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文档简介
1、1 脑脊液及浆膜腔积液检验脑脊液及浆膜腔积液检验2 脑脊液检验脑脊液检验3脑脊液(脑脊液(cerebrospinal fluid, CSF)概概 述述l分布于脑室系统和蛛网膜下腔分布于脑室系统和蛛网膜下腔l比重为比重为1.006 _ 1.008 1.006 _ 1.008 无色透明细胞外液无色透明细胞外液l成人总量为成人总量为120180ml(120180ml(平均平均160ml)160ml)l主要由血循环经脑脉络膜丛和脑内毛细血管内皮细胞滤过主要由血循环经脑脉络膜丛和脑内毛细血管内皮细胞滤过而生成的血浆超滤液而生成的血浆超滤液(95(95在侧脑室形成在侧脑室形成) )l与血浆相比,其蛋白、脂
2、质与钙含量较低,而氯化物、叶与血浆相比,其蛋白、脂质与钙含量较低,而氯化物、叶酸与镁的含量较高酸与镁的含量较高l血、脑脊液、脑之间血、脑脊液、脑之间 _ _ 血血- -脑屏障脑屏障(blood-brain barrier,BBB)(blood-brain barrier,BBB) 4一.标本采集 由临床医师进行腰椎穿刺采集,必要时可由临床医师进行腰椎穿刺采集,必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。 标本要求:将脑脊液分别收集于标本要求:将脑脊液分别收集于3个无菌试个无菌试管中,第一管作细菌培养,第二管作化学管中,第一管作细菌培养,第二管作化学分析和免疫学检查,第三
3、管作一般性状及分析和免疫学检查,第三管作一般性状及显微镜检查。显微镜检查。采集后申请单上注明时间、日期采集后申请单上注明时间、日期每管收集每管收集1-2毫升。毫升。 遇高蛋白标本时可采用遇高蛋白标本时可采用EDTA K2抗凝。抗凝。5标本采集 三管三管 细菌培养细菌培养 化学分析和免疫学检查化学分析和免疫学检查 一般性状及显微镜细胞计数检查一般性状及显微镜细胞计数检查 &每管收集每管收集 1-2毫升毫升 及时送检及时送检 6标本送检 标本储存:标本储存:立即送检,一般不能超过1小时。 标本运输:标本运输:室温运输。 标本拒收标准:标本拒收标准:污染,久置标本。7 易被污染而影响结果的准
4、确性易被污染而影响结果的准确性 细胞破坏、变形、消失,纤维蛋白凝结,影响细胞破坏、变形、消失,纤维蛋白凝结,影响 计数及细胞学检查计数及细胞学检查 糖因细胞、微生物等耗解而降低糖因细胞、微生物等耗解而降低 致病菌如隐球菌、脑膜炎双球菌等可溶解死亡致病菌如隐球菌、脑膜炎双球菌等可溶解死亡腰穿后脑脊液应立即送检,放置过久会造成腰穿后脑脊液应立即送检,放置过久会造成 8二二 检查内容检查内容一、一般性状检查一、一般性状检查 1 . 颜色(color) 2 . 透明度(CSF clarity) 3 . 凝块或薄膜(pellicle formation and clot) 4 .蛋白定性二、显微镜检查二
5、、显微镜检查三、化学检验三、化学检验 1. 蛋白质(protein) 2. 葡萄糖(glucose) 3. 氯化物(chloride) 4. 酶类(enzymes) 四、四、 病原体检查病原体检查 9 1. 一般性状检查 颜色颜色 透明度透明度 凝固物凝固物 蛋白定性蛋白定性10 颜色11主要与穿刺损伤性出血鉴别主要与穿刺损伤性出血鉴别如为蛛网膜下腔出血,三管试验均匀血性,静置不凝固,离如为蛛网膜下腔出血,三管试验均匀血性,静置不凝固,离心后上液黄色,因含铁质上液潜血联苯胺试验心后上液黄色,因含铁质上液潜血联苯胺试验(+)(+),镜下多见,镜下多见皱缩红细胞皱缩红细胞如为损伤性出血,三管试验初
