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文档简介

1、 . . . I / 23摘要摘要本文研究了不同提取溶剂对黄芩苷提取效果的影响。具体容摘要如下:使用超声波法从干燥的黄芩根中提取黄芩苷,提取过程分别采用不同的提取溶剂,不同提取溶剂选择水、60%乙醇、60%甲醇为实验材料。分别提取出黄芩苷粗品后,对提取出来的黄芩苷粗品进行分离纯化,用紫外分光光度法对黄芩苷的浓度和质量进行测定,从而测出每种溶剂中黄芩苷的提取率,然后对三种不同溶剂的提取率进行分析和比较,分析不同提取溶剂对黄芩苷提取效果的影响,以确定提取黄芩苷可使用的最佳的提取溶剂。通过实验分析黄芩苷的最佳提取溶剂为乙醇,甲醇次之,最后为水。关键词关键词:黄芩苷;黄芩根;不同溶剂;超声波提取;紫外

2、分光光度法 . . . II / 23AbstractAbstractOn the basis of a lot of literatures,we studied different extraction effect of the different extraction solvent.Specificsummary as follows: extract baicalin from the root of Scutellaria baicalensis with ultrasonic wave extraction , baicalin extraction process using

3、 different extraction solvent, we choose methanol 、ethanoland、 water as the extraction solvent. When the baicalin are extracted, we separated and purified them from compound.Baicalin were analysed and determined by UVSpectrophotometry.We also worked out the extraction efficiency of baicalin and made

4、 a comparation among different extraction efficiency.Finally we confirmed that ethanol is the best extraction solvent,the second is methanol,the last one is water.KeyKey WordsWords:Baicalin;Ultraviolet spectrophotomeg; Ultrasonic wave extraction; The root of Scutellaria baicalensis;Different extract

5、ion solvent . . . III / 23目录目录第一章绪论第一章绪论 11.1 概述 11.2 黄芩中的化学成分 21.2.1 黄酮和黄酮醇类 21.2.2 挥发油类 21.3 黄芩的临床应用 21.4 黄芩苷的理化性质 21.5 黄芩苷的药理作用 31.5.1 抗氧化 31.5.2 抗菌与抗病毒 31.5.3 抑制醛糖还原酶活性 41.5.4 其它 41.6 黄芩苷的提取方法 41.6.1 水煎煮法 41.6.2 微波提取法 41.6.3 超声波提取法 51.7 黄芩苷的分离纯化方法 51.8 黄芩苷含量的测定方法 51.9 本论文的研究容与研究意义 6第二章不同溶剂提取黄芩苷第

6、二章不同溶剂提取黄芩苷 72.1 超声波提取原理 72.2 实验部分 72.2.1 以水为提取溶剂 72.2.2 以 60%乙醇为提取溶剂 82.2.3 以 60%甲醇为提取溶剂 9第三章紫外分光光度法测黄芩苷含量第三章紫外分光光度法测黄芩苷含量 11 . . . IV / 233.1 实验仪器与试剂 113.2 实验部分 113.2.1 黄芩苷标准溶液的制备 113.2.2 测出所测溶液吸光度 123.3 实验结果与讨论 12结论结论 14参考文献参考文献 15附录附录 16致致 20 . . . 1 / 23第一章第一章 绪论绪论1.11.1 概述概述黄芩又名香水草、山茶根、土金茶根、空心

7、草,多年生草本植物,双子叶植物纲唇形科植物,是一种药用植物且药用效果较好,受到中药方面学者的青睐,研究发现,其药用成分主要存在于根部,主根长大,略呈圆锥状,外皮褐色。经过十几年的辛苦努力,学者们已从黄芩中分离得到多种黄酮类化合物,如黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素等等,还有甾醇类化合物、糖类化合物和氨基酸等成分,其中黄酮类化合物被确认为是最主要的药用有效成分。黄芩始载于东汉神农本草经列为中品。弘景本草经集注曰:“圆者名子芩为 ,破者名宿芩,其腹中皆烂,故名腐肠”。颂本草图经谓:“今川蜀、河东、近郡皆有之,苗长尺余,茎干粗如箸,叶从地四面作丛生,类紫草,高一尺许,亦有独茎者,叶细长青色,两两相

