检验仪器分析 第八章血液分析相关仪器_第1页
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1、第八章 血液分析相关仪器主要内容 第一节第一节 血细胞分析仪血细胞分析仪 第二节第二节 血液凝固分析仪血液凝固分析仪 第三节第三节 全自动血型分析仪全自动血型分析仪 第四节第四节 血液黏度计血液黏度计 第五节第五节 自动血沉分析仪自动血沉分析仪 本节要点本节要点1.1.电阻抗(库尔特)法血细胞计数原理电阻抗(库尔特)法血细胞计数原理 2.2.联合检测型血细胞分析仪的主要技术特点联合检测型血细胞分析仪的主要技术特点3.3.血细胞分析仪检测血红蛋白和网织红细胞原理血细胞分析仪检测血红蛋白和网织红细胞原理4.4.红细胞直方图的临床应用红细胞直方图的临床应用5.5.血细胞分析仪的基本结构、性能评价及结

2、果比对血细胞分析仪的基本结构、性能评价及结果比对6.6.血细胞分析仪的维护保养及故障排除血细胞分析仪的维护保养及故障排除第一节 血细胞分析仪返回目录返回目录 掌握血细胞分析仪的库尔特分析原理、血红掌握血细胞分析仪的库尔特分析原理、血红 蛋白检测原理。蛋白检测原理。 熟悉联合检测型血细胞分析仪器的检测原理、熟悉联合检测型血细胞分析仪器的检测原理、 网织红细胞检测原理、仪器的基本结构、仪网织红细胞检测原理、仪器的基本结构、仪 器性能评价和维护。器性能评价和维护。 了解血细胞分析仪的分类、性能指标、常见了解血细胞分析仪的分类、性能指标、常见 故障和排除。故障和排除。第一节 血细胞分析仪学习目标学习目

3、标返回目录返回目录一、概述 血细胞分析仪血细胞分析仪(blood cell analyzer)是临床检是临床检验应用最广泛的仪器之一,可以对一定体积全血内验应用最广泛的仪器之一,可以对一定体积全血内血细胞的数量和质量进行自动化分析血细胞的数量和质量进行自动化分析。返回目录返回目录 手工计数时代手工计数时代 19471947年,华莱士年,华莱士库尔特先生发现库尔特原理库尔特先生发现库尔特原理 19531953年,第一台血细胞计数仪年,第一台血细胞计数仪诞生诞生 2020世纪世纪6060年代,年代, 测定参数达测定参数达7 7项项 2020世纪世纪7070年代,年代, 全血细胞计数全血细胞计数(C

4、BC) 2020世纪世纪8080年代,双年代,双通道、白细胞通道、白细胞2 23 3分群、五分类分群、五分类 9090年代以来,多功能、多参数、流水线年代以来,多功能、多参数、流水线一、 概述返回目录返回目录二、工作原理1. 白细胞计数及分类计数检测原理白细胞计数及分类计数检测原理2. 红细胞检测原理红细胞检测原理 成熟红细胞检测成熟红细胞检测 网织红细胞检测网织红细胞检测 有核红细胞检测有核红细胞检测3. 血小板检测原理血小板检测原理 4. 血红蛋白含量检测血红蛋白含量检测返回目录返回目录二、工作原理1. 白细胞计数及分类计数检测原理白细胞计数及分类计数检测原理返回目录返回目录电阻抗法计数原

5、理电阻抗法计数原理联合检测型检测原理联合检测型检测原理l 血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体l 当血细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,在内外当血细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,在内外电极之间恒流电路上,电阻值瞬间增大,产生一个电极之间恒流电路上,电阻值瞬间增大,产生一个电压脉冲信号电压脉冲信号l 产生的脉冲数量,等于通过的细胞数量;脉冲信号产生的脉冲数量,等于通过的细胞数量;脉冲信号幅度大小与细胞体积大小成正比幅度大小与细胞体积大小成正比 请记哦!请记哦!二、工作原理 白细胞计数之电阻抗法之电阻抗法 返回目录返回目录 电阻抗法血细胞计数原

6、理示意图电阻抗法血细胞计数原理示意图二、工作原理 白细胞计数之电阻抗法 返回目录返回目录l 多角度偏振光散射分析技术多角度偏振光散射分析技术 l 容量、电导、光散射联合检测技术容量、电导、光散射联合检测技术 l 光散射与细胞化学联合检测技术光散射与细胞化学联合检测技术 l 核酸染色技术核酸染色技术 l 双鞘流双鞘流DHSS五分类技术五分类技术 二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录l前向角(前向角(0 0)散射光强度)散射光强度细胞的大小和数量;细胞的大小和数量;l小角度(小角度(1010)散射光强度)散射光强度细胞内部结构和核染色质复杂性;细胞内部结构和核染色质复杂性;l垂直

7、角度(垂直角度(9090)偏振光散射强)偏振光散射强度度细胞内部颗粒及分叶状况;细胞内部颗粒及分叶状况;l垂直角度(垂直角度(9090D D)消偏振光散)消偏振光散射强度射强度将嗜酸性粒细胞从多将嗜酸性粒细胞从多个核群中区分出来个核群中区分出来 。 多角度偏振光散射分析技术多角度偏振光散射分析技术 二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录l容量容量(V)完整完整原态细胞的体积;原态细胞的体积;l电导电导(C)细胞细胞内部结构,将大小内部结构,将大小相近的细胞区分开相近的细胞区分开来;来;l光散射光散射(S)提提高对细胞颗粒的构高对细胞颗粒的构型和颗粒质量的鉴型和颗粒质量的鉴别能力