6、为血性,逐渐变淡转为无色透如为损伤性出血,三管试验初为血性,逐渐变淡转为无色透明,离心后上清为透明水样,因无铁质上液潜血联苯胺试验明,离心后上清为透明水样,因无铁质上液潜血联苯胺试验( -( - ) ),镜下红细胞形态完整,镜下红细胞形态完整报告时填写:脑脊液颜色及离心后上清颜色及沉淀物报告时填写:脑脊液颜色及离心后上清颜色及沉淀物性质性质红红 色色12项项 目目新鲜性出血新鲜性出血陈旧性出血陈旧性出血外观浑浊清晰、透明易凝性易凝不易凝离心后上清液无色、透明红色、黄褐色或柠檬色红细胞形态无变化皱缩上清液OB试验阴性阳性白细胞不增高继发性或反应性增高脑脊液新鲜性出血与陈旧性出血的鉴别 13脑或蛛
7、网膜下腔出血脑或蛛网膜下腔出血5 56 6小时红细胞破坏可逐渐产生黄变,小时红细胞破坏可逐渐产生黄变,4848小小时明显,时明显,3 3周后消失周后消失由于椎管阻塞或癌肿浸润致脑脊液蛋白增高,产生梗阻性和郁滞由于椎管阻塞或癌肿浸润致脑脊液蛋白增高,产生梗阻性和郁滞性黄变症,与出血性黄变症不同点在于蛋白量极高,当脑脊液蛋白性黄变症,与出血性黄变症不同点在于蛋白量极高,当脑脊液蛋白量超过量超过1500mg/L1500mg/L时,腰穿采集脑脊液可以发生自发性凝固,称为时,腰穿采集脑脊液可以发生自发性凝固,称为FroinFroin氏现象氏现象严重黄疸(血清胆红素严重黄疸(血清胆红素150mg/L150
8、mg/L)或来自血液中的其他黄色物质)或来自血液中的其他黄色物质如胡萝卜素、脂色素等由于血脑屏障的病理性改变(如脑膜炎)弥如胡萝卜素、脂色素等由于血脑屏障的病理性改变(如脑膜炎)弥散入脑脊液的影响散入脑脊液的影响 黄 色14主要见于中枢神经系统脑膜黑色素瘤主要见于中枢神经系统脑膜黑色素瘤的侵犯的侵犯黑色黑色15乳白色乳白色 见于脑膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性链球见于脑膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性链球菌引起的化脓性脑膜炎菌引起的化脓性脑膜炎16 透明度 清澈透明:正常清澈透明:正常 微浊:病毒性脑(膜)炎等微浊:病毒性脑(膜)炎等 毛玻璃样浑浊:结核性脑膜炎毛玻璃样浑浊:结核性脑膜炎 乳白色浑浊:化
9、脓性脑膜炎乳白色浑浊:化脓性脑膜炎黑色或白色背景下观察黑色或白色背景下观察 报告时填写:报告时填写:“清澈透明清澈透明”“”“微浊微浊”“”“浑浊浑浊”17 凝固物 液面薄膜形成:结核性脑膜炎液面薄膜形成:结核性脑膜炎疑为结核性脑膜炎时在疑为结核性脑膜炎时在2-4度环境中静置度环境中静置12-24小时,在观察表面有无薄膜形成小时,在观察表面有无薄膜形成 凝块或沉淀物:化脓性脑膜炎凝块或沉淀物:化脓性脑膜炎 黄色胶冻状物:蛛网膜下腔阻塞黄色胶冻状物:蛛网膜下腔阻塞 报告时填写:报告时填写:“无凝块无凝块”“”“有凝块有凝块”“”“有薄有薄膜膜”“”“胶冻状胶冻状”描述描述18蛋白定性蛋白定性蛋白
10、定性试验蛋白定性试验( (潘氏法潘氏法) ):实验原理:脑脊液中球蛋白与苯酚结合,可形成不溶性蛋白盐而下沉,实验原理:脑脊液中球蛋白与苯酚结合,可形成不溶性蛋白盐而下沉,产生白色浑浊或沉淀。产生白色浑浊或沉淀。试验方法:取潘氏试剂试验方法:取潘氏试剂2-3ml2-3ml于小试管内,用毛细滴管滴入脑脊液于小试管内,用毛细滴管滴入脑脊液( (上上清液清液) ) 1-2 1-2滴,衬以黑背景,立即观察结果。滴,衬以黑背景,立即观察结果。结果判断:结果判断:阴性:清晰透明,不显雾状;阴性:清晰透明,不显雾状;极弱阳性(极弱阳性():微呈白雾状,在黑色背景下才能看到;):微呈白雾状,在黑色背景下才能看到
