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文档简介
1、襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院项目十六:非发酵菌鉴定项目十六:非发酵菌鉴定襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院学习目标学习目标u知道非发酵菌的概念知道非发酵菌的概念u知道常见非发酵菌的鉴定程序知道常见非发酵菌的鉴定程序u学会常见非发酵菌的鉴定试验学会常见非发酵菌的鉴定试验u能熟练运用编码系统鉴定非发酵菌能熟练运用编码系统鉴定非发酵菌u学会运用铜绿假单胞菌的生物学特性学会运用铜绿假单胞菌的生物学特性鉴定细菌鉴定细菌襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院 非发酵菌,指一群不发酵糖类或仅非发酵菌,指一群不发酵糖类或仅以氧化形式利用糖类的需氧或兼性厌氧、以氧化形式利用糖类的需氧
2、或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌;多为条件致病无芽胞的革兰阴性杆菌;多为条件致病菌。近年来由该类细菌引起感染的报告菌。近年来由该类细菌引起感染的报告日益增多,已引起临床医学及检验医学日益增多,已引起临床医学及检验医学的重视。的重视。 概概 述述襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院u非发酵革兰阴性杆菌包括假单胞菌属、不动杆非发酵革兰阴性杆菌包括假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、莫拉菌属、黄杆菌属等。菌属、产碱杆菌属、莫拉菌属、黄杆菌属等。 u氧化酶试验:除不动杆菌和个别假单胞菌外,氧化酶试验:除不动杆菌和个别假单胞菌外,均为阳性。均为阳性。uO/F试验:开管产酸,闭管不变试验:开管产酸,闭管不变u
3、动力:半固体培养基上观察动力不明显、以悬动力:半固体培养基上观察动力不明显、以悬滴法为准滴法为准u根据在根据在MAC培养基上生长与否,可初步分群培养基上生长与否,可初步分群概概 述述襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院假单胞菌生物学特性假单胞菌生物学特性 假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性杆菌,氧化酶试验阳性,包括荚膜的革兰阴性杆菌,氧化酶试验阳性,包括200余种菌。多数为腐生菌,少数为植物和动余种菌。多数为腐生菌,少数为植物和动物寄生菌,大多为条件致病菌。物寄生菌,大多为条件致病菌。 襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院 假单胞菌属分布广泛,土壤、
4、水和空气中假单胞菌属分布广泛,土壤、水和空气中均有存在,人类非发酵菌感染中,假单胞菌占均有存在,人类非发酵菌感染中,假单胞菌占7080,主要为铜绿假单胞菌,其他较为,主要为铜绿假单胞菌,其他较为常见的菌种有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞常见的菌种有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等。这些菌菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等。这些菌种也是医院感染的主要病原菌。种也是医院感染的主要病原菌。 襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院铜绿假单胞菌生物学特性铜绿假单胞菌生物学特性 G-直或微弯、直或微弯、较细长、散在较细长、散在排列、无芽胞排列、无芽胞有荚膜、有端有荚膜、有端鞭毛或丛鞭毛。
5、鞭毛或丛鞭毛。襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院专性需氧,生长温度范围广专性需氧,生长温度范围广,4,4不生长而不生长而4242可可生长是该菌的鉴别特点。最适生长温度为生长是该菌的鉴别特点。最适生长温度为3535。 培养特性培养特性襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院u普通培养基上生普通培养基上生长,长,80809090产生产生各种水溶性色素,各种水溶性色素,如绿脓素和荧光素如绿脓素和荧光素u对理化因素耐受对理化因素耐受性较强,对多种抗性较强,对多种抗生素耐药。生素耐药。 襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院u氧化酶阳性氧化酶阳性u氧化分解
