药学专业高级职称考试考点讲析药物分析

1、医学高级职称考试习题库电子书系列#医学高级职称考试习题库电子书系列药学专业高级职称考试考点讲析第三节药物分析药物分析#医学高级职称考试习题库电子书系列#医学高级职称考试习题库电子书系列(一) 药物分析学的基本概念与任务药物分析学(PharmaceuticalAnalysis):药物分析学是一门研究和发展药品全面质量控制的 "方法学科”。主要运用化学、物理化学或生物化学的方法和技术研究化学结构已经明确的合 成药物或天然药物及其制剂的质量控制方法，也研究中药制剂和生化药物及其制剂有代表性的质量控制方法。药物分析的任务：静态的常规检验；运用现代分析的方法和技术，深入到工艺流程、反应历程、生

2、物体内代谢过程和综合评价的动态分析监控中。药品质量标准：是药品现代化生产和质量管理的重要组成部分，是药品生产、经营、使用和行政、技术监督管理各部门应共同遵循的法定技术依据，也是药品生产和临床用药水平的重 要标志。药典：是国家监督管理药品质量法定技术标准。主要药典：中华人民共和国药典(ChinesePharmacopoeia，Ch. P简称"中国药典")美国药典(TheUnitedStatesPharmacopoeia , USP)美国国家处方集(TheNationalFoianulary, NF)英国药典(BritishPharmnacopoeia , BP)日本药局方(J

3、P)欧洲药典(EuropeanPharmacopoeia , Ph. Eup)国际药典(The: InternationalPharmacopoeia , Ph. Int)我国对药品质量控制的全过程其指导作用的法令性文件主要有：药品非临床研究质量管理规定(GoodLaboratoryPractice , GLP)药品生产质量管理规范(GoodManufacturePractice , GMP)药品经营质量管理规范(GoodSupplyPractice , GSP)药品临床试验管理规范(GoodClinicalPractice , GcP)(二) 误差和分析数据处理测量值的准确度与精密度准确度(

4、accuracy)是指测量值与真实值接近的程度。误差是衡量准确度高低的尺度，有绝对误差和相对误差两种表示方法。精密度(precisio n):平行测定结果相互靠近的程度，用偏差衡量。可采用偏差、平均偏差、相对平均偏差、标准偏差和相对 标准偏差表示。系统误差和偶然误差：系统误差(systematicerror)也称可定误差，是由某种确定的原因造成的误差。其一般特点：a.有固定的方向和大小；b.在同一条件下，重复测定，重复出现 c.影响准确度，不影响精密度；d.可以消除。根据误差的来源，可分为方法误差、仪器或 试剂误差及操作误差等。偶然误差(accide ntalerror)也称随机误差，是由偶然

5、因素引起的误差。其一般特点：a.无固定的方向和大小；b.难以校正；c.服从正态分布(统计规律) 有效数字及其运算法则：有效数字指分析工作中实际能测得的数字。有效数字不仅能表示数 值的大小，还可以反映测量的精确程度。数字的修约规则：a四舍六人五成双.b 禁止分次修约；c运算时可多保留一位有效数字进 行；d修约标准偏差时，其结果应使准确度降低。有效数字的运算规则：a加减法：加减法的和或差是各个数值绝对误差的传递结果。结果的绝对误差必须与各数据中绝对误差最大（绝对误差最大）的数据相当。b 乘除法：乘除法的积或商的误差是各个数据相对误差的传递 结果。结果的相对误差应与各参加运算的数据中相对误差最大（有

6、效数字位数最少）的数据为准。有限量测量数据的统计处理：检验方法的系统误差采用t检验，检验方法的偶然误差采用F检验，异常值的取舍米用G检验。检验顺序：G 检验tF检验ft检验。（三）滴定分析法滴定分析法（titlimetricanalysis）是将一种已知准确浓度的试剂溶液（标准溶液）滴加到待测物的溶液中，直到所加的试剂与待测组分按化学计量关系定量反应为止，然后根据标准溶液的浓度和所消耗的体积，算出待测组分的含量。基本概念化学计量点（stoichiometricpoint,sp）: 滴加标准溶液与待测组分恰好完全反应之点。指示剂（in dic3ator）:滴定分析中能发生颜色改变而指示终点的试剂

7、。滴定终点（titrati onen dpo int, ep）:指示剂变色之点。终点误差（titrati onen dpo in terror, TE）：实际分析操作中指示剂变色点与化学计量点之间的差别。基准物质（primarystandard）:能用于直接配制或标定标准溶液的物质。其应符合以下要求：必须具有足够的纯度（99 . 9%），所含杂质不影响滴定反应的准确度；物质组成与化学式应 完全符合；性质稳定；具有较大的摩尔质量；参加滴定反应时，应按反应式定量进行，没有 副反应。标准溶液（standardsolution）:具有准确浓度的试剂溶液，在滴定分析中用作滴定 剂。配制标准溶液的方法有两

