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文档简介
1、配餐作业 ( 三十六 ) 基因工程A 组全员必做题1.天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因Bo 现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是()A.提取矮牵牛蓝色花的 mRNA 经逆转录获得互补的 DNA 再扩增基因 BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC. 利用 DNA 聚合酶将基因 B 与质粒连接后导入玫瑰细胞D. 将基因 B 直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞解析 此题考查基因工程及其应用的相关知识。获取目的基因 B,可先提取矮牵牛蓝色花的 mRNA 经逆转录获得互补的 DNA 再经 PCR
2、技术扩增,A 项正确;基因文库构建时是将 目的基因与载体连接起来,形成重组载体,再导入受体菌中储存和扩增,提取目的基因时 不需使用限制酶,B 项错误;连接目的基因与质粒的酶是DNA 连接酶,C 项错误;将目的基因导入植物细胞,常用农杆菌转化法,不使用大肠杆菌,D 项错误。答案 A2.下列关于 cDNA文库和基因组文库的说法中,正确的是()A. 同一物种的 cDNA 文库只有 1 种B. 某真核生物的 cDNA 文库中的某基因一定比基因组文库中的该基因短C. 可以利用反转录法获取 cDNA 文库和基因组文库D. 只有 cDNA 文库的基因可实现物种间的基因交流解析 本题考查基因文库,意在考查考生
3、的理解能力。在同一个体的不同发育时期获得的 cDNA 文库不同,因此,一个物种可以有多个cDNA 文库,但一个物种的基因组文库只有 1 个,A 错误;cDNA 文库的基因是由 mRNA 经过逆转录获得的,所以,cDNA 文库的基因和基因组文库的基因相比,缺少基因中启动子和内含子,因此cDNA 文库的基因要短一些,B正确;只有 cDNA 文库可通过反转录法进行构建,C 错误;cDNA 文库的基因可实现物种间的基因交流,而基因组文库的部分基因可实现物种间的基因交流,D 错误。答案 B3利用外源基因在受体细胞中表达,可生产人类所需的产品。下列选项中能说明目的 基因完成表达的是 ()A. 棉花细胞中检
4、测到载体上的标记基因B. 山羊乳腺细胞中检测到人生长激素的基因C.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因的mRNAD. 酵母菌细胞中提取到人的干扰素解析 基因的表达即控制蛋白质的合成,包括转录和翻译,仅仅转录出mRNA 还不能叫表达,只有合成了相应的蛋白质才能证明目的基因完成了在受体细胞中的表达。答案 D4在基因工程中,可依据受体细胞的类型及其生理特性来选择合适的载体,既能高效地携带目的基因进入受体细胞,又能方便地进行检测。已知有以下几类含有不同标记基因 的质粒,不可作为侵入大肠杆菌的载体的是(已知青霉素可杀死细菌,四环素不能杀死大肠杆菌)()解析 A 质粒携带目的基因是否进入大肠杆菌,可用含有青霉素的
5、培养基培养大肠杆菌,如果大肠杆菌不死亡,说明这些大肠杆菌已含有了A 质粒上的标记基因表达出的性状,进一步说明目的基因已被携带进入大肠杆菌细胞内。B 质粒大肠杆菌含有抗四环素基因与否,都能在含四环素的培养基上生长,所以不能用于对目的基因是否进入大肠杆菌的检测。 C 和 D 质粒上的标记基因均可明显指示目的基因是否进入大肠杆菌细胞内。答案 B5如图表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。以下说法错误的是()A. 利用含有四环素的培养基可将含 n的细菌筛选出来B. 川是农杆菌,通过步骤将目的基因导入植株C. 可与多个核糖体结合,并可以同时翻译出多种蛋白质D.过程的完成需要限制酶和DNA
6、 连接酶的参与-抗青霉素基因-抗四环素基因*荧光蛋白基因紫色素合成基因解析 是一个 mRNA 分子,可与多个核糖体结合形成多聚核糖体,由于翻译的模板是 同一个mRNA 分子,故翻译出的是同一种蛋白质。答案 C6. (2016 山东济宁一模)图示方案为人们获得生物新品种的过程,请回答下列问题:导入方案 I:抗冻蛋白基因一烟草细胞抗冻烟草导入方案 n: A 基因免疫过的 B 细胞 体外培养一T单克隆抗体导入移植方案川:人的生长激素基因一 牛的受精卵一 T早期胚胎一受体母牛-转基因牛(1) 基因工程的核心步骤是 _ 。农杆菌转化法中,根据农杆菌的特点,如果将抗冻蛋白基因插入 _ 上,通过农杆菌的转化
7、作用,就可以使目的基因进入植物细胞,并将其插入植物细胞中 _上。(2) 推测方案 n中 A 基因所起的作用是_ ,请写出该方案获得的细胞中遗传信息传递时所遵循的法则_(3)方案川中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。这需要将人的生长激素基因与_ 的启动子等调控组件重组在一起。该方案中的早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前,必须进行性别鉴定,一般是取处于 _ 时期的_ 细胞进行检测。解析(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。农杆菌转化法中,将抗冻蛋白基因插入 Ti 质粒的 T DNA 上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因插入植物细胞中染色体 DNA 上。(2)方案 n 中将
