隐球菌临床推广ppt教案资料

1、一瑞生物一瑞生物隐球菌临床推广ppt一瑞生物一瑞生物q 隐球菌为圆形菌体，外周有荚膜，内有反光孢子，但无菌丝。q 隐球菌属已知有37个不同的种，但具致病性的多为新型隐球菌，其特点是菌体由一层很厚的多糖荚膜所包被。q 新型隐球菌主要包括新生变种、格特变种等简 介一瑞生物一瑞生物流行病学p38个 ICUs of 27个意大利医院p384 例真菌感染 (318例侵袭性念珠菌感染；63例霉菌感染；3例隐球菌感染)Tortorano AM et al. Mycoses. 2011, 55: 7379.一瑞生物一瑞生物q HIV感染者q 器官移植患者q 接受大剂量皮质类固醇或单克隆抗体（如阿仑单抗、英夫利

2、昔单抗）和/或其他免疫抑制剂治疗的患者q 其他无基础疾病的患者John R. Perfect, etc. Clinical Infectious Diseases 2010; 50:291322 美国感染病学会的美国感染病学会的“隐球菌病治疗临床实践指南（隐球菌病治疗临床实践指南（2010 年更新）年更新）”中指出，隐球菌病的易感人群主要包括：中指出，隐球菌病的易感人群主要包括：宿主因素一瑞生物一瑞生物流行病学q 随着AIDS患者的增多，各种机会性感染的发病率也随之上升，新型隐球菌成为继白色念珠菌之后最常见的机会性感染真菌，其在HIV中的感染率已达8.5%。q 隐球菌性脑膜炎发生率和死亡率在发

3、达国家达到10-30%， 在发展中国家可达到50-100%。q 早期隐球菌感染临床表现缺乏特异性，脑脊液变化不典型，但是当发展为隐球菌性脑膜炎时，死亡率可达到20%。早期、快速、准确地诊断很有必要一瑞生物一瑞生物现有检测手段v墨汁染色（菌体）v真菌培养（活菌）vELISA（荚膜多糖抗原）v乳胶凝集法（荚膜多糖抗原）v胶体金法 （荚膜多糖抗原）一瑞生物一瑞生物1. 印度墨汁染色：印度墨汁染色： 敏感性差，阳性检出率很低2. 脑脊液或血液培养（金标准）：脑脊液或血液培养（金标准）： 阳性检出率低，培养（2-10天）及鉴定时间长，易误诊3. 抗原检测试验：抗原检测试验： 脑脊液和血清样本抗原检测的敏

4、感性可达到97%和87%*，能实现早期快速诊断* Tyler Warkentien, MD. Int J STD AIDS. 2010 October ; 21(10): 679684.现有检测手段一瑞生物一瑞生物隐球菌荚膜多糖抗原q 由3种不同的单糖聚合而成q 是引起病理变化的主要毒性因子q 在菌体生长和繁殖过程中，GXM不断分泌到胞外q 通过发挥免疫抑制作用和免疫调理作用影响宿主免疫系统 Oscar Zaragoza, etc.Adv Appl Microbiol. 2009, 68: 133216隐球菌荚膜多糖抗原隐球菌荚膜多糖抗原GXM (Glucuronoxylomannan, GX

5、M) ：荚膜多糖抗原是隐球菌特有的分泌物，可以作为隐球菌感染的诊断依据一瑞生物一瑞生物 隐球菌病感染诊断现状隐球菌病感染诊断现状一 产品介绍产品介绍二 临床意义及适用科室临床意义及适用科室三 相关标准相关标准四一瑞生物一瑞生物隐球菌抗原检测试剂盒（胶体金法）原理一瑞生物一瑞生物隐球菌抗原检测试剂盒（胶体金免疫层析法）v试剂盒组成 隐球菌抗原检测试纸条50条 样本稀释液 滴定液 阳性对照v稳定性/储存方法 2年有效期 室温储存一瑞生物一瑞生物特 点v无需样本预处理v10分钟得到结果v定性或半定量测定v结果客观v血清，脑脊液，血浆一瑞生物一瑞生物样本收集及制备v按照无菌操作收集脑脊液、血浆和血清样

