生化检验质控及失控分析

1、生化检验室内质生化检验室内质控及失控分析控及失控分析生化检验室内质控目的生化检验室内质控目的生化检验室内质控方法生化检验室内质控方法温州医学院附属第二医院温州医学院附属第二医院 丁红香丁红香 室内质控是由实验室的工作人员采室内质控是由实验室的工作人员采用一系列统计学的方法，连续地评价本用一系列统计学的方法，连续地评价本实验室测定工作的可靠程度，判断检验实验室测定工作的可靠程度，判断检验报告是否可发出的过程。室内质控的目报告是否可发出的过程。室内质控的目的是检测、控制本实验室测定工作的精的是检测、控制本实验室测定工作的精密度，并检测其准确度的改变，提高常密度，并检测其准确度的改变，提高常规测定工

2、作的批间、批内标本检测结果规测定工作的批间、批内标本检测结果的一致性。的一致性。 一、室内质量控制目的一、室内质量控制目的检测检测样样本本报报告告质质控控品品结结果果推断推断二、室内质量控制的主要方法二、室内质量控制的主要方法（一）室内质控的准备工作（一）室内质控的准备工作 人员培训人员培训 普及质控知识、培养技术普及质控知识、培养技术 骨干。骨干。 建立标准化操作规程建立标准化操作规程 制定一系列制定一系列SOPSOP 文件文件 仪器的检定与校准仪器的检定与校准 仪器按要求进行仪器按要求进行 校准及项目要求的校准频度校准及项目要求的校准频度 质控品的准备质控品的准备 质控品的准备质控品的准备

3、1 1）质控品的种类）质控品的种类 根据质控品物理性状不同分为根据质控品物理性状不同分为冻干质控冻干质控品品、液体质控品液体质控品和和混合血清混合血清 根据有无测定值分为定值质控品和非定根据有无测定值分为定值质控品和非定值质控品。值质控品。 2 2） 质控品的特性质控品的特性 人血清基质，以减少基质效应；人血清基质，以减少基质效应； 无传染性；无传染性； 添加物的数量应少而纯；添加物的数量应少而纯； 成分分布均匀，瓶间变异小成分分布均匀，瓶间变异小; ;（酶类项目酶类项目瓶间瓶间CV%CV% 应小于应小于2%; 2%; 其它分析物其它分析物CV%CV%应小应小1%1%） 到实验室后的有效期应在

4、到实验室后的有效期应在1 1年以上；年以上； 冻干品复溶后成分稳定冻干品复溶后成分稳定; ;（2 28 8 时不少于时不少于24h 24h ， -20 -20时不少于时不少于20 20 天天; ; 某些不稳定成分某些不稳定成分( (如胆红素、如胆红素、ALP ALP 等等) )在复溶后前在复溶后前4h4h 的变异应小于的变异应小于2%;2%;） 3 3） 质控品的正确使用与保存质控品的正确使用与保存 严格按说明书操作；严格按说明书操作； 确保冻干质控品复溶所用溶剂的质量；确保冻干质控品复溶所用溶剂的质量； 复溶时所加溶剂的量要准确，轻轻振复溶时所加溶剂的量要准确，轻轻振 摇，内容物完全溶解，切

5、忌剧烈振摇；摇，内容物完全溶解，切忌剧烈振摇； 过期的质控品不能使用；过期的质控品不能使用； 质控品要在与患者标本同样测定条件质控品要在与患者标本同样测定条件 下进行分析测定。下进行分析测定。1 1、确定质量目标、确定质量目标 质量目标是实验室选用的质控方法质量目标是实验室选用的质控方法（包括质控规则和质控品测定的个数）所（包括质控规则和质控品测定的个数）所需达到的目标，可以用总允许误差的形式需达到的目标，可以用总允许误差的形式表示。目前中国尚未确立各项目的总允许表示。目前中国尚未确立各项目的总允许误误, ,可参考美国和欧洲提出的各项目可接可参考美国和欧洲提出的各项目可接受的允许误差范围。受的

