2.1 微生物的实验室培养-人教版高中生物选修一练习

1、知识像烛光，能照亮一个人，也能照亮无数的人。-培根2.1 微生物的实验室培养学校:_姓名：_班级：_考号：_一、单选题（本大题共30小题，共60.0分）1. 下列有关实验室中微生物培养和分离的叙述错误的是A. 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵B. 高温灭菌的目的是杀死所有微生物C. 划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落D. 稀释涂布平板法可用于计数活菌数目2. 下列有关微生物培养的叙述，正确的是( )A. 不同种类细菌的生长均需要相同碳源B. 常用液体培养基分离获得细菌单菌落C. 平板划线法是微生物接种的唯一方法D. 实验室常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌等3. 下列关于微生物实验室培

2、养的叙述，错误的是( )A. 平板划线法是在培养基上连续划线将聚集的菌种逐步稀释分散B. 培养霉菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性C. 培养硝化细菌时可不用在培养基中加有机碳源D. 培养乳酸菌时需要提供无氧的条件4. 下图是实验室使用某种接种方法在培养基上培养某种微生物的结果，相关叙述不正确的是A. 该图最可能是用平板划线法进行接种B. 该种微生物有可能是 H5N1病毒C. 如果培养的是尿素分解菌，可加入酚红指示剂鉴定D. 该接种方法不能用来准确统计样品中活菌的数目5. 下列是一些关于微生物的培养和应用的基本理论和基础知识，其中都正确的一组是 接种环、玻璃器皿（如培养皿等）可以通过灼烧灭菌和

3、干热灭菌  人工配制的培养基常需要调 PH，其应在分装灭菌前进行 超净工作台、接种室、空气可以通过紫外线消毒  菌种的长期保存通常接种在试管的固体斜面培养基上， -40C 下进行  用涂布稀释平板法统计菌落数的缺点是不能观察到微生物的的形态、大小、结构   实验室测定土壤中细菌的数量时，选取的稀释度的要求通常分别是： 103、104、105，A. B. C. D. 6. 在实验室培养微生物，配制培养基时一定要加入的物质是A. 碳源B. 氮源C. 维生素D. 无机盐7. 微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒，以下理解错误的

4、是A. 灭菌是指杀灭物体内外所有微生物的细胞、芽孢和孢子B. 常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法等C. 灼烧法灭菌主要对象是金属器具D. 常用灭菌方法有灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法和紫外线灭菌法8. 下列有关微生物实验室培养的说法正确的有( )A. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板B. 分离能分解尿素的细菌时要以尿素作为培养基中唯一的氮源C. 培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性D. 稀释涂布平板法和平板划线法均可以统计待测菌液中的活菌数目9. 实验室保存的菌种W不慎被其它杂菌污染，下面罗列了若干种消灭杂菌、获得纯种的方法，其中合理的有几项（

5、） 从物理性质的角度看，选择培养基多属于固体培养基根据微生物对特殊营养物的需求，在培养基中增减不同的营养物根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸根据微生物对抗生素敏感性的差异，选择使用添加不同抗生素的培养基使用固体培养基，采用划线法接种获得单菌落，根据菌落特征甄别筛选后继续培养利用高温高压消灭不需要的杂菌A. 3项B. 4项C. 5项D. 6项10. 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（）A. 实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B. 接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C. 使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处

6、理，以免污染环境D. 在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染11. 有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。下列叙述错误的是（）A. 在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以原油为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于选择培养基B. 无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染C. 为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈小说明该菌株的降解能力强D. 通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌

7、12. 微生物的实验室培养，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵。下列无菌操作中，错误的是（）A. 对实验用的培养基，采用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌B. 对锥形瓶、塞上棉塞的试管、吸管等，用干热灭菌箱进行灭菌C. 对操作者的双手、衣着以及操作空间等，采用紫外线进行消毒D. 对试管口、锥形瓶口等部位，通过火焰灼烧进行灭菌13. 下列关于实验室培养微生物所用的培养基的说法中，正确的是（）A. 所有培养基中都含有牛肉膏B. 所有培养基在使用前都要严格灭菌C. 所有培养基在配置时都要加入琼脂D. 所有培养基配置好后都要进行倒平板14. 下列有关实验室中微生物培养和分离的叙述错误的是（）A. 获得纯净培养

