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文档简介
1、肌酸肌酶测定实验目标掌握血清肌酸激酶(CK)测定(速率法)的原理,测定参数的设置及酶活性单位的计算。能及时发现和解决实验中出现的问题。实验原理CK催化磷酸肌酸与二磷酸腺苷(ADP)反应产生三磷酸腺苷(ATP)与肌酸,偶联己糖激酶(HK)及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)的催化反应。HK催化葡萄糖与ATP反应,形成葡萄糖-6-磷酸,G6PD催化葡萄糖-6-磷酸氧化,形成6-磷酸葡萄糖内酯及NADPH。可在340nm波长下测定NADPH生成速率而计算CK活性浓度。其反应式如下实验原理ATP 肌酸 ADP 磷酸肌酸CKADP 磷酸-6-葡萄糖 葡萄糖 ATPHKH NADPH 磷酸葡萄糖内酯-6
2、NADP 磷酸葡萄糖-6G6PDH+实验方法1、试剂准备:一定量的R2(参看R1瓶签)溶解一瓶R1,配制成工作液后方可使用。2、检测步骤(波长:340,温度:37)空白管空白管样本管样本管样本-0.02ml生理盐水0.02ml工作液1ml1ml分别混匀,在37度保温2分钟后,以空白管校零,计算每分钟吸光度变化率。半自动生化参数设置表项目名称项目名称CKCK测定方法速率法波长340试剂样本体积比250l:5l温度37保温时间2分钟测定时间1分钟K因子8095计算【参考范围】成年男性参考范围上限为38U/L174U/L(37),女性为26U/L140U/L(37)6300809520102010min/)/(6KKALUCK【临床意义】CK主要存在于骨骼肌和心肌细胞中,正常人血浆中CK活性很低。血清中CK活性增高主要见于:1.心肌梗死 心肌梗死发病早期,即发病后24h血清CK活性开始升高,1218h达最高峰值,可达正常上限的1012倍,在24d降至正常水平。CK对诊断心肌梗死较其他的心肌酶谱AST、LDH的阳性率高,特异性强,是用于心肌梗死早期诊断、估计病情和判断预后的较好指标。病毒性心肌炎CK也有明显升高。2.其他疾病 肌营养不良症、皮肌炎、骨骼肌损伤、脑血管意外、脑膜炎、
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