8、种：直接法：准确称取一定量的基准物质，用适当的溶剂溶 解后，定量转移至容量瓶中，然后根据称取物质的质量和溶液的体积即可算出该标准溶液的 准确浓度。标定法：先配成接近所需浓度的溶液，然后再用基准物质或已经用基准物质标 定过的标准溶液来标定它的准确浓度。滴定度（titer）:指每毫升标准溶液相当于被测物质 的质量（g或mg），以符号TT/B表示（其下标中T、B分别表示标准溶液中溶质、被测物质的 化学式）。滴定方式有直接滴定法、返滴定、置换滴定法和间接滴定法。按照化学反应分类的滴定分析法：酸碱滴定法、配位滴定法、氧化还原滴定法、沉淀滴定法、重量分析法。（四）电位法和永停滴定法直接电位法（离子选择性电

9、极法）选择合适的指示电极和参比电极，浸入待测溶液中组成原电池，测量原电池的电动势，利用电池电动势与被测组分浓度的函数关系直接测定试样中被测组分活度的电位法。测量方法有两次测量法、标准曲线法和标准加入法。电位滴定法利用电极电位的突变指示滴定终点的滴定分析方法，与指示剂滴定法比较，其特点是不用指示剂而以电动势的变化确定终点，更准确客观；不受样品溶液有色或浑浊的影响；可用于连续滴定、自动滴定、微量滴定及非水滴定；但操作和数据处理较麻烦。电位滴定终 点的确定主要有图解法和二阶微商内插法。永停滴定法根据滴定过程中电流的变化来确定化学计量点的电流滴定法。测定原理：将两个相同Pt电极插入样品溶液中，在两极间

10、外加低电压，连接电流计，进行滴定，根据可逆电 对有电流产生，不可逆电对无电流产生，通过电流计指针的变化确定SP特点是装置简单、准确度高，确定终点简便。（五）光谱分析法概论基于物质发射的电磁辐射或物质与辐射相互作用后产生的辐射信号或发生的信号变化来测 定物质的性质、含量和结构的一类仪器分析法，统称为光学分析法，主要包括三个主要过程： 能源提供能量、能量与被测物相互作用、产生检测讯号。光谱法和非光谱法光谱法利用物质与电磁辐射作用时，物质内部发生量子化能级跃迁而产生 的吸收、发射或散射、辐射等电磁辐射的强度随波长变化的定性、定量分析方法。其基本类 型包括吸收光谱法、发射光谱法和散射光谱法。非光谱法：

11、利用物质与电磁辐射的相互作用测定电磁辐射的反射、 折射、干涉、衍射和偏振等基本性质变化的分析方法，主要有折射法、旋光法、比浊法、X 射线衍射法。原子光谱法和分子光谱法原子光谱法是以测量气体原子或离子外层电子能级跃迁所产生的原子光谱为基础的成分分析方法，有原子发射光谱法、原子荧光光谱法及x射线荧光光谱法。 分子光谱法是由分子中电子能级、 振动能级和转动能级的变化产生， 主要有红外吸收光谱法、 紫外一可见分光光度法、分子荧光和磷光光谱法等。吸收光谱法和发射光谱法利用物质的吸收光谱进行定性定量及结构分析的方法为吸收光谱 法，主要有X射线吸收光谱法，红外吸收光谱法、紫外-可见分光光度法、核磁共振波谱法

12、。 利用物质的发射光谱进行定性定量的方法为发射光谱法，主要有原子发射光谱法、原子荧光光谱法、分子荧光和磷光光谱法等。（六）紫外-可见分光光度法（UV-vis）紫外-可见分光光度法是研究物质在紫外一可见光区（200nm-800nm分子吸收光谱的分析方法，属于电子光谱。I . ambert-Beer定律当一束平行单色光垂直通过均匀的非散射吸光物质溶液时，其对光的 吸光度与溶液的浓度及厚度成正比。按Beer定律，吸光度与浓度之间的关系应该是一条通过原点的直线，但实际上，往往会发生偏离。产生偏离的主要原因有化学因素（当溶液浓度较大时，吸光质点间可能发生离解、 缔合等相互作用，直接影响了对光的吸收）和光

13、学因素（非 单色光、杂散光、散射光、反射光、非平行光）。吸光度的加和原理溶液中存在多种无相互作用的吸光物质时，体系的总吸光度等于各种物质吸光度之和。定量分析方法单组分定量分析方法有吸光系数法、校正曲线法和对照法（外标一点法）。多组分定量分析方法有双波长法（等吸收双波长消去法、系数倍率法）、导数光谱法、褶合光谱法。定性分析根据紫外可见光谱中吸收峰的数目、吸收峰位置、吸收峰强弱以及吸收光谱形状等来进行定性鉴别。但结构相同的化合物应有相同的吸收光谱，但吸收光谱相同的化合物却不一定是化合物。（七）荧光分析法荧光是物质分子接受光子能量被激发后，从激发态的最低振动能级返回基态时发射出的光。根据物质的荧光谱

14、线位置和强度进行物质鉴定和含量测定的方法即荧光分析法。能够发射荧光的物质应同时具备两个条件：物质分子必须具有强的紫外可见吸收；物质分子必须有一定的荧光效率。影响荧光强度的外界因素有温度、溶剂、酸度、荧光熄灭剂以及散射光等。荧光光谱的特征荧光波长总是大于激发光波长、荧光光谱的形状与激发波长无光、荧光光谱与激发光谱存在”镜像对称"关系。荧光定量分析在低浓度时，溶液的荧光强度与溶液中荧光物质的浓度呈线性，这是荧光定量分析的依据。荧光定量分析方法有标准曲线法、比例法和联立方程式法。（八）红外吸收光谱法（IR）红外线是波长在0. 761000叩 范围内的电磁波。其中0. 782. 5艸 为近红

