弯曲菌属Campylobacter的检验

1、弯曲菌属Campylobacter的检验一类呈逗点状或S形的革兰氏阴性杆菌，广泛分布于动 物界，其中有些可引起动物和人类腹泻、胃肠炎和肠道 外感染。目前弯曲菌属有18个种（含亚种），对人类致病的主 要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌的胎儿亚种，前者引起人 类急性腹泻，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑 膜炎等，其次是胎儿弯曲菌和大肠弯曲菌等。1983年分离的幽门弯曲菌则与慢性胃炎和胃溃疡、十二指肠溃 疡有关。兽医临床上常见的有五个种（含亚种）：空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌（胎儿亚种和性病亚种）、小肠弯曲菌、幽门弯曲菌。其中以空肠弯菌最多见，胎儿亚种次之。致病性 空肠弯曲菌：弓I超多种动物的腹泻和人的急性胄

2、 肠菽与食物中毒，也可引超绵羊流产，禽类昭传 染肝炎。 胎儿弯曲菌：a. 月台丿J亚种：致绵羊痣产和牛的徽发比生流产感染 人引起流产，早产，类似布鲁氏杆菌疗状b. 性病亚种： 致牛流产和不育” 存在于牛阴道粘液, 流产胎儿组织，经更配传染.（一）形态与染色1、0.2-0.4 X 卩m G-,呈弧形、S形或海鸥展翅状，不易着色；2、无芽孢，一端或两端各有一根鞭毛，运动活泼，形态似霍乱弧菌；3、 从微需氧到厌氧，CO2有利于其生长。（二）培养特性? 微需氧，最适生长环境：氧气5%、二氧化碳10%、氮 气85%;通常42C初分离空肠弯和大肠弯曲菌，其他菌株37C生长良好。? 营养要求高，普通培养基不

3、生长，常用含头孢哌酮的选择性培养基，以抑制肠道正常菌群? 含血的Skirrow培养基、头孢哌酮-万古霉素-两性霉素琼脂培养基（CVA和不含血的碳-头孢哌酮-去氧胆酸盐（CCDA、碳基选择性培养基（CSM和半固体动力培养 基等常用于分离该属的细菌。? 在凝固血清和血琼脂培养基上培养36小时可见无色半透明毛玻璃样小菌落，单个菌落呈中心凸起，周边不规贝畀无溶血现象。（四）抵抗力? 抵抗力较弱，易被干燥、直射日光及弱消毒剂所杀灭，56C、5min可被杀死。但耐寒，在 4C冰箱或水中可存 活4周。? 对红霉素、新霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感。但近年发现了不少耐药菌株。（五）抗原构

4、造? 本菌抗原构造比较复杂，与肠道杆菌一样具有O H和K抗原。? 根据0抗原，可把空肠弯曲菌分成 45个以上血清型。?目前分型没有被广泛应用。（六）毒力? 本菌具有粘附定居和入侵上皮细胞的能力，通过产生的肠毒素、细胞毒素和内毒素等多种毒力因子致病，病变部位通常在空肠和回肠，也可蔓延至结肠。（七）致病性可引起人畜急性传染病一一弯曲菌病。1、带菌者：动物和人类，经肠道或生殖道排出；2、感染：经口（污染的食物或水）；经产道感染婴儿；3、临床症状：潜伏期 1-10d，一般3-5d。（1）肠炎：腹泻、腹痛、呕吐及发热等，初为水样，继 而转为粘液便，少数呈脓血便。（2）肠道外感染：可致菌血症、心内膜炎、脑

5、脊髓膜炎、 血栓性静脉炎、关节炎、肺脓肿和腹膜炎等。（3）母畜感染：上呼吸道症状、肺炎、发热及菌血症；死胎或流产；新生畜败血症及脑脊髓膜炎。（八）微生物学诊断1粪便直接镜检，G-呈弧形、呈投镖式运动。2核酸检测粪便仏粪便胃扌妾暫極亍G-皇弓瓜开玄“ 皇按鲁武运动。N片亥酉麦椒：则粪彳更普曲聞和玄A 基体夕料扩坦主月鬲/大麻苓曲圍为花歼海培齐 粪便箸标本百T 松神迭拜千板遴彳亍 分离. 書彳敛玄环境培齐。空険 / 犬険夯曲主 七&温度为斗3 U , 土咅养 N4h可观蔡为压曰遜专闰扁平辿缭不整白勺惹延主七W白勺聞落细菌鉴定1 为氧化酶阳性，G-体弯曲或呈S型口2蔡口定酸、头抱嚏吩敏感试验=空肠弯

6、曲菌对蔡呢酸敏感*嗟吩耐药；胎儿弯曲菌对Cd蔡堆酸耐药 对头砲嚏吩敏感。UT马尿酸盐试验：有助于鉴定空肠弯曲菌空 肠亚种，凡试验阳性、在429条件下生长, 氧化酶阳性且与镜检形态相符者，即可报 告为空肠弯曲菌空肠亚种。4 醋酸U弓|0朵水解试验，空肠弯曲菌为阳性， 胎儿弯曲菌为阴性。5*用抗体包被的乳胶颗粒，遇到相应的弯曲菌 时便可出现反应。可用于鉴定空肠/大肠弯 曲菌，具有高度敏感性和特异性乜6JDNA探针：DNA-DNA杂交可以用于鉴别大肠弯曲菌与马尿酸水解阴性的空肠弯曲菌*区别空肠弯曲菌和其他的弯曲菌。（九）检验程序1. 标本米集采集粪便及剩余食物，立即送检，或将标本接种于卡-布运送培养

7、基中送检；对于高烧和脑膜炎者，于用药前抽取静脉血或脑脊液，注入布氏肉汤送检。2. 细菌检验（1）显微镜检查 悬滴法动力检查：显微镜下观察有无螺旋状或投标样运动，脑脊液标本经离心沉淀后再制成悬滴标本检查； 染色标本检查：取新鲜粪便或脑脊液离心沉淀物涂片、 革兰氏染色，找革兰氏阴性、弯曲呈S状或螺旋状杆菌，鞭毛染色见一端或两端单根鞭毛;(2)分离培养将标本直接接种于选择性培养基上，也 可将标本过滤后培养，弯曲菌形成的菌落为灰色、扁平、表面湿润、圆形凸起、边缘不规则，常沿穿刺线蔓延生长， 血平板不溶血，布氏肉汤中呈均匀混浊。3. 细菌鉴定? 弯曲菌属的鉴定较复杂，必须综合多种试验确定。? 通常氧化酶阳性、革兰染色阴性、弯曲呈S形或螺旋形， 进一步鉴定试验： 马尿酸盐水解试验：鉴别空肠弯曲菌空