8、物的关键是防止外来杂菌的入侵B. 高温灭菌的目的是杀死所有微生物C. 划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落D. 稀释涂布平板法可用于计数活菌数目15. 有关微生物实验室培养的叙述,不正确的是A. 在熔化琼脂时,需要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊B. 培养基应先灭菌再分装到培养皿C. 统计样品中活菌数量时,应采用的接种方法是平板划线法D. 培养基应先调pH再进行灭菌16. 微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒，以下理解不正确的是( )A. 灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B. 任何消毒方法一般都不能消灭微生物的孢子和芽孢C. 灼烧法灭菌主要对象时金属器具，也可以是玻璃器

9、具D. 常用灭菌方法有灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法和紫外线灭菌法17. 在微生物的实验室培养实验中，将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37恒温箱的目的是（）A. 对比观察培养基有没有被微生物利用B. 对比分析培养基上是否生有杂菌C. 让未接种的培养基上也能长出菌落D. 为了下次接种时再使用18. 微生物的实验室培养可采用高压蒸汽、酒精擦拭、火焰灼烧等不同的灭菌或消毒方法，这些方法依次用于处理（）A. 接种针、手、培养基B. 器皿、接种针、手C. 培养基、手、接种针D. 菌种、手、接种针19. 在微生物实验室培养过程中，无菌技术是实验成功的关键环节。下列常用的无菌操作中错误的是（）A. 无

10、菌操作不要求杀死培养基内的一切微生物B. 用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒C. 实验操作过程中应在酒精灯火焰附近进行D. 玻璃器皿可用酒精擦拭来进行灭菌20. 下列关于微生物的实验室培养过程中的操作属于灭菌的是（）A. 接种前用酒精棉球擦拭双手和工作台面B. 牛奶在80下煮15min以杀死其中的微生物C. 接种前灼烧接种环D. 通过紫外光或者喷洒石炭酸溶液处理实验室21. 做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（）A. 高压蒸汽灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B. 倒平板时，应将打开的皿盖放到实验操作台一边，以免培养基溅到皿盖上C. 为防止污染，接种环经火

11、焰后应趁热快速挑取菌落D. 实验室培养硝化细菌时，培养基无需加入有机碳源22. 微生物的实验室培养要用到基础培养基，但培养不同的微生物还需满足其生长、繁殖的特殊需求下列有关说法正确的是（）A. 培养霉菌时需将培养基的pH值调至碱性B. 培养乳酸杆菌时需在培养基中添加维生素C. 在基础培养基中添加纤维素用于筛选能分解纤维素的菌种D. 培养酵母菌时需要提供无氧的条件23. 关于微生物的实验室培养，错误的是（）A. 培养基和需要保持干燥的培养皿都用高压蒸汽灭菌法进行灭菌B. 灭菌是杀死物体内外所有微生物包括芽孢和孢子C. 培养霉菌时需将pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或是微碱性D. 培养乳酸

12、杆菌时需要在培养基中添加维生素24. 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（）A. 实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B. 接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌C. 在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染D. 平板划线接种时，应先将皿盖打开并放置于桌面上，以便于划线操作25. 如图是在实验室中培养某种微生物的结果，相关说法错误的是（）A. 该实验所采用的接种方法为平板划线法B. 每次接种前都要将接种环进行灼烧灭菌C. 该接种方法常用于微生物的分离纯化D. 只有最后的划线区域才能得到单菌落26. 下列有