8、对,六月开紫花,根如知母粗细,长四五寸,二月、八月采根暴干”。以上所述植物形态与今所用黄芩基本一致。黄芩具有清热燥湿,泻火解毒,止血安胎等作用,为清凉解热药。主治肺热咳嗽,血热妄行,湿热下痢,胎动不安,动脉硬化,高血压,植物神经官能症等症。黄芩产于、等地,我国大约有一百多种植物属于黄芩属,根可入药的只有十多种,药用疗效较好的有粘毛黄芩(蒙,)、黄芩()、滇黄芩(,)、黄芩()、川黄芩()等1黄芩生长于石砾质或粘土质山坡、山顶草地、丘陵坡地、草原。常见于较干旱的荒山坡、土岗以与草原型石砾质山地阳坡。黄芩喜温和气候,喜光,耐旱,怕水涝、耐寒,成株地下根部能耐 30低温。适宜于中性或偏碱性、土质疏松

9、、肥沃土壤生长。在低洼积水或雨水过多的地方生长不良,易造成烂根死亡 . . . 2 / 231.21.2 黄芩中的化学成分黄芩中的化学成分1.2.11.2.1 黄酮和黄酮醇类黄酮和黄酮醇类黄酮类成分为黄芩中的主要的化学成分,从黄芩中获得黄酮和黄酮醇类化合物四十多种,最主要的黄酮类成分有黄芩苷(Baicalin)、黄芩素(Baicakin)、汉黄芩苷(Wogonoside)和汉黄芩素(Wogonin)、黄芩新素 I、II、去甲汉黄芩素、7-甲氧基黄芩素、7-甲氧基去甲汉黄芩素。其中黄芩苷作为黄芩药材的主要有效成分,在黄芩植株根、花、叶、茎等器官中均有分布,但含量上却有明显差异,其中根部的黄芩苷含

10、量最高,其次是花、叶、茎。2因此,黄芩苷主要分布在根中,本试验所用原料为黄芩的根部。1.2.21.2.2 挥发油类挥发油类得坡等利用气相一质谱联用方法对中药黄芩根的挥发性成分进行了分析研究,鉴定了 19 种挥发性成分,17 种为首次发现,其中烯类成分有旷藿香烯、愈创木烯、异戊二烯等,酮类成分有薄荷酮、番薄荷酮等,酯类成分有癸基、己基、邻苯-二甲酸酸二酯、邻苯二甲酸二异己酯等。其中异戊二烯是植物次生代过程中合成萜类化合物的基本单位,一般来说,在植物体很难发现其存在,另外邻苯二酸酯(26.1%)则是赛璐璐和化妆品工业常用的活性物质3。1.31.3 黄芩的临床应用黄芩的临床应用 1. 用于湿温发热、

11、胸闷、口渴不欲饮,以与湿热泻痢、黄疸等症。2. 用于热病高热烦渴,或肺热咳嗽,或热盛迫血外溢以与热毒疮疡等。此外,本品又有清热安胎作用,可用于胎动不安,常与白术、竹茹等配合应用。 1.41.4 黄芩苷的理化性质黄芩苷的理化性质黄芩苷主要来源于唇形科植物黄芩的干燥根,结构式如下图 . . . 3 / 23黄芩苷为淡黄色针晶体,熔点为 223-225,18D+123(c=0.2,吡啶-水) ;易溶于 N,N-二甲基甲酰胺 ,吡啶中,可溶于碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠等碱性溶液中,但在碱液中不稳定,渐变暗棕色,微溶于热冰醋酸,难溶于甲酸、乙酸、丙酮,几乎不溶于水 、乙醚、 苯、氯仿等 。1.51.5

