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文档简介

1、Enzyme 2 :澱粉酶活性之測定澱粉酶活性之測定還原糖還原糖 (ex:葡萄糖、果糖葡萄糖、果糖) 本氏液本氏液 (Benedicts solution)Benedicts solution內含之內含之Cu2+會被還原糖的官能基還原形成會被還原糖的官能基還原形成Cu2O之紅色沉澱之紅色沉澱 顏色變化：顏色變化： 藍藍 藍綠藍綠 綠綠 褐褐 橙橙 紅紅 (Cu2O)還原糖之多寡：還原糖之多寡： 少少 寡寡原理原理abc各加入各加入1 ml 3%澱粉液澱粉液 a:加入加入1 ml 3% -amylaseb:加入加入1 ml新鮮唾液新鮮唾液c:加入加入1 ml ddH2O放置加熱器反應放置加熱器反

2、應37 30 min a、b、c 3個試管各加入個試管各加入10滴的本氏液滴的本氏液 置於水浴加熱並觀察各管顏色之變化置於水浴加熱並觀察各管顏色之變化 步驟步驟結果結果問題問題實驗觀察結果實驗觀察結果 澱粉結構與種類澱粉結構與種類 澱粉酶種類澱粉酶種類Enzyme 2 :澱粉酶最適澱粉酶最適pH之測定之測定藉由在不同的藉由在不同的pH值的條件下，利用還原糖的測定值的條件下，利用還原糖的測定(DNS呈色法呈色法)，在在A540nm測吸光值，進而得知酵素最適測吸光值，進而得知酵素最適pH值。值。 原理原理澱粉澱粉-amylase葡萄糖、麥芽糖、異麥芽糖葡萄糖、麥芽糖、異麥芽糖及及69個葡萄糖組成的

3、寡糖個葡萄糖組成的寡糖可切斷澱粉中可切斷澱粉中-1,4糖苷鍵糖苷鍵步驟步驟再將各管分別加入再將各管分別加入100 l DNS reagent，沸水浴，沸水浴5 min測測OD540下吸光值下吸光值1%澱粉：將澱粉：將1 g澱粉溶於澱粉溶於100 ml ddH2O，加熱，加熱100至澱粉糊化至澱粉糊化先各加入先各加入500 l 1% 澱粉液澱粉液200 l 100 mM磷酸緩衝液磷酸緩衝液(pH=5,6,7,8,9)以及以及ddH2O再加入再加入100 l 1% NaClabcdef取取6支試管支試管將各試管放置將各試管放置37下，保溫下，保溫5 minae管加入管加入100 l 1% -amylase；f 管管100 l ddH2O37下反應下反應3

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