13、关培养基制备的叙述，正确的是（）A. 培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分B. 在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生糊底C. 在微生物的实验室培养中，培养皿可用70%酒精擦拭灭菌D. 倒平板时需将培养基冷却至室温，再在酒精灯火焰旁倒平板27. 下列在微生物的实验室培养过程中，关于平板划线操作的叙述正确的是（）A. 使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B. 打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞好棉塞C. 将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D. 最后应将平板倒置，放入培养箱中培养28. 在微生物的实验室培养中，下列哪项操作不需

14、要在无菌条件下进行（）A. 配制培养基B. 倒平板C. 接种D. 菌液稀释29. 下列有关微生物实验室培养的叙述，错误的是（）A. 样品中活菌数量统计时，接种方法应采用平板划线法B. 在溶化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊C. 灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术D. 接种时，接种环不能将培养基的表面划破30. .某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基，对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌，当培养基温度下降到50时，在酒精灯火焰附近倒平板，待培养基冷却至室温，按照下表处理。将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养23天，观察每个培养皿中的菌落特征和数目。下列关于该实验的评价不正确的

15、是 组别 处理 A组 打开培养皿盖，距地面0.3米处暴露15分钟 B组 打开培养皿盖，距地面0.6米处暴露15分钟 C组 打开培养皿盖，距地面0.9米处暴露15分钟 D组 打开培养皿盖，距地面1.2米处暴露15分钟 E组 不打开培养皿盖 A. 上述实验的实验目的是探究不同高度空气中微生物的种类和数量B. 若E组的培养基表面有菌落生长说明了培养基制备不合格C. “待培养基冷却至室温”的目的是防止温度高烫伤实验操作者D. 实验室对使用过的培养基丢弃前应进行灭菌处理二、填空题（本大题共1小题，共7.0分）31. （7分）将葡萄球菌在含卵黄的固体培养基上培养时,葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，形成的菌落

16、周围会出现特有的乳白色乳浊环。某兴趣小组欲通过实验室培养和计数来检测某果汁中的葡萄球菌密度。回答下列问题：（1）配制分离葡萄球菌的培养基时，在培养基中加入一定量的卵黄液，卵黄液除了能给微生物提供_           、水和无机盐等营养物质外,还具有的作用是_。在配制培养基时若加入高浓度的NaCl溶液，就更容易筛选出葡萄球菌来，最可能的原因是_。（2）检测果汁中的葡萄球菌密度时，需先将果汁稀释。若要制成101倍的稀释样液，可取待检测果汁2.5mL加入_mL无菌水中。稀释后的样液需用_法接种在固体培养基上，利用这一方法进行活菌计数的原理

17、是_。（3）将103倍的稀释样液接种在固体培养基上培养一段时间后，统计三个平板上葡萄球菌菌落数分别是200、180、220。如果需要据此计算出果汁中葡萄球菌的密度，还需要知道的一个重要数据是_。三、探究题（本大题共1小题，共7.0分）32. （7分）常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌，回答下列问题：(1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要目的是_。获得纯净培养物的关键是_。(2)将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶

18、中，然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以木糖为唯一_的固体培养基上，在适宜的条件下培养一段时间，获得能利用木糖的多个酵母菌菌落。实验中所用培养基按功能属于_培养基。(3)若要检测土样中的活酵母菌含量，应采用_法接种。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的_。然后，将1 mL土壤溶液稀释分别稀释10倍和100倍，每种稀释度各在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液，经过适当培养后，6个平板上的菌落数分别为59、57和205；2、7和5，据此可得出每升土壤溶液中的活菌数为_个。四、实验题（本大题共3小题，共26.0分）33. （6分）有些细菌可分解原油，从而消除由

19、原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题。(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上，纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和_。(2)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_。(3)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。34. (10分)无菌操作是微生物接种技术的关键：传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题：(1)下列各项哪些适用于消毒处理_。皮肤 

20、;饮用水 牛奶 注射器 培养皿接种环培养基果汁酱油    手术刀ABCD以上全部(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_，倒平板前要进行_。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。(3)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是_。右图是利用_法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：每次划线前接种环要_；冷却后从上一区划线末端开始划：首尾区_。(4)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对固体培养基应采用的检测方法是_，观察培养基上是否有菌落产