12、黄芩苷的药理作用黄芩苷的药理作用黄芩苷(Baicalin)的生物活性非常显著 ,不但具有抑菌、利尿、抗炎、抗变态与解痉作用,并且 还具有较强的抗癌反应等生理效能。在临床医学 上已占有重要地位。除此以外,黄芩苷还能吸收紫外线 ,抑制黑色素的生成,因此也 可以应用于化妆品的生产中。1.5.11.5.1 抗氧化抗氧化 由于黄芩苷能清除羟自由基和烷自由基,因此可抑制由他们引起的线粒体脂质过氧化以与卵磷脂体代和对抗过氧化氢引起的细胞损伤,即具有抗氧化的作用。1.5.21.5.2 抗菌与抗病毒抗菌与抗病毒黄芩苷在低于细胞毒浓度时可抑制T 细胞和艾滋病毒,在 HIV1 被细胞开始吸附时可阻止其复制,也可干扰

13、 HIV1 攻击靶细胞,因此黄芩苷具有抗 HIV1病毒的作用。另外黄芩苷的抗菌谱十分广泛,它对痢疾杆菌、白喉杆菌、链球杆菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、肺炎双球菌等均有抑制作用。程国强等以临床眼科常见病原菌为实验菌种,研究黄芩苷的体外抗菌作用,得出黄芩苷对所有病原菌均有不同程度的抑菌和杀菌作用4。熊英对黄芩苷抗白念珠菌的作用机制进行研究发现其 . . . 4 / 23在体外抗白念珠菌的作用较强。5总之,黄芩苷抗菌作用强,抗菌谱广,受到医学界的广泛关注。1.5.31.5.3 抑制醛糖还原酶活性抑制醛糖还原酶活性家庆等研究发现黄芩苷对醛糖还原酶有明显的抑制作用。长山经过研究也发现黄芩苷能抑制醛糖还原酶活性

14、,降低尿白蛋白排泄率,有助于早期糖尿病的治疗。61.5.41.5.4 其它其它黄芩苷还有镇静、解热、保肝利胆等作用,可用于治疗肝炎,对急性黄疸型肝炎、急性无黄疸型肝炎与慢性肝炎均有疗效,并对免疫、心脑血管、消化、神经等系统均有保护作用。1.61.6 黄芩苷的提取方法黄芩苷的提取方法1.6.11.6.1 水煎煮法水煎煮法水煎煮法是提取中药成分的最古老的方法,即将原料加水煎煮取煎出液的方法。此法能够提取植物中的大部分有效成分,且简单易行,只需将一定量的药材粉碎后,置于适宜的煎煮器中,加水浸没药材,反复煮沸,每次 1-2 小时,然后分离煎出液,每次分离出的煎出液合并到一起即可。此法优点是简单易行,对

15、提取仪器没有要求,在水浴锅或电炉上均可进行。缺点是煎出液杂质多,后处理复杂,煎煮时间长,浪费时间,提取率低。1.6.21.6.2 微波提取法微波提取法微波与无线电波、红外线、可见光一样都是电磁波,微波是指频率为300MHz-300KMHz 的电磁波,即波长在 1 米到 1 毫米之间的电磁波。通过微波来实现提取、干燥剂灭菌等的方法称为微波法 。微波法提取的原理: 微波能够对物料进行立体的并且是穿透性的加热。在微波场中,由于各种物料吸收微波能力的差异使得萃取体系中的某些组份被选择性加热,从而使得物质部产生能量差,被萃取的物质得到足够的动力从体系中分离。微波法提取的优点是没有高温热源,消除温度梯度,

16、大大提高了中药中有效成分的提取率。还能有效保护物料中的有效成分,而且节省提 . . . 5 / 23取时间,只用几分钟就可完成提取过程。71.6.31.6.3 超声波提取法超声波提取法超声波指频率高于 20KHz,人的听觉阈以外的声波。超声波能够在提取溶剂中产生机械效应,空化效应和热效应,通过增大溶剂分子的运动速度、增大溶剂的穿透力以提取植物有效成分。提取原理是:这些效应共同配合,能够有效的破坏植物的细胞壁和细胞膜结构,使细胞破碎,释放出细胞中的容物,将有效成分释放到提取溶剂中,并与有效成分充分接触、融合,加速有效成分在提取溶剂中的溶解和混合。因此,此法可用于植物活性成分的提取,而且效率高,可