11、;弱阳性(弱阳性(+ +):灰白色云雾状;):灰白色云雾状;阳性(阳性(+):白色浑浊;):白色浑浊;强阳性(强阳性(3+3+):白色浓絮状沉淀;):白色浓絮状沉淀;最强阳性(最强阳性(4+4+):白色凝块;):白色凝块;19 临床意义:临床意义: 1脑脊液蛋白明显增高脑脊液蛋白明显增高(+以上以上):常见于化脓性脑膜炎、:常见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、脊髓腔等中枢神经系统恶性肿瘤及其转移结核性脑膜炎、脊髓腔等中枢神经系统恶性肿瘤及其转移癌、脑出血、蛛网膜下腔出血及梗阻等。癌、脑出血、蛛网膜下腔出血及梗阻等。 2脑脊液蛋白轻度增高脑脊液蛋白轻度增高(+ - +):常见于病毒性脑膜炎、:常见
12、于病毒性脑膜炎、霉菌性脑膜性、乙型脑炎、脊髓灰质炎、脑膜血管梅毒、霉菌性脑膜性、乙型脑炎、脊髓灰质炎、脑膜血管梅毒、麻痹性痴呆、脑血栓形成等。麻痹性痴呆、脑血栓形成等。202、 显微镜检查显微镜检查21牛鲍氏计数板 计数公式计数公式: 白细胞总数= 4个大方格数(N)/4*10*稀释倍数*10622 白细胞数: 直接计数法直接计数法:适用于细胞总数不:适用于细胞总数不高,非血性或微混的标本。小试管高,非血性或微混的标本。小试管内放入冰乙酸内放入冰乙酸1-2滴,转动试管,滴,转动试管,使内壁沾有冰乙酸后倾去之,然后使内壁沾有冰乙酸后倾去之,然后滴加混匀的脑脊液滴加混匀的脑脊液3-4滴,数分钟滴,
13、数分钟后,混匀充入计数池,按白细胞计后,混匀充入计数池,按白细胞计数法计数数法计数10个大方格细胞数。个大方格细胞数。23 稀释计数法:稀释计数法:适用于白细胞数较高、浑浊的标本。根据浑适用于白细胞数较高、浑浊的标本。根据浑浊程度不同,将混匀的脑脊液用白细胞稀释液进行不同倍浊程度不同,将混匀的脑脊液用白细胞稀释液进行不同倍数稀释后进行计数。数稀释后进行计数。 血性标本:血性标本:&当穿刺损伤血管导致血性脑脊液或出血性脑当穿刺损伤血管导致血性脑脊液或出血性脑血管病时,计数白细胞总数已无意义,白细胞数须经校正血管病时,计数白细胞总数已无意义,白细胞数须经校正为剔除因出血而来的白细胞数,用下
14、式进行校正。为剔除因出血而来的白细胞数,用下式进行校正。 每每l脑脊液内白细胞校正数:脑脊液内白细胞校正数: 每每l 脑脊液内红细胞数脑脊液内红细胞数每每l白细胞数白细胞数=每每l脑脊液内白细胞未校正数脑脊液内白细胞未校正数 每每l血液内红细胞数血液内红细胞数24参考值: 成人脑脊液内无红细胞,白细胞极少,其参考范成人脑脊液内无红细胞,白细胞极少,其参考范围:围: 成人为(成人为(0-10)106/L; 儿童为(儿童为(0-15)106/L, 新生儿为(新生儿为(0-30)106/L。 如白细胞达如白细胞达 (10-50)106/L为轻度增加,为轻度增加, (50-100)106/L为中度增加
15、,为中度增加, 200106/L以上显著增加。以上显著增加。25临床意义1细胞数明显增高细胞数明显增高(200106/L):常见于化脓:常见于化脓性脑膜炎、流行性脑脊髓膜炎。性脑膜炎、流行性脑脊髓膜炎。2中度增高中度增高(200106/L):常见于结核性脑膜:常见于结核性脑膜炎。炎。3正常或轻度增高:常见于浆液性脑膜炎、流正常或轻度增高:常见于浆液性脑膜炎、流行性脑炎行性脑炎(病毒性脑炎病毒性脑炎)、脑水肿等。、脑水肿等。26 (二)白细胞分类(二)白细胞分类 白细胞数小于白细胞数小于30 不用分类计数不用分类计数 直接分类法:白细胞计数后,将低倍镜换为高倍镜,直接直接分类法:白细胞计数后,将
