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1、正交实验法优选鬼臼毒素固体脂质纳米粒制备工艺 09-09-06 11:47:00 编辑:studa20 作者:史毓杰 曾抗 李国锋 张敏 谷东风 杨健 【摘要】 目的优化鬼臼毒素固体脂质纳米粒配方及工艺条件。方法采用正
2、交设计方法对制剂配方及工艺条件进行实验,以表面活性剂含量及表面活性剂成分,固体脂质的含量,搅拌速度为4个因素,固体脂质纳米粒粒径大小为考察指标,筛选出鬼臼毒素固体脂质纳米粒最佳的制剂量配方,并进行形态学和稳定性观察。结果通过对各配方的综合评价进行统计分析研究得出表面活性剂含量为5%,主要成分为Brij78,固体脂质含量为1%,搅拌速度1 000 r/min为最佳制备条件,鬼臼毒素含量为0.5%。结论根据正交实验结果制备的鬼臼毒素固体脂质纳米粒在粒径方面符合要求,且在稳定性、外观方面均较理想。 【关键词】 正交设计 鬼臼毒素 固体脂质纳米粒Abstract:ObjectiveTo s
3、elect the optimum condition of the podophyllotoxin solid lipid nanopartcles(PODSLN)preparation.MethodsThe optimization of PODSLN preperation was performed based on the orthogonal esperimental design.In this study,the particle size of PODSLN were taken as the index and the influenece of factors such
4、as concentration of surfactant,matrix lipid,the composition of surfactant and agitation velocity were evaluated.ResultsThe best formulation of POD SLN were 5% surfactant (Brij78),1% matrix lipid and agitation velocity was 1 000 r/min,in which podophyllotoxin was 0.5%.ConclusionThe POD SLN designed a
5、ccording to orthogonal experiment was coincidenced with the requirements in aspect of the particle size and it has been proved to be stable,reasonable and scientific.Key words:Orthogonal design; Podophyllotoxin; Solid lipid nanoparticles 随着纳米技术在生物工程学及医学领域的不断发展,固体脂质纳米粒(s
6、olid lipid nanoparticle,SLN)作为一种新型药物载体制剂,因其良好的组织相容性和靶向缓释特性,成为目前药物治疗和基因治疗的研究热点1。人乳头瘤病毒(HPV )的传播和蔓延是当今困扰医学界的难题之一,在我国其发病率也逐年提高,目前已占我国性传播疾病的第2位。目前治疗HPV感染的药物主要有0.5%鬼臼毒素酊剂、0.5%鬼臼毒素凝胶等制剂,但是其吸收后可引起严重的全身副作用,而且对局部正常组织的刺激性也较大,限制了其临床应用。因此我们设计出靶向性、缓释性的鬼臼毒素新型外用制剂鬼臼毒素固体脂质纳米粒(Podophyllotoxin solid lipid nanoparticl
7、es,PODSLN),并通过正交实验法优选其基质成分及工艺条件,以进一步提高制剂的质量,优化制备工艺。1 材料和仪器1.1 试剂鬼臼毒素(陕西德赛高科技生物股份有限公司,纯度98%);棕榈酸(汕头市西陇化工厂);卵磷脂(上海太伟药业有限公司);F68、Brij78(sigma公司);Myrj53(辽宁奥克纳米材料有限公司,药用规格);二氯甲烷、乙醇及其他试剂均为国产分析纯。1.2 仪器Zetasizer 3 000 HS粒径分析仪(Malvern Instruments Ltd,UK);磁力搅拌器(GL2型 巩仪市英峪华仪器厂);JB3A 型定时恒温磁力搅拌
8、器(上海雷磁新泾仪器有限公司);TMP1 型电子天平(德国制造)2 方法2.1 考察因素和水平根据文献和预实验结果选择影响配方主要方面的表面活性剂量含量及表面活性剂量成分,固体脂质的含量,搅拌速度为4个因素,每个因素选取3个水平,采用正交表 L9(34)进行筛选。因素水平表见表1。固体脂质纳米粒粒径的大小能够直接影响到制剂的质量和药物疗效,作为经皮给药的固体脂质体,其粒径的大小影响到制剂与皮肤之间的闭塞效应和皮肤渗透能2。因此我们以粒径大小作为评价指标对鬼臼毒素 固体脂质纳米粒的制备工艺进行优化。表1 正交实验因素水平表(略)2.2 鬼臼毒素固体
9、脂质纳米粒的制备参考文献3,取处方量卵磷脂,加入适量乙醇,超声使其溶解;精密称取处方量的鬼臼毒素,棕榈酸、十八烷酰胺溶于适量二氯甲烷,两者混合共同构成油相。另取处方量的F68,Brij78或Myrj53加入50 ml 双蒸水中,超声使其充分溶解,构成水相。油相缓慢注入1 0003 000 r/min搅拌的(75±2) 恒温水相中持续搅拌约24h,使有机溶媒完全蒸发并使体系浓缩至约515ml。将所行半透明微乳快速混于另一04的5 ml冰水中,并在冰水中超声1 h,即得鬼臼毒素固体脂质纳米粒混悬液。2.3 纳米粒径的测定取制备的鬼臼毒素固体脂质纳米粒混悬液适量,加适量双蒸水稀释后,用Zetasizer 3 000HS型粒径分析仪测定其粒径。2.4 形态学观察取根据正交实验结果制备的PODSLN混悬液适量加双蒸水稀释后滴加在覆盖碳膜的铜网上,以2%的磷钨酸钠液负染,在扫描电镜下照片,观察其粒径大小和形态。2.5 外观性状及稳定性考察将制
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