8、别能力。 各类白细胞在各类白细胞在VCS三维空间中的分布特点三维空间中的分布特点 各类白细胞在散点图中的分布特点各类白细胞在散点图中的分布特点 原文地址:http:/ 容量、电导、光散射联合检测技术容量、电导、光散射联合检测技术 (volume conductivity light scatter, VCS)二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录u联合应用细胞化学染色联合应用细胞化学染色( (过氧化物酶染色过氧化物酶染色 ) ) u过氧化物酶过氧化物酶在在5 5种白细胞中的活性存在种白细胞中的活性存在差异差异 光散射与细胞化学联合检测白细胞分布图光散射与细胞化学联合检测白细胞分

9、布图 光散射与细胞化学联合检测技术光散射与细胞化学联合检测技术二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录 以半导体激光作为以半导体激光作为光源,在试剂中增加了核酸荧光源,在试剂中增加了核酸荧光染料光染料Polymethine( (聚聚次甲基次甲基) ),可以对核酸物质,可以对核酸物质DNA/RNA进行染色。进行染色。 染色染色后白细胞着色深(未成熟粒细胞、异常细胞后白细胞着色深(未成熟粒细胞、异常细胞荧光染色更深,成熟白细胞荧光染色浅),红细荧光染色更深,成熟白细胞荧光染色浅),红细胞不染色,血小板稍染色。胞不染色,血小板稍染色。核酸染色技术核酸染色技术二、工作原理 白细胞计数之联

10、合检测型 返回目录返回目录 核酸染色技术白细胞分类散点图核酸染色技术白细胞分类散点图原文地址:http:/ 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录u流式细胞术、化学染色和电阻抗法。流式细胞术、化学染色和电阻抗法。u设置设置3 3个通道完成对白细胞五分类和异常白细胞的测个通道完成对白细胞五分类和异常白细胞的测定。定。白细胞计数通道白细胞计数通道双鞘流通道双鞘流通道嗜碱性粒细胞通道嗜碱性粒细胞通道双鞘流双鞘流DHSSDHSS五分类技术五分类技术二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录 双鞘流图双鞘流图 二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录 双矩阵巨大未成熟细胞(双

11、矩阵巨大未成熟细胞(LIC)散点图)散点图 二、工作原理 白细胞计数之联合检测型 返回目录返回目录二、工作原理2. 红细胞检测原理电阻抗电阻抗u 电阻抗法检测原理电阻抗法检测原理u 流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法 u 有核红细胞检测有核红细胞检测返回目录返回目录 检测原理同白细胞计检测原理同白细胞计数相似数相似 脉冲多少的累积即红脉冲多少的累积即红细胞数量,脉冲高度细胞数量,脉冲高度的累积可换算成红细的累积可换算成红细胞比容胞比容 红细胞直方图上,在红细胞直方图上,在5050125fl125fl区域内有区域内有一个接近正态分布的一个接近正态分布的曲

12、线,为正常大小的曲线,为正常大小的红细胞红细胞正常红细胞直方图正常红细胞直方图 小红细胞且大小不等小红细胞且大小不等大红细胞且大小不等大红细胞且大小不等 巨幼细胞性贫血治疗有效(呈双峰)巨幼细胞性贫血治疗有效(呈双峰) 电阻抗法检测原理电阻抗法检测原理二、工作原理 红细胞计数原理返回目录返回目录p成熟红细胞无成熟红细胞无DNA/RNA不被染色;不被染色;p网织红细胞内网织红细胞内RNA经荧光染色后,荧光强度与经荧光染色后,荧光强度与RNA含量成正比,网织红细胞的成熟度不同,含量成正比,网织红细胞的成熟度不同,RNA含量不同,因此产生的荧光强度就有差异。含量不同,因此产生的荧光强度就有差异。 根

13、据荧光强度差异,可分成三区:根据荧光强度差异,可分成三区:低荧光强度网织红细胞(低荧光强度网织红细胞(LFR)区)区中荧光强度网织红细胞中荧光强度网织红细胞(MFR)区区高荧光强度网织红细胞高荧光强度网织红细胞(HFR)区区流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法 二、工作原理 红细胞计数原理返回目录返回目录 光学法检测网织红细胞、成熟红细胞和血小板散点图光学法检测网织红细胞、成熟红细胞和血小板散点图二、工作原理 红细胞计数原理返回目录返回目录 通过有核红细胞检测程序和专用通道,加入专用试通过有核红细胞检测程序和专用通道,加入专用试剂。剂。 试剂中的荧光染料

14、可渗透进入白细胞膜内。试剂中的荧光染料可渗透进入白细胞膜内。 通过检测荧光强度得到:通过检测荧光强度得到:白细胞核大、荧光强度高白细胞核大、荧光强度高有核红细胞核小、荧光强度低有核红细胞核小、荧光强度低正常红细胞无细胞核和破碎、荧光强度极低正常红细胞无细胞核和破碎、荧光强度极低 根据荧光强度差和前向散射光信号测定的细胞体积。根据荧光强度差和前向散射光信号测定的细胞体积。二、工作原理 红细胞计数原理有核红细胞计数有核红细胞计数返回目录返回目录u检测参数:检测参数:NRBCu独立的有核红细胞检测通道,能对外周血有核独立的有核红细胞检测通道,能对外周血有核红细胞红细胞进行定量分析进行定量分析u最新研