6、葡萄糖、木糖产酸不产气氧化分解葡萄糖、木糖产酸不产气u液化明胶液化明胶u还原硝酸盐产生氮气还原硝酸盐产生氮气u吲哚阴性吲哚阴性u利用枸橼酸盐利用枸橼酸盐u精氨酸双水解酶阳性精氨酸双水解酶阳性生化反应生化反应襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院氧化分解葡萄糖、氧化分解葡萄糖、木糖产酸不产气木糖产酸不产气襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院对照对照 阳性阳性 阴性阴性精氨酸双水精氨酸双水解酶阳性解酶阳性襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院铜绿假单胞菌鉴定程序铜绿假单胞菌鉴定程序标本标本 增菌增菌 分离培养分离培养(血平板)(血平板)最后鉴定最后鉴
7、定可疑菌落(性状、色素)可疑菌落(性状、色素)初步鉴定初步鉴定 涂片涂片染色镜检染色镜检血标本血标本涂片镜检涂片镜检氧化酶氧化酶菌落特征菌落特征绿脓素绿脓素气味气味42生长生长分型分型生化鉴定:生化鉴定:O/F O枸櫞酸盐利用枸櫞酸盐利用精氨酸双水解精氨酸双水解乙酰胺酶乙酰胺酶 明胶液化明胶液化襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院其他非发酵菌的鉴定其他非发酵菌的鉴定u不动杆菌不动杆菌 为一群不发酵糖类、氧化酶阴性、不能为一群不发酵糖类、氧化酶阴性、不能运动的运动的G-杆菌、常分离到的菌种有醋酸钙不动杆菌、常分离到的菌种有醋酸钙不动杆菌、洛菲不动杆菌、溶血不动杆菌等,模式杆菌、洛菲不动杆菌、溶血不动
8、杆菌等,模式菌种为醋酸钙不动杆菌。菌种为醋酸钙不动杆菌。DNA G+C mol为为383846.546.5。襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院u与临床有关的有粪产碱杆菌及亚型、皮乔与临床有关的有粪产碱杆菌及亚型、皮乔特产碱杆菌、木糖氧化产碱杆菌及亚种,特产碱杆菌、木糖氧化产碱杆菌及亚种,DNA G+C mol为为56567070,典型菌种为粪产碱杆菌。,典型菌种为粪产碱杆菌。uG-杆菌,呈链状、周鞭毛、有动力,无荚杆菌,呈链状、周鞭毛、有动力,无荚膜。在普通培养基上膜。在普通培养基上18182424h形成无色透明菌形成无色透明菌落落 。氧化酶及触酶均阳性,不分解任何糖类,。氧化酶及触酶均阳性,不
9、分解任何糖类,O-F试验碱性,脲酶阴性,不液化明胶。试验碱性,脲酶阴性,不液化明胶。 粪产碱杆菌粪产碱杆菌襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院u细菌的编码鉴定是在细菌表型特征的基础上,细菌的编码鉴定是在细菌表型特征的基础上,借助于计算机发展起来的一种生物信息学方法。借助于计算机发展起来的一种生物信息学方法。u通常选择若干个常用的生理生化试验,每通常选择若干个常用的生理生化试验,每3项项试验为试验为1组,试验阳性结果分别记为组,试验阳性结果分别记为“1”、“2”、“4”,阴性结果记为,阴性结果记为“0”,每组试验得,每组试验得分之和就可能为分之和就可能为0、1、2、3、4、5、6和和7中的中的一个值
10、,这样,几组不同试验得到的几个值就一个值,这样,几组不同试验得到的几个值就组成一组数码,这组数码在数据库中会有相对组成一组数码,这组数码在数据库中会有相对应的鉴定结果应的鉴定结果 非发酵菌编码鉴定系统非发酵菌编码鉴定系统襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院非发酵菌编码鉴定系统非发酵菌编码鉴定系统襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院思考练习思考练习u何为非发酵菌?突出的生物学特性是什何为非发酵菌?突出的生物学特性是什么?么?u铜绿假单胞菌有哪些显著的特征?铜绿假单胞菌有哪些显著的特征?u临床常见的非发酵菌有哪些?临床常见的非发酵菌有哪些?u什么是细菌编码鉴定系统?他的鉴定原什么是细菌编码鉴定系统?他的鉴定原理是什么?理是什么?襄樊职业技术学院襄樊职业技术学院参
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