6、允许误差范围。 （二）室内质控的实际操作2、设定靶值和控制限、设定靶值和控制限 实验室应使用自己现行的测定方法，实验室应使用自己现行的测定方法，测定新批号质控品各个项目的靶值，定值测定新批号质控品各个项目的靶值，定值质控品的标定值只能作为确定靶值的参考。质控品的标定值只能作为确定靶值的参考。同时应确定新批号质控品的控制限，控制同时应确定新批号质控品的控制限，控制限通常以标准差倍数表示。限通常以标准差倍数表示。 1. 1. 稳定性较长的质控品稳定性较长的质控品 （1 1）根据至少根据至少2020天的天的2020次质控测定结果，计次质控测定结果，计算出平均数和标准差，作为暂定靶值和暂定标准差。算出

7、平均数和标准差，作为暂定靶值和暂定标准差。 （2 2）以暂定靶值和标准差作为下一月室内质）以暂定靶值和标准差作为下一月室内质控图的靶值和标准差进行室内质控。控图的靶值和标准差进行室内质控。 （3 3）一个月结束后将该月的在控结果与前）一个月结束后将该月的在控结果与前2020个质控测定结果汇集在一起，计算累积平均数和累个质控测定结果汇集在一起，计算累积平均数和累积标准差（第一个月）；作为下一个月质控图的靶积标准差（第一个月）；作为下一个月质控图的靶值和标准差。值和标准差。（4 4）重复上述操作过程，连续）重复上述操作过程，连续3 3至至5 5个月，以最初个月，以最初2020个数据和至个数据和至5

8、 5个月在控数据汇集的所有数据计算个月在控数据汇集的所有数据计算累积平均数和标准差，以此作为该质控品有效期内累积平均数和标准差，以此作为该质控品有效期内的常用靶值和常用标准差。的常用靶值和常用标准差。（5 5）更换新批号质控品时，新批号质控品应和现）更换新批号质控品时，新批号质控品应和现用批号的质控品作平行检测，按上述（用批号的质控品作平行检测，按上述（1 1）（）（4 4）步骤建立步骤建立靶值和标准差。靶值和标准差。 2. 2. 稳定性较短的质控品稳定性较短的质控品 在在3 34 4天内，每天分析每个水平的质控品天内，每天分析每个水平的质控品3 34 4瓶，每瓶，每瓶进行瓶进行2 23 3次

9、重复测定，计算平均数和标准差，次重复测定，计算平均数和标准差，作为该质控品有效期内的靶值和标准差。作为该质控品有效期内的靶值和标准差。 3. 3.特殊情况的处理特殊情况的处理 不是每天开展的、不是每天开展的、有效期较短的试剂盒项目，采用有效期较短的试剂盒项目，采用CrubbsCrubbs氏法，氏法，只需连续测定只需连续测定3 3次即可对第次即可对第3 3次检验结果进行检次检验结果进行检验和控制验和控制。 3 3、质控图的绘制质控图的绘制 根据控制物的均值和控制限绘制根据控制物的均值和控制限绘制Levy-JenningsLevy-Jennings质控图质控图又称常规质控图，又称常规质控图，是目前

10、国内外广泛采用的一种常规室内是目前国内外广泛采用的一种常规室内质量控制方法质量控制方法。（1 13s3s为控制规则，对误差识别的灵敏度为控制规则，对误差识别的灵敏度不够不够;1;12s2s为控制规则，对误差识别的特异性不够。）为控制规则，对误差识别的特异性不够。）x2s+2s+3s3s 质控图质控图sx 4、质控规则选择、质控规则选择 使用多规则质控技术可揭示一些潜在的质量问使用多规则质控技术可揭示一些潜在的质量问题。其中有些规则对随机误差敏感，有些对系统误题。其中有些规则对随机误差敏感，有些对系统误差敏感。差敏感。 1 1） 方法方法 WestgardWestgard用一组质控规则来判定分用