17、明显缩短提取时间,还可保护有效成分不被破坏。超声提取的特点是:提取时不需加热,避免了其他方法长时间加热对有效成分的破坏,而且也节省了能源。超声波提取提高了有效成分的提取率,有利于中药资源的充分利用,提高了经济效益。溶剂用量少,节约了溶剂。提取物有效成分含量高。由于这些优点,超声波技术在中药制剂提取工艺中的应用越来越受到关注。是目前为止较为先进而且应用较为广泛的中药提取方法。1.71.7 黄芩苷的分离纯化方法黄芩苷的分离纯化方法上述提取法得到的中草药提取物仍然是混合物,需进一步除去杂质,进行分离、纯化,可采用酸碱沉淀法进行。酸碱沉淀法就是利用提取液中某些成分能在酸或碱中溶解,当加碱或酸调整溶液的

18、 pH 值后,所需成分又变回不溶物而析出,最后可以通过离心把这些化合物分离出。但是应该注意,酸度,碱度都不宜过高,否则,所要分离的物质会生成其他物质。1.81.8 黄芩苷含量的测定方法黄芩苷含量的测定方法采用紫外分光光度法对黄芩苷含量进行测定和分析。紫外分光光度计工作原理:紫外分光光度计基本工作原理是:利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收,在紫外可见光的围,对于一个特定的波长,吸光度与试样中该成分的浓度成正比,根据吸光度与已知浓度的标样的比较进行定量分析。紫外分光光度法原理:在一样吸收波长处,溶液的浓度与吸光度成正比。先用标准品绘制一个标准曲

19、线,然后根据所测得的吸光度的值带入标准曲线的线性方程,得 . . . 6 / 23出待测溶液的浓度,最终计算出所得的黄芩苷粗品中的黄芩苷含量。1.91.9 本论文的研究容与研究意义本论文的研究容与研究意义本论文的主要工作是对不同提取溶剂对黄芩苷的提取效果的影响进行比较,从而确定最适于用于提取黄芩苷的溶剂,也是一种对黄芩苷提取上的优化。用分光光度法计算出黄芩苷的得率,比较、分析不同溶剂对黄芩苷的提取效果,这是一种目前较为常用也比较准确的方法。黄芩是我国传统常用的中药材,以其较高的药用价值和良好的药用效果越来越受到广大药学工作者的关注,而其主要成分黄芩苷的提取率的提高成为相关科学家的研究重点,虽然

20、产生了许多新的提取方法,但目前黄芩苷的提取率依然很低,所以对黄芩苷的提取进行优化具有重要意义。 . . . 7 / 23第二章第二章 不同溶剂提取黄芩苷不同溶剂提取黄芩苷中药材的提取过程是固掖扩散过程,该过程分为:浸润、溶解、扩散和置换四个阶段。在温度度、原料表面积、原料外浓度差以与原料粒径一样的情况下,溶剂的极性、粘度等物性影响到植物组织中不同物质的提取速度和溶出度。不同的提取溶剂具有不同的极性与粘度,因此对物质的提取速度与溶出度也不同,从而影响提取效果。本论文使用三种不同的溶剂,分别为水、60%乙醇、60%甲醇,然后对黄芩苷的提取率进行比较,确定最佳的提取溶剂。2.12.1 超声波提取原理

21、超声波提取原理将药品放进超声波清洗仪后,开启,超声波的震动会产生机械效应、空化效应、以与热效应、乳化、扩散和击碎效应,这些效应共同配合,能够有效的破坏植物的细胞壁和细胞膜结构,使细胞破碎,释放出细胞中的容物,将有效成分释放到提取溶剂中,并与有效成分充分接触、融合,加速有效成分在提取溶剂中的溶解和混合。因此,此法可用于植物活性成分的提取,而且效率高,可明显缩短提取时间,还可保护有效成分不被破坏。2.22.2 实验部分实验部分2.2.12.2.1 以水为提取溶剂以水为提取溶剂2.2.1.12.2.1.1 实验仪器与试剂实验仪器与试剂超声波清洗仪(频率为 40khz,最大功率为 120kw,分为高低