21、生。(5)利用培养基不仅可以分离培养大肠杆菌，也可以进行植物组织培养。与大肠杆菌培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入_。(6)有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素。结果发酵失败，原因是_。35. （10分）回答下列相关问题：（1）牛肉膏蛋白胨培养基是实验室培养细菌常用的培养基。其中牛肉膏提供的主要营养包括_（答两种以上）。（2分）（2）选择性培养基常利用“投其所好”和“取其所抗”两种策略。“投其所好”策略是利用分离对象对某一营养物质有“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物，可使分离对象大大增殖，在数量上超过其他微生物，达到富集培养的目的。如要分离分解

22、纤维素的细菌，需要在培养基中加入_，等长出菌落后，产生纤维素酶的菌落周围_。（2分）“取其所抗”策略是利用分离对象对某抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于其他微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机增殖，可达到富集培养的目的。如要筛选酵母菌等真菌，须在培养基中加入_以抑制细菌的生长。（3）某小组同学用稀释涂布平板法测定同一样品中的细菌数，用1 g样品与9 ml无菌水配制菌液，然后稀释倍数至106。涂布时取菌液0.1 ml。甲同学涂了一个平板，统计菌落是216；乙同学涂了两个平板，统计菌落数为25和231，计算平均值为178；丙同学涂了三个平板，统计数为26、230和22

23、5，计算平均值为160。你认为哪个同学的计数结果最接近真实值？_，原因是_。（2分）若最终的菌落最可信的数值为A，则1 g样品中的菌落数为_个。答案和解析1.【答案】C【解析】微生物培养过程中要进行无菌操作，防止外来杂菌的入侵，A正确；高温灭菌可杀死所有微生物，B正确；划线分离可在培养基上获得逐渐变稀分布的单菌落，C错误；稀释涂布平板法中根据菌落的数目可计数活菌数目，D正确。 考点：本题考查微生物培养的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。2.【答案】D【解析】试题分析：本题是关于微生物实验室培养的题目，根据选项涉及的具体内容回忆相关知识点然后分析判断 A、不同种类细

24、菌的生长所需要的碳源不同，自养型细菌不需要有机碳，异养型细菌需要有机碳；A错误 B、分离菌种获得单菌落所用的培养基是固体培养基；B错误 C、微生物的接种方法有涂布平板法、平板划线接种法、斜面接种法、倾注培养法、穿刺接种法、液体接种法等；C错误 D、实验室常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌；D正确 故应选D3.【答案】B【解析】【分析】本题主要考查了微生物分离与培养的相关知识，熟记培养基的成分和条件，熟记不同微生物的代谢类型以及适宜生存的温度和PH等条件是解答本题的关键。【解答】A.平板划线法是在培养基上连续划线以纯化菌种的接种方法，A正确；B.培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，

25、B错误；C.硝化细菌属于自养型细菌，可不用在培养基中加有机碳源，C正确；D.乳酸菌属于厌氧型生物，培养乳酸菌时需要提供无氧的条件，D正确。故选B。4.【答案】B【解析】【分析】本题主要考查微生物培养的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力，熟记微生物培养的相关知识是解答此题的关键。【解答】A.据图分析可知，该图最可能是用平板划线法进行接种，A正确；B.病毒无细胞结构，必须依赖活细胞才能生存，不能在培养基上培养，B错误；C.如果培养的是尿素分解菌，尿素分解菌可将尿素分解产生氨，可加入酚红指示剂鉴定，C正确；D.平板划线法不能统计细菌数目，稀释涂布平板法可用来统计样品中