15、外区；2. 525m为中红外区；25m以上为远红外区。红外光谱学是用来研究红外辐射与物质 分子之间相互作用的学科，由于红外线能量较低，只能引起分子振动能级的跃迁，而振动能 级的跃迁会伴随许多转动能级的跃迁，所以红外光谱也称为振一转光谱。其可用于分子结构的基础研究、化合物组成的分析以及结构确定。红外光谱产生的条件红外辐射的能量必须与分子振动能级差相等；分子在振、转过程中其偶极矩必须发生变化。多原子分子振动的形式主要有伸缩振动和弯曲振动。红外光谱图纵坐标为透过率，横坐标为波长入（卩m）或波数1/入（单位：cm）。可以用峰数，峰位，峰形，峰强来描述。禾U用红外图谱中基团的特征吸收频率可以对化合物进行

16、 进行有机化合物的结构解析；利用其中特征峰的强度可以进行定量分析。通常把红外图谱分为特征区和指纹区。特征区：指40001300cm的高频区，其中每个吸收峰都和一定官能团相对应，包含 H的各种单键、双键和三键的伸缩振动及面内弯曲振动；特点是吸收峰稀疏、较强，易辨认。指纹区指1300400cm的低频区，包含 C-x（x : O, H, N）单键的伸缩振动及各种面内弯曲振动。特点是吸收峰密集、难辨认，但体现化合物的光谱特性很强。（九）原子吸收分光光度法（AAS）原子吸收分光光度法是根据蒸气相中被测元素的基态原子在对特征辐射的吸收来测定待测 试样中该元素含量的方法。当辐射投射到原子蒸气上时，如果辐射频

17、率相应的能量等于原子由基态跃迁到激发态所需要 的能量，就会引起原子对辐射的吸收，产生原子吸收光谱。原子由基态跃迁至第一激发态时 所产生的吸收线，简称共振线，又称元素特征谱线。在原子吸收光谱分析中，常用其作为分 析线。原子吸收线的特点是由吸收线的频率、强度和半宽度来表征的。吸收线的频率取决于 原子能级分布特征； 吸收线的强度取决于两能级之问的跃迁几率；半宽度是中心频率对应的吸收系数一半处谱线轮廓上两点间的频率差。原子吸收值与原子浓度的关系积分吸收：气态原子吸收共振线的总能量，吸收线轮廓所包围的面积，即积分吸收系数对频率的积分，其与待测原子的总数呈简单的线性关系。峰值吸收：通过测量中心频率处的峰值

18、吸收系数来测定吸收度和原子总数，峰值吸收测量的吸光度与试样中被测组分的浓度呈线性关系。采用测量峰值吸收的方法来代替测量积分吸收，必须满足：a发射线轮廓小于吸收线轮廓.b发射线与吸收线频率的中心频率重合。定量分析方法有校正曲线法（A-C 校正曲线）、标准加入法和内标法。（十）核磁共振波谱法（NMR）核磁共振波谱法是利用核磁共振波谱进行结构（包括构型和构象）测定、定性及定量分析的方法。核磁共振谱由化学位移、偶合常数及峰面积积分曲线分别提供了含氢官能团、核间关系 及氢分布等三方面的信息。化学位移3指质子由于在分子中所处的化学环境不同，而有不同的共振频率。影响化学位移的因素：氢核附近原子或基团的电负性

19、越大，3值增大；磁各向异性效应使处于负屏蔽区的氢核3值大，处于正屏蔽区的氢核3值小；氢键中质子3增大。分子间氢键使化学位移的改变与溶剂的性质和浓度有关。偶合常数由分裂所产生的峰裂距，反映偶合作用的强弱。（十一）质谱法（MS）质谱分析法是利用离子化技术，将物质转化为离子，按其质荷比的差异进行分离测定，从而 进行物质成分和结构分析的方法。在质谱中主要出现四种离子，即分子离子（分子在离子源中失去一个外层价电子而形成带正电荷的离子）、碎片离子（分子在离子源获得的能量超过其 离子化所需能量时， 分子中的某化学键断裂而产生离子）、同位素离子（含有同位素的离子）、 亚稳离子（离子脱离离子源后，在飞行中发生裂

20、解而形成的低质量离子）。分子离子的质量数服从奇偶规律。由C H 0组成的化合物，分子离子峰的质量数是偶数；由C H ON化合物中，含奇数个 N,分子离子峰的质量数是奇数；含偶数个N,分子离子峰的质量数是偶数。凡不符合这一规律的，不是分子离子峰。质谱中的大多数离子是根据有机物自身裂解规律形成的。由于键断裂的位置不同，同一分子离子可产生不同质量大小的碎片离子，而其相对丰度与键断裂的难易以及化合物的结构密切相关。因此，碎片离子的峰位及相对丰度可提供分子的结构信息。（十二）色谱分析法概论色谱过程指被分离组分在固定相和流动相中的多次 ”分配"平衡过程，不同组分通过固定相时的迁移速度不等，提供了