6、本。v样本最多可以在 2-8放置 72 小时。v不反复冻融的情况下，样本可以在-20以下保存更长时间。v样本在运输过程中应保持在 2-8或者-20以下。一瑞生物一瑞生物定性检测操作步骤v简单简单5步，步，10分钟得到结果分钟得到结果一瑞生物一瑞生物 注意：若对照条带未出现，则说明该检测无效，应重新检测。定性检测结果 一瑞生物一瑞生物半定量检测操作步骤v 1、以 1:5 作为初始稀释浓度，依次 1:2 稀释至 1:2560。 分别放置于10 个微离心管中并编号1-10。v 2、向 1 号试管中加入 4 滴样本稀释液。v 3、分别向标号 2-10 的试管中加入 2 滴滴定液。v 4、将 40 L

7、样本加入 1 号试管并混匀。v 5、从 1 号试管中吸取 80 L 样本混合液转移至 2 号试管并混匀，依次进行稀释直至 10 号试管。v 6、10 号试管中吸取 80 L 样本混合液并丢弃以保证试管内最终体积为 80 L。v 7、将试纸条的白端分别没入试管中。v 8、等待 10 分钟，读取并记录实验结果。一瑞生物一瑞生物半定量检测操作步骤一瑞生物一瑞生物半定量检测操作步骤-2一瑞生物一瑞生物半定量检测(滴度)结果 对于半定量滴定检测，患者的滴度应报告为产生阳性结果的最高稀释度。一瑞生物一瑞生物质量控制v阳性对照：将阳性对照：将 1 滴样本稀释液加入试管中，再加滴样本稀释液加入试管中，再加入入

8、 1 滴隐球菌抗原阳性对照。滴隐球菌抗原阳性对照。v阴性对照为：将阴性对照为：将 2 滴样本稀释液加入试管中。滴样本稀释液加入试管中。v分别插入试纸条，分别插入试纸条，10 分钟后读取结果。分钟后读取结果。v依据本地、国家的法规及认证机构的指导方针或要求，可能需要做额外的质控检测。一瑞生物一瑞生物胶体金法和培养/墨汁染色对比CrAg LFA package insert (IMMY)灵敏度灵敏度特异性特异性胶体金法试剂盒95.83%99.84%墨汁染色86.39%100.00%真菌培养60.72%100.00%一瑞生物一瑞生物胶体金法和ELISA/乳胶凝集法对比血清型灵敏度血清型灵敏度(ng

9、隐球菌抗原隐球菌抗原/ml)A (新型隐球菌)B (哥特隐球菌)C(哥特隐球菌)D (新型隐球菌)IMMY 胶体金法胶体金法1198IMMY 乳胶凝集法乳胶凝集法284738062ELISA28232,000770其他厂家乳胶凝集法其他厂家乳胶凝集法193794054TR Kozel, Clin. Vaccine Immunol. (2011) 18:1292TR Kozel, 8th International Conference on Cryptococcus and Cryptococcosis (2011)灵敏度远远高于其他方法一瑞生物一瑞生物隐球菌抗原分布时间感染感染血液血液脑脊液

10、脑脊液肺部肺部脑膜炎脑膜炎肺以外肺以外无症状无症状症状症状胶体金法胶体金法隐球菌抗原检测隐球菌抗原检测的其他方法的其他方法Adapted from Kozel and Bauman, Expert Opin. Med. Diagn. (2012) 6:245一瑞生物一瑞生物胶体金法和乳胶凝集法对比 胶体金法胶体金法乳胶凝集法乳胶凝集法检测时间检测时间10 分钟分钟长达长达60分钟分钟样品预处理样品预处理无需无需需要需要(蛋白酶处理血清蛋白酶处理血清)样品类型样品类型血清血清, 脑脊液脑脊液, 血浆血浆血清和脑脊液血清和脑脊液储存储存室温室温冷藏冷藏一瑞生物一瑞生物 隐球菌病感染诊断现状隐球菌病