16、低倍镜换为高倍镜,直接在高倍镜下根据细胞核的形态分别计数单个核细胞(包括在高倍镜下根据细胞核的形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞,应数淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞,应数100个白细胞,个白细胞,并以百分率表示。若白细胞少于并以百分率表示。若白细胞少于100个,应直接写出单核、个,应直接写出单核、多核细胞的具体数字。多核细胞的具体数字。 染色分类法:如直接分类不易区分细胞时,可将脑脊液离染色分类法:如直接分类不易区分细胞时,可将脑脊液离心沉淀,取沉淀物心沉淀,取沉淀物2滴,加正常血清滴,加正常血清1滴,推片制成均匀薄滴,推片制成均匀薄膜,置室温或膜,置室温或37温箱内待
17、干,进行瑞氏染色后用油镜分温箱内待干,进行瑞氏染色后用油镜分类。类。 如见有不能分类的细胞,应另行描述报告,如脑膜白血病如见有不能分类的细胞,应另行描述报告,如脑膜白血病或肿瘤时。或肿瘤时。27 参考值:参考值: 正常脑脊液中白细胞主要为单个核细胞,多为淋正常脑脊液中白细胞主要为单个核细胞,多为淋巴细胞及大单核细胞,两者之比约为巴细胞及大单核细胞,两者之比约为7:3,偶见,偶见内皮细胞:软脑膜和蛛网膜细胞、室管膜细胞、内皮细胞:软脑膜和蛛网膜细胞、室管膜细胞、脉络膜细胞等。脉络膜细胞等。 寄生虫学检查:经沉淀涂片认真寻找虫卵、幼虫寄生虫学检查:经沉淀涂片认真寻找虫卵、幼虫等。等。28临床意义临
18、床意义 化脑化脑: 白细胞显著增加,以白细胞显著增加,以 N 为主为主 结脑结脑:白细胞中度增加,早期以:白细胞中度增加,早期以 N 为主,中晚期为主,中晚期 以以 L 为主为主 病脑病脑:白细胞轻度增加,以:白细胞轻度增加,以 L 为主为主 脑寄生虫病:脑寄生虫病: WBC E 急性脑膜白血病:急性脑膜白血病:WBC ,可见原始及幼稚细胞,可见原始及幼稚细胞29注意事项 1、标本采集1小时内计数完毕 2、血性脑脊液白细胞数必须校正 3、细胞计数时如发现皱缩或肿胀红细胞应加以描述 4、注意鉴别红细胞、淋巴细胞和新型隐球菌 5、不能用血液分析仪计数法计数、不能用血液分析仪计数法计数303、化学检
19、查 蛋白质 葡萄糖 氯化物 酶(LDH、ADA、ALT 、 AST 、 CK)31脑脊液蛋白质来源于血浆和自身合成,脑脊液蛋白质来源于血浆和自身合成,脑脊液蛋白质中脑脊液蛋白质中67为为白蛋白、白蛋白、33为球蛋白。为球蛋白。且随不同部位而有差异,脑室且随不同部位而有差异,脑室0.050.15gL,小脑延髓池,小脑延髓池0.10.25gL,腰池,腰池0.20.4gL随年龄不同也有所差别,正常儿童脑脊液蛋白含量随年龄不同也有所差别,正常儿童脑脊液蛋白含量0.10.2gL,50岁以上者为岁以上者为0.30.4gL一般而言,脑脊液总蛋白不超过一般而言,脑脊液总蛋白不超过0.4gL为正常范围为正常范围
20、32临床意义 :化脓性脑膜炎:化脓性脑膜炎 :结核性脑膜炎:结核性脑膜炎 :病毒性脑膜炎:病毒性脑膜炎 33脑脊液氯化物来自血液,但高于血液浓度,含量与血浆浓度密脑脊液氯化物来自血液,但高于血液浓度,含量与血浆浓度密切相关(应同时查血氯水平)。按氯离子计算其浓度约为血清切相关(应同时查血氯水平)。按氯离子计算其浓度约为血清的的1.21.21.31.3(平均(平均1.251.25)倍。正常值为)倍。正常值为120120130mmol130mmolL L,儿,儿童略低童略低脑脊液氯化物降低较有意义,往往与糖降低同步发生脑脊液氯化物降低较有意义,往往与糖降低同步发生34临床意义 :结核性脑膜炎 (1