21、分离的可能性。根据色谱作用机制的不同，分为分配色谱法、吸附色谱法、离子交换色谱法和空间排阻色谱 法。分配色谱法是利用组分在流动相或固定相间溶解度差别实现分离。吸附色谱法是利用被分离组分对固定相表面吸附中心吸附能力的不同而实现分离。离子交换色谱法是利用被测组分离子交换能力的不同而实现分离。空间排阻色谱法是利用被测组分分子的线团尺寸而进行分离的。基本概念保留时间tR:从进样开始到某组分在柱后出现浓度极大时的时间间隔。死时间to :分配系数为零的组分即不被固定相吸附或溶解的组分的保留时间。分配系数K（平衡常数）：指在一定温度和压力下，在色谱柱中达分配平衡后，组分在固定相与流动相中的浓度比。容量因子k

22、（平衡常数）：指在一定温度和压力下，在色谱柱中达分配平衡后，组分在固定相与 流动相中的质量比。塔板理论假定：在色谱柱内一小段长度 H内，组分可以在两相中瞬间达到分配平衡。流动相进入色谱柱不是连续的，而是间歇式的，每次进入一个塔板体积。试样和新鲜流动相都加在第0号塔板上，且试样的纵向扩散可以忽略。分配系数在各塔板上是常数。速率理论vanDeemter方程式H=A+BTu+Cu（H塔板高度；A：涡流扩散系数；B：纵向扩散 系数；C:传质阻抗系数；u 流动相的线速度）。在低线速（0u最佳之间）时，u越小，B,u 项越大，Cu项越小，此时，Cu项可以忽略，B/u项起主导作用。u增加，H降低，柱效高。

23、在高线速时（u>u最佳）,u越大，cu项越大，B/u项越小，cu项起主导作用。u增加，H增 加，柱效降低。（十三）平面色谱法平面色谱法是在平面上进行分离的一种色谱方法，分为：薄层色谱法、纸色谱法和薄层电泳 法。基本概念溶质移动距离与流动相移动距离之比，或原点至斑点中心的距离与原点至溶剂前沿的距离之比，称为比移值（Rr）。组分与参考物质在同一条件下的Rf或移行距离之比称为相对比移值（Rr）。薄层色谱法吸附薄层色谱法是组分在薄层板上吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的过程。根 据各组分吸附系数不等实现分离。分配薄层色谱法是利用试样中各组分在固定相与流动相之 间的分配系数的不同，使得各组分在板上迁

24、移速度不同而获得分离。采用薄层色谱法可以对化合物进行定性、定量分析。定性分析主要通过比较比移值、斑点颜色或荧光的一致性、采 用已知标准物质对照（同一板上展开）、 采用多种展开系统的比移值与对照品一致。定量分析主要有洗脱法和直接定量法。纸色谱法是以纸纤维为载体，吸着在其上的水为固定相的色谱法，属于正相分配色谱。依据 组分分配系数的不同而达到分离，极性或亲水性强的组分，分配系数大，比移值小；极性弱 或亲脂性强的组分，分配系数小，比移值大。吸附薄层色谱中展开剂的选择原则根据被分离物质的极性，极性大，选择吸附剂的活性要小，而流动相极性要大。反之则相反。分离极性物质，加大展开剂的极性，会使极性物质的比移

25、 值变大。（十四）气相色谱法（GC）气相色谱法是以气体为流动相的柱色谱分离技术。气相色谱法按固定相分气一固色谱法和气一液色谱法，按分离原理分吸附色谱法和分配色谱法， 按柱子粗细分填充柱色谱法和毛细管柱色谱法。气相色谱的流动相一般为：氦气、氢、氮和二氧化碳等。气相色谱的固定相由固定液和载体组成。固定液按化学分类，可分为烃类、硅氧烷类、聚醇和聚酯类；按极性分为非极性固定液、中等极性固定液和非极性固定液。一般根据”相似性原则"选择固定液，即按被分离组分的机型或官能团与固定液相似的原则来选择。气相色谱的检测器常用的有热导检测器、氢火焰离子检测器和电子捕获检测器。热导检测器的检测原理是依据被测

26、组分与载气的热导率差别进行检测组分的浓度变化。氢火焰离子检测器是利用有机物在氢焰作用下，化学电离而形成离子流，根据离子流强度进行检测。电子捕 获检测器主要用于含电负性强的元素的物质。定性定量分析定性常用的方法有已知物对照法、利用相对保留值或保留指数定性、两谱联用等法。定量分析方法有归一化法、外标法和内标法。（十五）高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是在经典液相色谱法为基础，引入气相色谱法的理论和实验技术，以高压输送流动相，采用高效固定相及高灵敏度检测器，发展而成的现代液相色谱分析方法。高效液相色谱法按分离机制主要分为分配色谱法、吸附色谱法、离子交换色谱法和空间排阻色谱法。键合相色谱法指以