26、活菌的数目，D正确。故选B。5.【答案】C【解析】、接种环用灼烧灭菌，玻璃器皿用干热灭菌；测定土壤中细菌数量一般选 104、105、106倍的稀释液进行平板培养；而真菌的数量，一般选用102、103和104倍稀释6.【答案】D【解析】【分析】本题考查培养微生物培养基的组成，意在考查学生的识记和理解能力。培养基一般包括碳源、氮源、无机盐、水、特殊的营养物质等。【解答】A.一般来说需要添加碳源，自养型生物不需要，A不符合题意；B.一般来说需要添加氮源，固氮菌不需要，B不符合题意；C.不同的微生物对维生素的需求不同，有些需要，有些不需要，C不符合题意；D.配制培养基时一定要加入无机盐，D符合题意。故

27、选D。7.【答案】D【解析】【分析】解答本题的关键是：明确消毒和灭菌的区别，以及消毒和灭菌的相关方法，再根据题意作答。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。【详解】A.灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正确；B.日常生活中常用煮沸消毒法，巴氏消毒法，使用化学药剂进行消毒，B正确；C.将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，C正确；D.常用灭菌方法有灼烧灭菌法、高

28、压蒸汽灭菌法和干热灭菌，D错误。故选D。8.【答案】B【解析】【分析】本题考查微生物培养过程中的相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。【解答】A.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错误；B.分离能分解尿素的细菌时要以尿素作为培养基中唯一的氮源，B正确；C.针对不同的微生物， 所需培养基pH不同，C错误；D.分离纯化微生物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法，统计待测菌液中的活菌数目应用稀释涂布平板法，D错误。故选B。9.【答案】B【解析】【分析】本题主要考查微生物的培养及接种方法，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联

29、系，形成知识网络结构的能力。【解答】培养基的成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源和特殊营养物质，选择培养基的原理是根据微生物自身的特点，利用在培养基中加入某物质，使得目的菌能够存活，而阻止其他微生物的生长。常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。从物理性质的角度看，选择培养基多属于固体培养基，正确；根据微生物对特殊营养物的需求，在培养基中增减不同的营养物，正确；凡是具有细胞结构的生物遗传物质都是DNA，病毒的遗传物质是DNA或RNA，其中特殊营养物质常常是组成核酸的小分子物质，如碱基、核糖和脱氧核糖等，错误； 根据微生物对抗生素敏感性的差异，选择使用添加不同抗生素的培养基，正确；&

30、#160;使用固体培养基，采用划线法接种获得单菌落，根据菌落特征甄别筛选后继续培养，正确；利用高温高压消灭不需要的杂菌，同时菌种W也被杀死，D错误。综上所述，B符合题意。故选B。10.【答案】B【解析】【分析】本题考查微生物的消毒和灭菌，意在考查考生需要在进行实验操作中，注意总结，归纳相关知识形成体系。【解答】A.消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法和紫外线消毒，A正确；B.接种环、接种针等金属用具利用灼烧灭菌，在酒精灯外焰部位，B错误；C.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，C正确；D.实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染，D正确

31、。故选B。11.【答案】C【解析】【分析】从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。整个过程中需要保证无菌操作。本题主要考查微生物的选择培养过程，意在强化学生对微生物分离过程的认识和理解，强化无菌操作的要求，提高实验技能。【解答】A.欲筛选出能降解原油的菌株，培养基中应只含有原油而无其它碳源，这类培养基属于选择培养基，A正确； B.无菌操作要求在整个实验过程中操作都在酒精灯火焰附近进行，以避免周围微生物的污染，B正确； C.为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈越大说明该菌株的降解能力越强，C错误； D.实

32、验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌（如接种环）、干热灭菌（如培养皿）、高压蒸汽灭菌（如培养基）等，D正确。故选C。 12.【答案】C【解析】解：A、对实验用的培养基，采用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，A正确； B、对锥形瓶、塞上棉塞的试管、吸管等，用干热灭菌箱进行灭菌，B正确； C、对操作者的双手采用酒精进行消毒，C错误； D、对试管口、锥形瓶口等部位，通过火焰灼烧进行灭菌，D正确。 故选：C。微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌室常用的防止杂菌入侵的方法，微生物的实验室分离的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，通过不同方式的稀释，最终分离得到由单个细菌繁殖