21、02mmol/L) :化脓性脑膜炎 (102106mmol/L) :低氯血症 35脑脊液中的葡萄糖来源于血液,正常值为脑脊液中的葡萄糖来源于血液,正常值为2.54.4mmolL,其含量约为血糖的,其含量约为血糖的1/22/3,低于,低于2.25mmolL为异常为异常注意:注意:儿童与新生儿脑脊液中葡萄糖含量较成人略高,可达儿童与新生儿脑脊液中葡萄糖含量较成人略高,可达3.35.0mmolL血糖含量、血脑屏障的完整性以及脑脊液中糖被酵解的程血糖含量、血脑屏障的完整性以及脑脊液中糖被酵解的程度,是影响脑脊液中糖含量的主要因素(应同时查血糖水平)度,是影响脑脊液中糖含量的主要因素(应同时查血糖水平)
22、36参考值参考值 成人:成人:2.52.5 4.5mmol/L4.5mmol/L 儿童:儿童:2.82.8 4.5mmol/L4.5mmol/L 脑脊液脑脊液/ /血浆:血浆: 0.30.30.90.9临床意义 :化脓性脑膜炎:化脓性脑膜炎 :结核性脑膜炎:结核性脑膜炎 :其它脑膜(脑)炎:其它脑膜(脑)炎37化脓菌、结核菌、真菌性脑膜炎化脓菌、结核菌、真菌性脑膜炎时,被破坏的脑膜细胞释放出葡萄糖时,被破坏的脑膜细胞释放出葡萄糖酵解酶,将糖酵解为乳酸,使糖含量降低;感染可引发中枢神经系统代酵解酶,将糖酵解为乳酸,使糖含量降低;感染可引发中枢神经系统代谢改变,其代谢产物抑制了血脑屏障的膜携带运转
23、功能,使从血液进入谢改变,其代谢产物抑制了血脑屏障的膜携带运转功能,使从血液进入脑脊液的葡萄糖量减少脑脊液的葡萄糖量减少癌肿,尤其是脑膜癌病癌肿,尤其是脑膜癌病,由于癌细胞代谢活跃,可将葡萄糖迅速酵解;,由于癌细胞代谢活跃,可将葡萄糖迅速酵解;而癌细胞本身就能使碳水化合物发生不正常代谢,并可以阻止糖通过血而癌细胞本身就能使碳水化合物发生不正常代谢,并可以阻止糖通过血脑屏障。癌肿转移时,糖含量可降至零脑屏障。癌肿转移时,糖含量可降至零脑的囊虫病、血吸虫病、肺吸虫病、弓形体病等脑的囊虫病、血吸虫病、肺吸虫病、弓形体病等寄生虫感染寄生虫感染各种原因引起的各种原因引起的低血糖症低血糖症如胰岛细胞瘤、糖
24、尿病患者胰岛素使用过量如胰岛细胞瘤、糖尿病患者胰岛素使用过量等均可致脑脊液糖含量降低等均可致脑脊液糖含量降低其它其它如神经梅毒、蛛网膜下腔出血急性期、中枢神经系统结节病、鼻如神经梅毒、蛛网膜下腔出血急性期、中枢神经系统结节病、鼻咽癌、高颈位脊髓病变的深度咽癌、高颈位脊髓病变的深度X线或线或60Co放射治疗,或脑脊液留置太久放射治疗,或脑脊液留置太久等,均可引起脑脊液糖降低等,均可引起脑脊液糖降低38 lactic dehydrogenase (LDH ) 8-32U/L 化脓性脑膜炎化脓性脑膜炎 -病毒性脑膜炎病毒性脑膜炎 N 脑出血脑出血- 外伤引起的出血外伤引起的出血 N 脑部肿瘤脑部肿瘤
25、:急性期急性期- 静止期静止期 N adenosine deaminase(ADA) 0-8U/L 结核性脑膜炎结核性脑膜炎 lysozyme (Lzm) 结核性脑膜炎结核性脑膜炎 化脓性脑膜炎化脓性脑膜炎 ALT 5-15, AST 5-20 脑实质坏死、脑出血、脑萎缩脑实质坏死、脑出血、脑萎缩 CK 0.5-2U/L 脑实质坏死脑实质坏死酶学检查酶学检查394 4、病原体检查、病原体检查 1 1显微镜检查显微镜检查 涂片涂片 革兰氏染色:细菌革兰氏染色:细菌化脓性脑膜炎时其阳性率约为化脓性脑膜炎时其阳性率约为60-90% 60-90% 抗酸染色:结核菌抗酸染色:结核菌 印度墨汁染色:隐球菌