15、究:外周血有核最新研究:外周血有核红细胞红细胞还可对重症监护病人的生存给予预测还可对重症监护病人的生存给予预测前向散射光 有核红细胞有核红细胞(NRBC)检测通道检测通道二、工作原理 红细胞计数原理返回目录返回目录二、工作原理3. 血小板检测原理电阻抗电阻抗u 电阻抗法检测原理电阻抗法检测原理u 流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法 u 激光散射法激光散射法返回目录返回目录二、工作原理 血小板计数原理 正常人红细胞正常人红细胞体积与血小板体积与血小板体积有明显的体积有明显的差异差异 血小板计数设血小板计数设置置64个通道,个通道,体积分布范围体积分布范围

16、在在230fl之间之间 电阻抗法检测原理电阻抗法检测原理返回目录返回目录二、工作原理 血小板计数原理单个球形化血小板通过流式通道被激光束照射后单个球形化血小板通过流式通道被激光束照射后 低角度(低角度(23)光散射)光散射测量血小板的大小测量血小板的大小 高角度(高角度(515)光散射)光散射测量血小板折射指测量血小板折射指数数( (refactive index,RI),),此参数与血小板密度有关。此参数与血小板密度有关。 血小板的体积血小板的体积230fl,RI在在1.351.40之间之间 红细胞含有高浓度血红蛋白,红细胞含有高浓度血红蛋白,RI在在1.351.44之间之间 此法可以在一定

17、程度上纠正由于小红细胞、红细此法可以在一定程度上纠正由于小红细胞、红细胞或其它细胞碎片以及血小板聚集等因素导致的血胞或其它细胞碎片以及血小板聚集等因素导致的血小板计数的偏差,小板计数的偏差,可用于血小板计数的纠正。可用于血小板计数的纠正。激光散射法激光散射法返回目录返回目录l同网织红细胞同网织红细胞检测原理类似。检测原理类似。l荧光染料能够荧光染料能够迅速通过细胞迅速通过细胞膜,与膜,与RNA结结合后,其荧光合后,其荧光强度可提高强度可提高3000倍左右。倍左右。其中其中IPF1和和IPF2区域为未成熟血小板区域为未成熟血小板二、工作原理 血小板计数原理流式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法流

18、式细胞激光核酸荧光染色和鞘流电阻抗法 返回目录返回目录二、工作原理4. 血红蛋白含量检测电阻抗电阻抗改良氰化高铁血红蛋白法改良氰化高铁血红蛋白法非氰化高铁血红蛋白法非氰化高铁血红蛋白法 仪器血红蛋白仪器血红蛋白的校正必须以氰的校正必须以氰化高铁法为准化高铁法为准返回目录返回目录p 机械系统机械系统p 电子系统电子系统p 血细胞检测系统血细胞检测系统p 血红蛋白测定系统血红蛋白测定系统p 计算机和键盘控制系统等计算机和键盘控制系统等 三、基本结构返回目录返回目录 主要性能指标主要性能指标 包括:测试参数包括:测试参数 、细胞形态学分析、测试速度、细胞形态学分析、测试速度 、样本量、样本量 主要测

19、试指标的示值范围主要测试指标的示值范围 示值范围示值范围: :WBC(0250)109/L;RBC(07.7)1012/L;HGB(0230)g/L;PLT(02000)109/L 性能评价性能评价包括:精密度、正确度、包括:精密度、正确度、携带污染率携带污染率、线性范围、白细胞线性范围、白细胞分类计数和可比性分类计数和可比性不同血细胞分析仪检测结果的比对不同血细胞分析仪检测结果的比对四、性能指标与评价返回目录返回目录 开开 机机参数设置参数设置 检查试剂和废液桶,依次打开主机、电脑,仪检查试剂和废液桶,依次打开主机、电脑,仪器自行启动,完成初始化和自检,开始工作器自行启动,完成初始化和自检,

20、开始工作选择校准、质控、静脉血、末梢血模式等菜单选择校准、质控、静脉血、末梢血模式等菜单检查室内质控结果,若不在控,查找原因,重检查室内质控结果,若不在控,查找原因,重新运行。若在控,继续样本测定新运行。若在控,继续样本测定样本(样本(EDTA抗凝血)编号、混匀、放测试位抗凝血)编号、混匀、放测试位按已设定的参数和程序,按测试键自动检测按已设定的参数和程序,按测试键自动检测运行质控运行质控样本装载样本装载样本测定样本测定结果传送结果传送以标准模式传送报告结果以标准模式传送报告结果 关机关机按日保养程序,清洗保养后关机按日保养程序,清洗保养后关机五、检测流程返回目录返回目录 维护维护 检测器维护

21、检测器维护 液路维护液路维护 机械传动机械传动部分维护部分维护 常见故障处理常见故障处理 开机开机时的常见故障及排除时的常见故障及排除 测试过程中常见的错误信息测试过程中常见的错误信息 设备故障修复后设备故障修复后 :应进行应进行相关的检测和验证相关的检测和验证六、 维护与常见故障处理返回目录返回目录本节要点本节要点1. 全自动血凝仪常用的检测原理及异同点全自动血凝仪常用的检测原理及异同点2. 全自动血凝仪的基本结构、性能评价全自动血凝仪的基本结构、性能评价3. 全自动血凝仪常见错误及故障排除全自动血凝仪常见错误及故障排除第二节 血液凝固分析仪返回目录返回目录第二节 血液凝固分析仪 掌握血凝仪

22、的检测原理和基本结构掌握血凝仪的检测原理和基本结构 熟悉半自动、全自动血凝仪的特点,血凝仪的熟悉半自动、全自动血凝仪的特点,血凝仪的性能评价以及各种检测方法的优缺点性能评价以及各种检测方法的优缺点 了解血凝仪的分类、临床应用、仪器的维护和了解血凝仪的分类、临床应用、仪器的维护和进展进展学习目标学习目标返回目录返回目录一、 概述 血液凝固分析仪(血液凝固分析仪(automated coagulation analyzer, ACA)是采用一定分析技术,对血栓与止是采用一定分析技术,对血栓与止血有关成分进行自动检测分析的临床常规检验仪器。血有关成分进行自动检测分析的临床常规检验仪器。返回目录返回目

