甲氧基操作规程

1、 甲氧基操作规程目的：制订甲氧基测定法标准操作规程。适用范围：甲氧基测定。责任：检验室操作人员按本规程操作，检验室主任监督本规程的执行。程序：1.操作步骤1.1取规定量的供试品（相当于甲氧基约10mg）精密称定，置圆底烧瓶A中。1.2在烧瓶中加入熔融的苯酚2.5ml、氢碘酸5ml，另在两个吸收管内，分别加入10%醋酸钾的冰醋酸的溶液6ml与4ml，再各加溴0.2ml；连接装置，并将圆底烧瓶A置于加热用的油浴中。1.3通过支管将二氧化碳或氮气流缓慢而均衡地以每秒钟12个气泡通入烧瓶，并缓缓加热使温度控制在恰使沸腾液体的蒸气上升至冷凝管的半高度（控制升温30分钟使油浴温度上升至135140），保持

2、此温度约45分钟完成反应。1.4拆卸装置，将吸收管C和D的内容物倾入250ml碘瓶（内盛25%醋酸钠溶液5ml）中，用水淋洗吸收管及其可拆卸的玻璃管，并入碘瓶中使总体积约为125ml；1.5加入甲酸0.3ml，转动碘瓶至溴的颜色消失，再加入甲酸0.6ml，密塞振摇，使过量的溴完全消失，放置12分钟。1.6加入碘化钾1.0g与稀硫酸5ml，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定（以淀粉指示液指示滴定终点），并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于0.5172mg的甲氧基。2.注意事项2.1整个装置连接紧密。2.2称取的供试品应小心置于反应烧瓶A的底部中

3、心，保证供试品能全部溶入苯酚2.5ml中。2.3加热反应后生成的碘甲烷藉通入的CO2或N2气流一起自反应液中蒸馏出来，经过洗涤管，去除干扰物质（碘化氢和碘）。2.4反应过程中，注意温度的控制，一般控制油浴温度不宜超过140，升温速度太快（约30分钟），在到达温度后，45分钟可完成反应；如果供试品的分子中有2个以上甲氧基时，加热时间应延长为13小时。2.5通入的CO2或N2气流应不含O2；速度应以每秒12个气泡为宜，速度太快会将游离碘和氢碘酸等一起蒸出，使结果偏高；速度太慢，则生成的碘甲烷在未到达吸收管之前就被冷凝而损失，使结果偏低。2.6氢碘酸应为无色或微黄色液体，含量56.557.0%，如果

4、黄色加深或不纯，应经过处理（可加次亚磷酸处理）纯化后方可使用。氢碘酸与溴均有强刺激性，操作中取用注意安全。2.7溴应加过量，使反应完全，如加溴量不足，会使含量偏低；并应在加入甲酸，密塞振摇时使过量的溴完全消失，以免测得含量偏高。2.8空白试验中应包括除供试品以外的各种所用试剂。3.记录与计算3.1记录天平型号及室温和相对湿度，供试品与试药的名称、规格及取用量，滴定液的浓度（mol/L）及其消耗量（ml）。3.2计算OCH3%（V1-V2）×F×0.5172/W×100%式中：V1、V2分别为供试品与空白滴定时消耗硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）体积（ml）；F

5、 硫代硫酸钠滴定液的浓度值与其名义值之比；W 供试品的重量（mg）； 0.5172由于OCH3CH3IHIO33I2,故每1甲氧基消耗6分子Na2S2O3 供试品应测定两份，相对偏差不得过0.5%。 溶液颜色检查法标准操作规程 目 的：建立溶液颜色检查法标准操作规程。适用范围：溶液颜色检查法。责 任：质检员实施本操作规程，检验室主任负责监督本规程正确执行。程 序： 溶液颜色检查法系控制药品有色杂质限量的方法。有色杂质的来源：一是由生产工艺中引入，二是贮存中由于药品不稳定而产生。中国药典2000年版二部附录IX A溶液颜色检查法项下规定了三种检查方法。第一法1.简述本法为目测比色法，即将供试品溶

6、液与各色调标准比色液进行比较，以判定结果。2.仪器与用具2.1纳氏比色管 用25ml纳氏比色管并具有10ml刻度标线，要求玻璃质量较好，色泽、刻度标线一致。2.2白色背景要求不反光，一般用白纸或白布。3.试药与试液3.1重铬酸钾用基准试剂，硫酸铜及氯化钴均为分析纯试剂。3.2比色用重铬酸钾溶液 取重铬酸钾，研细后，在120干燥至恒重，精密称取0.400g，置500ml量瓶中，加适量水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。每1ml溶液含0.800mg的K2Cr2O7。3.3比色用硫酸铜溶液 取硫酸铜约32.5g，加适量的盐酸溶液（140）使溶解成500ml，精密量取10ml，置碘瓶中，加水50ml、醋酸

7、4ml与碘化钾2g，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失。每1ml的硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于24.97mg的CuSO4·5H2O，根据上述测定结果，在剩余的原溶液中加适量的盐酸溶液（140），使得1ml溶液中含62.4mg的CuSO4·5H2O，即得。3.4比色用氯化钴溶液 取氯化钴约32.5g，加适量的盐酸溶液（1 40）使溶解成500ml；精密量取2ml，置锥形瓶中，加水200ml，摇匀，加氨试液至溶液由浅红色转变至绿色后，加醋酸-醋酸钠缓冲溶液（PH6.0）10ml，加热至60，再加二甲酚橙指

