淋巴结外间变性大细胞淋巴瘤临床病理诊断要点的初步探讨

1、    淋巴结外间变性大细胞淋巴瘤临床病理 诊断要点的初步探讨        【摘要】目的探讨淋巴结外Ki-1阳性间变性大细胞淋巴瘤（Ki-1 positive anaplastic large cell lymphoma,Ki-1 ALCL）的临床病理诊断要点。方法应用病理组织学和免疫组织化学等方法对12例Ki-1 ALCL的临床病理学特性进行观察，并设置阴性对照组。结果淋巴结外Ki-1 ALCL病理组织学形态特异。免疫组织化学染色显示，12例淋巴结外ALCL均为

2、Ki-1阳性(CD30或BerH2），其中5例为白细胞共同抗原单克隆抗体(LCA)、上皮膜抗原单克隆抗体(EMA)阳性，2例LCA阴性、EMA阳性，1例LCA阳性、EMA阴性，其余4例LCA、EMA均为阴性。T、B细胞标记表明，7例为B细胞性，2例为T细胞性，另3例为非T非B细胞性。结论淋巴结外Ki-1阳性ALCL在病理组织学和免疫组织化学上有一定特异性，与其他肿瘤能够进行鉴别诊断。【主题词】淋巴瘤/病理学；淋巴瘤/诊断；免疫组织化学 Clinicopathologic criteria for the diagnosis of extranodal anaplastic large-cell

3、 lymphoma: a preliminary studyJI Tianhai, YAO Liqing, DENG Borong, et al.（Department of Pathology, Fuzhou General Hospital of PLA, Fuzhou 350025, China）【Abstract】ObjectiveTo study and observe the clinicopathologic features of extranodal Ki-1 (CD30) positive anaplastic large-cell lymphoma (ALCL) in o

4、rder to assess its diagnostic criteria.MethodsLymph nodes of 12 patients with Ki-1 positive ALCL were examined histopathologically and immunohistochemically.ResultsThere were distinctive histopathological features of ALCL cells. Immunohistochemical staining revealed that all of the ALCL were Ki-1 po

5、sitive (CD30 or Ber-H2). Of them, 5 cases were leucocyte common antigen (LCA) and epithelial membrane antigen (EMA) positive, 2 cases were LCA negative and EMA positive, 1 case was LCA positive and EMA negative, and the other 4 cases were both negative. Seven cases (58.3%) showed B cell markers, 2 c

6、ases (16.7%) showed T cell markers and remaining 3 cases had neither T nor B markers.ConclusionExtranodal Ki-1 (CD30) positive ALCL has distinctive histopathologic and immunohistochemical features which help its differential diagnosis.【Subject words】Lymphoma/pathology;Lymphoma/diagnosis;Immunohistoc

7、hemistryKi-1阳性间变性大细胞淋巴瘤(Ki-1 positive anaplastic large cell lymphoma, Ki-1 ALCL)是一种新的少见的淋巴瘤亚型，约占非霍奇金氏淋巴瘤的2%7%1，2。淋巴结外发生Ki-1 ALCL很罕见，其组织起源、组织形态、免疫学特征、生物学行为及预后都与其他淋巴瘤有显著不同。目前本病尚无统一的诊断标准，镜下病理组织学形态易与转移性低分化癌、恶性黑色素瘤、霍奇金病、恶性组织细胞增生症等相混淆。为此，我们对收集的12例该病例进行研究，观察其在临床特征、病理形态学和免疫组织化学上的共同点，并结合细胞遗传学研究提出结外Ki-1阳性ALCL

8、的临床病理诊断标准以供参考。材料与方法1.标本：12例淋巴结外Ki-1阳性ALCL为解放军第一六一医院、一七七医院及福州总医院19851998年手术或活检病例。选取典型病变蜡块做4 m切片，HE染色。分期采用Ann Arbor标准，并进行随访。2.方法：12例淋巴结外Ki-1 ALCL中，7例用新鲜组织冰冻切片，5例标本经10%福尔马林液固定，石蜡包埋切片，HE染色。免疫组化采用ABC法，所用第一抗体：鼠抗单克隆抗体（Ki-1/CD30）、抗全B单克隆抗体（CD20）、抗全T单克隆抗体（CD45RO）、白细胞共同抗原单克隆抗体（LCA）、上皮膜抗原单克隆抗体（EMA）、癌胚抗原单克隆抗体（CE

9、A）、细胞角蛋白单克隆抗体（CK）、黑色素瘤单克隆抗体（HMB45）、S-100蛋白单克隆抗体（S-100）等均为Dako公司产品；ABC试剂盒为Vector公司制品。用已明确诊断的淋巴瘤病例作为阳性对照组，Tris缓冲液代替第一抗体作为阴性对照组。结果1.临床资料：12例淋巴结外Ki-1阳性ALCL（皮肤4例、乳腺3例、软组织2例、胃肠道2例、骨髓1例）占同期诊断非霍奇金氏淋巴瘤总数的4.2%。其中男性7例，女性5例，男女之比为1.41。年龄最小者8岁，最大者76岁，中位年龄38岁。年龄呈双峰（儿童和成人），高峰年龄为915岁及4655岁。半数患者首发症状为不明原因的发热，另外表现为局部疼痛

10、和浅表淋巴结肿大。Ann Arbor分期，期2例，期7例，期2例，1例。2.组织病理学形态：肿瘤组织主要由大而多形性的瘤细胞组成，异样淋巴样大细胞浸润周边正常组织(1)。瘤细胞弥漫分布，细胞间不黏滞，偶见瘤细胞成巢倾向并绕有极少量的纤维结缔组织(2)。瘤细胞体积较大，呈卵圆形和多边形，包浆较丰富，嗜双色性，核异形多样，染色质凝块状，核仁明显，核分裂相多见。T细胞表型者细胞核周围可见一界限不清的淡灰色模糊狭窄空晕区；B细胞表型者为三五成群的中等偏小瘤细胞，无细胞周空晕。视野中偶见多核瘤巨细胞和胚胎样巨核细胞，甚至类R-S样细胞（3）。淋巴结外ALCL围血管现象比较明显，特别是发生于骨髓的ALCL

11、。有的肿瘤细胞侵袭区常有肉芽性纤维化伴炎细胞反应，或有双折光硬化性纤维带包绕残余正常细胞。部分视野肿瘤细胞与残余的正常细胞混合存在，瘤细胞形成粘连的片状，易误诊为转移性癌或恶性黑色素瘤。1大而多形性的肿瘤细胞侵袭间质，并与正常细胞混合存在HE×4002瘤细胞成巢并绕有纤维组织HE×2003R-S样瘤细胞，单核、多核瘤巨细胞，胚胎样巨核细胞HE×4004免疫标记Ki-1(CD30)阳性表达HE×4003.组织化学染色结果：网状纤维染色显示，巢状分布的肿瘤性淋巴样大细胞间绕有网状纤维，巢周网状纤维较少。纤维结缔组织明显增生者血管周围网状纤维较多。4.免疫组织

12、化学结果：7例冰冻切片瘤细胞Ki-1均阳性，表现为细胞膜点状阳性；5例石蜡切片均表达CD30阳性（Ber-H2），其中4例表现为细胞膜及细胞浆内点状阳性，1例细胞浆内核旁少量点状阳性(4)。12例标本中，5例为LCA、EMA阳性，2例为LCA阴性、EMA阳性，1例为LCA阳性、EMA阴性，4例LCA、EMA均阴性。T、B细胞标记表明，7例为B细胞性，2例为T细胞性，另3例为非T非B细胞性。其他抗体CEA、CK、HMB45、S-100均阴性(表1)。表112例Ki-1(CD30)的阳性表达与临床病理特征的关系临床资料例数Ki-1(CD30)表达例数LCA及EMA标记表达例数LCA(+)EMA(+

13、)LCA(-)EMA(+)LCA(+)EMA(-)LCA(-)EMA(-)性别男774012女551202年龄(岁)40883212<40442002发生部位皮肤443100乳腺330102软组织221010胃肠道221001骨髓110001细胞来源T220011B773202非T非B3320015.治疗及预后：手术并化疗4例（COP方案），单纯化疗8例（BACOP方案2例，CHOP方案5例，COP方案1例）。9例有随访结果，生存2例，最长生存时间26个月；7例因复发或转移死亡。平均生存时间9.6个月，1年生存率为38%。 讨论淋巴结外Ki-1 ALCL是一种高度恶性肿瘤，属非霍奇金氏淋

14、巴瘤一种罕见的特殊类型。多发生于男性，年龄呈双峰（儿童和成人），中位年龄约40岁。本病主要有发热消瘦等全身症状，可表现为结节性包块，影像学检查为占位性病变。发生在中枢神经系统的Ki-1 ALCL其症状与颅内的其他肿瘤有相似之处。约2/3的患者有血清乳酸脱氢酶增高（250 U/L）和血小板数增高。正常淋巴细胞，无论是T细胞或B细胞，由于接触植物凝集素、人类T细胞白血病病毒（、型）、EB病毒、金黄色葡萄球菌等可以引起Ki-1抗原的表达，淋巴细胞变为Ki-1阳性，表明Ki-1抗原是一种可诱导的、与淋巴样细胞有关的分子。在本组12例淋巴结外ALCL中，2例为T细胞性，7例为B细胞性，3例为非T非B细胞

15、免疫表型表达，与Lennert最近报道的免疫学与分子遗传学资料结果相符。淋巴结外ALCL多数为B细胞表型及JH重排，少数为T细胞表型及TCR-重排并表达活化T细胞相关抗原-白细胞介素2受体和组织相溶性抗原。此现象说明淋巴结外ALCL细胞不是同源性的，至少起源于两个细胞系3。细胞遗传学研究发现，T细胞表型者染色体t(25)(2335)转位4，B细胞表型者染色体5q35点断裂5，6。这也有助于对淋巴结外Ki-1 ALCL的进一步研究。目前，淋巴结外Ki-1 ALCL尚无统一的诊断标准。由于本病组织构型及细胞形态特殊，易误诊为转移性癌及恶性黑色素瘤；而多核瘤巨细胞和R-S样细胞出现，易与霍奇金氏病和

16、恶性组织细胞增生症混淆。因此，Ki-1(CD30)阳性是诊断该特殊类型淋巴瘤的有力依据。但某些研究已表明，在胰腺腺泡癌及恶性黑色素瘤中偶尔也会出现CD30弥漫性胞浆弱阳性，当上述肿瘤发生转移时易与淋巴结外ALCL混淆。为此，我们在分析临床特征的基础上，以免疫组化与形态学标准相结合，加以遗传学特性，提出了以下6点有关淋巴结外ALCL的诊断标准，谨供参考：(1)原发部位组织器官附近的淋巴结均无淋巴瘤病变；或后发于原发灶，早期无同细胞类型的白血病血象。(2)黏膜相关淋巴组织发生的ALCL不完全破坏腺体或残留有腺体结构，而瘤细胞则侵袭于间质（这与原发性低分化、未分化癌或肉瘤的摧毁性破坏显然不同）4。(

17、3)T细胞表型者细胞核周围可见一界限不清的淡灰色模糊狭窄空晕区；B细胞表型者则为三五成群的中等偏小瘤细胞，无细胞周空晕。(4)淋巴结外ALCL特征性围血管现象。异样淋巴样瘤细胞呈侵袭性生长，有形成团块或巢状倾向，并绕有网状纤维，可见花环状、胚胎样和R-S样多核及单核瘤巨细胞。(5)瘤细胞均表达Ki-1或CD30(Ber-H2)，而Leu-M1、Lu-5、Lysozymc、CEA、HMB45、S-100、CK均阴性。(6)B细胞表型者JH重排，T细胞表型者TCR-重排并表达活化T细胞相关抗原-白细胞介素2受体和组织相溶性抗原。部分T细胞表型者染色体t(25)(2335)转位，B细胞表型者染色体5

18、q35点断裂。与淋巴结外ALCL相鉴别的肿瘤包括转移性低分化癌、恶性黑色素瘤、霍奇金病、恶性组织细胞增生症等。根据病史、临床表现、镜下形态及ANAE、Lysozymc、CD68、Mac387，可与恶性组织细胞增生症鉴别；根据LCA、EMA、Leu-M1，可与霍奇金病鉴别（因霍奇金病Leu-M1阳性，而LCA、EMA阴性）；根据CK、Lu-5，可与低分化癌鉴别；根据HMB45、S-100，可与恶性黑色素瘤鉴别。综上所述，淋巴结外Ki-1 ALCL在病理组织学、组织化学和免疫组化以及细胞遗传学上有一定的特异性，与其他肿瘤能够进行鉴别诊断。季天海（350025 南京军区福州总医院病理科）姚丽青（35

19、0025 南京军区福州总医院病理科）邓波荣（解放军第一六一医院）黎洪展（广州医学高等专科学校）余英豪（350025 南京军区福州总医院病理科）参考文献1，Nakamura SH, Takage N, Kojima M, et al. Clinico-pathologic study of large cell anaplastic lymphoma (Ki-1positive large cell lymphoma)among the Japanese. Cancer，1991,68：118-129.2，The non-Hodgkins lymphoma classification project. A clinical evaluation of the international lymphoma study group classification of Non-Hodgkins lymphoma. Blood，1997,11:3909-3918.3，Stein H, Mason DY, Gerdes J, et al. The expression of the Hodgkins disease associated antigen K