23、录 1910年,年,Kottman发明了最早的血凝仪发明了最早的血凝仪 1950年,年,Schnitger和和Gross发明了基于电流法的发明了基于电流法的血凝仪血凝仪 20世纪世纪70年代,较精确的各种半自动血凝仪先后年代,较精确的各种半自动血凝仪先后问世问世,特点,特点是:单通道、终点法的半自动血凝仪,是:单通道、终点法的半自动血凝仪,也称也称第一代产品第一代产品 20世纪世纪80年代末,多通道、多种分析方法与原理年代末,多通道、多种分析方法与原理的半自动血凝仪相继诞生,称之为的半自动血凝仪相继诞生,称之为第二代产品第二代产品 2020世纪世纪9090年代,年代,多通道、多方法、多功能多通

24、道、多方法、多功能全自动全自动第三代第三代血血凝仪不断涌现凝仪不断涌现一、 概述返回目录返回目录 生物学方法生物学方法 光学法光学法 :散射比浊法:散射比浊法 、透射比浊法、透射比浊法 磁珠法磁珠法 电流法电流法 超声分析法超声分析法 发色底物法发色底物法 免疫分析法免疫分析法 干化学技术干化学技术二、 工作原理返回目录返回目录 将凝血因子激活剂加入到待检血浆中,凝血仪将凝血因子激活剂加入到待检血浆中,凝血仪连续记录在血浆凝固过程中一系列物理量(光、电、连续记录在血浆凝固过程中一系列物理量(光、电、超声、机械运动等)的变化,并将这些变化信号转超声、机械运动等)的变化,并将这些变化信号转变成数据

25、,再由计算机分析所得数据并将之换算成变成数据,再由计算机分析所得数据并将之换算成最终结果。最终结果。概念概念二、 工作原理 生物学方法返回目录返回目录 是根据血浆是根据血浆凝固过程中浊度的变化,导致光凝固过程中浊度的变化,导致光强度变化来测定相关因子。强度变化来测定相关因子。散射比浊法散射比浊法透射比浊法透射比浊法二、 工作原理 比浊法返回目录返回目录 散射比浊法原理示意图散射比浊法原理示意图二、 工作原理 散色比浊法 返回目录返回目录 双双磁路磁珠法原理:磁路磁珠法原理:其中一对磁路产生恒定其中一对磁路产生恒定的交替电磁场,用于吸引测试杯内磁珠,使的交替电磁场,用于吸引测试杯内磁珠,使之保持

26、等幅振荡运动;另一对磁路利用测试之保持等幅振荡运动;另一对磁路利用测试杯内磁珠摆动过程中对磁力线的切割所产生杯内磁珠摆动过程中对磁力线的切割所产生的的电信号电信号, ,对对磁珠摆动幅度进行监测,当磁珠磁珠摆动幅度进行监测,当磁珠摆动幅度衰减到摆动幅度衰减到50%50%,确定凝固终点,确定凝固终点。二、 工作原理 磁珠法返回目录返回目录 双磁路磁珠法检测原理示意图双磁路磁珠法检测原理示意图 二、 工作原理 磁珠法返回目录返回目录 又称为生物化学方法,主要是通过测定产色又称为生物化学方法,主要是通过测定产色物质的吸光度变化来推算所测定物质的含量。物质的吸光度变化来推算所测定物质的含量。 人工合成多

27、肽人工合成多肽待测凝血因子待测凝血因子人工合成多肽人工合成多肽产色基团释产色基团释放放+产色基团产色基团发色底物法检测原理发色底物法检测原理使溶液呈使溶液呈色色呈色深浅与凝血呈色深浅与凝血因子活性成比例因子活性成比例定量分析获得定量分析获得凝血因子活性凝血因子活性二、 工作原理 发色底物法返回目录返回目录 利用抗原利用抗原抗体的特异性结合反应来对被检抗体的特异性结合反应来对被检物质进行物质进行定性或定性或定量的测定定量的测定。 包被包被后的抗体与抗原结合后形成的复合物后的抗体与抗原结合后形成的复合物体积增大,引起透射光的变化,由吸光度变化体积增大,引起透射光的变化,由吸光度变化推算出所检测物质

28、的含量。推算出所检测物质的含量。 血凝仪使用的血凝仪使用的是免疫比浊法是免疫比浊法二、 工作原理 免疫分析法返回目录返回目录磁磁 场场磁磁 场场加血样本加血样本磁磁 场场磁磁 场场仪器光电检测器仪器光电检测器记录光亮变化记录光亮变化 定量测定定量测定干化学技术检测原理示意图干化学技术检测原理示意图试剂板试剂板 试剂板试剂板颗粒振动幅度改变颗粒振动幅度改变 发色底物法发色底物法 该法主要应用于床旁即时检测的便携式血凝分析仪该法主要应用于床旁即时检测的便携式血凝分析仪二、 工作原理 干化学技术返回目录返回目录 半自动血凝仪的基本结构半自动血凝仪的基本结构主要由样本和试剂预温槽、加样器、检测系统主要

29、由样本和试剂预温槽、加样器、检测系统(光学、磁场)及微机组成(光学、磁场)及微机组成 全自动血凝仪基本结构全自动血凝仪基本结构包括样本传送及处理装置、试剂冷藏位、样本包括样本传送及处理装置、试剂冷藏位、样本及试剂分配系统、检测系统、计算机、输出设及试剂分配系统、检测系统、计算机、输出设备及附件等备及附件等 三、 基本结构返回目录返回目录 主要性能指标主要性能指标 性能评价性能评价 一般性能评价一般性能评价 技术性能评价技术性能评价 :包括精密度、正确度、携带:包括精密度、正确度、携带污染、线性范围、干扰、可比性分析等污染、线性范围、干扰、可比性分析等 不同血凝仪结果比对不同血凝仪结果比对四 、

30、 性能指标与评价返回目录返回目录五 、检测流程返回目录返回目录 开开 机机 运行质控运行质控检查仪器试剂和废液桶,添加反应管。依次打检查仪器试剂和废液桶,添加反应管。依次打开主机、电脑及打印机开关,仪器自行启动,开主机、电脑及打印机开关,仪器自行启动,完成初始化和自检,即可开始工作完成初始化和自检,即可开始工作选择质控品操作模式选择质控品操作模式检查室内质控图检查室内质控图, 若不在控,则查找原因,重若不在控,则查找原因,重新运行室内质控。若在控,继续样本测定新运行室内质控。若在控,继续样本测定 样本编号、放测试位按已设定的参数和程序,样本编号、放测试位按已设定的参数和程序,按测试键仪器自动检

31、测按测试键仪器自动检测按已设定的参数和程序查看,以标准模式传送按已设定的参数和程序查看,以标准模式传送报告结果报告结果 质控在控质控在控样本测定样本测定结果传送结果传送 关关 机机按日保养程序,清洗保养后关机按日保养程序,清洗保养后关机 维护:包括日维护、周维护、月维护、半年维护等维护:包括日维护、周维护、月维护、半年维护等 常见故障处理常见故障处理开机时的常见故障及排除开机时的常见故障及排除测试过程中常见的错误及排除测试过程中常见的错误及排除 分析过程中常见的错误及排除分析过程中常见的错误及排除 六 、维护与常见故障处理返回目录返回目录本节要点本节要点1.1.全自动血型分析仪的工作原理全自动

32、血型分析仪的工作原理2.2.全自动血型分析仪的校准及评价全自动血型分析仪的校准及评价3.3.全自动血型分析仪的维护及常见故障处理全自动血型分析仪的维护及常见故障处理第三节全自动血型分析仪返回目录返回目录学习目标学习目标 熟悉熟悉血型分析仪的血型分析仪的工作工作原理原理 了解血型分析仪的性能指标了解血型分析仪的性能指标、仪器校准与评价、仪器校准与评价, 维护及维护及常见故障处理常见故障处理第三节全自动血型分析仪返回目录返回目录一、 概述 血型微量、快速血型微量、快速检测的仪用于血型鉴检测的仪用于血型鉴定、研究,使血型自定、研究,使血型自动化检测逐渐趋于成动化检测逐渐趋于成熟走向实验室。目前,熟走

33、向实验室。目前,自动化血型分析交叉自动化血型分析交叉配血以及不规则抗体配血以及不规则抗体筛查越来越广泛。筛查越来越广泛。返回目录返回目录 微孔板法微孔板法 微柱凝胶技术微柱凝胶技术 玻璃珠微柱法玻璃珠微柱法 其他血型鉴定新技术其他血型鉴定新技术 Capture 技术技术 基因芯片技术基因芯片技术 基因分型技术基因分型技术 磁珠微粒检测技术磁珠微粒检测技术 二 、工作原理返回目录返回目录三 、 基本结构样本位样本位试剂位试剂位试剂卡试剂卡架架孵育器孵育器传输系传输系统统离心机离心机判读工判读工作站作站计算机计算机血型分血型分析仪析仪返回目录返回目录 主要性能指标主要性能指标包括检测项目、测试状态

34、、测试速度、样本量包括检测项目、测试状态、测试速度、样本量 仪器校准与评价仪器校准与评价定期对自动加样系统的定期对自动加样系统的校准校准定期对检测准确性和重复性进行校准定期对检测准确性和重复性进行校准仪器报警功能的监测仪器报警功能的监测四 、性能、仪器校准与评价 返回目录返回目录开开 机机运行质控运行质控检查仪器试剂和废液桶,依次打开主机、检查仪器试剂和废液桶,依次打开主机、电脑及打印机开关,仪器自行启动,完成电脑及打印机开关,仪器自行启动,完成初始化和自检,即可开始工作初始化和自检,即可开始工作选择质控品操作模式选择质控品操作模式检查室内质控结果,不在控,查找原因,检查室内质控结果,不在控,

35、查找原因,重新运行;若在控,继续样本测定重新运行;若在控,继续样本测定样本编号、放测试位按已设定的参数和程样本编号、放测试位按已设定的参数和程序,按测试键仪器自动检测序,按测试键仪器自动检测按已设定的参数和程序查看,以标准模式按已设定的参数和程序查看,以标准模式传送报告结果传送报告结果质控在控质控在控样本测定样本测定结果传送结果传送 关关 机机倾倒废液,按日保养程序,清洗保养后关机倾倒废液,按日保养程序,清洗保养后关机五 、检测流程返回目录返回目录 仪器仪器的维护的维护 包括包括日维护、周维护、月维护、半年维护等,日维护、周维护、月维护、半年维护等,维护的内容包括一般检查、清洗管路、表面清维护