8、示液5滴，用乙二胺四醋酸二钠滴定液（0.05mol/L）滴定至溶液显黄色。每1ml的乙二胺四醋酸二钠滴定液（0.005mol/L）相当于11.90mgr的CoCl2·6H2O，根据上述测定结果，在剩余的原溶液中加适量的盐酸溶液（140），使每1ml溶液中含59.5mg的CoCl2·6H2O即得。3.5各种色调标准贮备液的制备 按下表量取比色用重铬酸钾溶液、比色用硫酸铜溶液、比色用氯化钴溶液与水，摇匀，即得。色 调比色用氯化钴液(ml)比色用重铬酸钾液（ml）比色用硫酸铜液（ml）水（ml）黄绿色1.222.87.268.8黄 色4.023.3072.7橙黄色10.619.0

9、4.066.4橙红色12.020.0068.0棕红色22.512.520.045.03.6各种色调色号标准比色液的制备 按下表量取各该色调标准贮备液与水，摇匀，即得。色号12345678910贮备液(ml)0.51.01.52.02.53.04.56.07.510.0加水量(ml)9.59.08.58.07.57.05.54.02.504.操作方法除另有规定外，取各该药品项下规定量的供试品，加水溶解，置于25ml的纳氏比色管中，加水稀释至10ml。另取规定色调和色号的标准比色液10ml，置另一纳氏比色管中，两管同置白色背景上，自上向下透视；或同置白色背景前，平视观察；比较时可在自然光下进行，以

10、漫射光为光源，供试品管呈现的颜色与对照管比较，不得更深。5.注意事项5.1所用纳氏比色管均应洁净、干燥，洗涤时不能用刷子，应用铬酸洗液浸泡，然后冲洗、避免表面粗糙。5.2检查时光线应明亮。5.3如果供试管中的颜色与对照管中溶液颜色相近时应将比色管互换位置后再行观察。6.记录应记录供试品溶液的制备方法，标准比色液的色调色量，比较结果。7.结果与判定 供试品溶液如显色，与规定的标准比色液比较，颜色相似或更浅，即判为符合规定；如更深则判为不符合规定。第二法1简述 本法为分光光法。2仪器 分光光度计3操作方法3.1除另有规定外，如供试品为原料药，称取该药品规定量的细粉，加水溶解使成10ml（或加水溶解

11、使成规定量的体积），必要时滤过，滤液照分光光度法于规定波长处测定吸收度。3.2如供试品为片剂，取该片剂，研细称取相当于该药品规定量的细粉，加水溶解使成规定量的体积，振摇或用超声波处理使溶解，滤过，取滤液照分光光度法于规定波长处测定吸收度。3.3如供试品为注射或液体制剂，量取该药品适量，加水稀释成规定的浓度（供试品的浓度与规定相同时，可直接测定），照分光光度，以水或以注射剂所用的溶剂为空白，于规定波长处测定吸收度。4.记录应记录仪器型号与测定波长；供试液的制备方法、测得读数。5.注意事项3.1与3.2中的滤过是指在规定“滤过”而无进一步说明时，使液体通过适当的滤纸或相应的装置过滤，直至滤液澄清。

12、6.结果判定 按规定溶剂与浓度配制成的供试液进行测定，如吸收度小于或等于规定值，判为符合规定；大于规定值，则判为不符合规定。第三法（色差计法）1.简述 本法是通过色差计直接测定药品溶液的透射三刺激值，对其颜色进行定量表述和分析的方法当供试品溶液的颜色处于合格边缘，目视法难以准确判断时；以及供试液与标准比色液色调不一致时，更可显示本法的优点与适用性。判断方法是直接将标准比色液和供试品溶液的三刺激值（或色品坐标值）进行比较，或通过比较它们分别与水的色差值而实现。色差计的测色原理见中国药典2000年版二部附录IX A溶液颜色检查法。2.仪器和性能测试2.1仪器构成：测色色差计是由照明、探测及读数处理

13、系统三大部分所组成。照明系统多为白炽光源，也有用微型脉冲氙灯的；探测器多为硒（硅）光电池、硅光电二极管或光电管，并配以拟合人眼色觉特性的滤光器；读数系统为指针式或数显仪表；其输出结果除三刺激值外，还有根据CIE（国际照明委员会）表色系统自动计算而得的各种色度学参数（可根据需要进行选定）。测色色差计除可测定溶液样品的透射色外，还可测定固体样品的反射色。2.2仪器的性能测试:根据中华人民共和国国家技术监督局颁布的测色色差计检计规程JJG594-89的规定进行检定。仪器首先应符合卢瑟条件，它决定着仪器测色准确度的高低，因而为减少由于卢瑟条件不够而导致的测色误差，仪器一般配备有专用工作白板、色板或其它

14、其准物质以校正仪器。按照仪器测量结果的准确度，仪器可分为一级和二级，检定项目除准确度外，还有重复性等。3.样品测定操作法除另有规定外，用水对仪器进行校准，并把水作为第一份样品进行测定，仪器将给出颜色值，接着依次取按各品种项下规定的方法配制的供试品溶液和标准比色液，分别进行测定，仪器不仅可测出两种溶液的颜色值，还给出供试品溶液和标准比液分别对水的色差值，如供试品溶液与水的色差值不超过标准比色液与水的色差值，则样品合格，反之则不合格。4.注意事项4.1测定池应洁净透明，可用洗液浸泡清洗。4.2水的三刺激值为：X=94.81 Y=100.00 Z=107.32，如测定后水的三刺激值中任一值与标准值的偏差大于1.5，则应重新校准仪器。4.3供试品溶液配制后应立即测定，如溶液中含有气泡，可