11、感染诊断现状一 产品介绍产品介绍二 适用科室及临床意义适用科室及临床意义三 相关标准相关标准四一瑞生物一瑞生物适用科室及临床意义新型隐球菌感染可发生于全身多个部位，最常见的感染主要发生在中枢神经系统、肺部、皮肤等。一瑞生物一瑞生物v 中枢神经系统隐球菌病-神经内科 隐球菌侵犯中枢神经系统最常见，包括脑膜炎或亚急性脑膜炎、散播型脑膜炎等。 临床症状：临床症状：首发症状间歇性头痛、恶心及呕吐，伴低首发症状间歇性头痛、恶心及呕吐，伴低热、周身不适、精神不振等非特异性症状。随病情发展热、周身不适、精神不振等非特异性症状。随病情发展，头痛渐加重转为持续性、精神异常、躁动不安，严重，头痛渐加重转为持续性、

12、精神异常、躁动不安，严重者出现不同程度意识障碍。者出现不同程度意识障碍。v 肺隐球菌病-呼吸科 肺部是隐球菌侵入的门户 适用科室及临床意义一瑞生物一瑞生物v 皮肤黏膜隐球菌病-皮肤科 10%15%的隐球菌病患者出现皮肤损害，比如出现丘疹、水疱、丘疹、水疱、脓疱、传染性软疣样丘疹、痤疮样脓疱脓疱、传染性软疣样丘疹、痤疮样脓疱等症状。 v 儿童脑膜炎-儿科 儿童由于免疫系统不健全，也容易被隐球菌感染，一般儿童的脑脊液样本都会做隐球菌筛查v 免疫缺陷人群-感染科、器官移植科、ICU等 新型隐球菌作为一种机会性感染真菌，主要侵犯免疫缺陷人群，如器官移植患者以及AIDS患者及使用免疫抑制剂人群等。 适用

13、科室及临床意义一瑞生物一瑞生物临床意义u 在撒哈拉以南的非洲地区，隐球菌脑膜炎是造成艾滋患在撒哈拉以南的非洲地区，隐球菌脑膜炎是造成艾滋患者死亡的一种重要疾病，隐球菌抗原可以在病症发生的几者死亡的一种重要疾病，隐球菌抗原可以在病症发生的几周前被检测到。周前被检测到。u 隐球菌抗原的检测对于隐球菌脑膜炎的预防有非常积极隐球菌抗原的检测对于隐球菌脑膜炎的预防有非常积极的作用。的作用。一瑞生物一瑞生物临床意义 筛查了筛查了HIVHIV感染病人感染病人进行隐球菌抗原预防的进行隐球菌抗原预防的成本效益，使用隐球菌成本效益，使用隐球菌抗原抗原可以显著降低成本可以显著降低成本一瑞生物一瑞生物临床意义 荚膜多

14、糖抗原是隐球菌特有的分泌物，是隐球菌感染确诊的依据。 在感染的初期，荚膜多糖抗原就被检测到，因此是隐球菌病早期诊断的标志物。 随着病情的发展，荚膜多糖抗原的含量会随之发生变化，还可作为病情监测的指标。一瑞生物一瑞生物G实验：实验：q 检测真菌细胞壁特有成分1,3-D-葡聚糖q 吞噬细胞将菌吞噬消化后释放1,3-D-葡聚糖到血液q 不能检测到的真菌：隐球菌和接合菌（包括毛霉菌、根霉菌等） G实验检测隐球菌为阴性结果的原因：实验检测隐球菌为阴性结果的原因：q 隐球菌含1,3-D-葡聚糖的量少q 荚膜很厚，不易被吞噬细胞消化联合检测的意义一瑞生物一瑞生物联合检测的意义一瑞生物一瑞生物 隐球菌病感染诊断现状隐球菌病感染诊断现状一 产品介绍产品介绍二 适用科