36、的内容包括一般检查、清洗管路、表面清洁与消毒及仪器性能的检测。洁与消毒及仪器性能的检测。 仪器仪器常见故障的处理常见故障的处理仪器自动检测和特定项检测中的问题仪器自动检测和特定项检测中的问题 仪器识别中的常见问题及处理方法仪器识别中的常见问题及处理方法 仪器运行中的问题及处理仪器运行中的问题及处理 仪器仪器退役前的处理退役前的处理 六 、 维护与常见故障处理 返回目录返回目录第四节 血液黏度计 本节要点本节要点1.1.血液黏度计的概述血液黏度计的概述2.2.血液黏度计的工作原理与基本结构血液黏度计的工作原理与基本结构3.3.血液黏度计的主要技术指标与性能评价血液黏度计的主要技术指标与性能评价4

37、.4.血液黏度计的使用与维护血液黏度计的使用与维护返回目录返回目录 学习目标学习目标 掌握毛细管黏度计和旋转式黏度计的检测原理与掌握毛细管黏度计和旋转式黏度计的检测原理与基本结构。基本结构。 熟悉黏度计的主要技术指标与性能评价及性能特熟悉黏度计的主要技术指标与性能评价及性能特点。点。 了解血液黏度计的使用与维护。了解血液黏度计的使用与维护。第四节 血液黏度计返回目录返回目录一、血液黏度计概述 血液流变分析仪器是对全血、血浆或血液流变分析仪器是对全血、血浆或血细胞流变特性进行分析的检验仪器。血细胞流变特性进行分析的检验仪器。主要有:血液黏度计、红细胞变形测定仪、主要有:血液黏度计、红细胞变形测定

38、仪、 血小板聚集仪、血沉分析仪等。血小板聚集仪、血沉分析仪等。返回目录返回目录按工作原理按工作原理 分为毛细管黏度计和旋转式黏分为毛细管黏度计和旋转式黏度计。前者按结构分为多电极式黏度计、红度计。前者按结构分为多电极式黏度计、红外多切变黏度计和压力传感式黏度计,后者外多切变黏度计和压力传感式黏度计,后者按结构可分为锥按结构可分为锥- -板式和圆筒式黏度计。板式和圆筒式黏度计。按自动化程度按自动化程度 分半自动黏度计和全自动黏分半自动黏度计和全自动黏度计度计有何区别?返回目录返回目录一、血液黏度计概述分类(一)(一)毛细管黏度计毛细管黏度计 1.1.检测原理:检测原理:按泊肃叶按泊肃叶(Pois

39、euille)定定律设计,即一定体积的牛顿液体,在恒律设计,即一定体积的牛顿液体,在恒定的压力驱动下,流过一定管径的毛细定的压力驱动下,流过一定管径的毛细管所需的时间与黏度成正比。管所需的时间与黏度成正比。 血浆比黏度血浆比黏度(ratio of viscosity):): 血浆比黏度血浆比黏度= =血浆时间血浆时间/ /蒸馏水时间蒸馏水时间二、工作原理与基本结构返回目录返回目录 2.2. 基本结构:基本结构: 包括毛细管、储液池、控温装置、计时装置包括毛细管、储液池、控温装置、计时装置等。等。毛细管黏度计毛细管黏度计 二、工作原理与基本结构返回目录返回目录(一)(一)毛细管黏度计毛细管黏度计

40、价格低廉、操作简便、速度快、易于普及价格低廉、操作简便、速度快、易于普及测定牛顿流体黏度结果可靠,是血浆、血测定牛顿流体黏度结果可靠,是血浆、血清样本测定的参考方法清样本测定的参考方法3.3.仪器的特点仪器的特点二、工作原理与基本结构返回目录返回目录(一)(一)毛细管黏度计毛细管黏度计二、工作原理与基本结构1.1.工作原理:工作原理:仪器在一个密封的模拟血流在人体仪器在一个密封的模拟血流在人体流动的毛细管内,加一定的压力,让血液在流动的毛细管内,加一定的压力,让血液在毛毛细细管内流动,流动的同时压力也不断减小,血流动管内流动,流动的同时压力也不断减小,血流动的速度也随压力不同而发生变化;仪器通

41、过计算的速度也随压力不同而发生变化;仪器通过计算机系统监测压力与流速变化的一组数据,测量出机系统监测压力与流速变化的一组数据,测量出不同压力下的血液不同压力下的血液黏黏度。度。 返回目录返回目录(二)毛细管(二)毛细管微流量压力传感式黏度计微流量压力传感式黏度计(二)毛细管(二)毛细管微流量压力传感式黏度计微流量压力传感式黏度计2 2基本结构基本结构 由测量系统、计算机系统和由测量系统、计算机系统和自动进样系统三部分组成。自动进样系统三部分组成。二、工作原理与基本结构 3.3.仪器特点:仪器特点:实现了在由高到低连续变化的剪实现了在由高到低连续变化的剪切力的作用下,使流体(全血或血浆)在模拟切

42、力的作用下,使流体(全血或血浆)在模拟人体血管的玻璃检测器中流动,适用于科研对人体血管的玻璃检测器中流动,适用于科研对全血或血浆黏度的检测。压力传感器式的毛细全血或血浆黏度的检测。压力传感器式的毛细管粘度仪所测得的不同切变率下的粘度值,是管粘度仪所测得的不同切变率下的粘度值,是通过数学换算、曲线拟合而得的,其拟合公式通过数学换算、曲线拟合而得的,其拟合公式一般为经验公式,是否通用于临床,需要验证。一般为经验公式,是否通用于临床,需要验证。(三)毛细管(三)毛细管微流量压力传感式黏度计微流量压力传感式黏度计二、工作原理与基本结构返回目录返回目录 (三)旋转式黏度计(三)旋转式黏度计 以牛顿的黏滞