27、化学键合相为固定相的色谱法，可分为正相和反相键合相色谱法。正相键合相色谱法中的固定相为极性键合相，如氰基（-CN）、氨基（-NH）或二羟基键合硅胶，流动相为非极性或弱极性溶剂加极性调整剂，如烷烃加醇类；适用于溶于有机溶剂的极性至中等极性的分子型化合物。组分的保留和分离的一般规律是极性强的组分容量因子大，后洗脱出柱。反相键合相色谱法中的固定相为非极性键合相，如十八烷基硅烷（C18, ODS）辛烷基（C8）键合硅胶，流动相以水为基础溶剂，加入一定量与水混溶的极性调整剂，常用甲醇一水、乙腈一水 等;适用于非极性至中等极性的组分。组分的保留和分离的一般规律是极性弱的组分容量因子大，后洗脱出柱。高效液相

28、色谱的检测器紫外检测器、荧光检测器、安培检测器和蒸发光散射检测器等。定性定量分析定性常用的方法有色谱鉴定法、化学鉴定法和两谱联用等法。定量分析方法有归一化法、外标法和内标法。（十六）毛细管电泳法（CE）电泳是电解质带电粒子在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象，称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同，迁移速率不同，可实现分离。利用这种现象对物质进行分离分析的方法，即为电泳法。应用高电压、在毛细管内进行的电 泳分析，称为毛细管电泳法。毛细管电泳的特点分析速度快、分离效率高、溶剂和试样消耗极少，仪器相对简单、操作方 便、应用范围极广。毛细管电泳的分离模式毛细管区带

29、电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管胶束电动色谱、毛细管等 电聚焦电泳、毛细管等速电泳、毛细管电渗色谱等。（十七）药典概况中国药典的内容与进展中国药典的内容主要包括以下四个部分：a凡例：解释和使用中国药典正确进行质量检定的基本原则，并把与正文品种、附录及质量检定有关的共性问题加 以规定，避免在全书中重复说明。”凡例"中的有关规定具有法律约束力。b正文：所收载药品或制剂的质量标准。c 附录：制剂通则、通用检测方法和指导原则。d索引：中国药典书末分列中文索引和英文索引。主要国外药典a美国药典（IJSP-NF） .b英国药典（BP）; c日本药局方（JP）药品检验工作的机 构和基本程序药品检验工作

30、的机构：国家级药品检验所即中国药品生物制品检定所、各省、 市、自治区药品检验所。药品检验的基本程序：取样一鉴别一检查一含量测定一写出检验报 告。（十八）药物的鉴别试验鉴别试验（ide ntificati on test）:根据药物的分子结构、理化性质，采用化学、物理化学或生物学方法来判断药物的真伪。用来证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药 物，而不是对未知物进行定性分析。因为这些鉴别试验虽有一定的专属性，但不具备进行未 知物确证的条件，故不能鉴别未知物。一般鉴别试验（generalidentiflcationtest）:是指依据药物的化学结构或理化特性，通过化学反应来鉴别药物的真伪。

31、一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。专属鉴别试验（specificide ntificati on test）: 是证实某一种药物的依据， 是根据每一种药物的化学结构的差异或理化性质的不同，选用某些特有的灵敏的定性反应， 来鉴别药物的真伪，以区分同类或具有相同化学结构部分的各个药物单体。常用的鉴别方法有：a化学鉴别法：呈色反应鉴别法、沉淀生成鉴别法、荧光反应鉴别法、气体生成反应鉴别法、测定衍生物熔点法；b光谱鉴别法：紫外光谱鉴别法、红外光谱鉴别法；c色谱鉴别法：薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法、纸色谱法；d生物学法。影响鉴别反应的因素主要有：a溶液的浓度：主要指被鉴

32、别物质的浓度，其大小影响结果的判断。b溶液的温度：温度升高可使反应加快；过高则可使某些产物分解，导致颜色变浅， 甚至观察不到结果。c 溶液的酸碱度：使反应物处于活化状态、反应产物处于稳定和易于观 测的状态。d试验时间：有机化合物的化学反应较慢，需要一定的反应时间和条件。e干扰成分的存在：其他成分可能参加鉴别反应，于扰鉴别结果的判断。（十九）药物的杂质检查药物的纯度：是指药物的纯净程度。药物的杂质检查：杂质：药物中存在的无治疗作用的、影响药物稳定性和疗效、甚至对人体 健康有害的物质。杂质的来源：生产过程中引入、贮藏过程中产生。杂质的分类：依杂质来 源分类：一般杂质和特殊杂质；依杂质毒性分类：信号

33、杂质和有害杂质； 依杂质的结构分类: 有机杂质和无机杂质。杂质的限量检查：在不对人体有害、不影响疗效的情况下，允许药物中存在一定量的杂质。杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量，表示方法：或ppm（百万分率）；限量检查：药物中杂质的检查，一般不要求测定其含量，而只是检查杂质的量是否超过限量。杂质限量的计算：杂质限量=杂质最大允许量/供试品量x 100%=标准溶液的浓度x标准溶液的体积/供试品量x 100%即 L=Co/ SX 100%一般杂质的检查方法包括对氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、溶液颜色、易炭化物、 溶液澄清度、炽灼残渣、干燥失重、有机溶剂残留量的检查特殊杂质检查法：特殊杂质：在