22、两档,高档为 120kw,低档为 60w),粉碎机,水浴锅,高速离心机,布氏漏斗,SHB-III 循环水式多用真空泵,电子天平,离心管(10ml,50ml),精密 PH 计,移液枪(200ul、1ml),玻璃棒,三角瓶,烧杯,滤纸,双层纱布,烘箱,黄芩根样品,无水乙醇,1mol/l 盐酸,1mol/l 氢氧化钠,蒸馏水。2.2.1.22.2.1.2 实验方法实验方法将黄芩根用烘箱彻底干燥后,用粉碎机粉碎,称取适量黄芩根粉碎样,置于 50ml 大离心管 . . . 8 / 23中,加入十倍量的蒸馏水,盖上盖子并拧紧,防止液体漏出。室温下置于超声波清洗仪中,离心管应完全浸没于水中,盖上超声波清洗仪

23、的盖子,超声波清洗仪调至低档,超声时间设为 30 分钟,打开开关,三十分钟后,打开盖子,取出离心管,用双层纱布过滤,取滤液,将滤渣重新放入到离心管中,再加入 10 倍量的蒸馏水,同样超声提取30 分钟,三十分钟后,再过滤,弃滤渣,合并两次滤液,用移液枪向滤液中加入1mol/l 稀盐酸调 PH 值为 12,使用精密 PH 计的方法为:首先把复合电极装在电极杆上,将电极插头插入仪器后部的测量电极插座。将温度传感器接在传感器插口处(若进行手动设置,则无需接传感器)。然后用蒸馏水清洗电极。电极用蒸馏水洗净后,用滤纸吸干,然后将电极放入第一个标准溶液中, 按“pH/ pH 标定”键使仪器处于 pH 测定

24、状态,待读数稳定后再按下“pH /pH 标定”键,使仪器处于 pH 标定状态,并按“”“”键使显示值为当时温度下标准溶液的 pH 值。再按一下“确认”键确认。再用蒸馏水清洗电极后,再用被测溶液清洗两次以上,将电极置于被测溶液中。按 pH 标定中的温度设定方法进行温度设定,使温度值为被测样品此时的温度。按“pH/ pH 标定”键使 “pH”测定指示灯亮,用玻璃棒搅拌溶液使之均匀,待读数稳定后,显示值即为被测样品的 pH 值。滴入稀盐酸,直至 PH 计上的示数在 1 和 2 之间。 然后将调节 PH 值后的滤液放在水浴锅中加热,80 度保温 30 分钟。三十分钟后,常温离心(6000r/min)4

25、0min,弃上清,取沉淀,向沉淀中加入 12ml 蒸馏水,再用移液枪加入适量 1mol/l 的氢氧化钠调节 PH 值为 7,然后加入等体积的乙醇,充分搅拌,用布氏漏斗和真空泵抽虑,取滤液,再向滤液中滴入 1mol/l 稀盐酸,调节 PH 值为 1 和2 之间。然后将溶液静置 1216 小时,常温下离心(6000r/min)40 分钟,弃上清液,取沉淀,即为黄芩苷粗品,置于烘箱中,50 度烘干 24 小时后,即为黄芩苷粗品的干燥品,此时可以称量黄芩苷粗品的干重。做四份平行样。表表 2-12-1 黄芩苷粗品干重黄芩苷粗品干重12 3 4样品重2.00052.00062.00112.0009黄芩苷粗

26、品干重0.0220.0430.0370.0452.2.22.2.2 以以 60%60%乙醇为提取溶剂乙醇为提取溶剂2.2.2.12.2.2.1 实验仪器与试剂实验仪器与试剂超声波清洗仪(频率为 40khz,最大功率为 120kw,分为高低两档,高档为 120kw,低档为 60w.)粉碎机, 水浴锅,高速离心机,布氏漏斗,SHB-III 循环水式多用真空泵,电子天平, . . . 9 / 23离心管(10ml,50ml),精密 PH 计,移液枪(200ul、1ml),玻璃棒,三角瓶,烧杯,滤纸,双层纱布,烘箱,黄芩根样品,无水乙醇,1mol/l 盐酸,1mol/l 氢氧化钠,蒸馏水,60%乙醇。