8、A 基因导入免疫过的 B 淋巴细胞生产单克隆抗体,说明A基因使得细胞无限增殖,即 A 基因能够调控细胞无限增殖,该基因在受体细胞中能够复制、 转录和翻译。(3)方案川中将人的生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在 一起,使得转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。囊胚中的内细胞团将来发育 成胎儿的各种组织,滋养层细胞发育成胎盘和胎膜,将早期胚胎移植入受体母牛子宫之前,一般取处于囊胚时期的滋养层细胞进行性别检测。答案(1)基因表达载体的构建Ti 质粒的 T DNA 染色体 DNA(2)调控细胞无限增殖复厂LTA转录翻译 尼宀壬DNA-* RNA - 蛋口质(3)乳腺蛋白基因囊胚
9、滋养层7. (2017 湖北武汉毕业调研)镰刀型细胞贫血症是一种单基因遗传病,患者的血红蛋白分子 3肽链第 6 位氨基酸谷氨酸被缬氨酸代替,导致功能异常。回答下列问题:(1) 异常血红蛋白的氨基酸序列改变的根本原因是编码血红蛋白基因的_ 序列发生改变。(2) 将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中,可以合成正常的血红蛋白达到治疗的目的。此操作 _ (填“属于”或“不属于”)蛋白质工程,理由是该操作(3) 用基因工程方法制备血红蛋白时,可先提取早期红细胞中的 _ ,以其作为模板,在_ 酶的作用下反转录合成 cDNA cDNA 与载体需在 _ 酶的作用下,拼接构建基因表达载体,导入受体菌后
10、进行表达。(4) 检测受体菌是否已合成血红蛋白,可从受体菌中提取 _ ,用相应的抗体进行_杂交,若出现杂交带,则表明该受体菌已合成血红蛋白。解析(1)基因是具有遗传效应的DNA 片段,遗传信息储存在基因碱基对的排列顺序中。(2)蛋白质工程是指通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋 白质,以满足人类的生产和生活的需求,故题中所述不属于蛋白质工程。(3)利用反转录法获取目的基因时,需先提取 mRNA 在逆转录酶的作用下反转录合成cDNA cDNA 与载体需要在限制酶和 DNA 连接酶的作用下拼接构建成基因表达载体,才可导入受体菌。(4)检测目的基因是否翻译成蛋白质,需要从转
11、基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原一抗体 杂交。答案(1)碱基对(2) 不属于没有对现有的蛋白质进行改造(3) mRNA 逆转录 限制酶和 DNA 连接蛋白质抗原一抗体& (2017 宁夏银川一中月考)为扩大可耕地面积,增加粮食产量,黄河三角洲等盐碱 地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。f C T G C A G JiiIiIii) )IiiiII;I|b)IIIIIIIIIIIIIIIG A C G T C?3*-巳a(1)_ 获得耐盐基因后,可通过扩增目的基因。构建重组DNA 分子所用的限制性核酸内切酶作用于图中的 _处,DNA1 接酶作用于
12、 _ 处(填“a”或“ b”)。(2)_将重组 DNA 分子导入水稻受体细胞常用的方法有 _ 法和_法。(3)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功,既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测,又要用 _的方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。(4)若将该转基因植株的花药在高盐碱的培养基上作离体培养,则获得的再生植株群体中耐盐型植株大约占_ %。(5)利用基因工程技术培育耐盐水稻新品系,相比传统的杂交育种方法,其优点主要表现为_ 。解析(1)扩增目的基因的方法是 PCR 技术。限制酶和 DNA 连接酶都作用于磷酸二酯键, 即 a处。(2)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法和基因枪法。(3)基
13、因探针为标记的目的基因单链,从个体水平鉴定可用一定浓度盐水浇灌植株。(4)若将该转基因植株的花药在高盐碱的培养基上作离体培养,则获得的再生植株群体中耐盐型植株大约占100% (5)基因工程的优点是能根据人类的需要,定向改造遗传物质,获得优良遗传性状。答案 (1)PCR 技术 a a(2)农杆菌转化 基因枪(或花粉管通道)(3)耐盐基因(目的基因)一定浓度盐水浇灌(移栽到盐碱地中)(4)100(5)能根据人类的需要,定向改造遗传物质,获得优良遗传性状B 组能力提升题9.若要利用某目的基因(见图甲)和 P1 噬菌体载体(见图乙)构建重组 DNA (见图丙), 限 制性核酸内切酶的酶切位点分别是Bg