26、印度墨汁染色:隐球菌2 2细菌培养细菌培养 主要用于脑膜炎奈瑟菌、链球菌、葡萄球主要用于脑膜炎奈瑟菌、链球菌、葡萄球菌菌 、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌分离培养、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌分离培养 40墨汁染色墨汁染色原理原理:墨汁染色(负染色法),背景着色而菌体本身不着色的染色法称负墨汁染色(负染色法),背景着色而菌体本身不着色的染色法称负染色法。在黑色印度墨水的背景下,可清晰观察到酵母细胞周围环绕染色法。在黑色印度墨水的背景下,可清晰观察到酵母细胞周围环绕着一圈明亮的区域,即粘多糖荚膜,因此印度墨汁可以检测到是否有着一圈明亮的区域,即粘多糖荚膜,因此印度墨汁可以检测到是否有囊状物包裹的酵母存在,
27、此法用以观察细菌及某种真菌的荚膜等囊状物包裹的酵母存在,此法用以观察细菌及某种真菌的荚膜等染色方法:脑脊液等液体标本经离心后取沉淀物涂布于洁净玻上,然后染色方法:脑脊液等液体标本经离心后取沉淀物涂布于洁净玻上,然后加印度墨汁加印度墨汁1小环(或更少)混匀,加上盖玻片,轻压一下,使混合小环(或更少)混匀,加上盖玻片,轻压一下,使混合液变薄。在低倍镜下寻找有荚膜的菌细胞,找到后换高倍镜确认。镜液变薄。在低倍镜下寻找有荚膜的菌细胞,找到后换高倍镜确认。镜下背景呈黑褐色,菌体无色。下背景呈黑褐色,菌体无色。结果判断:新型隐型球菌可呈宽阔透亮的厚荚膜,背景为均匀的黑色,结果判断:新型隐型球菌可呈宽阔透亮
28、的厚荚膜,背景为均匀的黑色,白细胞被染成黑色不透亮,但核形明显。白细胞被染成黑色不透亮,但核形明显。 41图注:图中隐球菌呈大小不等的球体,散在和成堆出现,图注:图中隐球菌呈大小不等的球体,散在和成堆出现,可见有芽胞。可见有芽胞。隐球菌脑膜炎 常见中枢神经系统疾病的脑脊液检查特点常见中枢神经系统疾病的脑脊液检查特点 压力压力外观外观凝固凝固细胞细胞蛋白质蛋白质葡萄糖葡萄糖 氯化物氯化物细菌细菌化脑化脑 浊浊可有可有多核多核 化脓菌化脓菌结核性结核性微浊微浊薄膜薄膜早中早中TB病毒性病毒性清清无无淋巴淋巴NN阴性阴性隐球菌性隐球菌性不定不定可有可有淋巴淋巴中中隐球菌隐球菌蛛网膜下腔出血蛛网膜下腔
29、出血血性血性可有可有RBC不定不定N无无绿色瘤绿色瘤清清无无淋巴淋巴轻度轻度NN无无脑脓肿脑脓肿浊浊可有可有淋巴淋巴轻度轻度NN不定不定 43三、脑脊液质量控制三、脑脊液质量控制1.送检标本的处理送检标本的处理CSF采集后应立即送检。采集后应立即送检。穿剌损伤出血的脑脊液细胞计数校正。穿剌损伤出血的脑脊液细胞计数校正。葡萄糖测定:留取标本后应马上测定或加入氟葡萄糖测定:留取标本后应马上测定或加入氟化钠,防止葡萄糖酵解。化钠,防止葡萄糖酵解。防止细菌离体后易死亡,及时检查或需防止细菌离体后易死亡,及时检查或需37下保温送检。下保温送检。442.建立标准化的检验方法建立标准化的检验方法(1)规范操
30、作规程规范操作规程 取标本的试管必须清洁干净,细菌培养用消毒无菌试管留取取标本的试管必须清洁干净,细菌培养用消毒无菌试管留取标本。标本。 白细胞计数应注意白细胞与隐球菌和红细胞的形态鉴别,有白细胞计数应注意白细胞与隐球菌和红细胞的形态鉴别,有穿剌损伤时应作要校正穿剌损伤时应作要校正。 化学成分测定应离心取上清液作试验。化学成分测定应离心取上清液作试验。 检测分析中严格按实验步骤进行操作。检测分析中严格按实验步骤进行操作。45 (2)建立室内质控和设置阴阳性对照)建立室内质控和设置阴阳性对照 定期校正实验所用的仪器和设备。定期校正实验所用的仪器和设备。 选择建立适当的检测方法。选择建立适当的检测
