非洛地平杂质I方法学验证

1、非洛地平杂质I方法学验证1. 测定仪器及检测条件仪器:Waters 515泵 2487紫外检测器 7725i手动进样器 N2000工作站测定条件柱: AlltimaTM C18 5u Serial No.2009050187 规格250*4.6mm流速：11.2ml/min 柱温：室温 检测波长：238流动相：乙腈：甲醇：0.05mol/L磷酸二氢钾 500：270：3302非洛地平杂质I纯度检查精密称取杂质I25mg至50ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释到刻度，配成0.5mg/ml的供试品溶液。对照溶液配制精密吸取供试品溶液1ml到100ml容量瓶中，用流动相稀释到刻度，配成1%的对照溶液。系

2、统适用性试验取对照溶液连续进样5次.A平均=155022 RSD=0.71% n=9114供试品溶液进样1次，所有杂质峰面积之和与对照溶液之比，按外标法计算，杂质I纯度为99.0%。3分离度试验精密称取非洛地平50mg到100ml容量瓶中，同时吸取供试品溶液0.3ml（1.5mg）到同一容量瓶中，用流动相溶解并稀释到刻度，在测定条件下进样，杂质I与非洛地平的分离度为2.3。4最低检测限试验称取杂质I10mg到100ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释到刻度，再吸取该溶液100ul到100ml容量瓶中，用流动相稀释到刻度，配成0.1ug/ml的溶液，在信噪比大于3的条件下进样1次，吸取0.1ug/m

3、l溶液1ml加2ml流动相混匀，配成0.033ug/ml的溶液，在信噪比大于3的条件下进样1次再吸取吸取0.1ug/ml溶液1ml加4ml流动相混匀配成0.02ug/ml的溶液，在信噪比大于3的条件下进样1次，测得最低检测浓度0.02ug/ml。5线性关系测定标准溶液配置 精密称取供试品杂质I15mg到100ml 容量瓶中，用流动相溶解并稀释到刻度，吸取10ml到100ml容量瓶中，用流动相稀释到刻度，配成标准储备液，分别吸取储备液1ml，2ml，5ml，10ml，20ml到50ml容量瓶中，用流动相稀释到刻度，配成15号0.3mg/ml，0.6 mg/ml，1.5 mg/ml，3.0 mg/

4、ml，6.0 mg/ml的标准溶液。在测定条件下分别进样1次，以峰面积为横坐标，浓度为纵坐标测定线性关系。杂质I线性关系浓度ug/ml峰面积回归方程相关系数039422Y=30890X+1678.7R=0.9998806213751549006309366460187074从上述结果可以看出：杂质I在浓度0.3ug/ml6.0ug/ml之间，线性关系良好，相关系数均大于0.9995。6回收率实验 精密称取供试品（批号20090901）约180mg，置10ml容量瓶中，平行称取10份，其中一份用流动相溶解并稀释到刻度做为空白溶液，另9份每3份为1组，分别用线性项下的1号，3号，5号标准溶液溶解，

5、将上述溶液高速离心20min，取上清液进样分析，取线性项下3号标准溶液（1.5mg/ml）连续进样5次，A平均=48687，RSD=0.65%，将空白溶液进样2次，杂质I A平均=4541，将另外9份样品分别进样1次，所得的杂质I的峰面积均减去空白溶液中杂质I峰面积4541，与标准溶液对比按外标法计算回收率。结果归纳如下：杂质I次数加入浓度ug/ml峰面积测定浓度ug/ml回收率%平均回收%RSD%St%10.394910.29297.599.92.52.4720.396060.29698.730.3101860.314104.641.5483631.49099.351.5495231.526

6、101.761.5494941.525101.776.01878195.78796.486.01931955.95299.296.01945805.99599.9200901032009010220090101批号0.399 0.4260.417总杂质%加速实验加速1个月0.0800.0910.081依拉普利拉%0.1180.1240.122依拉普利双酮%0.4220.3890.4140总杂质%加速2个月0.0790.0790.08依拉普利拉%0.1210.1210.124依拉普利双酮%0.3980.4030.425总杂质%加速3个月0.0760.0760.082依拉普利拉%0.1240.12

7、0.136依拉普利双酮%0.4060.4120.425总杂质%加速6个月0.0820.0790.081依拉普利拉%0.130.1270.131依拉普利双酮%200901032009010220090101批号0.433 0.4330.394总杂质%留样0个月0.0970.0960.089依拉普利拉%0.1260.1280.12依拉普利双酮%0.1270.3890.41总杂质%留样3个月0.3840.0780.082依拉普利拉%0.0790.120.127依拉普利双酮%0.4330.4400.403总杂质%留样6个月0.0860.0850.083依拉普利拉%0.1260.1260.128依拉普利

8、双酮%0.3850.360.374总杂质%留样9个月0.0810.0750.081依拉普利拉%0.1320.1160.124依拉普利双酮%0.1060.1080.104其他杂质点%200901032009010220090101批号 总杂质%留样12个月依拉普利拉%依拉普利双酮%其他杂质点%总杂质%留样18个月依拉普利拉%依拉普利双酮%其他杂质点%总杂质%留样24个月依拉普利拉%依拉普利双酮%其他杂质点%总杂质%留样36个月依拉普利拉%依拉普利双酮%其他杂质点%非洛地平加速实验、批号总杂质1个月%总杂质2个月%总杂质3个月%总杂质6个月%200901010.423 0.4080.4150.397200901020.471 0.410.4140.369200901030.384 0.400.4120.382非洛地平留样稳定性批号0个月%3个月%6个月%9个月总杂质 %杂质I %200901010.4040.3940.420.3670.02