33、而来的菌落。此题主要考查的是微生物的分离和培养中各种消毒、灭菌处理方法的选择的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。13.【答案】B【解析】解：A、天然培养基中不含有牛肉膏，A错误； B、微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染，故所有培养基在使用前都要严格灭菌，B正确； C、液体培养基在配置时不需要加入琼脂，C错误； D、液体培养基配置好后不要进行倒平板，D错误。 故选：B。培养基的类型： （1）按物理性质分： 名称特征功能固体培养基外观显固体状态的培养基主要用于微生物的分离、鉴定液体培养基呈液体状态的培养基主要用于工业生产（2）按化学性质分： 名称特征功能天然培养基用于化学

34、成分不明确的天然物质配成主要用于工业生产合成培养基用化学成分已知的化学物质配成主要用于微生物的分类、鉴定（3）按功能分： 种类制备方法特征用途选择培养基培养基中加入某种化学成分根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基加入某种试剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌本题考查培养基的相关知识，要求考生识记培养基的基本成分、种类及功能，能结合所学的知识准确判断各选

35、项。14.【答案】C【解析】解：A、微生物培养过程中要进行无菌操作，防止外来杂菌的入侵，A正确； B、高温灭菌可杀死所有微生物，B正确； C、划线分离可在培养基上获得逐渐变稀分布的单菌落，C错误； D、稀释涂布平板法中根据菌落的数目可计数活菌数目，D正确。 故选：C。微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌室常用的防止杂菌入侵的方法，微生物的实验室分离的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，通过不同方式的稀释，最终分离得到由单个细菌繁殖而来的菌落。本题考查微生物分离和培养的知识，着重考查平板划线法和稀释涂布平板法的原理及操作过程。15.【答案】C【解析】【分析】

36、 本题主要考查培养基的制作、无菌技术、微生物的计数及微生物的培养，意在强化学生对相关知识的识记、理解与运用。【解答】A.在熔化琼脂时,需要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊，A正确；B.培养基应先灭菌再分装到培养皿，B正确；C.样品中活菌数量统计时，接种方法应采用稀释涂布平板法，C错误；D.培养基应先调pH再进行灭菌，否则会被再次污染，D正确。故选C。16.【答案】D【解析】【分析】本题考查微生物实验室培养的灭菌和消毒方法，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。【解答】A.灭菌是指使用强烈的理化因素杀灭环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子，A正确；B.消毒是

37、使用较为温和的理化方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，不包括芽孢和孢子，B正确；C.灼烧法灭菌主要对象时金属器具，也可以是玻璃器具，C正确；D.常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法，D错误。故选D。17.【答案】B【解析】【分析】 本题主要考查微生物的培养的有关实验。解答本题的关键是掌握对照实验的设置原理则。【解答】通过设计对照实验，目的是为了检测培养基制备是否成功，即是否污染了杂菌，如果接种后的培养基和未接种的培养基均有菌落生成，则表示培养基受到污染；如果未接种的培养基上没有菌落生成，则表示培养基没有受到污染，综上所述， B正确，ACD错误。故选 B。 

38、; 18.【答案】C【解析】解：高压蒸汽气灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌；用酒精擦拭双手是消毒的一种方法；火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环、接种环等金属用具。 故选：C。1、消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。 消毒方法有煮沸消毒、化学药物消毒、紫外线消毒。 2、灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 实验室常用的灭菌方法 灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易

39、被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌； 干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌； 高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121的条件下，维持1530 min本题考查微生物的分离和培养，重点考查无菌技术，要求考生识记消毒和灭菌的概念，掌握消毒和灭菌的方法及实例，能结合所学的知识做出准确的判断。19.【答案】D【解析】解：A、无菌技术是用来防止培养物被其他外来微生物污染，而不是杀死培养基中的一切微生物，A正确； B、用酒精擦拭双手的方法是对操作者进行消毒，

