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文档简介
1、.课时作业四十三多聚酶链式反响扩增DNA片段PCR技术一、单项选择题1以下有关PCR技术的说法不正确的是 APCR技术需要特殊的DNA解旋酶 BPCR技术体外复制DNA以指数形式扩增 CPCR技术的原理与DNA复制的原理一样 DPCR技术的前提是有一段目的基因的核苷酸序列2以下有关PCR技术的表达正确的选项是 A作为模板的DNA序列必须不断的加进每一次的扩增当中 B作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断的加进每一次的扩增当中 C反响需要的DNA聚合酶必须不断的加进反响当中 D反响需要的DNA连接酶必须不断的加进反响当中3从2019年初到如今,青岛某实验基地已孕育出上百只转基因克隆羊,它们的体内分别携
2、带包括干扰素、抗凝血酶素、乙肝外表抗原在内的多种药用蛋白基因。这意味着,它们可以通过产奶的方式源源不断地提供药用蛋白基因,其应用前景非常光明。在其实验研究过程中,经常利用PCR技术制取大量的有关药用蛋白基因来供实验用。以下有关PCR技术的表达中,不合理的是 APCR扩增反响中参加引物的作用是结合在模板DNA上,提供DNA延伸起始位点 BDNA聚合酶的作用是从引物的5端开场催化DNA链的延伸 CPCR技术根据是DNA的热变性原理 DPCR的反响过程一般经历三十多个循环,每次循环都包括变性、复性、延伸4关于PCR技术以下说法中错误的有几项关于复性的目的是使原来分开的DNA的两条单链重新连接成双链P
3、CR技术是扩增完好的DNA分子DNA聚合酶不能从头开场合成DNA,只能从5端延伸DNA链DNA引物在细胞外可在DNA聚合酶的作用下合成 A有一项 B有二项 C有三项 D有四项5聚合酶链式反响PCR技术是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反响组成一个周期,循环进展,使目的DNA得以迅速扩增,其简要过程如以下图所示。以下关于PCR技术的表达,不正确的选项是 第5题图 APCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术 B反响中新合成的DNA又可以作为下一轮反响的模板 CPCR技术中以核糖核苷酸为原料,以指数方式扩增 D应用PCR技术与探针杂交技术可以检
4、测基因突变6退火温度是影响PCR特异性的较重要的因素。变性后温度快速冷却至4060,可使引物和模板发生结合。PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合,原因不包括 A由于模板DNA比引物复杂得多 B引物和模板之间的碰撞结合时机远远高于模板互补链之间的碰撞 C参加引物的量足够多而模板链数量少 D模板链加热解旋已经变性不可能再次结合7PCR利用了DNA热变性的原理,PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器,对PCR过程中“温度的控制的说法错误的选项是 A酶促反响需要高的温度,是为了确保模板是单链 B延伸的温度必须大于复性温度,而小于变性温度 CDNA聚合酶具有耐高温的才能 DDN
5、A解旋酶具有耐高温的才能8关于PCR 技术的以下表达错误的选项是 APCR反响中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反响 BPCR呈指数扩增DNA片段是因为上一轮反响产物可作为下一轮反响模板 C假设需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的PCR技术 DPCR反响包括屡次循环,每次循环包括三步:变性、复性和延伸9“X基因是DNA分子上一个有遗传效应的片段,假设要用PCR技术特异性地拷贝“X基因,需在PCR反响中参加两种引物,两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子,如图2所示,其中第种DNA分子有几个图1图2第9题图 A2 B4 C6 D8
6、10如图中PCR第二轮产物a、b、c、d分别是以PCR第一轮产物的哪一条单链DNA为模板复制产生的第10题图 A B C D二、非选择题11在遗传病及刑事侦破案件中常需要对样品DNA进展分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进展分析研究的问题。据图答复相关问题。第11题图1在相应的横线上写出引物,并在复性这一步骤中将引物置于适宜的位置。2在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。3假设将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记,请分析循环一次后生成的DNA分子的特点:_,循环n次后生成的DNA分子中不含放射
7、性的单链占总单链的比例为_。4PCR反响过程的前提条件是_,PCR技术利用DNA的_原理解决了这个问题。5在对样品DNA进展分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可参加的物质是_。12多聚酶链式反响PCR是一种体外扩增DNA片段的技术。可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。答复以下问题:1细胞内DNA复制过程中,引物的作用是_,而且DNA复制的前提是_。2PCR利用了_原理,可通过控制温度来控制双链的解旋与结合。3PCR技术用到的酶是_,与细胞内DNA复制时发挥一样作用的酶相比区别在于_。4下面表格是DNA体内复制与PCR反响的部分比较结
8、果。通过比较分析,请推导出PCR反响合成DNA子链时能量来源于_。原料ATPDNA体内复制四种脱氧核苷酸需要PCR反响脱氧胞苷三磷酸、脱氧腺苷三磷酸脱氧胸苷三磷酸、脱氧鸟苷三磷酸不需要5假设PCR反响所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,那么经过n次循环,具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为_。13多聚酶链式反响PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请答复以下有关PCR技术的根本原理及应用问题。1DNA的两条链是反向平行的,通常将_的末端称为5端,当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的_开场延伸DNA链。 2PCR利用DNA的热变性原理解决
9、了翻开DNA双链的问题,但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代,科学家从一种Taq细菌中别离到_,它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中别离出来,所用的培养基叫_。 3PCR的每次循环可以分为_三步。假设在PCR反响中,只有一个DNA片段作为模板,请计算在5次循环后,反响物中大约有_个这样的DNA片段。 4请用简图表示出一个DNA片段PCR反响中第二轮的产物。14近10年来,PCR技术多聚酶链式反响成为分子生物学实验室的一种常规手段,其原理是利用DNA半保存复制,在试管中进展DNA的人工复制如下图。第14题图1加热使DNA双链翻开,这一步是翻开_键,称为_,在细胞中是在_酶的作用下进展的。 2当温度降低时,引物与模板末端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成两条DNA分子,此过程中原料是_,遵循_。 3PCR技术的必需条件,除了模板、原料、_酶以外,至少还有三个条件,即:液体环境、适宜的_和_。4通过
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