磨盘草不同部位中鞣质含量测定VIP

1、磨盘草不同部位中鞣质含量测定张燕,张洪斌,胡海强,符冠烨【摘要】目的成立磨盘草不同部位中鞣质含量测定方式。方式以没食子酸为对照品,采纳磷钼钨酸-干酪素比色法测定鞣质含量。结果没食子酸浓度在210mg/L范围内与吸光度呈良好线性关系，平均加样回收率为,RS学，磨盘草叶、茎、根中鞍质含量别离为%结论本方式灵敏,准确性强,周密度高,重复性好,适用于磨盘草中鞣质含量的测定。【关键词】磨盘草；鞣质；含量测定Abstract：ObjectiveToestablishtheanalyticalmethodsfordeterminingthecontentsoftanninsindifferentvegeta

2、tiveorgansofAbutilonindicum(L.)Sweet.MethodsThecontentoftannins,expressedasgallicacidequivalents,wasmeasuredbyusingthephosphomolybdenumtungsticacid-caseincolorimetry.ResultsThegoodlinearitybetweenconcentrationsandabsorbancesofgallicacidwasfoundintherangeof210mg/L,theaveragerecoverywas%andRSDwas%,the

3、contentsoftanninsinleaves,stemsandrootsofAbutilonindicum(L.)Sweetwere%,%and%respectively.ConclusionTheproposedmethodissensitive,precise,accurateandreproducible,anditissuitableforthedeterminationoftanninsinAbutilonindicum(L.)Sweet.Keywords：Abutilonindicum(L.)Sweet；tannins；contentdetermination磨盘草Abuti

4、lonindicum(L.)Sweet为锦葵科苘麻属植物1,为1年生或连年生亚灌木状草本。全草入药,甘淡平,疏风清热、益气通窍、祛痰、利尿,用于伤风、久热不退、流行性腮腺炎、耳鸣、耳聋、肺结核、小便不利。全草含有萜类、甾类、酚类、黄酮苷、氨基酸、有机酸和糖等2。目前对磨盘草的研究要紧集中在生药学、部份化学成份等方面3-4,尚未见对第二生代谢产物鞣质的研究报导。鞣质又称单宁,是一类较复杂的酚类化合物,普遍存在于植物界。鞣质有普遍的用途,能凝固蛋白质且具收敛性,在抑菌、抗氧化、抗病毒、抗突变、抗衰老、抗过敏等方面有必然的作用5。本实验采纳磷钼钨酸-干酪素比色法,对磨盘草不同部位中鞣质含量进行了测定

5、分析,为磨盘草药材的质量操纵及第二生代谢产物的合理开发提供参考依据。1 仪器与试药UV-2100双光束紫外可见分光光度计(北京瑞利分析仪器公司）；BS224S电子天平（上海天平仪器厂）；CO25线超声波清洗器（上海超声仪器厂）。磨盘草采自海南五指山市文化村由琼州学院生命科学系林伟教授鉴定为磨盘草Abutilonindicum（L.）Sweet全草,将其洗净,分成根、茎、叶三部份,在60条件下烘干至恒重,粉碎,过40目筛,放在干燥器中备用。没食子酸对照品购于中国药品生物制品检定所（批号）。磷铝鸨酸试液按2005年版中华人民共和国药典（一部）附录XB方式配制6；干酪素为分析纯；水为二次蒸馏水；其他

6、试剂均为分析纯。2 方式与结果对照品溶液的制备周密称取没食子酸对照品50mg,置100mL棕色量瓶中，加水溶解并稀释至刻度,周密量取5mL,置50mL棕色量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即得mg/mL的对照品溶液。供试品溶液的制备精准称取磨盘草的根、茎、叶粉末各2g,别离置250mL棕色量瓶中，加水150mL,放置留宿，超声（250W,40kHz）处置10min,放冷，用水稀释至刻度，静置，滤过，弃去初滤液50mL,周密量取续滤液20mL,置100mL棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得标准曲线的制备周密量取没食子酸对照品溶液、mL别离置25mL棕色量瓶中，各加入磷铝鸨酸试液1mL,再别离加水