40、B正确； C、实验操作过程中应在酒精灯火焰旁进行，防止瓶口的微生物污染培养基，C正确； D、对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭只能消毒不能灭菌，D错误。 故选：D。 在微生物的实验室培养中获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下几个方面， 对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒； 将用于微生物培养的培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌； 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行； 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。 本题考查微生物实验实培养中的无菌技术的知

41、识，考生识记无菌技术的基本要求和所包括的内容是解题的关键；此题也能够提高考生的实验技能，强化无菌操作的意识，培养严谨的科学实验的态度。20.【答案】C【解析】解：A、接种前用酒精棉球擦拭双手和工作台面属于消毒，A错误； B、牛奶在80下煮15min以杀死其中的微生物属于消毒，B错误； C、为防止杂菌污染，接种前灼烧接种环属于高温灭菌，C正确； D、紫外光或者喷洒石炭酸溶液处理实验室属于消毒，D错误。 故选：C。灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。 消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微

42、生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。本题考查灭菌和消毒的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力。21.【答案】D【解析】解：A、高压灭菌加热结束，等待压力表指针回到零后，才能开启锅盖，不能打开放气阀使压力表指针回到零，A错误； B、倒平板过程中不能将培养皿的皿盖完全打开，B错误； C、接种环火焰上灼烧后，待冷却后才可以快速挑取菌落，C错误； D、实验室培养硝化细菌时，培养基无需加入有机碳源，D正确。 故选：D。1、无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭

43、菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌； 2、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法。 3、平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。本题考查了微生物培养的相关知识，属于对识记、理解层次的考查，要求考生能够掌握高压蒸汽灭菌法的操作过程，识记倒平板的步骤以及相关注意点，掌握无菌技术的主要内容。22.【答案】B【解析】解：A、培养霉菌时需将培养基的pH值调至酸性，A错误； B、培养乳酸杆菌时需在培养基中添加维生素，B正确； C、用以纤维素为唯一碳源的培养基来筛选能分解纤维素的菌

44、种，C错误； D、酵母菌在用样条件下可大量繁殖，因此培养酵母菌时需要提供有氧的条件，D错误。 故选：B。培养基的概念及营养构成 （1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质 （2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的基本成分、种类及功能，能结合所学的知识准确判断各选项23.【答案】A【解析

45、】【分析】本题考查微生物培养过程的操作，意在强化学生对微生物培养的过程的识记、理解与运用，意在考查学生对知识的理解和记忆能力。【解答】A.培养基制作完成后，需要进行灭菌，常用高压蒸汽灭菌锅进行高压蒸汽灭菌法灭菌，而培养皿用干热灭菌，A错误；B.灭菌是杀死物体内外所有微生物包括芽孢和孢子，B正确；C.培养霉菌时需将pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或是微碱性，C正确；D.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，以防止杂菌污染，D正确。故选A。24.【答案】D【解析】解：A、实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒，A正确； B、接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰上灼烧灭菌，B正确；

46、C、在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染，C正确； D、平板划线接种时，将皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，而不是将皿盖打开，D错误。 故选：D。无菌技术：消毒和灭菌  消毒灭菌概念使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌适用对象操作空间、某些液体、双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等本题考查微生物的分离和培养

47、，要求考生识记无菌技术，掌握消毒与灭菌的区别及实例，掌握平板划线的具体操作，能结合所学的知识准确判断各选项。25.【答案】D【解析】解：A、由图可知，该实验所采用的接种方法为平板划线法，A正确； B、每次接种前都要将接种环进行灼烧灭菌，B正确； C、该接种方法常用于微生物的分离纯化，C正确； D、不一定是最后的划线区域才能得到单菌落，在之前的划线区域也可能会得到单菌落，D错误。 故选：D。划线分离操作中的有关问题： 在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环。 第一次灼烧每次划线之前灼烧划线结束灼烧目的避免接种环上可能存在的微生物污染培养基杀死上次划线结

