基：无邻二酚羟基NaOAc 265 399带带II无红移，无无红移，无7-OHNaOAc/

53、H3BO3 265 386 41?山奈苷元山奈苷元 带带II 带带IMeOH 265 367NaOMe 276 424（分解）（分解） 带带I红移红移57，且分解，且分解，3，4-OHAlCl3 270 424 54，5-OHAlCl3/HCl 269 424AlCl3= AlCl3/HCl：无邻二酚羟基：无邻二酚羟基NaOAc 276 387带带II红移红移20，7-OHNaOAc/H3BO3 267 387 40?三、三、1H-NMR 常用溶剂：氘代氯仿（常用溶剂：氘代氯仿（CDDl3），氘代），氘代二甲基亚砜（二甲基亚砜（DMSO-d6），氘代吡啶），氘代吡啶（C5D5N）。）。 也可将

54、黄酮类化合物作成三甲基硅醚衍也可将黄酮类化合物作成三甲基硅醚衍生物溶于四氯化碳中进行测定。生物溶于四氯化碳中进行测定。优点：优点：无干扰信号，勿须昂贵的氘代试剂；无干扰信号，勿须昂贵的氘代试剂；供试后的样品用含水甲醇处理可回收；供试后的样品用含水甲醇处理可回收；三甲基硅醚衍生物可很方便的转变成乙三甲基硅醚衍生物可很方便的转变成乙酰衍生物或甲醚衍生物。酰衍生物或甲醚衍生物。hesperidinMeOH-H2Ohexa-trimethyl-silyl-rha-glc-OOOOSi(CH3)3OCH3OSi(CH3)3pyridin(CH3)3SiCl(CH3)3Si2NHrha-glc-OOOOH

55、OCH3OH（一）（一）A环质子环质子15, 7-二二OH黄酮黄酮H-6, H-8, 5.7-6.9, J=2.5HzH-6较H-8高场 86OOHOOH27-OH黄酮黄酮H-5 7.7-8.2 (d, J=9Hz)H-6 6.4-7.1(dd, J=9, 2.5Hz) H-8 6.8-7.0 (d, J=2.5Hz) 5OOHO68H-5较较H-6、H-8低场，是由于羰基的负屏蔽低场，是由于羰基的负屏蔽效应的影响。效应的影响。H-6、H-8较较5, 7-二二OH黄酮低场，且相互位黄酮低场，且相互位置可能颠倒。置可能颠倒。 （二）（二）B环质子环质子 6.5-814-氧取代黄酮类化合物氧取代黄

56、酮类化合物5632ORH-3, 5 6.5-7.1, d, J=8.5HzH-2, 6 7.1-8.1, d, J=8.5Hz由于由于C环对环对H-2, 6的负屏蔽作用大于对的负屏蔽作用大于对H-3, 5， 且且H-3, 5受受4-OR的屏蔽作用，故前者较低场；的屏蔽作用，故前者较低场；C环氧化程度越高，环氧化程度越高，H-2, 6处于越低场的位置。处于越低场的位置。23, 4-二氧取代黄酮类化合物二氧取代黄酮类化合物 562ORORH-2受受C环负屏蔽和环负屏蔽和3-OR屏蔽作用，屏蔽作用，H-6 也受也受C环负屏环负屏蔽作用，而蔽作用，而H-5则仅则仅4-OR屏蔽作用。故由低场到高场的屏蔽

57、作用。故由低场到高场的顺序为：顺序为：H-6 H-2 H-5。但有时也会发生但有时也会发生H-2和和H-6重叠的现象。重叠的现象。（1）3, 4-二氧取代黄酮及二氧取代黄酮及 黄酮醇黄酮醇H-5 6.7-7.1 d, J=8.5HzH-2 7.2 d, J=2.5HzH-6 7.9 dd, J=2.5, 8.5Hz（2）3, 4-二氧取代异黄酮、二氢黄酮及二氧取代异黄酮、二氢黄酮及 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 H-2, 5,6常作为一个复杂多重峰（通常常作为一个复杂多重峰（通常为两组峰）为两组峰） 6.7-7.1562OROR33, 4,5-三氧取代黄酮类化合物三氧取代黄酮类化合物62OR2OR1O

58、R3若若R1=R2=R3=H，则，则H-2,6为单峰，为单峰， 6.7-7.5若上述条件不成立，则若上述条件不成立，则H-2,6分别为二重峰分别为二重峰（J=2Hz） （三）（三）C环质子环质子 1. 黄酮类黄酮类H-3, 6.33OHO2. 异黄酮类异黄酮类32OOHH-2位于羰基位于羰基 位，同时受羰基和苯环的负屏位，同时受羰基和苯环的负屏蔽作用，且通过碳与氧相连，故较一般芳香蔽作用，且通过碳与氧相连，故较一般芳香质子低场，质子低场，7.6-7.8。若用若用DMSO-d6作溶剂，则作溶剂，则8.5-8.7。 3. 二氢黄酮和二氢黄酮醇二氢黄酮和二氢黄酮醇 1) 二氢黄酮二氢黄酮23OHOH

59、两个两个H-3, 分别为分别为dd峰，中心位于峰，中心位于2.8 ，J = 17Hz（偕偶），（偕偶），5Hz（顺偶）及（顺偶）及J = 17Hz（偕偶），偕偶），11Hz（反偶）（反偶）H-2, dd, 5.2, Jtrans = 11Hz（反偶）（反偶）, Jcis = 5Hz（顺偶）（顺偶）（2）二氢黄酮醇）二氢黄酮醇32(2S, 3S)二氢黄酮OOHOHH3-OR苷化，供电子能力下降，两个氢的苷化，供电子能力下降，两个氢的值升高（向低场位移），可用于判断二氢值升高（向低场位移），可用于判断二氢黄酮醇苷中糖的位置。黄酮醇苷中糖的位置。 H-2与与H-3为反为反 式双直立键，式双直立键，

60、J=11HzH-2 4.9H-3 4.34. 查耳酮查耳酮d, 7. 3-7. 7, J=17H zd, 6. 7-7. 4, J=17H zO5.橙酮橙酮s, 6.5-6.7 6.37-6.94 (DMSO-d6)OCHO（四）（四）糖上的质子糖上的质子 1. 单糖苷类单糖苷类 糖与苷元相连时，糖上糖与苷元相连时，糖上1-H与其它与其它 H比较，一般位于较低磁场区。因比较，一般位于较低磁场区。因-OR (R=苷元苷元) 不表现供电子，仅表不表现供电子，仅表现吸电子的诱导作用，端基现吸电子的诱导作用，端基H受两个受两个O的诱导，处于低场（的诱导，处于低场（ 4.0-6.0）1）葡萄糖位于不同位