14、ln (AGATCT) 、EcoR I (GAATTC)和Sau3A 1(GATC)下列分析合理的是()EcoRl FmRTf 表示 RW 聚合酶的移动方向Said Al表示 3 牛酶切位点在鞍体上的排列顺序重组 DN 冉乙丙甲A.用EcoR I 切割目的基因和 P1 噬菌体载体B.用Bgln 和EcoR I切割目的基因和 P1 噬菌体载体C. 用Bgln和SaU3A I切割目的基因和 P1 噬菌体载体D. 用EcoR I和Sau3A I切割目的基因和 P1 噬菌体载体解析 解答本题的关键是要看清切割后目的基因插入的方向,只有用EcoR I 和Sau3A I 切割目的基因和 P1 噬菌体载体,
15、构建的重组 DNA 中 RNA 聚合酶在插入的目的基因上的移 动方向才一定与图丙相同。答案 D10.为获得抗病的马铃薯往往采用转基因技术,将相关抗病基因转移到马铃薯体内。 其过程大致如下图所示。下列相关叙述,正确的是()A.图中过程涉及两种工具酶, 目的基因插入的位置为T-DNA 所在的区段B. 图中过程,农杆菌需经镁离子溶液处理,处理后的细胞处于感受态C. 图中过程,所用培养基中应添加两种激素,添加顺序对细胞的分化方向无影响D. 检测相关抗病基因是否在受体细胞内转录,可采用抗原一抗体杂交法解析 本题考查基因工程的知识,意在考查考生的理解能力。图中过程,农杆菌需经钙离子溶液处理, B 错误;
16、植物组织培养所用激素的先后使用顺序及其比例都会影响细胞 的分化方向,C 错误;检测相关基因是否在受体细胞内转录,可采用DNA- RNA 杂交法,而抗原一抗体杂交法检测的是目的基因是否翻译为蛋白质,D 错误。答案 A11.(多选)如图表示细胞膜上乙酰胆碱(一种神经递质)受体基因的克隆技术操作过程,F 列相关分析中错误的是()组织细胞复合体载体、感染细探针 筛选I分离相关菌落I获得 cDNAA获得该mRNA 勺最佳材料是受精卵B. 构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌C.完成过程必不可少的酶分别是逆转录酶、DNA 聚合酶D. 探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌,获得未被感染的细菌解析 该受体基
17、因在神经细胞中表达,获得该mRNA 勺最佳材料是神经细胞。构建基因表达载体最可能使用的载体是质粒。探针筛选的目的是检测是否存在cDNA答案 ABD12. (2016 天津卷)人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值,只能从人血浆中制备。 如图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。(1)为获取 HSA 基因,首先需采集人的血液,提取 _ 合成总 cDNA 然后以 cDNA为模板,使用 PCR 技术扩增 HSA 基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方 向,请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。mRNA mRNA-cDNA 分离IcDNA构建基因表达建立文库HS
18、A 基因(2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达需要选择的启动子是 _(填写字母,单选)。A.人血细胞启动子B.水稻胚乳细胞启动子C.大肠杆菌启动子D.农杆菌启动子(3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是人体合成的初始 HSA 多肽,需要经过膜系统加工形成正确空间结构才有活性。与途径 H 相比,选择途径 I 获取 rHSA 的优势是(5)_ 为证明 rHSA 具有医用价值, 须确认rHSA 与_ 的生物学功能一致。解析 本题主要考查基因工程的基本操作步骤和基因工程的应用等相关知识,意在考 查考生的识记、理解及应用能力。(1)cDNA 是以 mRNA 为模板逆转录得到的, 要合成总 cDNA 需要采集人的血液, 提取总 RNA 或 mRNA) PCR 扩增目的基因时 DNA 的合成方向总是从子链 的 5端向 3端延伸,两条模板链指导合成的子链延伸方向相反。(2)启动子具有物种和组织的特异性,要构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA 的载体,应选择水稻胚乳细胞的启动子。(3)自然条件下农杆菌可感染双子叶植物和裸子植物,而对大多数单子叶植物没有感 染能力,当植物受损伤时, 伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物, 吸引农杆菌移向这些 细胞。 水稻为单子叶植物,禾 U 用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中添加酚类物质,可吸引
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