34、该药物的生产和贮存过程中可能引入特有的杂质。可以利用药物和杂质在物理和化学性质上的差异进行检查常用的薄层色谱杂质检查法：杂质对照品法、供试品自身对照法、对照药物 法。高效液相色谱杂质检查法：峰面积归一化法、不加校正因子的主成分自身对照法、内标法加校正因子、外标法。气相色谱杂质检查法：同高效液相色谱法。（二十）药物定量分析与分析方法验证定量分析样品的前处理方法：不经有机破坏的分析方法包括：直接测定法、经水解后测定法 （碱水解后测定法、酸水解后测定法）、经还原分解后测定法。经有机破坏的分析方法包括： 湿法破坏、干法破坏。药品质量标准分析方法验证内容包括：准确度：是指用该方法测定结果与真实值接近的程

35、度，用回收率表示。精密度：是指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次测定所得结果 之间的接近程度。重复性：在相同条件下，由一个分析人员测定所得结果的精密度。中间精 密度：在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果的精密度。重现性： 在不同实验室由不同分析人员测定结果的精密度。专属性：指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的方法能准确测定出被测物的特性。检测限（limit ，Ofdetection , LOD）：是指试样中被测物能被检测出的最低浓度或量，是限度检验指标。它无 需测定，只要指出高于或低于该规定的浓度或量即可。定量限（limit of quanti

36、tation ,LOQ）是指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。线性：是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度或量直接呈正比关系的程度。范围：是指达到一定精密度、准确度和线性、测试方法适用的高低限度或量的区间。耐用性：是指 在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度。分析方法效能指标的具体应用：a用于鉴别试验：只要求专属性、耐用性.b 用于原料药中杂质测定和制剂中降解产物测定的方法：用于定量：除检测限不要求外，其余指标均要求。限度检查：只要求检测限、专属性、耐用性。c 原料、制剂的含量测定及溶出度测定：不 要求检测限和定量限，其余均要求。（二一）巴

37、比妥类药物基本结构和理化性质：为环状酰脲类镇静催眠药，是巴比妥酸的衍生物。本类药物在水中可 发生二级电离而显弱酸性，与碱溶液共沸即水解， 可与重金属离子反应产生沉淀或特殊的颜色，与香草醛可发生颜色反应。巴比妥类药物的紫外吸收特性随着电离级数不同发生显著变化。鉴别：可利用与重金属离子的沉淀或颜色反应；将其钠盐酸化后测定母体的熔点；利用不饱 和取代基（如司可巴比妥中的烯键）的还原性可使碘液褪色、使紫色的高锰酸钾变成棕色的二氧化锰。利用含芳环取代基的巴比妥类药物可与硝酸钾 -硫酸、硫酸-亚硝酸钠、甲醛-硫酸 反应发生颜色反应。含量测定：（1）银量法：利用巴比妥类药物可与银离子生成可溶性一银盐，稍过量

38、的银离子 可与巴比妥类药物形成难溶性二银盐沉淀，以此指示终点。溴量法：具有不饱和键的巴比妥类药物如司可巴比妥能与溴定量发生加成反应，可采用 溴量法测定其含量。（3）酸碱滴定法：由于本类药物呈弱酸性，可作为一元弱酸以标准碱液直接滴定，也可在非 水溶液中用强碱直接测定。（4）紫外分光光度法：本类药物在碱性介质中电离成具有紫外吸收的结构，可采用紫外直接 测定、提取分离后的紫外分光光度法以及差示紫外分光光度法进行含量测定。（二十二）芳酸及其酯类药物基本结构和理化性质：具有苯环和羧基结构，游离羧酸呈酸性，也可成盐或酯。水杨酸类药物的酸性受苯环、一 cOOH和其它取代基的相互影响，取代基为吸电子基，女口-

39、x , -NO-OH时，酸性增强；为供电子基，如-CH , -NH时，酸性下降。鉴别：不同结构的本类药物可与铁盐在不同介质中产生沉淀或颜色反应；含潜在芳伯氨基的化合物在水解后可发生重氮化一偶合反应；含酯键的化合物可水解， 生成沉淀、气体或颜色，并可测定沉淀的熔点进行鉴别。UV IR 亦可用于鉴别。特殊杂质检查：阿司匹林、对氨基水杨酸钠、羟苯乙酯、甲酚钠酸、氯贝丁酯等中特殊杂质 的检查。含量测定：(1)酸碱滴定法：直接滴定法：基于本类药物中游离羧基的酸性，可采用碱滴定 液直接滴定。水解后剩余滴定法：具有酯键结构的本类药物如阿司匹林、羟苯乙酯等，利用 其在碱液中水解的性质，定量加入过量的氢氧化钠溶

40、液，加热水解后，剩余的碱液用酸回滴 定。两步滴定法：第一步先中和酸性辅料及酸性杂质；第二步定量加入过量的碱液，加热水 解后，剩余的碱液用酸回滴定。(2) 亚硝酸钠滴定法：具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物可在盐酸条件下与亚硝酸钠定量 发生反应，借此测定含量。(3) 双相滴定法：利用苯甲酸钠易溶于水，但在用盐酸滴定过程中产生的游离酸能溶于有机 溶剂，不溶于水，为增大滴定突跃，加入乙醚使游离酸溶解以保证滴定反应完全。(4) 紫外分光光度法：可采用直接紫外分光光度法、离子交换一紫外分光光度法、柱分配色 谱一紫外分光光度法等法测定。HPLC法(二十三)芳香胺类药物基本结构和理化性质：本类药物包括芳胺类、