48、束后接种环上残留的菌种杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种。 在进行第二次以及其后的划线操作时'要从上一次划线的末端开始划线。每次划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。本题结合模式图，考查微生物的分离和培养，重点考查平板划线法的相关知识，要求考生识记平板划线法的原理、操作步骤，注意操作中的相关细节，能结合图中信息准确判断各选项。26.【答案】B【解析】解：A、微生物培养基的主要营养物质有碳源、

49、氮源、水和无机盐等，有的还需要生长因子等特殊的营养，固体和半固体培养基需要琼脂，液体培养基不需要琼脂，A错误； B、在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊，B正确； C、在微生物的实验室培养中，培养皿要用干热灭菌法彻底消灭其中的微生物，C错误； C、倒平板时需将培养基冷却至室温，不需要在酒精灯火焰旁倒平板，D错误。 故选：B。培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；培养基的配制过程中，操作顺序如下：称量、溶化、调节pH、分装、加棉塞、包扎，灭菌等。本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及功能，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次

50、的考查。27.【答案】D【解析】解：A、使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中还需灭菌，因为接种环会感染细菌，故A错误 B、打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后还需通过火焰灭菌，再塞上棉塞；故B错误 C、将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线，还需盖上培养皿盖，防止空气中杂菌混入，故C错误 D、最后将平板倒置，防止盖子水滴落引起污染，有利培养基水蒸发；故D正确 故选D平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面；在数次划线后培养，可以分离由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的子细胞群为菌落转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线

51、；等待平板冷却凝固后需要倒过来放置，目的是防止培养皿内壁上出现的冷凝水污染培养基本题考查平板划线操作的相关知识，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构28.【答案】A【解析】解：A、配制培养基时不需灭菌，但配好的培养基需经过高压蒸汽灭菌，A正确； B、倒平板需在酒精灯火焰旁进行，严格无菌操作，B错误； C、接种时接种环需用灼烧灭菌，且整个过程中需在酒精灯火焰旁进行，C错误； D、菌液稀释整个过程中需在酒精灯火焰旁进行，严格无菌操作，D错误 故选：A微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染，常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌本题主要考查微生物实验室

52、培养的无菌操作，意在考查考生对相关知识的理解，把握知识间内在联系的能力29.【答案】A【解析】解：A、样品中活菌数量统计时，接种方法应采用稀释涂布平板法，A错误； B、琼脂属于多糖，在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊，B正确； C、灭菌和消毒都属于无菌技术，常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，静止的空气常用紫外线照射等都属于无菌技术，C正确 D、接种时，接种环不能将培养基的表面划破，D正确 故选：A 1实验室常用的消毒方法 煮沸消毒；化学药物消毒；紫外线消毒 2实验室常用的灭菌方法 灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰

53、的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌； 干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌； 高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121的条件下，维持1530 min 3、微生物常见的接种的方法 平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落 稀释涂布平板法：将待分离的菌

54、液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落 本题主要考查培养基的制作、无菌技术、微生物的计数及微生物的培养，意在强化学生对相关知识的识记、理解与运用30.【答案】C【解析】略31.【答案】（一）（1）碳源和氮源；鉴别葡萄球菌；葡萄球菌更耐受高浓度的NaCl溶液（2）22.5；涂布平板；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌（3）接种时所用样液的体积（二）（1）逆转录酶；无；PCR；一段已知目的基因的核苷酸序列（2）使大肠杆菌处于一种能吸收周围DNA分子的状态；重组表达质粒（3）DNA分子杂交【解析】【分析】本题主要考查微生物的培养及基因工程的相关知识，意在考查考生分析和解决问题的能力。【解答】（一）（1）配制分离葡萄球菌的培养基时，在培养基中加入一定量的卵黄液，卵黄液除了能给微生物提供碳源和氮源、水和无机盐等营养物质外，还具有的作用是鉴别葡萄球菌。在配制培养基时若加入高浓度的NaCl溶液，就更容易筛选出葡萄