大鼠脑缺血再灌注损伤神经元形态观察及川芎嗪治疗作用 医学论文

1、    大鼠脑缺血再灌注损伤神经元形态观察及川芎嗪治疗作用 医学论文              【摘要】     目的探讨大鼠脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion，CIR)大脑皮质、纹状体神经元的形态学变化及川芎嗪对其影响。方法参考Bannisters方法复制大鼠脑缺血再灌注动物模型，利用川芎嗪治疗；在光、电镜下观察了皮质水肿及神经元的超微结构变化

2、。结果治疗组与模型组相比，大脑皮质和纹状体的血管周围、神经细胞周围水肿带厚度有显著差异（P    【关键词】  脑缺血 再灌注 皮质 纹状体据世界卫生组织调查表明, 脑血管意外引起的死亡率占所调查的57个国家死亡总人数的11.3% , 仅次于癌症和心肌梗塞，脑缺血是脑血管疾病最主要的病种, 在我国其死亡率仅次于恶性肿瘤, 严重危害人类的健康1。川芎嗪是一种新型的钙离子拮抗剂,具有抑制自由基产生、提高内源性超氧化物歧化酶(SOD)活性、清除氧自由基、改善血液流变学、抑制血小板聚集、抑制纤维化、调节脂质代谢、抗脂质过氧化作用等药理活性2。在临床上对

3、缺血性脑血管病有较好疗效, 但其作用机制尚未完全明了。为模拟临床脑梗塞致缺血和血管再通导致的脑缺血再灌注病例，笔者选择颈动脉血管引流法建立脑缺血再灌注动物模型，并给予中药川芎嗪治疗，观察其脑切片超微结构的变化，探讨脑缺血再灌注病理变化及药物干预机制。1  材料与方法1.1  动物分组   健康雄性Wistar大鼠39只，体重200240 g，随机分为对照组、模型组、治疗组，每组13只。1.2  CIR模型复制   参考Bannisters方法建立大鼠脑缺血再灌注动物模型。大鼠1.5%戊巴妥钠(45 mg/kg)腹腔注射麻醉，

4、1% 肝素(0.1 ml/kg)抗凝，仰卧固定于手术台上，颈部正中切口，暴露和分离左右侧颈总动脉、右颈外静脉，自右侧颈总动脉远端逆行插管（并结扎近心端），将插管近心端插入右颈外静脉，夹闭左侧颈总动脉，使椎动脉进入脑中血液经引流管进入右颈外静脉中，造成脑缺血。治疗组自脑缺血开始腹腔注射川芎嗪，模型组不给药，90 min后夹闭动、静脉之间的引流管，开放左颈总动脉夹，导致脑缺血再灌注，再灌注2 h后，处死动物、取脑。对照组在麻醉后切开颈部，分离双侧颈动、静脉后，处死动物、取脑。1.3  标本采集和处理   光镜切片制作：在脑漏斗前后缘将脑组织冠状切开，取1.5 mm厚脑

5、组织,并固定于4%多聚甲醛中，常规脱水和石蜡包埋后切片，切片厚度为5 m，常规甲苯胺蓝染色和HE染色。电镜切片制作：取顶叶皮质1、2区1 mm×1 mm×1 mm大小的组织块，用2.5%戊二醛固定，PBS缓冲液洗涤和梯度丙酮脱水，EP0812浸透和包埋，LKB4型超薄切片机切片，厚度4050 nm，铀-铅染色，在JEM100CX透射电镜下观察，摄像。1.4  统计学方法  统计学数据用(±s)表示，采用 SPSS10.0 软件进行处理。2  结果2.1  光镜观察2.1.1  光学显微镜下观察对照组：大脑皮质神经元

6、核大而圆,核仁清晰,胞质嗜酸性；皮质和纹状体血管周围及神经元周围有狭窄明亮带，是由于石蜡切片制片时组织收缩造成的人工假象所致。    模型组：皮质部分神经细胞核固缩、着色加深，甚至有些细胞核、质界限不清；细胞周围和血管周围水肿带明显增宽（见表1）,纹状体神经细胞水肿也比较明显，血管周围及神经元周围水肿带厚度明显增大（见表2），是由于脑组织水肿所致。    治疗组：大部分皮质神经元结构清晰,在皮质及纹状体水肿带宽度分别缩小（见表12）。表1  大脑皮质血管周围、神经细胞水肿带厚度（略）与模型组比较有显著差异，P<0.05

7、表2  大脑纹状体血管周围、神经细胞水肿带厚度（略）与模型组比较有显著差异，P<0.052.1.2  尼氏染色对照组：皮质锥体细胞及星形细胞,核呈空泡状,核仁清晰,尼氏体呈蓝色斑块状,分布于胞质中；模型组：皮质神经元、尼氏体减少；治疗组：尼氏体相对增多,但与正常组相比仍显着色较浅。2.2  电镜观察对照组：大脑皮质有明、暗两种神经元。神经元核大、圆、核仁明显，神经元胞质有丰富的内质网、核糖体和较多线立体、高尔基体等细胞器；纹状体神经元核规整,胞质细胞器丰富；皮质内血管腔圆，内皮细胞核完整，细胞器丰富，基膜清晰。    模型组：大脑皮质许多明神经元核内异染色质增多，胞质水肿，细胞器明显减少；纹状体神经元大部分核固缩，严重者核膜消失,胞质水肿，细胞器减少；皮质内血管周围水肿,基膜变窄或结构模糊，胶质膜水肿或消失。    治疗组：大脑皮质神经元大部分无明显水肿现象，胞质细胞器丰富,线粒体、内质网较规整；纹状体神经元可见核仁,细胞器丰富,细胞周围有水肿区减少或消失；皮质内血管周围水肿带缩小。 关键词:观察,治疗,作用,形态,神经,损伤,医学论文,大鼠脑缺血再灌注损伤神经元形态观察及川芎嗪治疗作用 内容摘要:【摘要】 目的探讨大鼠脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia r