PCR技术(硕士生课程)_第1页
PCR技术(硕士生课程)_第2页
PCR技术(硕士生课程)_第3页
PCR技术(硕士生课程)_第4页
PCR技术(硕士生课程)_第5页
已阅读5页，还剩19页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、PCR技术简介 分子生物学技术的迅速发展，分子生物学技术的迅速发展，为为PCR技术的发现提供了坚实的技术的发现提供了坚实的基础，同时也为这一技术的发展基础，同时也为这一技术的发展和应用提供了宽广的舞台。和应用提供了宽广的舞台。PCR技术的发明v1985年vMullis v青年v遗传学领域v1995年诺贝尔化学奖v灵感PCR技术的发明v1971年Korana最早提出核酸体外扩增的设想：“经过DNA变性、与合适的引物杂交、用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。 PCR原理示意图原理示意图PCR的扩增效率：的扩增效率：循环数循环数. 扩增子数扩增子数 (靶序列拷贝数靶序列拷

2、贝数)1 22 43 84 165 326 6420 1,048,57630 1,073,741,824(10亿亿)3、PCR条件的优化条件的优化 模板模板 引物引物(0.2-1umol/L) 缓冲液缓冲液(Tris-HCl 10mmol/L KCl 50mmol/L pH 8.3-9.3) 镁离子镁离子(0.5-5.0 mmol/L) dNTP 耐热耐热DNA聚合酶聚合酶 温度循环参数温度循环参数 PCR的改进与完善vMullis最初使用DNA聚合酶I的Klenow片段v不耐高温v37C下反应PCR技术的改进与完善v1984年Keohanog改用T4DNA聚合酶v1988年Saiki等从温泉

3、中分离的一株嗜热杆菌（thermus aquaticus)中提取到一种耐热DNA聚合酶Taq DNA聚合酶v耐热性v忠实性v扩增长度v平台期PCR技术的发展v高保真PCRv长片段PCRvRTPCRv定量PCRv原位PCRvssPCRv反向PCRPCR技术的发展v武断引物PCRv多重PCRv标记PCRv重组PCRv免疫PCRvPCRELISAvddPCRPCR 技术的应用分子生物学v克隆v重组v突变体构建v突变分析vSNPv序列分析PCR 技术的应用医学研究v基因表达水平与疾病的相关性v基因变异与疾病的相关性v基因与表型的关联v基因之间的相互关系v寻找未知基因v研究基因功能PCR技术的应用临床医学v遗传学（各种遗传病）v肿瘤学（K-ras、p53、微卫星、端粒酶、p16、BCR/ABL等）v传染病学（病毒、细菌、寄生虫等）v其他法医学v亲子鉴定v刑事侦破v物证v身份确认PCR技术的发展趋势v简便v快速v封闭v集成（高通量）v定量v广泛v预测疾病（上工治未病）v指导治疗（个体化治疗）荧

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论