43、定律为理论依据,主要以牛顿的黏滞定律为理论依据,主要有以外园筒转动或以内园筒转动的筒有以外园筒转动或以内园筒转动的筒- -筒式筒式旋转黏度计(又称旋转黏度计(又称Couette黏度计)和以园黏度计)和以园锥体转动或以圆形平板转动的锥板式(又锥体转动或以圆形平板转动的锥板式(又称称Weissenberg黏度计)黏度计。黏度计)黏度计。哪种常用?二、工作原理与基本结构返回目录返回目录 (三)旋转式黏度计(三)旋转式黏度计 1.1.工作原理:工作原理:是同轴锥板构型,平板与锥体间是同轴锥板构型,平板与锥体间充满被测样本,调速电机与圆形平板同速旋转,充满被测样本,调速电机与圆形平板同速旋转,锥体与平板

44、及马达间均无直接联系。当圆形平板锥体与平板及马达间均无直接联系。当圆形平板以某一恒定角速度旋转时,转动的力矩通过被测以某一恒定角速度旋转时,转动的力矩通过被测样本传递到锥体;样本越粘稠,传入的力矩越大。样本传递到锥体;样本越粘稠,传入的力矩越大。当此力矩作用于锥体时,立即被力矩传感装置所当此力矩作用于锥体时,立即被力矩传感装置所俘获,并将其转换为电信号,其信号大小与样本俘获,并将其转换为电信号,其信号大小与样本黏度成正比。黏度成正比。二、工作原理与基本结构返回目录返回目录2.2.基本结构基本结构:电 机切血板Rp血 液力矩传感器圆 锥二、工作原理与基本结构返回目录返回目录(三)旋转式黏度计(三

45、)旋转式黏度计 样本传感器样本传感器 转速控制与调节系统转速控制与调节系统 力矩测量系统力矩测量系统 恒温系统恒温系统锥锥- -板式黏度计基本结构板式黏度计基本结构二、工作原理与基本结构返回目录返回目录2.2.基本结构基本结构:(三)旋转式黏度计(三)旋转式黏度计(三)仪器的评价与鉴定 3.3.仪器的特点:仪器的特点:能在稳态下测定不同剪切率时能在稳态下测定不同剪切率时全血等非牛顿流体的黏度,结果准确,可定量的了全血等非牛顿流体的黏度,结果准确,可定量的了解全血的流变特性,解全血的流变特性,RBC与与WBC的聚集性、变形的聚集性、变形性、时间相关性等很多流变特性。性、时间相关性等很多流变特性。

46、不适于血浆、血不适于血浆、血清等牛顿流体样本黏度的测定,结果偏高。清等牛顿流体样本黏度的测定,结果偏高。二、工作原理与基本结构返回目录返回目录(三)旋转式黏度计(三)旋转式黏度计1性能指标性能指标 黏度测试范围:黏度测试范围:(0.730)mPas;剪切率变化范围:剪切率变化范围:(1200)s-1;黏度值重黏度值重复性复性CV3;准确度:准确度:3%;控温准确控温准确度:度:0.5,稳定性:,稳定性:0.2;样本用量样本用量0.8ml2.0ml不等。不等。 2基本测试参数基本测试参数 血浆黏度、全血黏度(指全血血浆黏度、全血黏度(指全血表观黏度、相对黏度、还原黏度)等。表观黏度、相对黏度、还

47、原黏度)等。三、 主要技术指标与性能评价返回目录返回目录(一)主要技术指标1.准确度:以国家计量标准油为准,在剪切准确度:以国家计量标准油为准,在剪切率率(1200)s-1范围内分别用低黏度油(约范围内分别用低黏度油(约2mPa.s)和高黏度油(约)和高黏度油(约20mPa.s)测定其)测定其黏度,要求实际测定值与真值的相对偏差黏度,要求实际测定值与真值的相对偏差3%很重要哦!三、 主要技术指标与性能评价返回目录返回目录(二)性能评价 2.2.分辨率:分辨率:是指黏度计所能识别出的血液是指黏度计所能识别出的血液表观黏度最小变化量。取比容在表观黏度最小变化量。取比容在0.400.45全血测试高剪

48、切率全血测试高剪切率200s-1状态下,能反映出状态下,能反映出比容相差比容相差0.02时的血液表观黏度的变化时的血液表观黏度的变化 在低剪切率在低剪切率5s-1以下状态,能反映出比容相以下状态,能反映出比容相差差0.01时的血液表观黏度的变化时的血液表观黏度的变化 三、 主要技术指标与性能评价返回目录返回目录(二)性能评价 3.3.重复性:重复性:取比容在取比容在0.400.45血样,血样,测量测量11次,取后次,取后10次测定值计算次测定值计算CV值值 在高剪切率时,血液表观黏度在高剪切率时,血液表观黏度CV3% 在低剪切率时,血液表观黏度在低剪切率时,血液表观黏度CV5%三、 主要技术指

49、标与性能评价返回目录返回目录(二)性能评价4.4.灵敏度与量程:灵敏度与量程: 测力传感器应具有测力传感器应具有10mPa灵敏度才能灵敏度才能测定测定1s-1的血液黏度的血液黏度 恒定剪切应力的黏度计,这一控制范恒定剪切应力的黏度计,这一控制范围包括围包括100mPa1000mPa太重要了!太重要了!三、 主要技术指标与性能评价返回目录返回目录(二)性能评价 5.温控误差的检测方法:温控误差的检测方法: 将仪器充分预热,当测量池温度稳定在设定温将仪器充分预热,当测量池温度稳定在设定温度度37时,开始检测时,开始检测 将标准温度计放置在测量池或测量孔内,将标准温度计放置在测量池或测量孔内,等温等