11、一组质控规则来判定分析是否在控，推荐使用六个不同的规则来判断分析析是否在控，推荐使用六个不同的规则来判断分析的可接受性，即的可接受性，即1 12S2S、 1 13S3S 、2 22S2S、R R4S4S、4 41S1S和和10 10 规规则，由此提高了系统误差的检出概率。质控图的制则，由此提高了系统误差的检出概率。质控图的制作方法同作方法同LeveyLeveyJenningsJennings质控图的制作。质控图的制作。xWestgard多规则的逻辑示意图多规则的逻辑示意图质控数据质控数据 否否12S 在控，接受分析批，发报告在控，接受分析批，发报告 是是 否否 否否 否否 否否否否13S 22

12、S R4S 41S 10 x 是是 是是 是是 是是 是是 失失 控控 ，拒发报告，拒发报告5、质控样本检测、质控样本检测 实验室应规定：实验室应规定：（1 1）使用几个浓度质控品）使用几个浓度质控品（2 2）每个质控品测定频次）每个质控品测定频次 批长度：分析批是一个区间（如：一段批长度：分析批是一个区间（如：一段时间或测量样本量），预期在此区间内时间或测量样本量），预期在此区间内检测系统的准确度和精密度是稳定的。检测系统的准确度和精密度是稳定的。（3 3）质控品的位置，须考虑分析方法的类型，可）质控品的位置，须考虑分析方法的类型，可 能产生的误差类型。能产生的误差类型。 - - 在用户规定

13、批长度（在用户规定批长度（UDRLUDRL）内，进行不连续）内，进行不连续 样品检验，则质控品最好放在结束标本检验样品检验，则质控品最好放在结束标本检验 前，可检出偏倚。前，可检出偏倚。 - - 质控品平均分布于整个批内，可监测漂移。质控品平均分布于整个批内，可监测漂移。 - - 随机插于患者标本中，可检出随机误差。随机插于患者标本中，可检出随机误差。注：注：应在报告患者结果前评价质量控制结果。质控应在报告患者结果前评价质量控制结果。质控品放在校准品后面，得到的质控结果是对分析不精品放在校准品后面，得到的质控结果是对分析不精密度的不真实的估计，对批量标本检测时出现的偏密度的不真实的估计，对批量

14、标本检测时出现的偏倚或漂移无法作出估计。倚或漂移无法作出估计。1 1）填写失控报告）填写失控报告 上报实验室负责人；上报实验室负责人； 2 2）简单迅速地回顾整个操作过程，分析查）简单迅速地回顾整个操作过程，分析查找最可能发生误差的因素。找最可能发生误差的因素。 质控品质控品 试剂试剂 校准品校准品 分析仪器分析仪器 其他如环境、人员等因素其他如环境、人员等因素6、失控原因分析及纠正措施、失控原因分析及纠正措施判断误差类型和失控原因的关系判断误差类型和失控原因的关系 一般影响系统误差的因素有：一般影响系统误差的因素有：（1 1）使用不同批号的试剂或校准品）使用不同批号的试剂或校准品（2 2）试

15、剂或校准品在配制过程中发生错误）试剂或校准品在配制过程中发生错误（3 3）试剂或校准品被污染或变质）试剂或校准品被污染或变质（4 4）反应温度产生变化）反应温度产生变化（5 5）加样器部分堵塞造成加样不足）加样器部分堵塞造成加样不足（6 6）相关的反应参数被修改）相关的反应参数被修改 影响随机误差的因素影响随机误差的因素（1 1）标本或试剂管路中存在气泡）标本或试剂管路中存在气泡（2 2）搅拌机构被污染）搅拌机构被污染（3 3）清洗机构存在故障）清洗机构存在故障（4 4）交叉污染引起）交叉污染引起（5 5）比色灯衰老造成光能量不均匀）比色灯衰老造成光能量不均匀 失控失控单项目单项目 多项目多项