41、苯乙胺类、苯氧丙醇胺类药物。芳胺类药物中 的芳伯氨基或潜在芳伯氨基特性：重氮化一偶合反应；芳醛缩合成schiff碱；易氧化变色等。分子结构中的酯键或酰胺键易水解；除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具有 弱碱性。鉴别：结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物均可采用重氮化-偶合反应进行鉴别，如苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、对乙酰氨基酚、醋氨苯酚等。具有酚羟基的对乙酰氨基酚可与三 氯化铁试液反应显蓝紫色。利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物、与氯化钴生成亮绿色沉淀。可制备衍生物，测定其熔点进行鉴别。UV IR 亦可用于鉴别。特殊杂质检查：对乙酰氨基酚、盐酸普鲁卡因注射液中特殊杂质检查；苯乙胺类药物中

42、酮体 的检查。含量测定：(1) 亚硝酸钠滴定法结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物均可在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，用亚硝酸钠滴定法测定含量。测定条件：a加KBr增加反应速度；b加过量HCI加速反应；c室温条件下滴定；d 滴定管尖端插入液面下滴定。指示终点的方法：永停滴定法 和外指示剂法。(2) 非水溶液滴定法：基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因侧链叔胺氮具有弱碱 性，可采用该法测定含量。在滴定盐酸丁卡因时，因其在冰醋酸中碱性弱，加醋酐可增加其 碱性。因醋酐合乙酰氧离子比醋酸合质子的酸性强，可增加碱性。(3) 溴量法：苯乙胺类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及其注射液用此法。在酸性

43、溶液中，结构中酚羟基的邻对位活泼氢能与过量的溴定量地发生反应，剩余的溴采用碘量法测定，即可计算其含量。(4) 提取酸碱滴定法：药物的盐酸盐或硫酸盐易溶于水，而药物本身不溶于水，加适量碱化 试剂后，用适当的有机溶剂萃取，提取液蒸干后用中性乙醇溶解，用标准酸液直接滴定，或 加入滴定过量的标准酸溶液，用标准碱溶液进行回滴。(二十四)杂环类药物本类药物指碳环中含非碳原子的环状有机化合物，故所含类别较多：吡啶类、喹啉类、托烷 类、吩噻嗪类、苯并二氮杂卓类等。鉴别吡啶环的开环反应：戊烯二醛（koning）反应：本反应适用于吡啶环的a、a '位无取代基的异烟肼和尼可刹米；二硝基氯苯（Vongeric

44、hten）反应。 绿奎宁反应（Thalleioquin） 是奎宁和奎尼丁的特殊鉴别反应。含量测定（1）非水溶液滴定法：强酸滴定液置换出与游离碱结合的较弱的酸，即适用范围主要用于 kb<10的有机碱盐的含量测定。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使pKb为813的弱碱性药物采用本法滴定；无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：高氯酸 >氢溴酸硫酸盐酸硝酸，若置换出 的酸酸性较强，反应无法完成，此时可加入定量的醋酸汞冰醋酸溶液。（2）酸陛染料比色法：是利用碱性药物在一定的 pH条件下与某些酸性染料结合显色，进而用分光光度法测定药物含量的方法。主要

45、影响因素：水相最佳pH值、酸性染料及其浓度、有机溶剂的选择和水分控制。（二十五）维生素类药物维生素A为一个具有共轭多烯侧链的环己烯，具有UV吸收，存在多种立体异构化合物，易发生脱氢、脱水、聚合反应，其共轭多烯侧链易被氧化。鉴别：三氯化锑反应：在饱和无水 三氯化锑的无醇氯仿溶液中显蓝色，渐变紫红色。含量测定：紫外分光光度法（三点校正法），其原理：a杂质的吸收在310340nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小； b物质对光的吸收具有加和性。维生素B1是由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的季铵类化合物，其与盐酸成盐， 所以本品易溶于水，且水溶液呈酸性。其在碱性介质中可被铁氰化钾氧化

46、成硫色素，硫色素 溶于正丁醇显蓝色荧光，此即为维生素B。的特殊鉴别反应-硫色素反应。由于本品分子中有两个碱性伯胺和季铵基团，可采用非水溶液滴定法进行含量测定；本品分子中具有共轭双键结构，在紫外区有吸收，UV法亦可测定其含量。维生素C结构中具有极强还原性的二烯醇结构，易水解的内酯环，还有两个手性碳原子，使得本品具有旋光性。本品结构与糖类相似，具有糖的性质和反应。利用其还原性，可还原硝 酸银产生银沉淀，使2, 6-二氯靛酚变为无色，使其他具有颜色的氧化剂褪色或发生颜色改 变，如亚甲蓝、高锰酸钾、碱性酒石酸铜、磷钼酸等。同样利用其还原性，可采用氧化还原 滴定法如碘量法、2, 6-二氯靛酚钠滴定法测定