31、方法。 保证所用检验试剂的质量。保证所用检验试剂的质量。 采用适当的质控物。采用适当的质控物。46脑脊液常规报告单 颜色:颜色:注明原有颜色及离心后上清液颜色 透明度:透明度: 凝块:凝块: 蛋白定性:蛋白定性: 细胞计数:细胞计数: *106 单个核:单个核: % 分叶核:分叶核: %47脑脊液生化项目 蛋白CSF 氯化物CL 葡萄糖GLU 酶类 LDH、ADA、ALT 、 AST 、 CK4950一、浆膜腔积液的概述一、浆膜腔积液的概述 胸膜腔胸膜腔 人体浆膜腔包括人体浆膜腔包括 腹膜腔腹膜腔 心包膜腔心包膜腔 20ml在正常情况下只有少量液体在正常情况下只有少量液体 500106/L 临
32、界值临界值 (300500)106/L66 2.细胞分类细胞分类直接和涂片分类法直接和涂片分类法 细胞数小于细胞数小于150不用分类计数不用分类计数 直接分类法直接分类法 直接在高倍镜下分类计数直接在高倍镜下分类计数100个细个细胞包括单个核细胞和多个核细胞以百分率表示胞包括单个核细胞和多个核细胞以百分率表示 染色分类法染色分类法 涂片作瑞特染色或瑞涂片作瑞特染色或瑞-吉姆萨染色吉姆萨染色后油镜进行分类,如需检查肿瘤细胞应用巴氏染后油镜进行分类,如需检查肿瘤细胞应用巴氏染色或色或HE染色染色673. 临床意义临床意义:漏出液漏出液 细胞少,淋巴细胞为主,少量间皮细胞细胞少,淋巴细胞为主,少量间
33、皮细胞; 渗出液渗出液 细胞较多细胞较多积液中各种细胞增多时意义积液中各种细胞增多时意义:中性粒细胞中性粒细胞 化脓性炎症、早期结核性炎症等化脓性炎症、早期结核性炎症等淋巴细胞淋巴细胞 慢性炎症如结核、病毒感染、肿瘤等慢性炎症如结核、病毒感染、肿瘤等嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞 变态反应、寄生虫感染等变态反应、寄生虫感染等组织细胞组织细胞 炎症、淤血、炎症、淤血、 恶性肿瘤恶性肿瘤68七、化学检查七、化学检查1.蛋白质定量蛋白质定量测定方法与血清蛋白定量相同测定方法与血清蛋白定量相同渗出液蛋白质渗出液蛋白质 30g/L ;积液总蛋白;积液总蛋白/血清总蛋白比值血清总蛋白比值 0.5; 漏出液漏出液
34、蛋白质蛋白质 25g/l ;积液总蛋白;积液总蛋白/血清总蛋白比值血清总蛋白比值0.5; 蛋白质如为蛋白质如为25-30 g/L ,则难以判明其性质(中间型积液),则难以判明其性质(中间型积液)692.葡萄糖定量葡萄糖定量测定方法与血清葡萄糖定量相同。测定方法与血清葡萄糖定量相同。漏出液:葡萄糖含量与血糖相近或稍低些。漏出液:葡萄糖含量与血糖相近或稍低些。渗出液:葡萄糖因受细菌或炎症细胞的酵解作用,积液中葡渗出液:葡萄糖因受细菌或炎症细胞的酵解作用,积液中葡 萄糖含量降低萄糖含量降低(2.22mmol/L2.22mmol/L) 参考值:参考值:3.6-5.5mmol/L 化脓性细菌感染化脓性细
35、菌感染200U/L,积液,积液LDH/血清血清 LDH比值比值0.6可作为可作为渗出液的指标。在各类渗出液中渗出液的指标。在各类渗出液中化脓性感染积液化脓性感染积液LDH活性活性癌性癌性结核性结核性正常正常。5.腺苷脱氢酶腺苷脱氢酶(adenosine deaminase,ADA):): ADA大于大于45U/L应考虑为结核性,应考虑为结核性,结核性结核性 癌性癌性非炎症性积液非炎症性积液,当抗当抗结核药物治疗有效时,其胸腹炎内结核药物治疗有效时,其胸腹炎内ADA也应随之下降,因此也能作为抗结也应随之下降,因此也能作为抗结核治疗效观察指标。核治疗效观察指标。 726.溶菌酶(溶菌酶(lysoz
