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文档简介
1、尿中尿中ALA的测定的测定目的目的原理原理操作步骤操作步骤结果计算结果计算评价评价注意事项注意事项目的目的掌握尿中ALA测定的原理和方法了解尿中ALA测定的临床意义在PH为4.6及温度100度的条件下,尿中ALA与乙酰乙酸乙酯缩合成吡咯化合物。此化合物可被醋酸乙酯萃取,并与改良显色剂作用生成红色化合物,根据颜色深浅进行比色定量。原理原理标准曲线的绘制采样样品的测定操作步骤标准曲线的绘制按实习指导25页配制标准色列采 样自留尿样,测比重样品的测定(一)分别量取2毫升尿样于10毫升具塞比色管中。分别加入2毫升醋酸缓冲液,混匀。样品管加0。4毫升乙酰乙酸乙酯,向空白管补加0。4毫升醋酸缓冲液,分别混
2、匀,同时置于沸水中加热10分钟,取出冷却至室温。各管分别加入4毫升的醋酸乙酯振摇,离心10分钟。取出静置分层,分别取上层萃取液2毫升,加入显色剂2毫升,静置10分钟后比色结果计算结果计算尿中ALA浓度(毫摩尔/升)=样品管含量(微克)/1(尿样).(1.020-1.000)/尿比重-1.000 0.0076式中C-样品管中ALA含量注意事项注意事项醋酸乙酯,乙酰乙酸乙酯最好用近期产品。改良显色剂宜新鲜配制。加入显色后,应静置10分钟,比色在半小时内完成。尿样易腐败,可导致PH升高,影响结果。如不能及时测定,应将尿液保存在冰箱中尿中粪卟啉的测定(荧光比色法)尿中粪卟啉的测定(荧光比色法)原理原理
3、操作步骤操作步骤注意事项注意事项原理原理尿液中加入过氧化氢使粪卟啉原氧化为粪卟啉,经冰醋酸酸化后,粪卟啉连同其他卟啉被乙醚萃取。当达到一定浓度时,于紫外光灯照射下,醚层可呈现红色荧光。根据红色荧光强弱进行半定量测定操作步骤操作步骤于20毫升具塞比色管中加尿20毫升,30%过氧化氢一滴,乙酸乙醚混合液5毫升,加塞颠倒混匀数次,注意放气,充分混匀后于暗处静置约30分钟。在暗室中,于紫外光灯下观察结果。评价评价阴性 (-)醚层为淡蓝色,绿色弱阳性 (+)醚层淡红色荧光阳性 (+)醚层红色荧光强阳性(+)醚层深红色荧光注意事项注意事项粪卟啉易被高温和日光所破坏,故应取新鲜尿液,并收集在棕色瓶中,立即测定。在无紫外光灯时,可作红环试验。取上述乙醚萃取液,加95%酒精0.3毫升,慢慢
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