50、温计显示计显示稳定后每隔稳定后每隔2min读一次数,连读读一次数,连读35次次 计算实计算实测测温度与设置温度温度与设置温度(37)间的绝对误间的绝对误差;计算最大温度测量值与最小温度测量值的差差;计算最大温度测量值与最小温度测量值的差异异三、 主要技术指标与性能评价返回目录返回目录(二)性能评价四、使用与维护(一)毛细管黏度计的调校与维护(一)毛细管黏度计的调校与维护仪器调校:仪器调校:用重蒸馏水在用重蒸馏水在37时测得时时测得时间比间比D=(t- t。)/ t。,要求,要求D 1%。仪器维护:仪器维护:残留液处理、毛细管污染处残留液处理、毛细管污染处理和理和 温度控制温度控制 返回目录返回

51、目录(二)旋转式黏度计的调校与维护(二)旋转式黏度计的调校与维护仪器调校:仪器调校:用国家计量单位所标定的标准牛顿用国家计量单位所标定的标准牛顿油,按仪器说明进行标定。日常工作中也可油,按仪器说明进行标定。日常工作中也可以用重蒸馏水检测仪器,看水的黏度是否为以用重蒸馏水检测仪器,看水的黏度是否为0.69mPas(37)仪器维护:仪器维护:电压稳定、机芯防尘、及时清洗测电压稳定、机芯防尘、及时清洗测试头和剪血板及剪血锥试头和剪血板及剪血锥四、使用与维护返回目录返回目录第五节 自动血沉分析仪 自动血沉分析仪概述自动血沉分析仪概述 自动血沉分析仪的工作原理和方法自动血沉分析仪的工作原理和方法 自动血

52、沉分析仪的结构、性能指标及维护自动血沉分析仪的结构、性能指标及维护 自动血沉分析仪的常见故障处理自动血沉分析仪的常见故障处理本节要点本节要点返回目录返回目录 学习目标学习目标 掌握自动血沉分析仪的原理与基本结构掌握自动血沉分析仪的原理与基本结构 熟悉自动血沉分析仪的性能评价与维护熟悉自动血沉分析仪的性能评价与维护 了解自动血沉分析仪的常见故障与处理了解自动血沉分析仪的常见故障与处理第五节 自动血沉分析仪返回目录返回目录一、概述红细胞沉降率(红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)是指红细胞在一定条件下沉降的速度,简称血沉。是指红细胞在一定条件下沉降的

53、速度,简称血沉。红细胞沉降率的传统测定方法是红细胞沉降率的传统测定方法是(Westergren)魏氏法魏氏法 。返回目录返回目录 二、工作原理 影响红细胞沉降的因素主要包括影响红细胞沉降的因素主要包括 红细胞的形态和大小红细胞的形态和大小 红细胞的变形性红细胞的变形性 红细胞的聚集性红细胞的聚集性 红细胞间的相互作用红细胞间的相互作用 红细胞压积红细胞压积 血浆介质和上升流动血浆介质和上升流动 沉降管的倾斜度等沉降管的倾斜度等 返回目录返回目录 仪器的读数原理仪器的读数原理 一类是血沉管垂直固定在自动血沉仪的孔板上,一类是血沉管垂直固定在自动血沉仪的孔板上,光电二极管沿机械导轨滑动,对血沉管进

54、行扫描。光电二极管沿机械导轨滑动,对血沉管进行扫描。如果红外线不能到达接收器,说明红外线被高密度如果红外线不能到达接收器,说明红外线被高密度的红细胞阻挡,一旦红外线能穿过血沉管到达接收的红细胞阻挡,一旦红外线能穿过血沉管到达接收器,接收器的信号就引导计算机开始计算到达移动器,接收器的信号就引导计算机开始计算到达移动终端时所需的距离。终端时所需的距离。 二、工作原理返回目录返回目录 二、工作原理返回目录返回目录)/(150ttHH红细胞沉降曲线方程:红细胞沉降曲线方程: 记录血沉管中的血液在时间零计时记录血沉管中的血液在时间零计时的高度,此后每隔一定时间扫描一次,的高度,此后每隔一定时间扫描一次

55、,记录每次扫描时红细胞和血浆接触的位记录每次扫描时红细胞和血浆接触的位置,并以计算机自动计算转换成魏氏法置,并以计算机自动计算转换成魏氏法测定值报告结果。测定值报告结果。 二、工作原理返回目录返回目录 另一类是固定光电二极管,血沉管随另一类是固定光电二极管,血沉管随转盘转动。垂直置管式与魏氏法相同。转盘转动。垂直置管式与魏氏法相同。18倾斜置管方式是将放入血沉管中倾斜置管方式是将放入血沉管中的血样被仪器充分混匀后,试管相对的血样被仪器充分混匀后,试管相对于于Y轴倾斜轴倾斜18 ,促使红细胞沉降加,促使红细胞沉降加速,静置一段时间,光电传感器自动速,静置一段时间,光电传感器自动读出红细胞沉降值,先纪录结果后转读出红细胞沉降值,先纪录结果后转换成魏氏法测定值。换成魏氏法测定值。 二、工作原理返回目录返回目录三、基本结构基本结构基本结构光源光源沉降管沉降管检测系统检测系统数据处理数据处理系统系统返回目录返回目录四、性能参参 数数性性 能能 指指 标标参参 数数性性 能能 指指 标标检测时间检测时间2060min;动态法或标;动态法或标准魏氏法可选;定时准魏氏法可选;定时精度精度1min温度湿度温度湿度温度温度 153

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