27、2.2.2.22.2.2.2 实验方法实验方法称取适量黄芩根粉碎样,置于 50ml 大离心管中,加入十倍量的蒸馏水,盖上盖子并拧紧,防止液体漏出。室温下置于超声波清洗仪中,离心管应完全浸没于水中,盖上超声波清洗仪的盖子,超声波清洗仪调至低档,超声时间设为 30 分钟,打开开关,三十分钟后,打开盖子,取出离心管,用双层纱布过滤,取滤液,将滤渣重新放入到离心管中,再加入 10 倍量的蒸馏水,同样超声提取 30 分钟,三十分钟后,再过滤,弃滤渣,合并两次滤液,用移液枪向滤液中加入 1mol/l 稀盐酸调 PH 值为 12,然后将调节 PH 值后的滤液放在水浴锅中加热,80 度保温 30 分钟。三十分

28、钟后,常温离心(6000r/min)40min,弃上清,取沉淀,向沉淀中加入 12ml 蒸馏水,再用移液枪加入适量 1mol/l 的氢氧化钠调节 PH 值为 7,然后加入等体积的乙醇,充分搅拌,用布氏漏斗和真空泵抽虑,取滤液,再向滤液中滴入 1mol/l 稀盐酸,调节 PH 值为 1 和 2 之间。然后将溶液静置 1216 小时,常温下离心(6000r/min)40 分钟,弃上清液,取沉淀,即为黄芩苷粗品,置于烘箱中,50 度烘干 24 小时后,即为黄芩苷粗品的干燥品,此时可以称量黄芩苷粗品的干重。做四份平行样。表表 2-22-2 黄芩苷干重黄芩苷干重 1 2 3 4样品重(克)2.00962

29、.00022.00072.0085黄芩苷粗品干重(克)0.0710.0690.0810.0942.2.32.2.3 以以 60%60%甲醇为提取溶剂甲醇为提取溶剂2.2.3.12.2.3.1 实验仪器与试剂实验仪器与试剂超声波清洗仪(频率为 40khz,最大功率为 120kw,分为高低两档,高档为 120kw,低档为 60w.)粉碎机, 水浴锅,高速离心机,布氏漏斗,SHB-III 循环水式多用真空泵,电子天平,离心管(10ml,50ml),精密 PH 计,移液枪(200ul、1ml),玻璃棒,三角瓶,烧杯,滤纸,双层纱布,烘箱,黄芩根样品,无水乙醇,1mol/l 盐酸,1mol/l 氢氧化钠

30、,蒸馏水,60%甲醇。2.2.3.22.2.3.2 实验方法实验方法称取适量黄芩根粉碎样,置于 50ml 大离心管中,加入十倍量的蒸馏水,盖上盖子 . . . 10 / 23并拧紧,防止液体漏出。室温下置于超声波清洗仪中,离心管应完全浸没于水中,盖上超声波清洗仪的盖子,超声波清洗仪调至低档,超声时间设为 30 分钟,打开开关,三十分钟后,打开盖子,取出离心管,用双层纱布过滤,取滤液,将滤渣重新放入到离心管中,再加入 10 倍量的蒸馏水,同样超声提取 30 分钟,三十分钟后,再过滤,弃滤渣,合并两次滤液,用移液枪向滤液中加入 1mol/l 稀盐酸调 PH 值为 12,然后将调节 PH 值后的滤液

31、放在水浴锅中加热,80 度保温 30 分钟。三十分钟后,常温离心(6000r/min)40min,弃上清,取沉淀,向沉淀中加入 12ml 蒸馏水,再用移液枪加入适量 1mol/l 的氢氧化钠调节 PH 值为 7,然后加入等体积的乙醇,充分搅拌,用布氏漏斗和真空泵抽虑,取滤液,再向滤液中滴入 1mol/l 稀盐酸,调节 PH 值为 1 和 2 之间。然后将溶液静置 1216 小时,常温下离心(6000r/min)40 分钟,弃上清液,取沉淀,即为黄芩苷粗品,置于烘箱中,50 度烘干 24 小时后,即为黄芩苷粗品的干燥品,此时可以称量黄芩苷粗品的干重。做四份平行样。表表 2-32-3 黄芩苷干重黄