36、yme,LZM):): 结核性结核性积液中溶菌酶含量超过积液中溶菌酶含量超过30mg/L,积液和血清中溶菌酶比值,积液和血清中溶菌酶比值1.0,明显高于癌性积液、结缔组织病。因此测定积液中溶菌酶对结核性胸膜炎明显高于癌性积液、结缔组织病。因此测定积液中溶菌酶对结核性胸膜炎的诊断有帮助,连续观察可估计预后。的诊断有帮助,连续观察可估计预后。而而癌细胞不含溶酶体,无癌细胞不含溶酶体,无LZM产生,产生,故故癌性积液癌性积液LZM无增高无增高。 7。淀粉酶淀粉酶(amylase,AMY):):参考值:参考值:0-300U/L 大多数大多数胰腺炎胰腺炎患者其胰腺创伤所致腹腔积液中淀粉酶活性患者其胰腺创
37、伤所致腹腔积液中淀粉酶活性/血清淀粉酶血清淀粉酶 1。当当食道破裂食道破裂时唾液经食道穿孔处流进胸腔,此时胸腔积液淀粉酶也升高,时唾液经食道穿孔处流进胸腔,此时胸腔积液淀粉酶也升高,738、碱性磷酸酶碱性磷酸酶(alkaline phoephatase,ALP):):积液中因肿瘤细胞释放大量积液中因肿瘤细胞释放大量ALP,使积液,使积液ALP/血清血清ALP比值比值1,而其,而其他性质积液他性质积液ALP/血清血清ALP比值比值1.0。另外,小肠扭转穿孔患者的腹腔穿刺液中另外,小肠扭转穿孔患者的腹腔穿刺液中ALP活性升高,约为血清活性升高,约为血清ALP的的2倍,发病倍,发病2-3小时即升高,
38、并随病情进展而增加。小时即升高,并随病情进展而增加。 74 9、C反应性蛋白反应性蛋白(C-resctive protein,CRP):): CRP为急性时相反应蛋白,可用于漏出液及渗液的鉴为急性时相反应蛋白,可用于漏出液及渗液的鉴别判断。别判断。CRP10mg/L为渗出为渗出液。液。7510.10.肿瘤标志物测定肿瘤标志物测定癌胚抗原(癌胚抗原(carcinoembryonicantigencarcinoembryonicantigen,CEA CEA ):当积液中:当积液中CEA20g/LCEA20g/L,积液积液CEA/CEA/血清血清CEACEA比值比值11时,应高度怀疑为癌性积液。时
39、,应高度怀疑为癌性积液。甲胎蛋白(甲胎蛋白(alpha-fetoproteinalpha-fetoprotein,AFP AFP ):血清:血清AFPAFP作为原发性肝癌的标志作为原发性肝癌的标志物。腹水中物。腹水中AFPAFP检测结果与血清检测结果与血清AFPAFP呈正相关。检测腹水中呈正相关。检测腹水中AFP25g/LAFP25g/L时时对诊断原发性肝癌引起的腹水是有价值的。对诊断原发性肝癌引起的腹水是有价值的。CA125:腹水中:腹水中CA1251000u/ml常作为卵巢癌转移的指标,在胃癌、结常作为卵巢癌转移的指标,在胃癌、结直肠癌、肝癌和胰腺癌中也有较高的阳性检出率;直肠癌、肝癌和胰腺癌中也有较高的阳性检出率; CA199是胰腺癌和结、直肠癌的标志物;是胰腺癌和结、直肠癌的标志物;76胸腹水生化检验项目 蛋白TP 葡萄糖GLU 脂类 TC 、TG 酶类 LDH ADA AMY ALP CRP 77八、微生物检查八、微生物检查如标本通过一般性状如标
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