7、1一、10、九、八、7mL,用29%碳酸钠溶液稀释至刻度,摇匀。以随行试剂为空白。30min后,将对照品溶液在400900nm波长范围内进行光谱扫描，最大吸收波长为760nm于760nm波优势测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。计算得回归方程：Y=9X+9,r=9。结果说明，没食子酸浓度在210mg/L范围内，与吸光度呈良好的线性关系。含量测定方式总酚：周密量取供试品溶液2mL,置25mL棕色量瓶中，照“”项下方式，自“加入磷铝鸨酸试液1ml：起，加水10mL,依法测定吸光度,从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量(mg),计算即得。不被吸附的多酚：周密量取供试品溶液2

8、5mL,加至已盛有干酪素g的100mL具塞锥形瓶中，密塞，置30C水浴中保温1h,不时振摇,掏出,放冷,摇匀,过滤,弃去初滤液,周密量取续滤液2mL,置25mL棕色量瓶中，照项下方式，自“加入磷铝鸨酸试液1mL”起，加水10mL,依法测定吸光度，从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量(mg),计算即得。按下式计算鞍质的含量：鞍质含量=总酚量-不被吸附的多酚量。周密度实验精准量取对照品溶液2mL置25mL棕色量瓶中，照项下方式，自“加入磷铝鸨酸试液1mL”起，加水10mL,依法测定吸光度，重复测定5次，吸光度的RS乐，说明周密度良好。重复性实验精准称取同一供试品粉末5份,各2g,依照“”项下方

9、式制成供试品溶液,再依照“”项下方式测定吸光度,测得总酚吸光度的RSD=%,不被吸附的多酚吸光度的RS&，说明重复性良好。稳固性实验取显色后的同一供试品溶液,别离于0、一、二、3、h测定吸光度，结果供试品溶液在显色后3h内吸光度稳固，吸光度的RS氏%说明供试品溶液应在显色h后开始测定，并在3h内测定完毕。加样回收率实验取已知鞣质含量的同一样品5份,别离准确加入近等量的没食子酸对照品,按供试液的制备及“”项下方式操作,依法测定,并计算回收率。结果见表1。表1加样回收率实验结果（略）样品含量测定精准称取磨盘草的根、茎、叶粉末各2g,依照“”项下方式制成供试品溶液,再依照“”项下方式测定吸光度,依照

10、回归方程求出鞣质的含量,再计算出样品中鞣质的含量。结果见表2。表2磨盘草不同部位中鞣质的含量测定结果（略）3 讨论磷钼钨酸法的原理为：在碱性溶液中,酚类化合物能够将钨钼酸还原（使W6变成W5+），生成蓝色的化合物，颜色的深浅与酚含量呈正相关，且在760nm处有最大吸收。以干酪素作为鞍质吸附剂，能够选择性地吸附有生理活性的鞣质,因此测出的是有疗效的鞣质,而无疗效的鞣质如鞣酐等那么不被测定。以没食子酸为对照品,通过磷钼钨酸-干酪素比色法,采纳紫外可见分光光度计在760nm波优势测定了磨盘草不同部位中鞍质的含量,由表2可知,鞣质含量在磨盘草叶中最高,第二是根,茎中最低。可见,在磨盘草不同部位中鞣质含量有明显不同。本实验发觉,该方式在测定鞣质时,为了保证测定结果的准确,应现用现配且在避光的方式下进行。本实验结果说明,该方式具有操作简便、效率高、周密度高、稳固性和重复性好、测定结果靠得住的优势,适用于磨盘草中鞣质的定量分析,可为磨盘草药用质量评判提供靠得住的检测标准。【参考文献】1 中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴(第二册)M.北京：科学出版社,.2 中华本草编委会.中华本草(第14卷)M.上海：上海科学技术出版社,.3 DeokuleSS,PataleMW.PharmacognosticstudyofAbutilonindicum(L.)SweetJ.JournalofPhy