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1、关于分子生物学常用技术 (2)现在学习的是第一页，共31页现在学习的是第二页，共31页现在学习的是第三页，共31页（a）（b）（c）（d）（e）基因组基因组DNADNA限制片段限制片段硝酸纤维素滤膜硝酸纤维素滤膜同探针同源杂交的基同探针同源杂交的基因因DNA片段片段X光底片光底片现在学习的是第四页，共31页现在学习的是第五页，共31页现在学习的是第六页，共31页现在学习的是第七页，共31页现在学习的是第八页，共31页核酸杂交常用几种膜的性核酸杂交常用几种膜的性能比较能比较现在学习的是第九页，共31页. . 现在学习的是第十页，共31页现在学习的是第十一页，共31页现在学习的是第十二页，共31页

2、现在学习的是第十三页，共31页足迹实验（足迹实验（footprinting assayfootprinting assay） 现在学习的是第十四页，共31页现在学习的是第十五页，共31页现在学习的是第十六页，共31页凝胶电泳凝胶电泳和和现在学习的是第十七页，共31页me分离分离DNA并用并用六氢吡啶切割六氢吡啶切割现在学习的是第十八页，共31页5 5、SouthwesternSouthwestern杂交杂交6 6、NorthwesternNorthwestern杂交杂交现在学习的是第十九页，共31页.PCR.PCR技术技术 1 1、基因扩增原理条件、基因扩增原理条件 现在学习的是第二十页，共3

3、1页现在学习的是第二十一页，共31页现在学习的是第二十二页，共31页ParameterConcentrationTemplatepHdNTPsGelatinPrimersMg2+ oncentrationEnzymeTotal volume10 attomoles(1106 molecules)8.4（10mM Tris-Hcl）200 M(each one)100 g/ml (optional)0.5 M(each one);(0.11.0M)0.5mM50% at 95 for 40 min1.110-4 substitutions per cycle0.5mM10mM5 to 3only5 adenosines现在学习的是第二十六页，共31页现在学习的是第二十七页，共31页 3 3、PCRPCR用于融合基因的克隆用于融合基因的克隆 现在学习的是第二十八页，共31页.体外转录与体外翻译体外转录与体外翻译1 1、体外转录系统、体外转录系统现在学习的是第二十九页，共31页. .基因瞬间表达与稳定表达基因瞬间表达与稳定表达2 2、常用的体外翻译系统、常用的体外翻译系统 小麦胚、兔网织红血球小麦胚、兔网织红血球下节

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