细菌的人工培养方法和意义(平板划线)

1、第三单元 细菌的人工培养主讲人：齐雪茹廊坊职业技术学院动物科学系人工培养细菌的意义n在医学中的应用：在医学中的应用：诊断；细菌鉴定；生物制品。诊断；细菌鉴定；生物制品。 n在工农业生产中的应用：在工农业生产中的应用：细菌在培养过程产生多种代谢细菌在培养过程产生多种代谢产物，经过加工处理，可制成抗生素、维生素、氨基酸、产物，经过加工处理，可制成抗生素、维生素、氨基酸、有机溶剂、酒、酱油、味精等产品有机溶剂、酒、酱油、味精等产品。 n在基因工程中的应用：在基因工程中的应用：制备出胰岛素和干扰素等生物制制备出胰岛素和干扰素等生物制剂。剂。 细菌的人工培养n一、培养基一、培养基n二、细菌接种技术二、细

2、菌接种技术n三、细菌生长结果观察三、细菌生长结果观察细菌的人工培养n一、培养基一、培养基 概念概念: 培养基是用人工方法将多种营养物质按培养基是用人工方法将多种营养物质按照各类微生物生长的需要而合成的一种混合养料。照各类微生物生长的需要而合成的一种混合养料。 任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素：营养要素： 碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理高压蒸汽灭菌按物理状态不同划分按物理状态不同划分固体培养基固体培养基 液体培养基液

3、体培养基在液体培养基中加入一定量凝固剂，使在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态，琼脂含量一般为其成为固体状态，琼脂含量一般为1.5%-2.0%1.5%-2.0%琼脂含量一般为琼脂含量一般为0.2%-0.7%不加任何不加任何凝固剂凝固剂半固体培养基半固体培养基固体培养基常用来进行微生物的分离、固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏鉴定、活菌计数及菌种保藏 观察微生物的运动特征、分类鉴定及观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定噬菌体效价滴定 用于增菌，大规模工业生产及在实验用于增菌，大规模工业生产及在实验室进行微生物的研究室进行微生物的研究 培养基的分类：培

4、养基的分类：固体培养基固体培养基半固体培养基半固体培养基 液体培养基液体培养基按用途不同划分按用途不同划分基础培养基基础培养基鉴别培养基鉴别培养基含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物。比如物。比如 肉汤培养基。肉汤培养基。选择培养基选择培养基利用细菌代谢产物不同而使指示剂显色反应利用细菌代谢产物不同而使指示剂显色反应不同的原理，鉴别和鉴定细菌。如不同的原理，鉴别和鉴定细菌。如麦糠凯琼麦糠凯琼脂培养基脂培养基。营养培养基营养培养基在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于物质，抑制不需要

5、的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。所需微生物的生长。用来将某种或某类微生物用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。从混杂的微生物群体中分离出来。如如SS琼脂培琼脂培养基。养基。在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。如类营养丰富的培养基。如血琼脂培养基。血琼脂培养基。特殊培养基特殊培养基如如厌氧培养基厌氧培养基。用于厌氧菌的培养。用于厌氧菌的培养。细菌的人工培养细菌的人工培养n培养基的制备：培养基的制备：细菌的人工培养细菌的人工培养n二、细菌的接种技术二、细菌的接种技术 n分离培养接种法平板划线法、平行划线法n纯

6、种细菌接种法 固体斜面培养基接种法 液体培养基接种法 半固体培养基接种法 细菌的人工培养平板划线分离培养法 菌落菌落平行划线法平行划线法固体斜面接种法 （1）用左手大姆指、食指和无名指夹住菌种试管和待接种和斜面试管，右手拧松棉塞、不取下。（2）右手拿接种环，在火焰上烧灼灭菌，特别是箍处。（3）火焰边取下两个棉塞，不能放下；烧灼管口一周。（4）将接种环伸入试管内，冷却后，轻轻挑取少量菌体，立即将接种环抽出。（5）火焰旁将沾有菌种的接种环迅速伸到斜面培养基的底部，由里向外画蛇形细线，线要画得细些。（6）抽出接种环后，烧管口，塞棉塞，接种环灭菌。液体培养基接种液体培养基接种固体斜面培养基接种固体斜面培养基接种细菌的人工培养n三、细菌生长结果观察三、细菌生长结果观察固体琼脂平板上固体琼脂平板上菌落菌苔nEMB琼脂平板上大肠菌菌落具有金属光泽SS琼脂平板上大肠杆菌为粉红菌落半固体培养基观察细菌动力无运动性无运动性 有运动性有运动性表面生长表面生长 沉淀生长沉淀生长 混浊生长混浊生长 液体培养基上生长现象复习思考题：n1