胰岛素样生长因子-Ⅰ及其受体在脑膜瘤细胞增殖调节中的作用

1、    胰岛素样生长因子-及其受体在脑膜瘤细胞增殖调节中的作用        我们采用放射自显影方法检测脑膜瘤组织中胰岛素样生长因子-I(IGF-I)受体的表达和分布，并观察IGF-I对早期传代人脑膜瘤细胞增殖和DNA合成的影响。 一、材料与方法1. IGF-I受体自显影：IGF-I(Sigma公司)用氯胺-T法进行碘化标记1。10 m厚脑膜瘤或脑膜冰冻切片在适当条件下与125 I-IGF-I进行结合反应，洗脱，干燥，放射自显影。2. 细胞生长实验：1×105个细胞

2、/瓶植入25 cm2培养瓶中，无血清培养24 h后，实验组分别加入1×10-111×10-7 mol/L的IGF-I，对照组加入0.1%牛血清白蛋白(BSA)，5 d后收集细胞计数。3. 氚标胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺合实验：3×104个细胞/孔植入24孔培养板，无血清培养24 h后，实验组分别加入1×10-121×10-7 mol/L IGF-I，对照组加入0.1%BSA或20%小牛血清的DMEM。共同培养22 h后每孔加入37 kBq 3H-TdR,继续培养6 h，收集样品用液体闪烁仪测定每孔每分钟的放射性活度计数值。二、结果1. IG

3、F-I受体的表达：所用7例脑膜瘤(内皮型3例、恶性2例、血管母细胞型1例、过渡型1例)组织中均可以见到IGF-I受体表达的银颗粒，分布于肿瘤细胞膜上，对照的脑膜中未见受体表达。2. IGF-I对脑膜瘤细胞增殖的作用：如表1所示，IGF-I以浓度依赖形式刺激脑膜瘤细胞的增殖，在1×10-9 mol/L时达最大值，与对照组相比差异有非常显著性(P0.01)。3. IGF-I对脑膜瘤细胞DNA合成的作用：如表2所示，5例脑膜瘤细胞在IGF-I作用下，3 H-TdR摄取率呈现剂量依赖形式上升，在1×10-9 mol/L或1×10-8 mol/L时达到最大值，为对照组的30

4、1%384%(P0.01)，EC50=(2.25±0.80)×10-11 mol/L。表1不同浓度IGF-I对脑膜瘤细胞数的影响(×105病例编号对照组(含0.1%BSA)实验组IGF-I浓度(mol/L)对照组(含20%血清)×10-11×10-10×10-9×10-8×10-711.26±0.171.27±0.191.61±0.242.58±0.281.99±0.241.53±0.185.56±0.3821.27±0.151.43&

5、#177;0.121.68±0.152.13±0.151.60±0.171.53±0.064.37±0.4231.08±0.131.36±0.241.80±0.252.31±0.231.96±0.321.76±0.254.02±0.36     注： 与对照组(含0.1%BSA)比较， P0.05， P0.01 表2IGF-I对脑膜瘤细胞3病例编号对照组(含0.1%BSA)IGF-I浓度(mol/L)对照组(含20%血清)×1

6、0-12×10-11×10-10×10-9×10-8×10-711 954±3622 783±4833 552±9164 985±312*6 928±451*6 447±451*6 369±540*9 483±55422 766±4124 738±6754 932±1 2037 791±1 210*10 639±1 551*6 561±9075 669±77512 552±1 28332

7、 613±3262 787±5814 303±6366 502±436*7 875±396*7 604±161*6 843±949*10 147±87042 096±4763 457±8724 049±9556 059±1 067*6 541±570*6 691±1 071*6 377±1 5818 386±1 02152 489±5313 366±6574 043±4837 188±391*8

8、371±501*7 255±1 9547 464±1 90810 064±1 084     注： 与对照组(含0.1%BSA)比较，P0.05，*P0.01     三、讨论生长因子可能以自分泌或旁分泌的形式参与脑膜瘤的增殖和分化2。本实验中7例脑膜瘤组织均有IGF-I受体的表达，而对照组的脑膜中没有表达，说明IGF-I受体在脑膜瘤组织中表达的特异性。在无血清培养条件下，IGF-I能有效地刺激脑膜瘤细胞的增殖和DNA合成，进一步说明脑膜瘤组织中存在IGF-I的功能性受体。而

9、且，培养的人脑膜瘤细胞能产生IGF-I，这些证据显示，由IGF-I组成的自分泌或旁分泌环路可能参与脑膜瘤细胞的增殖和分化3。作者单位：李东海（330006南昌，江西医学院附属第一医院脑外科）朱贤立（同济医科大学附属协和医院脑外科）参考文献1王浩丹，周申，主编. 生物医学标记示踪技术. 北京： 人民卫生出版社，1995.9-11.2Todo T, Adams EF, Fahlbusch R, et al. Autocrine growth stimulation of human meningioma cells by platelet-derived growth factor. J Neurosurg, 1996,84:852-859.3Glick RP, Unterman TG, Vander WM, et al. Insulin and insulin-