32、芩苷干重 1 2 3 4样品重(克)2.00902.00082.00262.0031黄芩苷粗品干重(克)0.0620.0530.0680.071 . . . 11 / 23第三章第三章 紫外分光光度法测黄芩苷含量紫外分光光度法测黄芩苷含量3.13.1 实验仪器与试剂实验仪器与试剂紫外可见分光光度计,黄芩苷标准品,50%乙醇,待测黄芩苷样品3.23.2 实验部分实验部分3.2.13.2.1 黄芩苷标准溶液的制备黄芩苷标准溶液的制备称取黄芩苷标准品 50mg,用 50%乙醇定容至 50ml,制成浓度为 1mg/ml 的标准储备液,然后用移液管分别移取上述标准溶液 1.0、2.0、3.0、4.0、5

33、.0 置入 100ml 容量瓶中,用 50%乙醇定容成浓度分别为0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.03mg/ml、0.04mg/ml、0.05mg/ml 的溶液。用紫外分光光度计测定上述溶液的吸光度,并绘制吸光度溶液浓度标准曲线,如下图所示吸光度-浓度标准曲线00.050.10.150.20.250.30.010.020.030.040.05溶液浓度(mg/ml)吸光度0.2540.2280.2020.1760.149图图 3-13-1 吸光度吸光度溶液浓度标准曲线溶液浓度标准曲线根据标准曲线,求出线性方程为 y=2.6286x+0.123 . . . 12 / 233.2.23.2

34、.2 测出所测溶液吸光度测出所测溶液吸光度将提取出的黄芩苷粗品溶于 5ml 的浓度为 50%的乙醇中,在稀释 100 倍使溶液变成500ml,测出每组溶液的吸光度,将所测得的吸光度的吸光度值带入线性回归方程,算出溶液浓度,进一步算出粗品中黄芩苷含量。3.33.3 实验结果与讨论实验结果与讨论表表 3-13-1 待测溶液吸光度待测溶液吸光度 1 2 3 4水0.1490.2160.1870.21760%乙醇0.2320.2290.2390.30560%甲醇0.2230.2180.2290.231根据吸光度,测得粗品配置成的溶液中黄芩苷质量如下表:表表 3-23-2 待测溶液含黄芩苷质量(待测溶液

35、含黄芩苷质量(g g) 1 2 3 4水0.00490.01770.01220.017860%乙醇0.02070.02020.02210.034660%甲醇0.01900.01810.02010.0205 黄芩苷质量黄芩苷得率计算公式为:黄芩苷得率=*100%,通过此公式计算黄芩黄芩样品质量苷得率如下表所示:表表 3-33-3 黄芩苷得率黄芩苷得率 1 2 3 4平均值水0.2449%0.8847%0.6097%0.8896%0.6522%60%乙醇1.0301%1.0099%1.1046%1.7227%1.2168%60%甲醇0.9457%0.8996%1.0037%1.0234%0.968

36、1%实验结论:通过图 2 可明显的比较出,以 60%乙醇为提取溶剂时黄芩苷的提取率最高,甲醇次之,提取率最少的是水。所以乙醇是提取效果较好的提取溶剂。 . . . 13 / 2300.0020.0040.0060.0080.010.0120.0141234溶剂类型黄芩苷得率系列1系列2系列3图图 3-23-2 黄芩苷得率比较黄芩苷得率比较 . . . 14 / 23结论结论本文研究了用不同提取溶剂提取中草药黄芩中黄芩苷对提取效果的影响,结论如下:1. 本文以黄芩苷得率为指标,采用超声波法提取黄芩苷,因为超声波法简单省时且提取率明显高于传统提取技术,而且无需高温加热,因此不会破坏中药中的有效成分。提取过程分别采用不同的提取溶剂,分别为蒸馏水、60%的乙醇、60%的甲醇,并把三种溶剂的提取率进行比较,发现乙醇的提取率最高,甲醇次之,水提取率最低。2. 采用紫外分光光度法测定黄芩苷含量,最大吸收波长为 278nm,回归方程为y=2.6286x+0.123 该方法简单快捷,准确率高。 . . . 15 / 23参考文献参考文献1欣,黄璐琦,邵爱娟等黄芩种质资源的研究概况J世界科学技术一中医药现代化,2003,5(6).2春风黄芩苷在黄芩植株体积累规律的研究J中华中医药学刊, 2004,27(5).3得坡,小莉中药

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