16、目单水平单水平双双(多多)水平水平随机误差随机误差质控品质控品试剂问题试剂问题新开质控品新开质控品校准问题校准问题质控问题质控问题人为因素人为因素重测质控重测质控纠正位置纠正位置重新校准重新校准更换试剂更换试剂监控纠正监控纠正纠正更换试剂纠正更换试剂培训考核培训考核试剂问题试剂问题(共用共用辅助试剂辅助试剂)仪器问题仪器问题环境问题环境问题操作问题操作问题保养维护保养维护变质污染变质污染配制错误配制错误放错位置放错位置变质污染变质污染人为因素人为因素过期漂移过期漂移配错或放错位置配错或放错位置变质污染变质污染光路吸样针交叉污染光路吸样针交叉污染温度水质温度水质未按未按SOP操作操作失控分析基本

17、线路图失控分析基本线路图新开质控品新开质控品重新溶解质控重新溶解质控图13）质控图形分析图2图3图4图5图6图7图8图94）纠正措施 重新测定同一质控品（图重新测定同一质控品（图1-21-2），此步主要是），此步主要是用以查明人为误差，每一步都应认真仔细操作，用以查明人为误差，每一步都应认真仔细操作，以查明失控原因；另外，这一步还可以查出随以查明失控原因；另外，这一步还可以查出随机误差，如是随机误差则重测的结果应在允许机误差，如是随机误差则重测的结果应在允许范围内范围内( (在控在控) )，若重测结果仍不在允许范围则，若重测结果仍不在允许范围则可以进行下一步操作。可以进行下一步操作。 原则：从

18、易到难原则：从易到难 新开一瓶质控品（图新开一瓶质控品（图3 3），重测失控项目），重测失控项目 如果如果新开的质控血清结果正常，那么原来那瓶质控血新开的质控血清结果正常，那么原来那瓶质控血清可能过期或在室温放置时间过长而变质，或者清可能过期或在室温放置时间过长而变质，或者被污染，若结果仍不在允许范围，则进行下一步。被污染，若结果仍不在允许范围，则进行下一步。 新开一批质控品（图新开一批质控品（图3 3），重做失控项目，若结），重做失控项目，若结果在控，说明前一批血清可能都有问题，检查它果在控，说明前一批血清可能都有问题，检查它们的有效期和贮存环境，以查明问题所在，如果们的有效期和贮存环境，以

19、查明问题所在，如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。结果仍不在允许范围，则进行下一步。 重新校准（图重新校准（图4-74-7），重测失控项），重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除目。用新的校准液校准仪器，排除校准液因素。校准液因素。 更换试剂（图更换试剂（图6-86-8），用同一批号），用同一批号或不同批号，重测失控项目。排除或不同批号，重测失控项目。排除试剂因素。试剂因素。 仪器因素（图仪器因素（图8 8），检查仪器），检查仪器状态，查明光源是否需要更换，状态，查明光源是否需要更换，比色杯（电极）是否需要清洗或比色杯（电极）是否需要清洗或更换，对仪器进行清洗等维护，更换，对仪器进行清洗等

20、维护，另外还要检查试剂此时可更换试另外还要检查试剂此时可更换试剂以查明原因，如果结果仍不在剂以查明原因，如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。允许范围，则进行下一步。 请专家帮助，如果前六步都未能请专家帮助，如果前六步都未能得到在控结果，那可能是仪器或试得到在控结果，那可能是仪器或试剂的原因，剂的原因， 只有和仪器或试剂厂家只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援了。联系请求他们的技术支援了。 质控结果落在质控结果落在2S2S线上就认为失控线上就认为失控 质控结果超出质控结果超出2S2S就马上重做，并抹去原结就马上重做，并抹去原结果，点上在控结果果，点上在控结果 以以VIS80VIS80为目标，用为目标，用CCVCCV去计算控制范围去计算控制范围 直接用厂商的定值及允许范围作为控制图上直接用厂商的定值及允许范围作为控制图上的靶值和标准差的靶值和标准差5）几种不恰当的做法7 7、室内质量控制数据的管理、室内质量控制数据的管理 1）每月室内质量控制数据统计处理每月室内质量控制数据统计处理 每个测定项目原始质控数据的平均数每个测定项目原始质控数据的平均数 、 标准差和变异系数。标准差和变异系数。 每个测定项目在控数据的平均数、每个测定项目在控数据的平均数、 标准标准 差和变异系数。差和变异系数。 测定项目所有在控数据的累积平均数、