47、其含量；在测定复方制剂或生物样品中的VC时，可采用HPLC法。维生素D是开环的甾体：具有甾类化合物的显色反应；具有手性碳原子，因此具有旋光性；结构中具有紫外吸收特性的多烯等均可用于鉴别。中国药典采用正相高效液相色谱法（NP-HPLc）测定维生素D的含量，定量方法为内标法，内标物为邻苯二甲酸二甲酯。维生素E为苯并一二氢吡喃醇衍生物，有多种异构体。含量测定采用GC法,采用正三十二烷作为内标；HPLC也可用于本品的测定。由于本品具有荧光，亦可采用荧光分光光度法测 定含量。（二十六）甾体激素类药物甾体激素类药物含肾上腺皮质激素和性激素（雄性激素及蛋白同化激素、孕激素、雌激素）。 鉴别许多甾体能与强酸的

48、呈色反应； C17-a -醇酮基具有还原性，可使具有氧化性的四氮唑 盐、斐林试液、多伦试液等发生呈色反应；C3-酮基和 C20-酮基可与羰基试剂如2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼等形成黄色的腙；具有甲酮基或活泼亚甲基的甾体激素类药物能与亚硝基铁氰化钠、间二硝基酚、芳香醛类等反应呈色；制备衍生物测定其熔点；IR、UV亦可用于鉴别。特殊杂质检查采用 TLC法和HPLC法检查其他甾体（药物中存在的具有甾体结构 的其他物质）；有些甾体在合成中用二氧化硒脱氢，可能引入杂质硒，因其有毒，需进行检 查，可采用氧瓶燃烧破坏后，用二氨基萘比色法测定；GC法检查有机溶剂残留量；采用对照品比色法检查游离磷酸盐。

49、含量测定（1）比色法：a异烟肼比色法：主要用于 c3-酮基及某些其他位置上有酮基的甾体化合物，其在酸性条件下与异烟肼形成黄色异烟腙，在一定波长具有最大吸收， 采用对照品对照法进行含量测定。b四氮唑比色法：用于具有 C17-a -醇酮基的甾体化合物，该基团具还原性，可还原具有氧化性的四氮唑盐生成有色甲用甲，采用对照品对照法进行含量测定。cKober反应比色法：雌激素与硫酸-乙醇反应呈色，在一定波长处有最大吸收，采用对照品对照法 进行含量测定。（2）HPLC法：大多采用内标法测定。（3）UV法：甾体分子中具有共轭体系，在紫外区有吸收。（二十七）抗生素类药物3 -内酰胺类抗生素本类抗生素包括青霉素族

50、和头孢菌素族，结构中均含游离羧基，可与碱金属（Na 、K）或有机碱成盐。青霉素类和头孢菌素族均含手性碳，均具旋光性。青霉素类母核无共轭部分，但侧链多数有苯环等取代基；头孢菌素类的母核有共轭体系，所以3 -内酰胺类抗生素一般具有紫外吸收特性。3-内酰胺环为不稳定的大张力的四元环，其稳定性与含水量和纯度关系很大。本类抗生素的特殊杂质主要有高分子聚合物等，主要采用凝胶色谱法-自身对照外标法进行检查。含量测定：碘量法：利用青霉素或头孢菌素不消耗 碘，而其降解产物消耗碘的性质，采用剩余碘量法测定，并以标准对照法计算含量。氨基糖 苷类抗生素本类抗生素结构都是以碱性环己多元醇为苷元，与氨基缩合而成的苷，所以

51、一般具有碱性。本类抗生素分子中具有多个氨基酸，具有旋光性。鉴别反应：（l）Molisch 反应：具有五碳糖或六碳糖的氨基糖苷类抗生素经酸水解后，在盐酸作用下脱水生成糠醛或羟甲基糠醛，加入a -萘酚（红紫色）或蒽酮（蓝紫色）。（2）Elson-Morgan反应：本类药物经水解产生的N甲基-L葡萄糖胺在碱性溶液中与乙酰丙酮合成吡咯衍生物，再与对二甲氨基苯甲醛的酸性醇溶液反应，生成樱桃红色缩合物。（3）麦芽酚（Mohol）反应：链霉素水解得到的链霉糖经分子重排使环扩大形成六元环，然后消除N甲基葡萄糖胺，再消除链霉胍,生成a甲基-3 -羟基-y -吡喃酮（麦芽酚），该化合物与Fe 在弱酸性溶液中形成红

52、紫色配位化合物。（4）坂口 （Sakaguchi）反应：链霉胍的特有反应。链霉素的水解产物链霉胍与NaBrO反应的产物1； 8-羟基喹啉也和 NaBrO 反应得产物2。产物1和产物2再相互作用生成橙红色化合物。特殊杂质的检查：采用TLC法检查链霉素中链霉素B;采用衍生化后HPLC法检查的庆大霉素中组分 G含量测定：各国药典主要采用微生物检定法测定含量；体内抗生素的分析常用 HPLc法。四环素类抗生素母核 C4位上的二甲氨基具碱性，C1（位上的 酚羟基具酸性，故四环素类具有酸碱两性，可与碱和酸成盐。含有手性中心，具有旋光性。分子内具有共轭双键体系，在紫外区有吸收。分子中含酚羟基和烯醇基，可与金属离子形成 配位化合物或不溶性盐类。本类药物对氧化剂、酸、碱均不稳定易形成差向、脱水和异四环素。含量测定：各国药典多采用HPL（法测定含量。（二十八）药物制剂分析药物制剂分析特点检验项目和要求与原料药不同，一般不需完全重复原料药的检查项目，主要考虑在制